2005年 · 第85卷第24期

我国的肝移植经过几年的探索和奋进,目前已经进入飞速发展的阶段.全国每年的肝移植例数已超过1000例,一些单位还成立了专门的肝移植小组和肝移植病区,肝移植也更加专业化、规模化.许多肝移植中心手术成功率超过了90%,五年生存率大于70%,移植效果已与国际先进水平接近。

原发性肝癌是居中国第二位的恶性肿瘤,全世界每年新发肝癌的一半以上在我国[1].据不完全统计,截至2005 年1月,全国累计施行肝移植手术已超过5000例,其中肝癌肝移植约占40%左右.随着肝移植数量的增加及经验的积累,国内许多肝移植中心已从既往的一味追求肝移植的"数量"向"数量和质量"并举的方向转变,而肝癌肝移植的适应证问题也逐渐成为争论的焦点。

肝移植在我国的开展已经呈现出蓬勃发展的趋势.在几个大的移植中心,肝移植围手术期病死率已降至6%以下,受体术后1年生存率已超过90%,显示出很好的疗效,因此,许多医院也积极加入开展肝移植的行列中来。

目的 探讨小鼠睾丸巨细胞病毒(MCMV)感染对附睾尾部精子顶体反应与膜功能的影响.方法随机选择无MCMV感染史的BALB/c雄性小鼠48只作为实验组,睾丸直接接种MCMV,分别于感染后第1、2、4、6、9、14天处死小鼠,用地高辛标记的MCMV M83 mRNA寡核苷酸探针对睾丸组织进行原位杂交,检测睾丸MCMV感染情况,同时取附睾尾部成熟精子进行精子顶体反应与精子膜低渗肿胀功能检测.另设平行对照组雄性小鼠30只(同法随机选择),睾丸接种不含MCMV的细胞培养液,其他处理方法同实验组.结果实验组48只雄性小鼠睾丸组织间质及(或)生精细胞中均出现原位杂交阳性信号.实验组精子顶体反应与膜功能在接种病毒后的第2天、第4天,精子顶体反应率(58%±9%、56%±9%)低于平行对照组(71%±6%、70%±7%)(P均<0.05),精子膜尾部低渗肿胀率(48%±9%、38%±8%)低于平行对照组(60%±7%、50%±4%)(P均<0.05).结论小鼠睾丸MCMV感染模型成功建立.小鼠睾丸MCMV急性感染可导致精子顶体反应与膜功能的显著下降。

目的 比较异氟醚和异丙酚后处理对内毒素血症大鼠肺泡毛细血管屏障功能的影响.方法健康雄性SD大鼠共96只,体重250～350 g.静脉注射内毒素(LPS,4 mg/kg)或等量生理盐水(NS)后2 h,分别给予戊巴比妥钠(C,20 mg·kg-1·h-1),异氟醚(I,0.55%)或异丙酚(P,10 mg/kg静脉注射,40 mg·kg-1·h-1维持),分为NS-C、NS-I、NS-P、LPS-C、LPS-I、LPS-P共6组,每组16只.机械通气2 h,每小时记录血压、血气分析,实验结束后每组8只大鼠行肺泡灌洗测定肺通透指数,测量肺组织湿干比,观察肺组织病理和电镜改变;另8只大鼠按同样方法实验,到观察时点前30 min,静脉注射伊文思蓝(30 mg/kg),实验结束后测定肺组织伊文思蓝含量.结果 NS各组和LPS各组在各时点的平均动脉压、血气分析各指标差异均无统计学意义;各组肺组织湿干比亦未见差异;肺通透指数和肺组织伊文思蓝含量在LPS-C组(8.1×10-3±2.4×10-3,吸光度0.628±0.082)比NS-C组(3.3×10-3±2.2×10-3,吸光度0.479±0.154)高(P<0.05),LPS-P组(9.1×10-3±2.2×10-3,吸光度0.664±0.028)比LPS-I组(5.5×10-3±2.0×10-3,吸光度0.517±0.048)高(P<0.05).肺组织光镜观察显示LPS各组比NS各组的肺部炎性损伤严重,尤其在LPS-P组损伤最为严重.电镜结果提示LPS-P组肺毛细血管内皮细胞间的紧密连接已裂开.结论与异丙酚相比,异氟醚保护了内毒素血症大鼠的肺泡毛细血管屏障功能,降低了肺组织通透性。

