2013年 · 第93卷第42期

目的探讨膀胱平滑肌细胞是否存在自噬及其在环磷酰胺诱导的大鼠膀胱炎中的作用及意义。方法30只SD大鼠完全随机法分为对照组和实验组（4 h组、48 h组、72 h组、96 h组），每组6只。实验组腹腔给予环磷酰胺150 mg/kg处理，对照组腹腔给予等体积生理盐水0.6 ml处理。Western印迹检测膀胱肌层自噬标志蛋白微管相关蛋白1轻链3（LC3）、白细胞介素（IL）-6、IL-1β和肿瘤坏死因子（TNF）-α蛋白表达变化。LC3和平滑肌肌动蛋白α（α-SMA）免疫荧光双标膀胱平滑肌细胞自噬斑点共定位。透射电镜观察膀胱平滑肌细胞自噬小体。HE染色行膀胱病理组织评分。结果电镜、免疫荧光双标以及Western印迹证实实验组和对照组膀胱平滑肌细胞均存在自噬。Western印迹结果显示实验4 h组膀胱肌层LC3表达显著低于对照组（0.08±0.01比0.13±0.01，P<0.05）；实验48、72及96 h组膀胱肌层LC3表达高于对照组（0.29±0.04比0.13±0.01，P<0.05；0.23±0.03比0.13±0.01，P<0.05；0.16±0.03比0.13±0.01，P>0.05），分别为对照组的2.19、1.75、1.20倍。电镜和免疫荧光双标的结果支持该变化趋势。此外，实验组膀胱肌层炎症因子（IL-6、IL-1β和TNF-α）以及膀胱病理组织评分均显著高于对照组（均P<0.05）。结论膀胱平滑肌细胞存在自噬。在环磷酰胺诱导的大鼠膀胱炎中膀胱平滑肌自噬的激活不充分，未能保护大鼠膀胱肌层。

目的单纯高脂饲料饲养雄性新西兰兔建立高脂血症动物模型，研究高脂血症对膀胱功能、形态学的影响及可能机制。方法选取体重2.5~3.0 kg成年雄性新西兰兔30只，依次编号后采用随机抽签法随机分成高脂饲料（高脂组）及普通饲料（对照组）两组，分别进行在体膀胱尿动力学检查及离体逼尿肌肌条张力实验评估膀胱功能，HE染色观察膀胱壁及髂内动脉形态变化，透射电镜下观察膀胱逼尿肌肌细胞微结构变化，以及免疫组织化学方法确定膀胱逼尿肌及黏膜层胆碱能（M）2、3受体表达情况。结果喂养至第12周时，高脂组（n=14）在体膀胱尿动力学检查显示储尿期膀胱逼尿肌不自主收缩增加者高于对照组（n=13）（10/14比1/13，P<0.05）、顺应性变差[（2.16±0.17）比（4.18±0.21）ml/cm H2O，P<0.01]；高脂组逼尿肌离体肌条在M受体激动剂卡巴胆碱刺激下收缩力减弱；在选择性M3受体拮抗剂索利那新作用下肌条张力下降幅度更明显。HE染色示高脂组髂内动脉内膜增厚；膀胱平滑肌层肌纤维排列紊乱且其间纤维结缔组织增加，透射电镜发现高脂组膀胱逼尿肌胞质内线粒体肿胀改变；免疫组织化学半定量结果显示M2受体在两组中差异无统计学意义（P>0.05），M3受体在高脂组中表达高于对照组（膀胱黏膜层：146±14比108±9，P<0.01；膀胱平滑肌层：131±17比116±15，P<0.05），且在黏膜层表达增加更为明显。结论高脂血症雄性新西兰兔出现顺应性变差、不自主收缩次数增多及收缩力减弱等膀胱功能改变，考虑可能与高脂血症引起的膀胱慢性缺血和膀胱黏膜层和肌层M3受体表达增加有关。

