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2014年 · 第94卷第12期
出版日期 2014-04-01电子版 ￥14.00元
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关注医学研究中的科学诚信与科研不端行为王吉耀 金雪娟
中华医学杂志2014年 94卷 12期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2014.12.001
摘要
科研不端行为是一个全球性问题。2013年，日本原京都府立医科大学教授松原弘明在抗高血压药物缬沙坦预防卒中的临床研究论文中，人为操纵改动临床试验数据的新闻，以及葛兰素史克的治疗多发性硬化症实验化合物论文数据造假风波，再次引发了医学界对科学的诚信与科研不端行为的广泛讨论[
临床研究
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云南省抗病毒治疗病毒学失败的艾滋病患儿的基因型耐药性分析钟敏 杨绍敏 杨壁珲 刘家法 李健健 楼金成 李惠琴
中华医学杂志2014年 94卷 12期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2014.12.002
摘要
目的
了解云南省艾滋病儿童患者抗病毒治疗病毒学失败病例的耐药发生情况及耐药基因突变特点。
方法
收集云南省2005至2012年接受免费高效抗逆转录病毒治疗(HAART)的人类免疫缺陷病毒(HIV)感染/获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患儿的临床及实验室资料，对抗病毒治疗持续6个月以上、病毒载量≥1 000拷贝/ml的患儿进行基因型耐药检测，分析耐药发生情况及耐药毒株流行特点。
结果
2005至2012年接受免费HAART的患儿共729例，其中73例患儿发生病毒学失败。73例抗病毒治疗病毒学失败的患儿中耐药基因突变者53例，占病毒学失败患儿的72.6%(53/73)，占抗病毒治疗总体人群的7.3%(53/729)。耐药突变位点主要为M184V/I[52.1%(38/73)]、K103N[30.1%(22/73)]、T215F/Y[21.9%(16/73)]、G190A[20.5%(15/73)]、Y181C[15.1%(11/73)]和K101E[12.3%(9/73)]。在使用过的药物中，对奈韦拉平(NVP)、依非韦伦(EFV)高度耐药的构成比分别为61.6%(45/73)、47.9%(35/73)；对拉米夫定(3TC)、齐多夫定(AZT)、司他夫定(D4T)、阿巴卡韦(ABC)高度耐药的构成比分别为54.8%(40/73)、12.3%(9/73)、13.7%(10/73)、5.5%(4/73)；只有1例对洛匹那韦/利托那韦(LPV/r)中度耐药。
结论
云南省在治的儿童艾滋病患者中，HIV耐药是导致抗病毒治疗失败的主要原因，在当前有限的药物资源环境下，如何最大可能避免耐药的发生与耐药毒株的传播尤为重要。
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糖尿病足合并感染患者754株病原菌分布及耐药性分析沈秋燕 林迪妮 朱虹 葛胜洁 吴文俊 潘晓燕 顾雪疆 谷雪梅 沈飞霞
中华医学杂志2014年 94卷 12期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2014.12.004
摘要
目的
了解糖尿病足溃疡处病原菌分布及耐药情况。
方法
回顾性分析2010年1月–2013年8月在温州医科大学附属第一医院住院治疗，有临床标本的糖尿病足患者519例，对其创面处分离的754株病原菌进行病原菌分布及耐药性分析。
结果
