2007年 · 第87卷第06期

近年来,冠心病的诊断和治疗迅速发展,相关的基础研究、药物治疗和介入治疗都在不断深入.而有关心肌病的研究报道较少,基础和临床研究进展也相对滞后于其他心血管疾病.但毋庸置疑的是心肌病严重影响患者的生活质量、危及患者的生命,是心血管疾病死亡的主要原因之一。

在大规模的人群流行病学研究及一系列大规模降脂治疗的临床试验证实脂蛋白与冠心病独立相关.但目前认为还没有探究到低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的底线浓度.最近的一项荟萃分析提出他汀药物对动脉粥样硬化性心血管疾病的防治效果不能单纯归功于其降低LDL-C作用,降脂外的作用也很重要.而且即使强化降脂,也只能降低25%～40%的心血管病事件,仍然有60%～75%的事件不能单纯靠降低LDL-C预防,这提示我们需要寻找新的治疗目标,而低高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)作为冠心病的重要危险因素符合作为主要治疗靶点的条件.尽管早期的研究已证实了HDL-C与冠心病危险呈显著负相关,甚至部分研究发现HDL-C较LDL-C能更好地预测冠心病的危险[1],但对HDL-C的重视远不如LDL-C,其中原因之一是目前没有有效和安全地升高HDL-C的药物.

目的 探讨糖尿病心肌病(DCM)中转化生长因子β1(TGFβ1)相关的Smads信号通路的激活及缬沙坦的干预作用.方法 雄性Wistar大鼠40只,随机分为3组:对照组(8只),DCM组(16只),缬沙坦组(16只),采用高脂高热量饲料喂养加小剂量链脲佐菌素(STZ)注射制作DCM大鼠模型.成模后缬沙坦组给以缬沙坦(30 mg/kg)干预治疗,实验末观察大鼠生化指标的变化,血流动力学观察大鼠心功能的变化,应用电子显微镜、Masson染色、实时定量逆转录(RT)-PCR和Western印迹技术,检测各组大鼠左室心肌组织胶原含量,TGFβ1、TGFβⅡR、Smad2、Smad3及Smad7 mRNA和蛋白质表达水平的变化.结果 DCM组大鼠心功能明显低于对照组(P＜0.01),左室心肌组织胶原含量明显高于对照组(17%±3%vs 11%±3%,P＜0.01),存在心肌间质纤维化;同时TGFβ1、TGFβⅡR、Smad2和Smad3 mRNA表达水平均高于对照组(0.0054±0.0009 vs 0.0126±0.0057,0.0523±0.0218 vs 0.0877±0.0272,0.0413±0.0186 vs 0.0884±0.0146,0.0064±0.0021 vs 0.012±0.0048,P＜0.05～0.01),Smad2/Smad7和Smad3/Smad7的mRNA的比值也明显高于对照组(P＜0.05),TGFβ1、磷酸化(P)-Smad2和P-Smad3蛋白质表达水平明显高于对照组(103±18 vs 143±17,107±21vs 212±43,89±17 vs 151±32,P＜0.01),P-Smad2/Smad7和P-Smad3/Smad7蛋白质的比值也明显升高(P＜0.05).应用缬沙坦干预治疗后,大鼠心功能明显好转,心肌间质胶原沉积减轻,同时上述分子异常均明显好转,Smad2、Smad3和Smad7之间的失平衡现象较DCM组减轻(均P＜0.05).结论 TGFβ1相关的Smads信号通路的激活及相关分子之间的平衡状态的改变可能是DCM心肌间质纤维化的机制之一,缬沙坦通过抑制这一信号途径,在一定程度上可逆转DCM心肌间质纤维化的发生和发展。