目的分析颈胸段完全性脊髓损伤患者影像尿动力学检查特点及泌尿系统处理方法与疗效。方法回顾性分析2008年1月至2010年5月中国康复研究中心附属北京博爱医院收治的颈胸段完全性脊髓损伤患者113例的影像尿动力学检查结果和泌尿系统管理方法，追踪3年后其泌尿系统情况及并发症的发生情况。结果113例中82例（72.57%）表现为逼尿肌过度活动，31例（27.43%）表现为逼尿肌无反射；71例（62.83%）出现逼尿肌-外约肌协同失调，59例（52.21%）表现为膀胱顺应性下降，6例（5.31%）出现膀胱输尿管反流；12例（10.62%）超声检查发现肾积水。根据检查结果对逼尿肌过度活动的患者选择口服抗胆碱能制剂、A型肉毒毒素注射等方法，对逼尿肌无反射的患者进行规律间歇导尿进行膀胱训练。追踪随访3年，治疗效果满意，发生膀胱结石2例，泌尿系统感染7例，未出现其他特殊并发症。结论颈胸段完全性脊髓损伤患者影像尿动力表现不尽相同，大部分患者表现为逼尿肌过度活动，同时合并逼尿肌括约肌协同失调，膀胱顺应性下降，选择适当的治疗方法能有效的保护上尿路功能，预防泌尿系统并发症。

目的评价O′Leary-Sant问卷表在间质性膀胱炎（IC）的诊断及鉴别诊断中的应用价值。方法回顾性分析2008年1月1日至2013年3月31日因反复尿频、尿急、排尿费力、憋尿时耻骨上膀胱区疼痛于北京朝阳医院泌尿外科门诊初步考虑IC并应用O′Leary-Sant问卷表对症状进行评估的患者资料。根据最终的临床诊断结果将患者分为IC组和非IC组，比较两组患者之间的O′Leary-Sant评分（OPSI评分）、及其中的问题指数评分（ICPI评分）和症状指数评分（ICSI评分）的分布情况，并分别绘制相应的受试者工作特征（ROC）曲线，分别评价其在IC诊断中的特异性和敏感性。结果共收集82例患者，其中IC组58例，非IC组24例。IC组和非IC组的OPSI评分分别为（24.7±6.9）和（23.2±7.8）分（P=0.403），ICPI评分分别为（11.7±3.2）和（10.2±3.7）分（P=0.070），ICSI评分分别为（13.0±4.0）和（13.1±4.3）分（P=0.975），差异均无统计学意义。若以OPSI评分≥12分诊断IC，其敏感度为98%，特异度为8%，敏感度非常高，可将OPSI作为筛查IC的一项工具。在ROC曲线中，OPSI、ICPI和ICSI评分的曲线下面积分别为0.548±0.071、0.622±0.069、0.492±0.070，这三项指标对IC的诊断价值均不高。结论O′Leary-Sant问卷表诊断IC敏感性高，特异性低，作为诊断IC工具其诊断价值不高。以OPSI评分≥12分筛选IC，其敏感性高，有一定临床价值。

目的探讨影响前列腺癌（PCa）患者生存预后的临床因素，以及近距离治疗在改善PCa患者生存状况方面的临床意义。方法回顾性总结近12年来289例PCa患者的临床病理资料及生存资料，分析可能影响患者生存预后的临床因素，并进一步比较单纯内分泌治疗方案与内分泌联合近距离治疗方案对患者生存率的影响。结果全组患者中位生存时间73（7~144）个月，1、3和5年生存率分别为93.1%、81.0%和60.2%。单因素分析显示：前列腺体积、基线前列腺特异抗原（PSA）水平、Gleason评分、肿瘤分期、PSA下降时间、PSA最低值以及治疗分组（是否联用近距离治疗）是影响PCa患者生存时间的预后因素。多因素分析显示：Gleason评分、肿瘤分期、PSA最低值以及治疗分组（是否联用近距离治疗）是独立的预后因素。内分泌联合近距离治疗组患者的生存曲线与单纯内分泌治疗组患者的生存曲线相比差异有统计学意义，前组患者的5年累积生存率显著高于后组患者（68.7%与41.8%，P=0.003）。结论是否联合近距离治疗不仅与Gleason评分、肿瘤分期以及治疗后PSA最低值等因素一样，是PCa患者的独立预后因素；而且在内分泌治疗前进行近距离治疗能够显著延长PCa患者的生存周期。