519例患者中444例(85.5%)分离出病原菌共754株，包括革兰阳性(G＋)菌357株(47.3%)，革兰阴性(G–)菌304株(40.3%)，真菌93株(12.3%)。随着溃疡Wagner级别的增加，病原菌谱由以G＋菌为主逐渐转变为以G–菌为主，且真菌及混合感染率逐渐升高，以G＋菌与G–菌混合感染为主。多重耐药菌(MDRO)122株(16.2%)。G＋菌以金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及粪肠球菌为主。葡萄球菌属对青霉素G、红霉素、苯唑西林耐药率较高，对万古霉素、利奈唑胺则较敏感；G–菌以肠杆菌科为主，主要有大肠埃希菌、变形杆菌属，分离出铜绿假单胞菌29株；肠杆菌科对美罗培南、亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、舒普深及头孢吡肟的耐药性较低，其他抗菌药物有不同程度耐药。真菌以白色念珠菌为主。
结论
病情重的糖尿病足感染，病原菌以G–菌为主，且真菌及混合感染比例升高。万古霉素、亚胺培南抗菌活性较高，但耐药形势仍严峻，应合理使用抗生素，注意监测细菌耐药性。
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香烟烟雾对慢性阻塞性肺疾病患者单核细胞源性巨噬细胞吞噬功能的影响庞琪 刘晓菊 施凯 曾晓丽 包海荣
中华医学杂志2014年 94卷 12期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2014.12.005
摘要
目的
探讨香烟烟雾提取物(CSE)对慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)患者单核细胞源性巨噬细胞(MDM)吞噬功能的影响。
方法
选择2012年1月至2013年3月兰州大学第一医院慢阻肺稳定期患者32例，选择同期健康体检者32名，分离外周血单核细胞，体外诱导培养成MDM。分别将慢阻肺患者和健康体检者的MDM分为慢阻肺非CSE组(常规培养)、慢阻肺CSE组(4%CSE干预6 h)、健康非CSE组(常规培养)、健康CSE组(4%CSE干预6 h)。以流式细胞术的平均荧光强度和激光共聚焦显微镜的荧光灰度值判断MDM吞噬荧光标记大肠杆菌(FITC–E.coli)的能力，菲罗啉比色法检测细胞上清液总抗氧化能力(TAC)，硫代巴比妥酸比色法检测丙二醛含量，改良Hafeman直接测定法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH–PX)活力。
结果
平均荧光强度、荧光灰度值：慢阻肺非CSE组(20.2±2.2、51.5±5.8)显著低于健康非CSE组(56.9±6.7、87.3±7.3)，慢阻肺CSE组(7.6±0.7、14.1±3.4)和健康CSE组(48.0±5.4、69.7±6.0)分别显著低于慢阻肺非CSE组和健康非CSE组(均P<0.01)。TAC、GSH–PX水平：慢阻肺非CSE组[(4.1±0.5)、(47.1±4.1)U/ml]显著低于健康非CSE组[(5.1±0.6)、(88.4±2.3)U/ml]，慢阻肺CSE组和健康CSE组[(3.1±0.4)、(26.8±6.2)U/ml和(4.5±0.4)、(72.3±5.1)U/ml]分别显著低于慢阻肺非CSE组和健康非CSE组(均P<0.01)。丙二醛水平：慢阻肺非CSE组[(4.8±0.5)μmol/L]显著高于健康非CSE组[(2.1±0.4)μmol/L]，慢阻肺CSE组和健康CSE组[(7.7±0.9)和(3.0±0.6)μmol/L]分别显著高于慢阻肺非CSE组和健康非CSE组(均P<0.01)。慢阻肺组平均荧光强度在基础状态下与TAC、GSH–PX水平呈正相关(r＝0.523、0.818，P＝0.038、0.001)，与丙二醛水平呈负相关(r＝–0.501，P＝0.048)，CSE干预后上述相关关系依然存在(r＝0.704、0.716、–0.522，P＝0.002、0.002、0.038)。
结论
香烟烟雾可导致慢性肺患者MDM吞噬能力下降，这可能与氧化应激密切相关。
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结直肠癌中Jab1的表达及其预后意义郭志琴 吕青山 张燕萍 王振 温晓伟 姚明 邬万新
中华医学杂志2014年 94卷 12期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2014.12.006
摘要
目的
探讨c–Jun激活区结合蛋白1(Jab1)在结直肠癌发生发展中的作用及其与结直肠癌临床病理特征的关系。
方法
