2005年 · 第85卷第34期

1990年,美国人类基因治疗小组委员会(HGTS)批准了世界上第一个具有治疗作用的基因治疗方案(ADA-SCID),并在临床上获得初步成功,从此揭开了基因治疗人类疾病的新篇章.其后,虽几经曲折,但科学界对基因治疗的兴趣却丝毫未减,现在基因治疗已从单基因遗传病扩展到包括恶性肿瘤在内的多个病种范围。

目的 探讨腓骨肌萎缩症(CMT)患者的病理学特点及其与基因突变的关系.方法对26例患者的临床表现和病理特点以及13例基因突变分析结果进行回顾性分析.结果 5例周围髓鞘蛋白22基因重复突变患者中出现髓鞘脱失、增厚各4例,2例出现"洋葱球"样改变,无轴索变性;4例连接蛋白32基因突变患者出现髓鞘脱失3例,髓鞘增厚1例,无轴索变性;热休克蛋白22和热休克蛋白27基因突变各1例,均表现为轴索萎缩、缺失和再生.结论本组基因突变患者的病理活检结果与国外报道的腓骨肌萎缩症的病理特点不完全相同;基因突变分析结果与病理表现一致,准确性高、损伤小,可早期诊断,值得广泛应用于临床,特别是有家族史的患者或高危亲属。

目的 观察不同直径的骨移植物修复骨缺损过程中,供体骨内细胞转归的情况.方法近交系DA大鼠174只,其中雄性大鼠58只,作为供体;雌性大鼠116只,作为受体.将受体随机分为块状骨组、颗粒骨组和空白对照组,建立大鼠桡骨骨缺损模型,取雄性大鼠髂骨为供体骨,分别制成直径为2 mm的骨块和直径为0.3～0.5 mm的颗粒骨,植入骨缺损,分别于术后1、4 d和1、2、4、6、10周取材,采用聚合酶链反应技术观察受体骨组织中Y染色体性别决定基因(Sry)的表达情况并观察各组的组织学改变. 结果块状骨组在移植早期Sry的表达逐渐减少,至1周消失,4周后再次出现,并且随时间延长表达逐渐增多;颗粒骨组Sry的表达随时间延长逐渐减少,但各时间段均有Sry的表达.在同一时间点,颗粒骨较块状骨有更多的骨细胞存活,其成骨效果优于块状骨. 结论不同直径的骨移植物修复骨缺损时均有供体骨细胞参与,但颗粒骨内有更多的骨细胞存活,这些骨细胞参与骨缺损修复的各个阶段,并能加速骨缺损的修复,为临床上修复骨缺损和脊柱融合提供了新的有效的方法。

目的 观察脊柱侧凸患者关节突中Ⅰ、Ⅱ型胶原和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的特点.方法收集9例特发性脊柱侧凸(IS)患者和10例先天性脊柱侧凸(CS)患者的顶椎、上下端椎凸凹侧下关节突,采用苏木素-伊红(HE)染色方法和免疫组化方法染色,免疫组化染色结果采用图像分析系统处理.结果 IS、CS顶椎凹侧关节突中Ⅰ型胶原的表达均高于凸侧,分别为193±64对151±45和199±86对179±78(P<0.05),顶椎高于端椎,IS下端椎凹侧高于凸侧,而CS顶椎凸侧高于IS.CS下端椎凹侧的Ⅱ型胶原表达高于凸侧,IS和CS顶椎高于端椎.IS及CS顶椎凹侧TGF-β1的表达高于凸侧,分别为145±43对112±50和120±61对89±32(P<0.05),IS下端椎凹侧高于凸侧;IS顶椎、上端椎、下端椎三组凹侧中顶椎最高,IS顶椎凸侧高于上端椎,CS顶椎凹侧高于端椎;IS顶椎高于CS. 结论脊柱侧凸患者顶椎关节突关节软骨呈现退变征象,Ⅰ、Ⅱ型胶原和TGF-β1在IS、CS凹侧关节突中的表达增高和顶椎的表达增高,异常压应力可能起着非常重要的作用。