目的观察转染RelB小干扰RNA（RelB-siRNA）对小鼠前列腺癌细胞RM-1放射治疗敏感性的影响。方法将RM-1细胞分为4组，分别为RelB-siRNA组、空载体组、未感染组和正常对照组，分别感染RelB-siRNA慢病毒载体、空载体病毒及不感染病毒，细胞感染成功后，前3组细胞接受X线照射，用细胞克隆方法检测0、2、4、6、8 Gy剂量照射后细胞存活分数和相关参数值；上述4组细胞用Annexin V/PI流式细胞仪检测6 Gy照射剂量下细胞凋亡率，实时PCR检测6 Gy照射剂量下细胞RelB mRNA表达，Western印迹检测6 Gy照射剂量下细胞质和细胞核中RelB蛋白的表达。结果细胞克隆结果提示，RelB-siRNA组在每个剂量点所对应的存活分数均低于空载体组和未感染组，Rel B-siRNA组的细胞平均致死剂量（D0值）、准域剂量（Dq值）、2Gy细胞存活分数（SF2值）分别为1.68、0.60、0.43，低于空载体组（1.92、3.08、0.89）和未感染组（1.93、2.76、0.84）；Annexin V/PI流式细胞仪结果表明，RelB-siRNA组凋亡率为15.27%±1.62%，明显高于未感染组和空载体组的7.90%±1.50%、8.40%±0.69%（P<0.01），实时PCR结果显示，RelB-siRNA组的RelBmRNA的扩增倍数1.18±0.03，低于未感染组与空载体组2.10±0.61、1.97±0.66（P<0.01）；Western印迹检测结果提示，细胞质RelB-siRNA组灰度比值为0.50±0.08，明显低于未感染组和空载体组的1.77±0.19、1.52±0.12（P<0.01）；细胞质RelB-siRNA组灰度比值为0.18±0.03，明显低于未感染组和空载体组的0.61±0.12、0.54±0.13（P<0.01）。细胞质RelB-siRNA对RelB蛋白抑制率为71.8%，细胞核Rel B-siRNA对RelB蛋白抑制率为70.4%。结论RelB-siRNA可有效抑制小鼠前列腺癌细胞RM-1中RelB表达，可明显增加RM-1对放射治疗的敏感性。

目的探讨酪蛋白激酶2（CK2）催化亚单位是否都参与前列腺癌细胞雄激素受体信号转运表达。方法CK2选择性抑制剂四溴肉桂酸（TBCA）和基因特异性小干扰RNA（siRNA）应用到多种前列腺癌细胞株进行检测，探讨CK2不同催化亚单位在雄激素受体（AR）信号传导的作用。萤光素酶基因报道分析检测雄激素受体反式激活，免疫荧光方法检测AR核定位以及定量聚合酶链反应（PCR）检测AR介导的基因表达。结果TBCA阻断AR核转位和基因表达（P<0.01）。雄激素反应元件荧光素酶基因检测结果显示CK2α和CK2α′siRNA都显著减弱R1881（人工合成的雄性激素）刺激引发的前列腺癌细胞活性（38.5与31.4），2种CK2催化亚单位都参与雄激素刺激的核转位和AR介导的基因表达（P<0.05）。结论CK2亚单位CK2α和CK2α′都参与了雄激素受体信号转运表达。