回顾性收集嘉兴市第一医院2007年1月至2008年12月行手术切除的80例结直肠癌组织标本，采用免疫组织化学EnVision二步法检测结直肠癌及其相应癌旁正常组织中Jab1的表达情况并分析其与临床病理特征的关系；提取6例新鲜结直肠癌手术标本的总蛋白并进行定量，通过蛋白质印迹检测结直肠癌组织与癌旁正常组织中Jab1的表达。
结果
免疫组织化学及蛋白质印迹结果均显示，Jab1在结直肠癌组织中的表达显著高于在癌旁正常组织中的表达，结直肠癌组织中Jab1阳性表达率为96.3%(77/80)，高表达者66例(82.5%)，低表达者14例(17.5%)；而癌旁组织中Jab1阳性表达率为8.8%(7/80)，与结直肠癌组织之间差异有统计学意义(P<0.05)；Jab1阳性表达与肿瘤细胞分化程度、浸润深度、TNM分期和淋巴结转移情况有关(均P<0.05)；Jab1阳性表达与增殖指标Ki–67表达呈显著正相关(r＝0.548，P<0.01)，与p27kip1表达呈显著负相关(r＝–0.461，P<0.01)。
结论
Jab1异常表达可能参与了结直肠癌的发生发展并与p27kip1负相关。Jab1有望成为评价结直肠癌恶性程度和判断预后的重要参考指标。
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中国肝细胞癌患者最佳分期系统探讨赵建军 阎涛 黄振 毕新宇 赵宏 周健国 李智宇 李原 李聪 蔡建强
中华医学杂志2014年 94卷 12期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2014.12.007
摘要
目的
寻找适合于中国肝细胞癌患者最佳的分期标准。
方法
回顾性分析1999年1月至2010年12月中国医学科学院肿瘤医院外科治疗的908例肝细胞癌患者的临床资料，比较TNM分期第七版、BCLC分期、Tokyo分期、JIS分期、CUPI分期、CLIP分期以及Okuda分期对肝细胞癌术后生存情况的判断力。采用Kaplan–Meier法进行生存分析，采用Cox比例风险模型进行多因素分析。应用赤池宏治信息准则(AIC，Akaike Information Criterion)来判断各分期系统对预后总的评估能力。
结果
Kaplan–Meier生存曲线及Log–rank检验结果显示，BCLC与JIS分期系统中各期之间差异有统计学意义(P<0.05)；TNM第七版中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期间差异有统计学意义，但Ⅲ、Ⅳ期间差异无统计学意义(P＝0.538)；Tokyo评分0分与1分组(P＝0.398)，3分与4分组(P＝0.290)之间差异无统计学意义；本研究CUPI分期只包含低危组和中危组，两分期间差异有统计学意义(P＝1.03×10–8)；CLIP分期中2分组与3，4组之间差异无统计学意义(P＝0.805及P＝0.073)；OkudaⅠ、Ⅱ期间差异无统计学意义(P＝0.872)。采用SAS软件计算各自的AIC值，结果显示TNM第七版具有最小的AIC值(3 719.39)，其次为BCLC分期(3 724.38)。
结论
TNM第七版分期对于肝细胞癌的生存情况具有较好的预测作用，是一种较适用于国人的肝细胞癌分期方法。
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老年人腹部脂肪(CT测量)分布与体质指数及代谢综合征的关系王传海 王新江 田慧 方福生 韩晓菲
中华医学杂志2014年 94卷 12期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2014.12.008
摘要
目的
研究老年人腹部脂肪分布的特点与体质指数(BMI)及代谢综合征(MS)的关系。
方法
收集2009年1月至2010年12月于解放军总医院放射科行腹部CT检查、≥65岁患者的临床资料和腹部CT图像，按照不同年龄、BMI值进行分组，另选择同期一组正常体重、≥65岁的老年患者和BMI与正常体重老年患者相匹配的中年(40～60岁)患者腹部CT图像作对照，比较分析老年人腹部脂肪分布的特点和影响因素。腹部CT取L4/L5椎间隙水平面图像传至GE工作站，用专项软件计算腹内脂肪面积(VFA)和皮下脂肪面积(SFA)。
结果