目的 研究中国人肥厚型心肌病(HCM)致病基因,分析基因型与临床表型的关系.方法在一个HCM家系中进行心脏型肌钙蛋白T基因(TNNT2)、心脏型肌球蛋白结合蛋白C基因(MYBPC3)和β-肌球蛋白重链基因(MYH7)突变筛查,利用聚合酶链反应(PCR)扩增其功能区的外显子片段,双脱氧末段终止法测序.家系调查资料包括临床表现、体格检查、心脏超声和心电图.结果在该家系接受家系调查的10例对象中4例携带TNNT2 14035c＞t(R130C)突变,全部于40岁之前发病,外显率100%.正常对照组同一位置未见异常,该突变位点使TNNT2基因第10号外显子130位的精氨酸变为半胱氨酸,先证者及其两兄长皆以心功能不全表现为主,先证者的两位兄长在我们随访过程中发生猝死.MYH7及MYBPC3基因未发现突变.结论 TNNT2基因14035c＞t突变是该HCM家系的致病突变.其携带者的临床表型较恶.对于临床表型较恶,猝死发生率较高HCM家系有必要进行TNNT2的突变筛查。

目的 探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/Akt信号传导通路在溃疡性结肠炎(UC)发病中的作用并为沃特曼宁(wortmannin)作为UC治疗新药物提供实验依据.方法 收集UC患者30例,15例结肠癌旁正常组织作为对照,采用免疫组化法检测UC肠黏膜组织中磷酸化Akt(p-Akt)的表达情况;体外组织培养观察PI3K/Akt信号传导通路抑制剂wortmannin对UC肠黏膜活检组织肿瘤坏死因子(TNF)-α表达的影响.结果 ①UC肠黏膜组织中p-Akt的表达明显高于正常对照组(A值分别为73.6±5.2、18.0±2.6,阳染面积分别为720±58、133±29,均P＜0.05).②与未用wortmannin处理的UC对照组比较,wortmannin处理后UC肠黏膜组织分泌TNF-α的水平明显较低(分别为296±39、138±11、26±5,均P＜0.05).③用wortmannin处理后UC患者肠黏膜组织中p-Akt的表达低于未用wortmannin处理的UC对照组(A值分别为:72.3±6.2、35.3±5.6、18.0±2.2,阳染面积分别为716±94、351±50、129±30,均P＜0.05).结论 ①PI3K/Akt信号转导通路参与了促炎性细胞因子TNF-α的调控与释放,可能在UC的发生发展中起着重要作用.②PI3K的抑制剂wortmannin能阻断PI3K/Akt信号转导通路,进而减少细胞因子的释放.wortmannin有可能成为治疗UC的新药物。

目的 了解先天性小耳畸形患者的心理状况并探讨其相关的影响因素.方法 对410例先天性小耳畸形患者进行横断面调查.以Achenbach儿童行为量表(CBCL)和症状自评量表(SCL-90)为标准,筛选存在心理障碍的患者,并对相关因素进行单因素χ2检验及多因素的Logistic回归分析.结果 83例患者(20.2%)存在"抑郁"心理;150例(36.6%)患者存在"人际关系敏感或社交困难";108例患者(26.3%)存在"敌对或攻击性"心理.患者年龄的增长(OR=1.75)、畸形程度严重(OR=2.77)、母亲受教育程度低(OR=2.49)、受到过他人讥笑(OR=2.58)、家属心理压力过重(OR=1.96)、家属对患者的态度不正确(OR=2.45)及家庭长期不和睦(OR=2.57)与患者"抑郁"心理的形成有关;年龄增长(OR=1.62)、受到过他人讥笑(OR=3.34)及家属心理压力过重(OR=1.89)与其"人际关系敏感或社交困难"心理的形成有关;受到过他人的讥笑(OR=2.47)及家属心理压力过重(OR=1.80)与"敌对或攻击性"心理的形成有关.结论 应该有效地控制和避免与小耳畸形患者心理问题形成有关的危险因素,对患者进行早期教育.尽早成功地实施外耳再造手术对于防止其心理问题的产生是极为必要的。