目的 探讨脑室内注入EphB2-Fc融合蛋白对大脑皮层梗死后内源性神经干细胞活化的影响.方法采用易卒中型肾血管性高血压大鼠,建立大脑中动脉闭塞模型(MCAO),并将其随机分成:(1)假手术组,(2)脑梗死组,(3)梗死+IgG-Fc 组,(4)梗死+EphB2-Fc 组,每组24 只.MCAO 术后第4 天, EphB2-Fc 组大鼠经侧脑室注入20 μl浓度为200 μg/ ml的EphB2-Fc 融合蛋白,IgG-Fc 组大鼠注入等量等浓度的IgG-Fc.MCAO 术后第1 和第4 周,将各组大鼠处死取脑,用免疫组化和原位杂交检测各组大鼠不同时点梗死侧EphB2 及其mRNA、巢蛋白(nestin) 和多聚唾液酸-神经细胞黏附分子(PSA-NCAM) 表达,Western蛋白印迹检测各组大鼠不同时点梗死侧EphB2 和nestin 蛋白量的变化.结果 MCAO 术后1 周,脑梗死组梗死侧大脑皮层和侧脑室下区EphB2 及其mRNA 的表达低于假手术组,梗死+EphB2-Fc 组高于梗死+IgG-Fc 组(均P<0.05),脑梗死组与梗死+IgG-Fc 组间差异无统计学意义(P>0.05);脑梗死组梗死侧侧脑室下区nestin、PSA-NCAM的表达高于假手术组, 梗死+EphB2-Fc 组高于梗死+IgG-Fc 组(均P<0.05),并可见PSA-NCAM阳性细胞沿胼胝体向梗死灶迁移.MCAO 术后4 周,各组间梗死侧EphB2 及其mRNA 表达水平差异无统计学意义(均P>0.05),各组脑梗死大鼠梗死侧nestin、PSA-NCAM表达水平下降,各组间nestin表达水平差异无统计学意义,但脑梗死组PSA-NCAM表达水平仍高于假手术组.结论阻断内源性EphB2 的活化可促进实验性大脑皮层梗死后脑室下区神经干细胞的增殖和迁移。

目的 探讨帕金森病小鼠模型中不同剂量左旋多巴对百草枯毒性作用的影响及相关机制.方法选用不同剂量左旋多巴分别在注射百草枯一定时间的C57BL小鼠(72只)腹腔内注射,利用免疫组化、Western 印迹法等观察黑质部位百草枯沉积和多巴胺能神经元变性以及α-突触核蛋白(α-Syn )聚集,并检测纤维状α-Syn经左旋多巴孵育后其聚集的改变情况. 结果在注射百草枯之前腹腔注射小剂量左旋多巴抑制百草枯诱导的黑质部位多巴胺能神经元变性,α-Syn聚集减少;大剂量左旋多巴则促进黑质部位多巴胺能神经元变性.左旋多巴可以解聚已经形成的纤维状α-Syn.结论小剂量左旋多巴竞争性抑制百草枯通过血脑屏障进入中枢神经系统,起到了神经保护作用;大剂量左旋多巴则使已经形成的纤维状α-Syn解聚,出现明显的毒性作用。

目的 探讨血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)基因启动子区单核苷酸缺失/插入(4G/5G)多态性与脓毒症易感性和转归的相关性.方法采用聚合酶链反应、限制性内切酶分析、16%聚丙烯酰胺凝胶电泳结合溴化乙锭染色法,测定89例术后并发严重脓毒症的患者(脓毒症组)和100例术后未并发脓毒症的患者(对照组)PAI-1基因启动子区4G/5G多态性的基因型. 结果脓毒症组患者急性生理与慢性健康状况评分Ⅱ评分为22.5±2.1,死亡率为51%;脓毒症组患者PAI-1 4G/4G基因型携带频率为0.44,4G等位基因携带频率为0.65;对照组分别为0.25和0.50;两组比较差异有统计学意义.脓毒症组中,死亡患者4G/4G基因型携带频率为0.54,存活者为0.34;两者比较差异有统计学意义.结论 PAI-1基因启动子区4G/5G多态性与脓毒症的易感性和转归相关, 4G纯合子、4G等位基因是脓毒症易感的预警指标,4G纯合子为脓毒症死亡的高危遗传标志。

目的 探讨云南白族、纳西族与汉族幽门螺杆菌(H.pylori)菌株含有vacA基因m混合亚型及iceA基因混合型的感染情况及其致病性.方法选取H.pylori相关慢性胃炎和消化性溃疡患者的胃黏膜,分离培养H.pylori菌株;用PCR方法检测云南白族、纳西族与汉族菌株的vacA基因亚型及iceA基因.结果云南109例H.pylori菌株的混合感染率为32.1%.iceA混合基因亚型的检出率明显高于vacA基因m混合亚型检出率(均P<0.05).其中白族混合感染率(67.7%)高于纳西族(20.0%)和汉族(12.1%)(均P<0.001);白族中iceA1+iceA2的混合感染率(61.3%)明显高于纳西族(17.8%)和汉族(9.1%)(均P<0.001).云南菌株34例H.pylori混合感染患者中含vacA基因m混合亚型+iceA混合基因型的混合感染与消化性溃疡有关;只含iceA混合基因亚型的混合感染与慢性胃炎有关.结论不同国家和地区的混合感染率差别很大,云南白族、纳西族与汉族H.pylori菌株含有vacA基因m混合亚型及iceA混合基因型者的混合感染具有多态性.汉族以vacA基因混合亚型来判断混合感染较敏感,白族、纳西族患者中以iceA基因混合亚型判断混合感染较敏感.云南H.pylori菌株含iceA基因亚型和含vacA基因m混合亚型以及白族菌株的vacA基因m区亚型的混合感染与H.pylor致病性有关;以iceA基因混合亚型判断混合感染较敏感。