纳入研究的腹部CT图像共390例(男252例，女138例)，腹部总脂肪面积(TAF)女性与男性差异无统计学意义[(323±122)比(303±141)cm2，P＝0.146]，用身高校正后，女性TAF明显高于男性[(128±49)比(105±49)cm2/m2，P＝0.000]。按BMI分层计算，可见TAF、VFA、SFA值随BMI值增高而逐渐增加。按年龄分层(>65～75岁组，>75～85岁组，>85岁组)比较各值间的变化未能看到TAF、VFA和SFA随着年龄的增加而增多。与正常体重的老年人、BMI匹配中年人比较，有MS者TAF、VFA、SFA增高，且随着MS积分的增加而逐渐增加；但以仅有一种MS组分分组，单有糖尿病、高血脂或高血压的老年组与对照老年组的TAF、VFA、SFA值差异均无统计学意义。Logistic回归分析显示，VFA值大(男：OR＝1.03，95%CI：1.012～1.047；女：OR＝1.06，95%CI：1.026～1.088)是老年人发生MS的危险因素，年龄、皮下脂肪均不是影响老年人发生MS的因素(均P>0.05)。
结论
老年女性较男性TAF明显高；增龄不增加老年人的腹部脂肪面积。TAF、VFA、SFA值随BMI值增高而逐渐增加，有高度相关性。≥2个MS组分叠加时TAF、VFA、SFA各值均明显增大，其中VFA是老年人发生MS的危险因素。
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老年男性人群代谢异常与全因死亡及心血管死亡关系的分析孙般若 邵迎红 李剑 田慧 李春霖
中华医学杂志2014年 94卷 12期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2014.12.009
摘要
目的
调查北京地区某老年男性人群代谢异常患病情况，探讨其与全因死亡及心血管死亡的关系。
方法
对1 447名从1996年开始于解放军总医院接受年度健康体检的老年(65～96岁)男性作为基线人群进行15年随访研究。Cox比例风险模型用于多因素分析，累积生存率估计采用Kaplan–Meier法，生存率比较采用Log–rank检验。
结果
1 447名老年男性平均年龄(73.4±4.8)岁，随访15年间因各种原因死亡639名，其中心脑血管死亡186名，占总死亡人数的29.1%，仅次于恶性肿瘤的40.5%。Cox风险比例模型多因素分析结果显示与老年男性全因死亡独立相关的危险因素有年龄[相对危险度(RR)＝1.131，95%CI 1.114～1.148]、糖代谢异常(RR＝1.344，95%CI 1.139～1.585)、高血压(RR＝1.241，95%CI 1.055～1.460)、体质指数(BMI，RR＝0.968，95%CI 0.943～0.993)及空腹血糖(RR＝1.101，95%CI 1.031～1.177)；与心脑血管疾病死亡率独立相关的危险因素有年龄(RR＝1.119，95%CI 1.086～1.153)、糖代谢异常(RR＝1.856，95%CI 1.386～2.458)及高血压(RR＝1.699，95%CI 1.242～2.324)。和正常糖代谢者相比，糖调节受损和糖尿病患者累积生存率及心脑血管疾病累积生存率均显著低(P<0.01)，且两者之间差异无统计学意义(P>0.05)。糖代谢异常合并高血压患者，其心脑血管疾病累积生存率显著降低(P<0.01)。和正常BMI及高BMI相比，低BMI积累生存率显著低(P<0.01)。与0～1个代谢异常者相比，存在2个及以上代谢异常者累积生存率显著降低(P<0.01)。
结论
恶性肿瘤、心脑血管疾病死亡是老年男性主要的死亡原因，年龄增长、糖代谢异常、高血压及合并2个以上代谢异常是全因死亡及心脑血管疾病死亡的危险因素。低体重增加全因死亡风险。
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五年间肺炎衣原体血清抗体检测及流行病学分析崔京涛 闫文娟 倪安平 孔令君 陈兰兰
中华医学杂志2014年 94卷 12期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2014.12.011
摘要
目的
了解最近5年临床送检标本血清肺炎衣原体抗体检测结果及其流行病学情况。
方法