目的分析甲状旁腺癌（PC）患者的临床特点、遗传背景、病理特征，初步探讨CDC73基因突变在PC中的致病作用。方法总结1980年1月—2012年12月北京协和医院内分泌科诊疗的24例PC患者的临床资料。提取外周血及PC肿瘤石蜡组织DNA，行CDC73基因的PCR扩增及测序；对石蜡标本进行parafibromin蛋白免疫组织化学染色。结果诊断原发性甲状旁腺功能亢进症（PHPT）及PC的年龄分别为42.2、42.6岁，第1次术前平均血钙3.78 mmol/L、血磷0.65 mmol/L，甲状旁腺素（PTH）增高倍数的中位数为20.0，76.2%的患者发生复发。11例患者发现CDC73基因突变，PC组织中parafibromin蛋白的表达完全（55%）或部分缺失（45%）。结论PC具有血钙、血PTH升高明显、复发风险高的临床特点，携带胚系CDC73基因突变率高较高，肿瘤组织存在parafibromin蛋白表达缺失或减少。

目的探讨S100A8与S100A9在胃癌组织中的表达及其在癌症进展中的作用。方法北京大学肿瘤医院1998至2004年的176例胃癌根治性手术患者样本，全部进行S100A9检测，男124例，女52例，年龄26~80岁，平均年龄57岁。其中125例进行了S100A8检测，男92例、女33例。同时，采集30例胃癌患者配对的转移淋巴结和由青岛医学院普外科提供的10例慢性阑尾炎急性发作的组织作为对照组。用免疫组织化学法对S100A8与S100A9在胃癌组织样本中的表达进行分析，用免疫荧光及激光共聚焦扫描的方法对S100A9、S100A8及异二聚体S100 A8/A9的共存情况进行分析。S100 A9和S100A8阳性炎性细胞数对于患者病理TNM分期的评估用受试者工作特征（ROC）曲线来判定。χ2检验评估S100 A9及S100A8阳性细胞数与临床病理因素之间的联系。Kaplan-Meier方法评估S100A9和S100 A8蛋白表达与生存的关系。结果S100A9和S100 A8阳性炎性细胞数针对TNM分期获得的ROC曲线下面积分别是0.623和0.522，S100A9和S100A8分别以高倍镜下阳性炎性细胞数≥200和65个为阳性组（n=77和62），阳性炎性细胞数<200和65个为阴性组（n=99和63），进行肿瘤分期预测，其敏感度分别为61.48%和51.09%，特异度分别为64.29%和51.52%。生存分析数据显示，S100A9阳性组患者的预后明显优于其阴性组[总生存时间（35.1±10.8）比（20.3±3.0）个月，P=0.021]，而S100A8阳性组与阴性组之间则差异无统计学意义[总生存时间（26.4±2.8）比（29.5±2.9）个月，P=0.145]。免疫组织化学和免疫荧光激光共聚焦结果显示，胃癌组织炎性浸润细胞中S100A8及S100A9蛋白均表达而S100A8/A9不表达，在慢性胃炎炎性细胞和慢性阑尾炎急性发作的组织中S100A9、S100A8和S100A8/A9均表达。结论胃癌组织中S100A9阳性组与胃癌分期以及预后相关，而S100A8阳性组与胃癌分期以及预后无关；胃癌与胃炎中的炎症浸润细胞S100A8/S100A9表达情况明显不同，其机制有待进一步研究。