目的 探讨子宫内膜癌患者辅助内分泌治疗的有效性和安全性,以及孕激素受体情况对内分泌治疗效果的影响.方法选取171例子宫内膜癌患者,患者均根据个体情况决定采取手术、放疗和化疗等综合治疗措施,将患者分为内分泌治疗组(82例)和对照组(89例),内分泌治疗组根据用药时间分为小于1年亚组(27例)和1年以上亚组(55例),对患者进行回顾性研究. 结果内分泌治疗组和对照组复发/转移患者分别为13.4%和23.6%,因癌死亡分别为12.2%和20.2%,差异均无统计学意义(P﹥0.05);小于1年亚组和1年以上亚组复发/转移患者分别为25.9%和7.3%,因癌死亡患者分别为22.2%和7.3%,1年以上亚组的患者复发/转移及因癌死亡比例明显低于对照组(P=0.012,P=0.036).多因素分析得出,肿瘤分期、手术范围以及肿瘤细胞分化程度、内分泌治疗时间对患者复发/转移有显著影响(OR=5.199,OR=0.507,OR=1.796,OR=0.538),对患者因癌死亡情况也有影响(OR=5.488,OR=0.482,OR=1.516,OR=0.547).内分泌治疗组中PR阳性及PR阴性的患者复发/转移分别为4.7%和26.7%,差异有统计学意义(P=0.034). 结论子宫内膜癌患者应用内分泌治疗作为综合治疗中的一种辅助手段,持续应用1年以上可以改善患者预后,尤其是对于孕激素受体阳性的患者。

目的 探讨水通道蛋白2(aquaporin 2,AQP2)在人不同时期子宫内膜中的表达特点及其意义.方法采用免疫组织化学技术、Western印迹方法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对87例(其中增生期23例,分泌早期30例,分泌中期34例)来自生育年龄妇女不同月经周期的子宫内膜行AQP2的检测.结果 AQP2阳性着色主要分布于人子宫内膜腔上皮和腺上皮细胞的胞膜和胞质;Western印迹证实了AQP2在人子宫内膜中的表达,半定量分析发现增生期内膜AQP2的相对表达量为1.03±0.10,显著低于分泌早期(1.33±0.14,P<0.05)和分泌中期(1.63±0.15,P<0.01);分泌早期和中期相比,差异有统计学意义(P<0.05).结论 AQP2在人子宫内膜中表达,且其表达量随月经周期而变化,表明其可能在性激素作用下的子宫内液体平衡过程中起一定作用。

目的 探讨膝关节骨性关节炎(OA)伴发半月板损伤的发生率及其在诊断治疗中的意义. 方法对因第一诊断为膝关节OA而行关节镜下关节清理术共120例125个膝关节,分析半月板损伤的发生率、损伤类型及其与OA严重程度的相关性,并对选择性关节腔清理结合半月板修切术的疗效进行评价. 结果症状以膝关节疼痛为主,无游离体而有绞锁现象者32膝(25.6%),术前诊断OA合并半月板损伤22膝(17.6%),LYSHOLM评分平均52分.术中发现内侧半月板损伤41膝(32.8%),外侧半月板损伤21膝(16.8%),其中内外侧均损伤7膝(5.6%).镜下损伤类型主要为磨损(29.0%)、边缘毛刷样破损(12.9%)、各种破裂(51.6%)以及桶柄样撕裂(1.61%),损伤程度与关节软骨破坏程度明显呈正相关,手术前后诊断符合率为40.0%(22/55). 术后3、6、12个月复诊,总体满意率分别为89.6%(107/120)、86.4%(104/120)、83.2%(100/120),有半月板损伤者满意率分别为94.5%(59/62)、91.0%(56/62)、87.3%(54/62),平均LYSHOLM评分分别为77、74、71分和85、82、79分.结论膝关节OA往往伴有半月板损伤,两者可有相互加重的作用.部分OA患者保守治疗难以缓解膝关节症状或延缓OA的病程,关节镜下清理术有一定的诊断和治疗价值。