对北京协和医院2008年5月至2013年9月采用微量免疫荧光法检测的7 802份血清标本肺炎衣原体IgG和IgM抗体结果进行回顾性分析。根据IgG和IgM抗体以及滴度判断肺炎衣原体既往感染或近期感染。分析年龄、性别等临床因素与肺炎衣原体抗体滴度的关系。
结果
(1)肺炎衣原体既往感染：IgG抗体滴度≥ 1∶16且<1∶512(阳性)率为87.5%(6 827/7 802)，其中2～4岁组阳性率最低[50.6%(78/154)]，70岁以上组阳性率最高[98.7%(1 277/1 294)]。肺炎衣原体IgG抗体阳性患者中，男性抗体滴度高于女性抗体滴度(几何均数：45.8比41.9)，差异有统计学意义(P＝0.000 1)。(2)肺炎衣原体近期感染：肺炎衣原体IgG抗体≥1∶512或IgM滴度≥1∶16或急性期和恢复期双份血清抗体阳转或滴度4倍及以上升高，总体近期感染率为3.6%(282/7 802)，其中<2岁组感染率最低[0.5%(2/417)]，10～14岁组感染率最高[6.7%(24/357)]。如果IgM作为唯一的近期感染标准可能有高达68.1%(192/282)漏检。仅自身免疫病患者和肺部感染或肺部阴影患者中肺炎衣原体近期感染率高于总体近期感染率[7.1%(24/336)和4.7%(69/1 467)比3.6%，P＝0.000 4、0.014 0]。
结论
肺炎衣原体IgG抗体阳性率非常高，男性患者IgG抗体滴度明显高于女性；如果以IgM抗体作为肺炎衣原体近期感染率唯一判定标准可造成漏检。
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促肾上腺皮质激素非依赖性双侧肾上腺大结节样增生的临床特点分析段炼 卢琳 陆召麟 顾锋 胡明明 童安莉 陈适 李汉忠 张学斌
中华医学杂志2014年 94卷 12期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2014.12.012
摘要
目的
明确促肾上腺皮质激素(ACTH)非依赖性双侧肾上腺大结节样增生(AIMAH)的临床特点。
方法
回顾性分析北京协和医院自2001年1月至2011年12月收治的AIMAH共30例，总结AIMAH的临床和生化特点以及治疗转归。
结果
AIMAH在不同性别的发病比例差异无统计学意义，平均起病年龄(44±9)岁，中位病程是5年，最常见的临床表现是高血压(100.0%)。血皮质醇昼夜节律均消失，24 h尿游离皮质醇(UFC)正常的患者仅有4例(13.3%)，所有患者小剂量地塞米松抑制试验均不被抑制，28例(93.3%)患者大剂量地塞米松抑制试验不被抑制。在异常受体表达的兴奋试验中，14例患者中有12例具有1种或1种以上兴奋试验呈阳性或部分阳性反应。25例患者采用手术治疗，行单侧肾上腺全切术的14例患者中，8例缓解，而行单侧肾上腺全切＋对侧次全切术的7例患者中，6例缓解。
结论
影像学表现为双侧肾上腺大结节样增生的患者应明确有无AIMAH，并依据患者临床症状和皮质醇水平采取不同治疗方式，缓解临床症状，改善预后。
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外周血检测梅毒螺旋体DNA及其分子亚型的初步观察王林娜 樊硕 郑和义 李军 姚志远
中华医学杂志2014年 94卷 12期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2014.12.013
摘要
目的
探讨外周血标本检测梅毒螺旋体DNA基因分型的可行性，了解梅毒病程与梅毒螺旋体DNA阳性率及基因分型的关系。
方法
收集2012年7月至2013年2月北京3家医院性病中心就诊的181例梅毒患者的临床资料，采用PCR方法检测患者外周血梅毒螺旋体特异性基因polA基因；对pol A基因阳性标本采用巢式PCR法扩增酸性重复蛋白质基因arp和重复基因簇基因tpr进行基因分型。
结果
181例梅毒患者中有35例polA基因阳性，其中67例初诊非潜伏梅毒的未治疗患者中24例(35.8%)阳性；26例潜伏梅毒患者均阴性；72例复诊患者中7例(9.7%)阳性；16例血清固定患者中4例(25.0%)阳性。进一步基因分型发现35份polA基因阳性标本中14份为14d亚型，10份为14b亚型，7份为14a亚型，4份为13c亚型，其中血清固定的4份标本中3份为14d亚型，1份为14b亚型。