目的探讨含十字形结构域蛋白2C（JMJD2C）和缺氧诱导因子1α（HIF-1α）在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法回顾性分析2005至2007年浙江省人民医院胃肠外科收治的110例胃癌患者的临床资料，其中男78例，女32例，平均年龄57（32~79）岁，术前未经任何放化疗。通过免疫组织化学法检测110例原发性胃癌组织及80例癌旁正常胃黏膜组织中JMJD2C和HIF-1α蛋白表达情况。结果JMJD2C约在69.1%（76例）的胃癌组织中呈高表达，正常胃黏膜组织中表达阴性（P<0.05）；胃癌组HIF-1α的阳性表达率为73.6%（81/110），而正常胃黏膜组织中无表达（P<0.05）。胃癌组织中JMJD2C的表达与肿瘤的分化程度、浸润深度、临床TNM分期和淋巴结转移、远处转移密切均相关（均P<0.05），而与患者性别、年龄、肿瘤大小等因素均无关（均P>0.05）。HIF-1α的表达与胃癌的TNM分期、浸润深度、淋巴结转移、远处转移等均有关（均P<0.05），而与年龄、性别、肿瘤大小、分化程度等因素均无关（均P>0.05）。JMJD2C和HIF-1α表达呈正相关（r=0.219，P<0.05）。Kaplan-Meier生存分析显示JMJD2C阳性组和HIF-1α阳性组平均生存时间均分别低于其阴性组[（38±4）比（56±6）个月，(38±4）比（60±6）个月，χ2=8.006、7.218，均P<0.01]； JMJD2C和HIF-1α双阳性组平均生存时间显著低于单阳性组和双阴性组（χ2=10.425，P<0.01）。结论JMJD2C和HIF-1α在胃癌组织中呈高表达，二者的表达呈正相关； JMJD2C和HIF-1α共同参与胃癌的发生，浸润，转移等生物学行为，可作为评价胃癌恶性程度和预后分析的新指标。

目的探讨肾上腺醛固酮瘤（APA）血浆肾素活性（PRA）和醛固酮水平（PAC）及PAC/PRA比值（ARR）的特点。方法回顾性分析2006年3月至2012年3月华中科技大学同济医学院附属同济医院内分泌科和泌尿外科80例经手术证实的APA和70例原发性高血压病（EH）的数据，分为标准化筛查组（简称标化组）和用药组，26名正常血压者为对照（正常血压组）。受试者工作特征曲线（ROC）探讨最佳ARR和低PRA切点值。结果正常血压组和EH标化组：90%~95%卧位和100%立位PRA≥0.52 ng·ml-1·h-1（1 ng·ml-1·h-1=1μg·L-1·h-1）。APA标化组：≥90% PRA<0.52 ng·ml-1·h-1；最低ARR（为计算方便，PAC单位选用ng/dl，1 ng/dl=27.7 pmol/L；ARR单位选用ng·dl-1/ng·ml-1·h-1）：卧位≥24.2，立位≥37.5。筛查APA最佳ARR（ng·dl-1/ng·ml-1·h-1）：卧位≥26.0，立位≥37.0；低PRA（ng·ml-1·h-1）切点值：卧位<0.50，立位<0.63。盐水负荷后PAC≥10.0 ng/dl，诊断敏感度88.2%，特异度61.5%。降压药干扰PRA和ARR测定，对盐水负荷后PAC无影响。结论PRA和PAC及ARR以排除诊断APA为特点。APA存在明确的低PRA切点值。

目的探讨耳后注射曲安奈德注射液对常规药物治疗无效的主观性耳鸣的疗效。方法2012年5—11月，海军总医院耳科门诊100例主观性耳鸣成年患者，随机分为治疗组和对照组，每组50例。治疗组患者行耳后皮下注射曲安奈德注射液1 ml，对照组患者给予皮下注射生理盐水注射液1 ml，2组均每周注射1次，连续治疗5次。初诊和末次治疗后1周给予耳鸣严重程度评分。随访6个月。结果两组主观性耳鸣治疗前的年龄、性别、耳鸣严重程度、耳鸣病程和听力损失程度差异均无统计学意义（P值分别为0.316、0.685、0.839、0.682、0.881）。治疗组50例主观性耳鸣患者中，显效8例，有效18例，无效24例，总体有效率为52%。对照组50例患者中，显效7例，有效15例，无效28例，总体有效率为44%。两组治疗有效率差异无统计学意义（P=0.724）。结论耳后皮下注射曲安奈德治疗常规药物治疗无效的主观性耳鸣无明显效果。