目的 评估以胃内水球方法治疗肥胖症患者的疗效与安全性.方法 对48位中国香港特别行政区华裔[其中女35例,平均年龄(39±9)岁]自2004年11月开始接受并已完成胃内水球治疗的肥胖患者进行分析.患者的平均基础体重和体重指数分别为(106±26)kg和(40±9)kg/m2,其中34(70.8%)例患有肥胖相关性疾病.此研究的治疗方法是运用胃内水球系统(bioEntericsintragastric balloon,BIB(R))在静脉注射镇静药物下进行,并运用内镜进行水球的放置和取出操作.水球放置后患者需配合有限制性的平衡饮食(低于1200 kcal/d,1 cal=4.184 J)和适度的有氧运动(150 min/周).结果 患者住院和治疗时间中位数分别为1 d和174 d;胃内水球治疗后平均体重下降(13±7)kg;平均体重指数下降(5±3)kg/m2;平均超标体重下降(45±36)%;平均腰围减少(12±8)cm;以上所有指标均明显低于治疗前(均P＜0.01).32(66.7%)例患者对此种减肥方法的疗效感到满意;未发现与胃内水球相关的严重并发症发生.结论 胃内水球是一项安全的减肥装置,能让华裔肥胖症患者达至适量减重效果。

目的 观察胃食管反流病(GERD)各亚型在埃索美拉唑治疗前后食管黏膜上皮细胞间隙增宽(DIS)的变化.方法 19例以烧心为主诉、经内镜检查、24 h食管pH监测和质子泵抑制剂治疗试验证实为GERD的患者,接受埃索美拉唑40 mg/d治疗2个月.治疗前后内镜检查时在食管齿状线上3～5 cm处外观正常黏膜取活检,分别进行组织学及透射电镜检查.15例正常人食管黏膜活检电镜检查作为正常参数.结果 2个月治疗后,糜烂性食道炎(6例)、伴有病理性酸反流的NERD(7例)、不伴有病理性酸反流的NERD(6例)DIS恢复正常分别有5例(83.33%)、6例(85.71%)和5例(83.33%),均伴随烧心症状完全消失.DIS未恢复正常的3例患者中2例烧心症状仍然存在.结论 GERD患者经埃索美拉唑治疗2个月后DIS恢复正常伴随症状消失,各组间在DIS恢复上差异无统计学意义。

目的 探讨视黄酸受体α(RARA)基因D17S579微卫星位点等位基因多态性与中国湖南汉族人群非综合征性唇腭裂(NSCL/P)遗传易感性之间的关系.方法 采用PCR和聚丙烯酰胺变性凝胶技术,对132例健康者和140例NSCL/P患者进行研究,分析RARA基因D17S579微卫星位点多态性.结果 两组共检出10种等位基因,正常对照组与病例组等位基因频率比较,差异有统计学意义(χ2=17.163,df=9,P=0.046);病例组A6(8.93%)、A9(13.21%)等位基因频率明显高于健康对照组A6(4.17%)、A9(5.68%,均P＜0.05);有家族史的患者等位基因频率与无家族史患者等位基因频率差异无统计学意义(χ2=2.710,P=0.978).结论 RARA基因D17S579微卫星多态性与中国湖南地区NSCL/P患者存在遗传易感性,等位基因A6、A9可能为NSCL/P发生的危险因子;RARA基因多态性与NSCL/P家族史无相关性。