目的 从人胎盘中分离间充质干细胞(MSC),研究胎盘MSC在脐血移植中的免疫调节作用. 方法分离人胎盘组织灌流液中单个核细胞(MNC)贴壁培养、集落筛选,鉴定表面标志及纯度,向脂肪、成骨诱导鉴定多向分化潜能.应用3H-TdR掺入法,观察胎盘MSC对成人外周血淋巴细胞及脐血淋巴细胞的免疫抑制作用.将不同数量胎盘MSC分别与成人外周血和脐血淋巴细胞共培养,加入植物血凝素(PHA)刺激淋巴细胞增殖,观察胎盘MSC对淋巴细胞转化的影响. 结果从人胎盘组织中分离获得的贴壁细胞,具有同骨髓MSC相同的细胞表型及多向分化能力,可以显著抑制成人外周血和脐血淋巴细胞转化,抑制作用与MSC的数量呈正相关.与无MSC作用相比,当MSC为2×105/孔时对成人外周血和脐血淋巴细胞转化的抑制率分别为79.97%和64.06%,而当MSC为1.25×104/孔时抑制率则分别为46.83%和12.19%. 结论从人胎盘中可以成功地分离出MSC,利用其对脐血淋巴细胞的免疫调节作用,除了可以作为与脐血造血干/祖细胞相适应的培养基质,还有望降低脐血移植中困扰已久的移植物抗宿主疾病(GVHD)问题,促进脐血移植的广泛应用。

目的 探讨莪术提取物-榄香烯诱导大鼠胶质瘤C6细胞系凋亡机制及其对Bcl-2家族基因及蛋白质表达的影响.方法应用RT-PCR、Western blot方法检测榄香烯在0、20、40、60、80 μg/ml浓度及作用时间为12、24、36、48、72 h时处理的大鼠胶质瘤C6细胞系,利用流式细胞仪观察细胞的凋亡、细胞增殖的变化和Bcl-2家族基因及蛋白质表达的变化.结果经榄香烯20、40、60、80 μg/ml处理大鼠胶质瘤C6细胞48 h后,单视野细胞计数分别为(536±9)个、(375±10)个、(246±9)个、(112±10)个,与浓度为0 μg/ml时单视野细胞计数(625±12)个相比体外增殖抑制效应比差异有统计学意义(F＝1292.416,P<0.05).经不同浓度榄香烯处理后C6细胞凋亡率分别增加到(27±2)%、(29±4)%、(32±3)%、(35±5)% ,同时有亚二倍体凋亡峰,即Ap峰出现.榄香烯可明显下调Bcl-2/Bcl-x/l基因及蛋白质表达,且该作用呈浓度、时间依赖性, 而对Bax基因及蛋白质无明显影响. 结论下调Bcl-2/Bcl-x/l基因及蛋白质表达可能是榄香烯诱导凋亡、抑制C6细胞增殖的主要机制。

目的 在体外共培养体系中研究乳腺癌细胞对正常内皮细胞的作用.方法建立乳腺癌细胞株MCF-7与正常内皮细胞的体外共培养体系条件培养液Z-MCF-7-EC;以同期单独培养的正常内皮细胞为对照,对与乳腺癌细胞株MCF-7在Z-MCF-7-EC条件下共培养后的内皮细胞进行透射电镜细胞超微结构、光镜细胞形态学观察,并以看家基因β2m为内参照进行ESM、IGFBP-3、αvβ3、VE-C、及Tie-2-2基因半定量RT-PCR表达分析,以缩时录像技术进行血管新生观察.结果与同期单独培养的正常内皮细胞对照相比,经共培养后的内皮细胞形态不规则、呈游走状;超微结构出现胞核增大、核仁增大、核浆比例增大,内质网疏松、变形,细胞表面窗孔加深,细胞间隙加大和细胞表面纤毛减少;半定量RT-PCR值均较对照上调,其半定量值与对照组比较:ESM/β2m (0.60±0.28,P<0.01)、IGFBP-3/β2m (0.54±0.30,P<0.05)、αvβ3/β2m (0.58±0.23,P<0.01)、VE-C/β2m (0.51±0.17,P<0.01)及Tie-2-2/β2m (0.55±0.21,P<0.05).结论共培养后的内皮细胞有明显的趋瘤特征和血管新生能力,推测活体内乳腺癌生长中通过对相邻内皮细胞的作用促进血管新生且新生血管的内皮细胞性质与行为不同于正常内皮细胞。