目的探讨氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）/ox-LDL受体1（LOX-1）系统与高脂肥胖幼鼠血管内皮功能障碍的相关性和烟酸的干预效果及其可能机制。方法21日龄断乳雄性Wistar大鼠30只，通过高脂饮食建立幼鼠高脂肥胖模型，设对照组、高脂组、烟酸组，各10只，于12周检测外周血血脂、ox-LDL、可溶性细胞间黏附分子（sICAM）-1水平，血浆内皮素，血清一氧化氮（NO），主动脉血管壁LOX-1、ICAM-1的基因和蛋白表达，主动脉ICAM-1、LOX-1蛋白的定位表达。结果高脂组和烟酸组外周血甘油三酯、总胆固醇、LDH、ox-LDL、内皮素水平均高于对照组[（0.98±0.12）和（0.69±0.06）比（0.49±0.06）mmol/L、（2.11±0.16）和（1.62±0.12）比（1.30±0.12）mmol/L、（0.71±0.04）和（0.50±0.03）比（0.30±0.04）mmol/L、（44.2±5.1）和（33.7±2.1）比（26.6±2.9）μg/L、（187±10）和（157±6）比（118±7）pg/ml]，高脂组各指标均高于烟酸组（均P<0.01）；高密度脂蛋白（HDL）和NO水平高脂组和烟酸组则均低于对照组（均P<0.01），高脂组均低于烟酸组（均P<0.01）；高脂组血管壁LOX-1、ICAM-1蛋白及mRNA的表达均高于对照组和烟酸组（均P<0.01）。相关分析显示，ox-LDL与LOX-1、总胆固醇、甘油三酯、LDL、内皮素、ICAM-1显著正相关（r=0.918、0.867、0.857、0.834、0.869、0.644，均P<0.01），而与NO、HDL显著负相关（r=-0.823、-0.872，P<0.01）。结论烟酸早期应用可能通过调节血脂、干预血管ox-LDL和LOX-1的表达，发挥对饮食诱导的高脂肥胖幼鼠保护内皮功能的作用。

目的探讨低剂量胰岛素对重度烧伤早期大鼠心脏、肾脏组织氧化还原的影响。方法24只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假伤组、烫伤组与治疗组各8只。假伤组浸入37℃温水中15 s模拟烫伤，伤后不进行液体复苏；烫伤组及治疗组（95.0±0.5）℃热水中15 s制作烧伤总面积30%、Ⅲ度烫伤模型，伤后立即腹腔注射生理盐水（40 ml/kg）；治疗组复苏补液后皮下注射胰岛素（1.0 U·kg-1·d-1），烫伤组同法注射等量生理盐水。伤后24 h采集腹主动脉血及心脏、肾脏组织标本。采用分光光度法测定血糖及心脏、肾脏组织中氧化及抗氧化指标，包括丙二醛（MDA）、黄嘌呤氧化酶（XO）、髓过氧化物酶（MPO）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、超氧化物歧化酶（SOD）1和2、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）。结果烫伤组心脏、肾脏组织MDA含量、XO及MPO活力均显著高于假伤组（均P<0.05）；与烫伤组比较，治疗组心脏组织MDA含量、XO活力均显著降低[（0.85±0.07）比（1.11±0.07）nmol/mg，(69.72±1.94）比（77.21±2.10）U/g]，心脏、肾脏组织MPO活力也均显著降低（均P<0.05）；与假伤组比较，烫伤组心脏、肾脏组织的T-SOD、CAT、GPx活力均显著降低，肾脏组织SOD1活力显著降低而SOD2活力显著升高，心脏组织SOD2活力显著降低（均P<0.05）；与烫伤组比较，治疗组心脏组织T-SOD、SOD1活力均显著升高[（83.5±2.5）比（79.6±3.2）、（62.8±2.3）比（58.8±3.0）U/mg]，心脏、肾脏组织CAT、GPx活力也均显著升高（均P<0.05）；烫伤组、治疗组血糖水平均显著高于假伤组[（7.81±0.30）、（7.19±0.22）比（6.30±0.24）mmol/L]，而治疗组显著低于烫伤组[（7.81±0.30）mmol/L]（均P<0.05）。结论低剂量胰岛素可干预重度烧伤早期大鼠心脏组织的脂质过氧化，对心脏、肾脏氧化还原的影响存在差异。