目的 旨在寻求一种能完全替代目前常规体外转录合成肿瘤相关抗原(TAA)mRNA的方法.方法 构建4个质粒包括pmRNA荧光素(Luc)、pmRNA IRES-Luc、pmRNA鸡卵清蛋白(OVA)和pmRNA IRES-OVA,用Luc报告系统检测不同形式的Luc mRNA转染小鼠树突状细胞(DC)后的蛋白表达水平;以OVA作为靶抗原,以小鼠黑色素瘤肺转移作为动物模型,通过体内细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤实验及荷瘤实验,比较Capped-OVA mRNA和IRES-OVA mRNA修饰DC所诱发的抗原特异性细胞免疫反应.结果 将IRES序列插入mRNA转录模板编码基因cDNA序列前,不影响体外转录合成相应mRNA的产量.不同形式Luc mRNA转染DC后8 h,IRES-Luc mRNA较Capped-Luc mRNA表达的酶活性高1倍,而较Uncapped-Luc mRNA高20倍;IRES-Luc mRNA和Capped-Luc mRNA转染DC 96 h后仍能检测到Luc活性.用Capped-OVA mRNA和IRES-OVA mRNA修饰DC免疫小鼠1周后行体内CTL杀伤实验,结果示Capped-OVA mRNA/DC免疫组4 h CTL杀伤率为(28±3)%,而IRES-OVA mRNA/DC免疫组4 h CTL杀伤率为(32±4)%.荷瘤实验显示,Capped-OVA mRNA/DC和IRES-OVA mRNA/DC免疫小鼠后均能保护小鼠肺部免受黑色素瘤转移结节形成.结论 含IRES序列的TAA mRNA可作为一种更经济、适用的方法,完全可以取代Cap化mRNA修饰DC,并能诱导与Cap化mRNA修饰DC同样有效的抗原特异性细胞免疫反应。

目的 利用RNA干扰(RNAi)技术,探讨核小体结合蛋白1(NSBP1)基因对人激素依赖前列腺癌细胞系LNCaP增殖的作用.方法 设计并合成针对NSBP1的4种小分子干扰RNA(siRNA)(包含1种阴性对照),构建能抑制NSBP1 mRNA表达的重组pSilencer 2.1-U6 neo质粒,转染LNCaP细胞.应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹实验检测不同质粒对NSBP1表达的抑制效率,选取抑制效率最高的质粒转染LNCaP细胞,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞增殖活性,用流式细胞光度术检测细胞周期的变化.结果 筛选出抑制效率最高的质粒pSilencer-81(mRNA水平抑制80%,蛋白水平抑制85%),与阴性对照pSilencer-Neg质粒分别转染LNCaP细胞.转染60 h后,经过84 h、108 h,一直到132 h,LNCaP/81细胞A值(代表细胞活性)低于LNCaP/Neg细胞A值,差异均有统计学意义(t=4.501,4.282,5.229,4.759,均P＜0.05).抑制率随时间延长而增加,在84 h有所降低,在108 h达最大值30.2%.转染60 h后,经过84 h,一直到108 h,LNCaP/81细胞的G2M+S期细胞百分率较LNCaP/Neg细胞的降低,差异均有统计学意义(t=3.705,3.887,8.220,均P＜0.05).结论 针对NSBP1的siRNA通过抑制前列腺癌LNCaP细胞中NSBP1基因的表达,能明显抑制细胞的增殖,NSBP1可能参与前列腺癌细胞生长增殖过程。

目的 观察肝动脉灌注碘油羟基磷灰石纳米粒(nHAP)对兔VX2肝肿瘤生长、坏死率、凋亡指数、微血管密度(MVD)及增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响,同时观察其对瘤兔生存期的影响.方法 80只新西兰白兔肝内肿瘤种植后2周,随机分为4组,每组20只,兔上腹正中开腹,胃十二指肠动脉插管固定,经肝动脉灌注给药,实验设生理盐水组(A组)、单纯碘油组(B组)、阿霉素碘油组(C组)及碘油nHAP组(D组).治疗后1周及2周,采用CT检测肿瘤大小,计算肿瘤的生长率.治疗后2周,病理观察肿瘤区的坏死率,DNA缺口末端标记(TUNEL)法检测肿瘤的凋亡指数,免疫组化方法测定肿瘤的MVD值.记录各组实验兔治疗后的存活期.结果 治疗后1、2周,碘油nHAP组肿瘤体积及生长率明显小于其他各组(均P＜0.05).治疗后2周,碘油nHAP组肿瘤坏死率和凋亡指数大于其他各组(均P＜0.05).单纯碘油组及阿霉素碘油组栓塞后,残余肿瘤区的MVD(条)升高,两者分别为34±7和35±8,高于阴性对照A组(23±6,P＜0.05);碘油nHAP组残余瘤区MVD(16±4)条低于其他组.栓塞组增殖指数低于阴性对照A组,碘油nHAP组增殖指数低于其他各组(均P＜0.05).4组瘤兔治疗后的生存天数(d)分别为38±6、46±8、50±8、55±9.碘油nHAP组治疗后的生存期长于其他组(均P＜0.05).结论 肝动脉灌注碘油nHAP可明显抑制肿瘤生长,延长瘤兔的生存期,其可能通过促进肿瘤细胞坏死、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖和抑制肿瘤血管生成发挥抗肿瘤效应。