结论
外周血检测梅毒螺旋体基因具有可行性，尽管阳性率较低，但是可靠易行，尤其对血清固定患者具有一定意义。
医学动态
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第十五个世界癌症日到来及《世界癌症报告》发表苗蔚
中华医学杂志2014年 94卷 12期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2014.12.003
摘要
2014年2月4日是第十五个世界癌症日，今年癌症日的主题是"消除对癌症的错误认识"。从全球来看，以下四点是人们对于癌症的主要错误认识：(1)我们不需要谈论癌症；(2)对于已经或者即将患癌的人来说，没有迹象和信号能预示；(3)对于癌症，我们都无能为力；(4)用各种生活方式去防癌没有用。世界卫生组织(WHO)和国际癌症研究机构(IARC)非常支持国际抗癌联盟(UICC)用各种方法去减轻全球的癌症负担，加快癌症研究、预防及治疗等领域的进展，为人类造福。预防癌症和提高癌症患者生活质量是世界癌症日反复出现的主题。
病例报告
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食管原发性恶性黑色素瘤一例高世乐 董六一 王崇 费振乐 卢东徽 胡宗涛
中华医学杂志2014年 94卷 12期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2014.12.010
摘要
患者男，81岁，因"进食梗阻6个月，加重1周"于2013年8月6日在外院行食管造影示：食管中段可见长4 cm椭圆形充盈缺损，考虑食管中段癌。8月8日入住解放军第一〇五医院，胸部CT示：食管中下段局部管壁明显不均匀增厚，局部呈肿块状凹向管腔内，病变区管腔狭窄，初步诊断为食管中下段癌；8月12日胃镜示：食管黏膜距门齿25～30 cm处见增生隆起型病灶，考虑食管癌；8月19日食管病变组织免疫组织化学结果示：肿瘤细胞S–100＋，Melan–A＋，HMB45＋，34βE12–，35βH11–或＋，LCA–，CD34–，CD117部分弱＋，CK5/6–，P63–，食管活检印象：恶性黑色素瘤；血、生化、尿、粪常规以及腹部B超均未见明显异常。患者偶尔饮酒，无吸烟史。体格检查：右侧颈部、双侧腋下可触及多个浅表淋巴结肿大，最大为1 cm×1 cm；其余无明显异常。治疗上给予三维适形放疗、干扰素生物治疗。随访3个月，复查胸部CT示食管病变段范围明显缩小，现可进食半流质。
基础研究
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丙种球蛋白对川崎病小鼠心脏核因子κB与MMP–9表达及活性的影响上官文 杜忠东 杨海明 张艳兰 宋铭晶 董伟
中华医学杂志2014年 94卷 12期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2014.12.016
摘要
目的
探讨静脉注射丙种球蛋白(IVIG)对川崎病小鼠心脏核因子(NF)–κB及其下游基质金属蛋白酶9(MMP–9)的表达及活性的影响。
方法
将72只3～4周龄C57BL/6小鼠按随机数字表法分为IVIG组、模型组和对照组，每组24只。前两组予干酪乳杆菌细胞壁提取物(LCWE)0.5 mg单次腹腔注射进行造模，对照组同法予生理盐水0.5 ml。IVIG组在试验第5天予IVIG(2 mg/g)腹腔注射进行干预，其他两组同样方法注射同浓度生理盐水。在实验第14、28、56天时，每组取8只小鼠分别行超声心动图检测，留取心脏标本进行病理分析。通过蛋白质印迹和电泳迁移率实验(EMSA)法检测心脏及脾脏组织NF–κB的表达。通过蛋白质印迹法和明胶酶谱法检测心脏及冠状动脉组织MMP–9表达量和生物活性。采用t检验及方差分析进行组间比较。
结果