目的 评价数字化乳腺X线摄影的计算机辅助诊断(CAD)系统的临床应用价值.方法随机抽取120例乳腺癌患者数字化乳腺X线平片,比较放射科医师应用CAD前后诊断乳腺癌敏感度的差异.详细记录患者乳腺密度、肿块直径、钙化直径、是否为毛刺样肿块、病理类型等特点,探讨其对CAD辅助放射科医师诊断乳腺癌敏感度的影响.结果放射科医师应用CAD前后诊断乳腺癌的敏感度分别为74.2%和89.2%(χ2＝37.628,P=0.000).乳腺密度(χ2＝7.352,P＝0.007)、钙化直径(χ2＝10.549,P＝0.014)和病理类型(χ2＝13.751,P＝0.003)对CAD提高放射科医师诊断敏感度的影响具有重要意义.CAD可以显著降低致密型乳腺内病变、直径小的钙化灶、导管内癌及浸润性导管癌的漏诊率;但对其余各种病变的辅助诊断价值有限.放射科医师漏诊的原因主要有:大量阅片过程中,视觉疲劳、注意力降低而忽略了一些微小的病灶(Ⅰ型漏诊);无典型的恶性肿块或钙化(Ⅱ型漏诊).应用CAD可以有效地避免Ⅰ型漏诊,但对Ⅱ型漏诊的帮助意义较小.结论基于数字化乳腺X摄影的CAD系统对提高放射科医师诊断乳腺癌的敏感度有较大帮助,但它仅能作为放射科医生的诊断助手,而不能对乳腺疾病的良恶性作出判断。

目的 探讨术中实时超声在脑动静脉畸形(AVM)外科治疗中的应用价值.方法13例脑AVM(幕上12例,幕下1例)接受显微外科治疗,病变切除前进行多模式的术中超声扫描用以:(1)定位和描述AVM边界;(2)辨别栓塞与灌注区;(3)识别供血动脉和引流静脉.病变切除后重复超声检查以发现AVM的残留并与术中和/或术后血管造影结果对比.结果 13例病变均在实时超声导航下获得全切除.畸形血管团由于具有双色血流特征均可被准确定位和界定范围,栓塞区为高回声无血流信号,供血及引流血管的形态和血流动力学有别于正常血管;术中超声影像上病变的全切除为血管造影所证实.结论术中实时超声能够对脑AVM进行准确定位和导航,为手术提供有价值的信息;并可判定脑AVM的全切除。

目的 探讨夏秋季花粉症患者中变应性鼻炎和变应性哮喘的关系.方法对2001年8月至2003年12月确诊为夏秋季花粉症的1120 例患者进行吸入变应原皮内试验和血清特异性IgE检测(法玛西亚公司 UinCAP100荧光酶联免疫法),同时对变应性鼻炎和变应性哮喘患者的发病年龄、发病时间、临床症状特点及哮喘的严重程度进行标准临床问卷调查和研究.结果夏秋季花粉诱发的变应性鼻炎的平均发病年龄27.9岁,变应性哮喘的平均发病年龄32.6 岁,两者差异有统计学意义 (P<0.001); 在全部夏秋花粉症患者中,变应性鼻炎占97.9 % (1096/1120),单纯变应性鼻炎占45.6% (511/1120);变应性哮喘占53.8 % (602/1120),单纯变应性哮喘占0.9% (10/1120).在变应性鼻炎患者中53.4 % (585/1096)合并季节性变应性哮喘;在季节性变应性哮喘患者中97.2% (585/602)合并变应性鼻炎,30.8%(183/602)需要急诊治疗.结论变应性鼻炎合并哮喘的状况在夏秋季花粉症患者中不容忽视,夏秋季花粉是中国北方地区夏秋季哮喘的重要原因。