目的 探索人骨髓来源多能成体祖细胞(ZHJ-MAPC)在与人肝细胞系L02在体外共培养条件下诱导分化为肝细胞的可行性.方法 (1)间接共培养:将ZHJ-MAPC和人肝细胞系L02仅培养液相通行间接共培养.分别于培养第1、3、5、7天应用免疫细胞化学法鉴定ZHJ-MAPC的白蛋白、甲胎蛋白(AFP)、细胞角蛋白-18(CK-18)、细胞角蛋白-19(CK-19)等肝细胞特征性表型的表达情况.(2)直接共培养:将荧光染料羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE,绿色)标记的ZHJ-MAPC与L02细胞(均为1×104 个/ml)按照各50%比例混合行直接共培养.5 d后采用荧光免疫细胞化学SABC-Cy3法(红色)双标后在激光共聚焦显微镜下分别观察ZHJ-MAPC表达白蛋白、AFP、CK-18的情况.结果 (1)间接共培养结果:AFP在ZHJ-MAPC间接共培养第1天即表现为强阳性,随后表达逐渐减弱;白蛋白在第5天达到高峰;CK-18在第5天开始出现阳性,第7天出现较强表达.CK-19在各时间点均为阴性.(2)直接共培养结果:共培养第5天在检测白蛋白和CK-18表达情况时呈黄色荧光的阳性细胞即向肝细胞分化的ZHJ-MAPC出现较多,而AFP阳性表达则较少.结论 人骨髓来源的ZHJ-MAPC与人肝细胞系L02行间接或直接共培养均能够诱导其向成熟肝样细胞定向分化。

目的 探讨生存素反义寡核苷酸(生存素-ASODN)对化疗药多西紫杉醇(泰索帝)诱导膀胱癌细胞系BIU87细胞凋亡的影响.方法 将已构建成功的生存素-ASODN真核表达载体pcDNA3-SVVas通过脂质体介导转染膀胱癌细胞系BIU87,并筛选转染成功的阳性克隆;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测其生存素mRNA表达;锥虫蓝拒染法观察生存素-ASODN与泰索帝联合应用对BIU87细胞生存的影响;细胞计数和四甲基偶氮唑盐(MTT)试验测定转染细胞对泰索帝敏感性;琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡DNA断裂情况;核染色检测凋亡细胞的细胞核的变化;流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 转染生存素-ASODN真核表达载体pcDNA3-SVVas的BIU87-SVVas细胞生存素mRNA表达水平下降、细胞增殖明显受抑,与转染pcDNA3空载体BIU87-neo细胞、未转染载体的BIU87细胞进行比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05);经琼脂糖凝胶电泳,BIU87-SVVas细胞可见到DNA梯形条带,而其他对照组未见到;与BIU87-neo、BIU87细胞相比,BIU87-SVVas细胞的细胞核呈致密浓染;加入泰索帝的BIU87-SVVas细胞组的凋亡率大幅度增加.结论 生存素-ASODN可促进泰索帝诱导BIU87细胞凋亡及增加其对泰索帝的敏感性,为膀胱癌的生物学治疗研究奠定了实验基础。