LCWE注射后HE染色可见模型组小鼠冠状动脉局部出现大量炎性细胞浸润，弹力纤维染色可见模型组冠状动脉弹力层断裂浅染。超声心动图可见实验第14天及28天模型组小鼠左侧冠状动脉的内径均值均高于IVIG组及对照组[第28天：(0.48±0.07)比(0.41±0.03)和(0.35±0.02)mm，均P<0.01]，后两组差异均无统计学意义(均P>0.05)。蛋白质印迹测得各时间点模型组心脏组织NF–κB以及MMP–9的蛋白表达水平均明显高于对照组和IVIG组[第28天：(58±14)比(19±11)和(25±14)μg/L，(100±41)比(35±19)和(39±19)μg/L，均P<0.01]。EMSA和明胶酶谱检测心脏组织NF–κB和MMP–9的蛋白活性水平，可见各时间点模型组均明显高于对照组和IVIG组[第28天：(84 788±2 081)比(27 220±4 990)和(50 192±1 586)μg/L，(18 560±7 963)比(9 112±3 398)和(11 834±4 996)μg/L，均P<0.05]。
结论
川崎病小鼠模型心脏组织的NF–κB和(或)MMP–9呈过度表达及激活状态。IVIG在川崎病小鼠模型上可有效抑制冠状动脉周围炎症细胞浸润，缓解冠状动脉损伤，其机制可能是通过抑制NF–κB和(或)MMP–9的过度表达及激活来实现的。
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钙敏感受体在缺氧诱导气道黏液高分泌中的作用杨红菊 尤列·皮尔曼 维克多·科罗索夫 周向东
中华医学杂志2014年 94卷 12期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2014.12.017
摘要
目的
探讨钙敏感受体(CaSR)在缺氧诱导的气道黏液高分泌中的作用。
方法
通过缺氧培养箱(94%N2、1%O2、5%CO2、37 ℃)培养人气道上皮细胞HBE16的方法复制细胞缺氧模型。转染CaSR的小干扰RNA(siRNA)及预先给予CaSR特异性激动剂CaCl2、磷脂酶C信号通路不同的抑制剂：Gαq/11蛋白特异性抑制剂(YM–254890)，磷脂酶C特异性抑制剂(U73122)，三磷酸肌醇受体(IP3R)特异性抑制剂(2–APB)及细胞内Ca2＋螯合剂(BAPTA–AM)后，各组细胞再施以缺氧处理。采用反转录–PCR检测黏蛋白(MUC)5AC mRNA的转录水平，Western印迹法检测CaSR蛋白的表达水平，酶联免疫吸附(ELISA)法检测MUC5AC蛋白的相对含量，共聚焦显微镜观察细胞内Ca2＋浓度的变化。
结果
缺氧组CaSR蛋白相对表达水平(0.423±0.028)显著高于对照组(0.185±0.036)(t＝12.75，P<0.001)；细胞内Ca2＋浓度、MUC5AC蛋白相对含量及MUC5AC mRNA相对表达水平[(154.2±11.4)nmol/L、(0.624 ±0.063)μg/L、0.736±0.045]也显著高于对照组[(67.5±2.8)nmol/L、(0.257±0.051)μg/L、0.321±0.034](t＝18.04、11.06、18.05，均P<0.001)。CaCl2能上调缺氧引起的上述作用，转染CaSR siRNA能够下调缺氧引起的上述效应(均P<0.001)。预先给予YM–254890、U73122、2–APB、BAPTA–AM处理细胞，细胞内Ca2＋浓度、MUC5AC蛋白相对含量及MUC5AC mRNA相对表达水平均显著低于单纯缺氧组(均P<0.05)。
结论
CaSR可通过Gαq/11/磷脂酶C/三磷酸肌醇/细胞内Ca2＋信号通路参与缺氧诱导的气道黏液高分泌。
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脂多糖预处理对人脐带间充质干细胞内毒素耐受的影响侯玉森 柴家科 刘玲英 郁永辉 段红杰 胡泉 褚万立 马丽
中华医学杂志2014年 94卷 12期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2014.12.018
摘要
目的
观察脂多糖预处理对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)内毒素耐受的影响，并探讨其可能机制。
方法