随着社会的进步,卫生体制改革的推行和我国加入世界贸易组织(WTO)步伐的加快,医疗市场面临激烈竞争与挑战.如何辩证地看待新时期给药学工作带来的机遇与挑战格外重要,以患者为中心和以人为本,无疑成为新形势下的管理要素。

病历摘要 　　患者女性,25岁,江苏太仓人,因"发热7 d,气促、胸闷5 d"于2004年3月12日入院.患者于入院前7 d凌晨2点顺产1孕37周女婴,下午16时出现发热,体温38℃,轻咳,少许白色泡沫痰,偶有鲜红色血丝,无其他伴随症状.没有恶露.在当地医院应用头孢曲松、利巴韦林、氨基比林治疗无好转.2 d后发热达40℃,伴畏寒、寒战,并出现胸闷、气促。

关联分析方法被越来越多的用于疾病相关基因的定位,它的关键是选择合适的正常对照群体,因为存在病例组与对照组两群体间的差异会导致假阳性结果.近来,人们通过分析一些与疾病不相关的遗传标记在两组人群间的分布是否存在显著差异来判定样本间的层化程度,以鉴定疾病关联结果的真实性.祖先信息标记(ancestry informative markers, AIMs),也称人群特异标记,是在不同人群中等位基因存在较大差异的遗传位点 [1].国外一些小组筛选了许多这样的标记,但大多反映了非裔、欧裔和土著美裔人群之间的差异[1,2].我们根据文献选取了5个AIMs,分析它们在家族性热性惊厥组(FC)和正常对照组两组人群之间的分布, 探讨两组人群的匹配性,并与AIMs在其他人群中的分布作比较,了解这些标记是否可以反映中国人群构成的特异性。

中风是冠状动脉搭桥术(CABG)后最重要的并发症之一,对患者的预后影响极大.有人曾归纳出33种对CABG后中风有影响的危险因素.颈动脉高度狭窄是其中重要的危险因素之一.为预防这种致命的并发症,充分了解颈动脉狭窄(CAS)和CABG后中风的相关性十分重要。

患者男,49岁,因"左下腹痛半年,便血3个月",于2004年10月10日肠镜检查,诊断为"乙状结肠癌",B超及CT未发现其他部位有转移,癌胚抗原(CEA)59 ng/ml(正常值 0.0～5.0 ng/ml), CA199 199 U/ml (正常值 0～27 U/ml).于2004年10月20日在复旦大学中山医院外科行根治性左半结肠切除术.术后病理为:乙状结肠隆起型管状腺癌Ⅱ级,部分见印戒细胞,肿块4 cm×5 cm,侵及全层及周围脂肪组织,两切缘未及癌累及,找到肠系膜淋巴结14枚,肠旁淋巴结18枚,均未见癌转移.手术后,患者恢复良好.当医生和患者谈起术后进行化疗时,患者产生了很多疑问。

4例患者均为男性,年龄32～50岁,平均44.2岁,均有误食鱼刺或鸡骨史,发病至就诊时间为20～78 h,平均49 h,均伴有胸闷、气短、发热症状.并发左侧液气胸2例,右侧液气胸2例.1例行左胸腔闭式引流术,术后引流出食管残渍,口服美蓝自引流管引出.4例胃镜检查均发现食管破裂口,裂口长1.0～1.8 cm,平均1.3 cm。

肝癌射频凝固治疗后的局部复发率据报道为2%～60%不等.大多数作者认为肿瘤体积是局部复发的重要危险因素,但由于多数报道的例数有限、且随访时间短,无法对影响复发的其他危险因素,如肿瘤病理、肿瘤位置和治疗入路,作出有意义的多因素分析。

2005全国髋关节及周围神经外科学术研讨会暨第三届股骨头缺血性坏死修复与再造学习班于2005年7月22～25日在大连召开.卢世壁、王国照、俞明哲等国内外著名专家学者应邀出席会议并做专题讲座。

1999年7月至今,本院应用胸骨正中小切口(ministernotomy,MIST)行小切口冠状动脉搭桥术(minimally invasive direct CABG, MIDCAB)82例,现介绍经验如下。

肿瘤细胞和内皮细胞向细胞外基质和基底膜迁移的过程需要一系列蛋白水解酶的参与[1].尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)作为丝氨酸蛋白酶,与其受体结合后可降解基底膜和细胞外基质成分,从而促进肿瘤的浸润转移及血管新生[2].本研究应用原位杂交和免疫组化方法,观察uPA、尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)在胃癌组织中的表达,探讨它们与胃癌血管生成、浸润转移及预后的关系。