目的 探讨汉防己甲素对先天性膈疝动物模型肺发育及肺动脉高压的影响及意义.方法 25只成年雌性SD大鼠随机分为5组,每组5只.定时配种成功后,于配种后第9.5天,正常对照组孕鼠每只给予食用油灌胃,膈疝组每只给予Nitrofen灌胃.配种后第18.5天,正常对照组每只腹腔内注射生理盐水;各膈疝组分别给予相应的干预措施;配种后第2l天对所有孕鼠行剖宫产,取出胎鼠肺组织,将肺组织进行内皮素免疫组化染色和图像分析.结果 正常对照组4只雌鼠共产仔38只,均无膈疝形成.膈疝组雌鼠19只共产仔126只,有膈疝形成者57只,致畸率45.2%.图像分析及数据统计结果显示各膈疝组之间内皮素在肺小动脉、细支气管中的表达强度差异有统计学意义.而且肺小动脉和细支气管之间内皮素表达强度以及肺小动脉相对血管壁厚度、相对血管壁面积和肺小动脉相对积分光密度之间存在正相关(r=0.847、0.851、0.844,均P＜0.01).结论 汉防己甲素能明显改善先天性膈疝大鼠模型的肺组织发育不良、减轻肺动脉高压,同时能降低内皮素在肺内的表达强度.汉防己甲素可能是通过抑制肺组织内皮素的合成与释放,抑制内皮素与相应受体结合而发挥其作用的。

病历摘要 　　患者女,29岁.阵发性头痛、心慌、多汗1年,加重2个月.1年前患者活动后出现头痛,心慌、多汗,每次发作持续20 min,自行缓解,4次/周,期间发现血压160/100 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),未予重视.2个月前,发作频繁,每天1次,测血压最高达210/160 mm Hg,伴有胸腹颈压迫感和濒死感,持续20 min自行缓解,血压降至120/80 mm Hg.B超发现:左肾上腺增大,边界欠清.发病来无夜尿增多、双下肢无力、软瘫、抽搐等症状.无肾脏病史,无高血压家族史.体格检查:体温36.6℃,心率80次/min,呼吸20次/min,血压右上肢170/140 mmHg,左上肢160/90 mm Hg,双下肢150/100 mm Hg。

组织工程学(tissue engineering)是一门将细胞生物学和材料学相结合,在体内和体外进行组织或器官构建的新兴学科,其基本方法是将一定数量的具有特定功能的种子细胞与可降解的多孔生物支架材料复合,经过一段时间体外培养后植入体内.支架材料在体内逐渐降解吸收,种子细胞则不断分裂增殖,合成并分泌细胞外基质,最终支架完全降解,形成具有正常结构与功能的新生组织或器官。

蛛网膜下腔出血(SAH)是一种常见类型的卒中,多见于相对中青年人群,预后一般较差.迟发性缺血性神经功能缺损(DIND)常出现于出血后4～10 d,是导致SAH患者死亡和致残的主要原因之一.虽然目前临床上使用尼莫地平防止SAH后血管痉挛以减轻DIND,但总的来说,疗效有限.最近有作者通过病理解剖学资料发现DIND与微栓子负荷有着明显的关联.有文献报道血小板活化与SAH诱导的血管痉挛和DIND相关,SAH患者第3天血小板聚集增加,血栓烷素B2释放增加以及血栓烷素A2代谢增加。

心肌病是以心肌病变为表现的一组疾病.公众及医务工作者对于该病的认识长期以来一直为其定义及分型所困扰.该病的分型(既往已有许多)对于进一步理解该病是十分重要的;而且对该病应用精确的语言加以描述也是非常必要的。

患者男,59岁,左眼突然视物不见1个月.眼部检查:左眼视力:光感,光定位不准;非接触眼压计测得眼压:2.394 kPa,左眼结膜混合性充血,角膜轻度水肿混浊,色素性及灰白色尘状KP(+),房水闪辉,虹膜表面散在积血及灰白色脓样物质,下方较多,上方虹膜2～3个灰白色小结节,呈干酪样,下方虹膜弥漫隆起,瞳孔区灰白色脓样物质,晶体全白色混浊.眼底窥不入.右眼视力1.0,眼前后段检查均未见异常.全身体检无异常,全身浅表淋巴结无肿大.