将hUCMSCs(1×104个/孔)分别暴露于0、0.1、1.0、10.0、20.0、30.0、40.0及50.0 μg/ml的脂多糖24 h，采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率；以1 μg/ml脂多糖为预处理浓度，50 μg/ml脂多糖为诱导凋亡浓度，核因子(NF)–κB特异性抑制剂PDTC浓度为20 μmol/L，处理时间为20 min。使用Stata软件产生随机数字将hUCMSCs随机分为：对照组(A组)；脂多糖诱导组(B组)；预处理＋脂多糖诱导组(C组); PDTC组(D组)；PDTC＋预处理＋脂多糖诱导组(E组)；预处理组(F组)；PDTC＋预处理组(G组)。利用Hoechst 33258染色及流式细胞术观察细胞凋亡，Western印迹法检测NF–κB p65及细胞型Fas相关死亡区域蛋白样白细胞介素–1β转换酶抑制蛋白(c–FLIP)的表达。
结果
0、0.1、1.0、10.0、20.0、30.0、40.0及50.0 μg/ml脂多糖刺激组的细胞存活率分别为：100%、(117.0±8.8)%、(134.7±6.9)%、(105.3±8.3)%、(99.2±8.3)%、(84.2±9.3)%、(66.4±6.6)%和(59.2±8.0)%；与0 μg/ml组比较，1.0 μg/ml组hUCMSCs的存活率明显提高(P＝0.004)，而40.0、50.0 μg/ml组细胞存活率显著降低(P＝0.005、0.002)。A组hUCMSCs染色质分布均匀，为弥散均匀的低强度荧光；B组细胞核呈浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光的凋亡细胞明显增多；C组凋亡细胞较B组显著减少。A、B、C、D、E各组细胞凋亡率分别为：(2.8±0.8)%、(29.7±3.4)%、(17.8±3.0)%、(2.9±0.4)%和(23.2±2.6)%；细胞凋亡率B组显著高于A组(P<0.001)，C组显著低于B组(P<0.001)，E组显著高于C组(P＝0.015)。F组NF–κB p65、c–FLIP相对表达量(0.851±0.031、0.534±0.053)显著高于A组(0.220±0.021、0.049±0.009)(均P<0.001)和G组(0.418±0.007、0.299±0.061)(P<0.001，P＝0.007)。
结论
脂多糖预处理能够抵抗内毒素环境引起的hUCMSCs凋亡，增强细胞内毒素耐受性；其机制可能与激活NF–κB信号通路并上调c–FLIP的表达有关。
综述
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CD4＋T细胞可塑性在支气管哮喘中的研究进展吉宁飞 殷凯生 吴桢珍 姚欣 王虹 黄茂
中华医学杂志2014年 94卷 12期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2014.12.019
摘要
适应性免疫应答是机体对于胞内或胞外病原体的主要免疫应答，其中CD4＋辅助性T细胞(也称为Th细胞)有极其重要的作用。既往曾认为初始CD4＋T细胞分化为各种不同类型效应细胞的过程不可逆，近来研究发现，已分化的某种类型的CD4＋T细胞亚群，在一定条件下可以转变自身细胞因子分泌谱，称为CD4＋T细胞的可塑性[
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Luminal型早期乳腺癌辅助治疗后远期复发的研究进展陈雪莲 樊英 徐兵河
中华医学杂志2014年 94卷 12期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2014.12.020
摘要
早期乳腺癌(Ⅰ～ⅢC期)的复发高峰集中在术后2～3年(即近期复发)，但是不同分子亚型复发模式存在差异[
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他汀类药物对甲状腺未分化癌的治疗作用及其机制赵军玉 董建军 姚金铭 刘萌 邵丽辉 廖琳
中华医学杂志2014年 94卷 12期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2014.12.021
摘要
甲状腺癌是内分泌系统最常见的恶性肿瘤，约占人类新发恶性肿瘤的1%，呈逐年上升趋势。甲状腺乳头状癌(PTC)和甲状腺滤泡状癌(FTC)的经典治疗方案为甲状腺全切或近全切除术＋放射性131I治疗＋甲状腺激素抑制治疗，5年生存率约为85%[
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