目的 探讨HLA-DRB1结合性流感病毒血凝素 (HA) 308-317变构肽对类风湿关节炎 (RA) 患者外周血T细胞激活的影响.方法选取27例HLA-DRB1阳性的RA患者,密度梯度离心法分离外周血单个核细胞.采用固相法合成HA308-317变构肽,并检测RA 患者外周血T细胞对这些多肽的反应性;及多肽对白细胞介素(IL)-2、γ干扰素分泌及CD69表达的影响.同时进一步观察HA308-317变构肽对CII263-272或HA308-317多肽介导的T细胞激活的抑制作用.结果变构肽刺激T细胞增殖的阳性率分别为7.4%(APL1)、3.7%(APL2)和3.7%(APL3),明显低于CII263-272和HA308-317原型肰(62.2%和52.9%),3条变构肽的刺激指数也明显低于原型肽(均P<0.01).并且,其诱导IL-2、γ干扰素分泌的水平及CD69的表达亦下降(P<0.05).与单独加入CII263-272或HA308-317原型肽的对照组相比,加入HA308-317变构肽的T细胞增殖的刺激指数明显下降 (P<0.05).结论替换HA308-317多肽中T细胞受体的接触残基产生了弱或非T细胞刺激肽,它们可能有效地抑制RA的T细胞免疫反应。

目的 探讨血红素氧化酶-1(HO-1)在异种肝移植中的作用及其机制方法采用豚鼠对大鼠肝移植模型,实验动物分为3组,每组10对鼠.A组供体鼠术前24 h腹腔注射5 ml/kg生理盐水作为对照;B组供体术前24 h腹腔注射HO-1诱导剂钴原卟啉(CoPP),C组供体注射CoPP 的同时给予HO-1抑制剂锌原卟啉(ZnPP).每组受体均接受眼镜蛇毒因子(CVF).分别以RT-PCR和western印迹法观察HO-1 mRNA及蛋白表达.通过凝胶电泳迁移率改变法(EMSA)检测移植肝核转录因子(NF)-κB的活化,免疫组化观察E-选择素表达,来评价HO-1对内皮细胞活化的抑制作用.并比较各组受体鼠存活时间.结果各组均未发生超急性排斥反应.CoPP 预处理可以诱导HO-1 mRNA和蛋白过度表达,进而显著抑制移植肝内NF-κB的活化和内皮细胞E-选择素表达;B组与(0.112±0.039) A组(0.211±0.030)、C组(0.283±0.075)相比差异有统计学意义(P<0.05).HO-1过度表达组与其它组相比,移植肝内皮细胞肿胀减轻,浸润细胞数减少,肝脏功能改善,而且受体鼠存活时间显著延长;B组(15.5 h±3.8 h)比A组(7.3 h±2.1 h)差异有统计学意义(P<0.01).这种保护效应可被同时给予HO-1抑制剂ZnPP所取消;B组比C组(6.7 h±2.9 h)差异有统计学意义(P<0.01).结论 HO-1通过抑制内皮细胞活化,延缓异种移植肝排斥反应发生。

目的 探讨肝移植术后早期肝动脉血栓形成的诊断及治疗. 方法 2001年4月至2004年11月在复旦大学附属中山医院共施行肝移植220例,移植术后彩色多普勒超声定期监测肝动脉血流,怀疑肝动脉血栓形成(HAT)者行肝动脉造影,确诊为HAT的病例均采用经肝动脉内导管持续性尿激酶溶栓治疗. 结果本组HAT发生率为2.7%(6/220).6例HAT发生在移植术后2～19 d(中位数5.5 d),经溶栓治疗后肝动脉均再通.其中1例术后2个月死于肺部感染.另1例术后半年再次出现HAT,因再次溶栓失败行第二次肝移植,2个月后死于多脏器功能衰竭.其余4例已健康存活至今,最短为3个月,最长已22个月. 结论 CDI检查对于早期HAT的诊断至关重要,经肝动脉内导管尿激酶持续性溶栓治疗效果良好,可作为肝移植术后HAT的首选治疗手段。

目的 分析肝移植术后早期肝动脉血供不良(HAI)背景下胆道并发症(BC)的临床转归. 方法自1999年2月至2004年2月,本单位共施行原位肝移植术240例.术中肝动脉和胆道重建均采用改良的显微外科吻合技术,术后动态监测肝动脉血流动力学及胆树完整性,回顾性研究肝移植术后早期HAI对胆道并发症发生与预后的影响.结果 32例(13.3%)受体发生胆道并发症,其中11例(4.6%)病人移植后早期出现HAI(HAI组),21例(8.7%)移植后早期未出现HAI(non-HAI组).HAI 组包括3例肝动脉血栓形成(HAT)和8例肝动脉狭窄(HAS).3例HAT病人均成功实施急诊取栓术, 2例HAS病人接受短期抗凝药物治疗.HAI组术后出现7例胆道狭窄和4例胆漏,6例行内镜和/或放射介入治疗,4例行吻合口修补及胆道引流术,1例行药物治疗.8例病人死亡,3例治愈.HAI组病人术前血清总胆红素水平显著高于non-HAI组(373 μmol/L±94μmol/L vs 111 μmol/L±45 μmol/L,P=0.008).HAI组病人的1年和3年生存率分别为54.6%和16.4%,non-HAI组为66.3%与61.2%,两组差异有统计学意义(P＝0.042).结论肝移植术后早期出现HAI的胆道并发症病人预后不良;移植后早期应加强彩色多普勒超声动态监测,尽快恢复肝动脉正常血流;具有早期HAI背景者一旦发生胆道并发症,需及时施行介入治疗或中转手术并考虑再次肝移植的必要性。

病历摘要 　　患者男,54岁,汉族.主因间断胸闷气短3年余加重伴发作性晕厥2个月,于2004年3月11日收入院.3年余前患者无明显诱因于活动中出现胸闷气短,程度不重,伴头晕乏力,休息10余分钟可缓解.后活动耐力逐渐下降,并逐渐出现呼吸道感染诱发的尿少、腹胀、夜间不能平卧.

随着产前超声检查的广泛应用和诊断技术水平的提高,使人们增加了对胎儿肾盂积水的认识.但究竟这种肾内的改变对胎儿造成多大的影响,应采取何种检查、诊断、处理措施,仍是超声科、产科及小儿泌尿外科亟待解决的问题[1].现将胎儿肾盂积水产前诊断及产后临床转归的研究现状综述如下。

长期以来,人们一直把全脑数字减影血管造影术(DSA)作为颅内动脉瘤术前诊断的金标准.但是DSA作为一个有创的检查,不仅耗时较长,而且可能引起颅内栓子脱落、脑血管痉挛等并发症,并造成0.5%的病人发生永久性神经功能缺陷.这些并发症一旦发生不但使动脉瘤病人雪上加霜,而且可能会进一步增加手术的难度.最新的研究表明,三维磁共振血管成像技术(3D-MRA)可以代替传统的DSA检查,成为颅内动脉瘤术前诊断评估的有效方法。

鱼油对增加心率变异性(HRV)非常有效,这项研究结果已经发表在Chest,2005,127:1102-1107.鱼油的主要成分--ω-3脂肪酸水平与心脏性猝死率的降低直接相关,但其心血管保护机制尚不十分清楚.有可能的机制是其能通过增加HRV改善心脏自律性从而减低心律失常的危险.该研究选择58例老年非住院需看护的病人,试验开始前2个月不服用任何相关药物,之后随机分为两组,1组每天服用ω-3脂肪酸含量较高的鱼油胶囊(2 g/d),1组服用含量较低的植物源性ω-3脂肪酸(α-亚麻酸,2 g/d)。

第12届亚太骨科学会脊柱手术演示和脊柱疾病研讨会(12th Asia Pacific Orthopaedic Association Spine Operative Course)暨国内首次脊柱互动式手术演示及脊柱疾病研讨会于2005年4月7～10日在北京召开。

我们比较基因组杂交研究已发现,鼻咽癌原发灶和淋巴结转移灶均存在显著的染色体不平衡[1].本研究以染色体缺失率较高的16p为研究对象,构建其杂合性缺失(loss of heterozygosity,LOH)图谱,为进一步定位和克隆鼻咽癌转移相关抑癌基因提供基础。

研究发现,细胞凋亡是退变椎间盘组织中细胞减少的主要因素,椎间盘退变与细胞凋亡及由凋亡引起的基质代谢障碍有关[1].在腰椎间盘突出症患者椎间盘组织内发现Fas和FasL的表达[2],但没有对其进行相关功能的深入研究.本研究应用逆转录PCR(RT-PCR)和免疫印记方法检测退变腰椎间盘组织中Fas及FasL基因的表达,并通过抗Fas抗体诱导椎间盘细胞凋亡,以了解Fas系统在腰椎间盘退变中的作用。

近年来,国外关于妊娠期妇女在体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)下行心内直视手术已有报道[1].迄今为止,国内的相关报道仍较少见.我院在CPB下成功地进行了3例孕妇心瓣膜置换手术,现报道如下。