2005年 · 第85卷第23期

严重烧伤患者救世主治的第一道难关是休克,因为烧伤后48h内大量血浆成分外渗,谦有血细胞的破坏,极易产生低血容性休克。

目的 研究血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1(SGK1)在高糖诱导人肾小球系膜细胞(HMC)产生纤连蛋白(FN)中的作用,探讨SGK1在糖尿病肾病(DN)肾小球硬化中的作用机制.方法将带有SGK1显性激活型突变体质粒(PIRES2-EGFP- S422D SGK1 mutant,SD)瞬时转染HMC; 同时,设空质粒(PIRES2-EGFP,FP)转染组和未转染组(NT)为对照.分别用正常糖(NG,5.5 mmol/L D-葡萄糖)和高糖(HG,25 mmol/L D-葡萄糖)刺激8h后,采用RT-PCR方法和Western印迹方法来观察SGK1和FN 的mRNA及蛋白的表达.结果高糖环境下,转染SD的HMC与转染FP、NT组比较,其SGK1 mRNA表达显著性增高(0.704 vs 0.497, 0.491,P<0.01),SGK1蛋白过度活化(1 178 497 vs 193 875, 195 597, P<0.01),其FN mRNA和蛋白的表达显著性的增加 (0.749 vs 0.463, 0.475, P<0.01; 659 550 vs 342 354, 340 428, P<0.01).结论在糖尿病肾病中,高糖可以通过SGK1介导的信号通路来诱导人肾小球系膜细胞增加合成FN,这种新发现的信号通路,表明SGK1可能参入糖尿病肾病肾小球纤维化的发生。

目的 探讨腺病毒载体(Ad)介导异种黑色素瘤相关抗原酪氨酸酶相关蛋白2(TRP2)诱发抗肿瘤免疫与自身免疫性损伤的关系.方法用Ad编码的人或小鼠TRP2(Ad hTRP2或Ad mTRP2)皮内免疫C57BL/6小鼠,将小鼠分为正常对照组(d170-3)、Ad hTRP2和Ad mTRP2免疫组.体内细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤试验和细胞内干扰素γ(IFN-γ)染色(ICS)分析CTL杀伤活性和IFN-γ的产生(每组3只小鼠);皮下接种B16.F10黑色素瘤细胞(每组10只小鼠),观察荷瘤小鼠成活情况.结果 Ad hTRP2诱发小鼠CTL杀伤活性与免疫时间相关,免疫后1周活性达到最大,随后逐渐降低;Ad hTRP2诱导的CTL杀伤活性具有剂量效应关系.Ad hTRP2免疫小鼠1周其6 h CTL杀伤率为94%±5%,脾脏产生IFN-γ的CD8+T细胞占总CD8+T细胞的0.87%±0.12%,而相应地Ad mTRP2分别为22%±8%和0.15%±0.05%.接种1×106 B16.F10细胞,Ad hTRP2免疫的小鼠观察3个月100%无瘤生长,但在病毒注射部位有白癜风形成;而接种1×105 B16.F10细胞的Ad mTRP2免疫小鼠3个月只有20%的成活率,并不伴局部白癜风形成.结论用Ad介导异种TRP2能有效地打破对自身TRP2的免疫耐受,诱发强烈的抗原特异性细胞免疫反应,同时伴发自身免疫性损伤。

目的 研究新基因CT120A的表达与肺癌细胞生长的关系.方法构建特异性靶向于CT120A基因的RNA干扰表达质粒小发夹RNA(shRNA)-H,并将其转染肺腺癌细胞株SPC-A-1.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹测定干扰后CT120A表达水平;采用BrdU-TdR掺入实验和软琼脂克隆形成实验进行细胞体外增殖分析;裸鼠成瘤实验测定CT120A基因表达下调后SPC-A-1细胞在体内致瘤能力的改变;流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 RNA干扰表达质粒shRNA-H可以有效抑制CT120A基因的表达,使CT120A mRNA表达减少50%～70%,蛋白表达减少80%;CT120A基因表达下调抑制了SPC-A-1细胞在体外的增殖,降低其在软琼脂中生长形成克隆和在裸鼠体内成瘤的能力,提高细胞对紫外线诱导凋亡的敏感性.结论新基因CT120A与肺癌细胞生长有着密切的关系,CT120A基因可能可以作为药物治疗肺癌的一个新的靶点。

目的 了解肺动脉血栓栓塞症(PTE)患者住院构成比与病死率的变迁,为PTE的防治提供参考依据.方法回顾性分析1974年至2002年阜外心血管病医院收治的442例PTE住院患者资料.结果 PTE住院患者年住院例数及住院构成比分别从1970年代初每年低于5例和平均每年0.1152%的构成比,到21世纪初每年48～79例和平均0.5866%的住院构成比,呈逐渐升高的趋势.冬季是PTE发病高峰,发病数显著高于其他季节(P<0.05).发病年龄大多数处于30～60岁,男性发病高峰在30～60岁,女性为40～60岁,男性较女性提前10年进入发病高峰.PTE住院患者的病死率有明显下降的趋势:从1970年代的20%降到21世纪初的5.8%.1990年之前PTE患者住院病死率为12.5%,1990年之后患者住院病死率为4.5%,差别有统计学意义(P=0. 005).PTE男性患者住院病死率为4.6%,女性为8.6%,二者比较差别无统计学意义(P=0.09).住院病死率在年龄＜70岁的PTE患者为5.5%,≥70岁的患者为19.0%,住院病死率差别有统计学意义(P<0.05).结论 PTE是一重要的常见病,应该得到足够的重视。

目的 评价射频消融术(RFA)治疗肝脏海绵状血管瘤(HCH)的可行性、安全性及疗效,探讨射频治疗的最佳途径.方法 2001年3月至2004年6月,对68例患者共104个HCH病灶进行了RFA治疗.其中,经皮RFA治疗19例,腹腔镜RFA治疗29例,开腹RFA治疗20例.腹腔镜及开腹RFA治疗中,对7例直径大于7 cm的病灶采用Pringle法阻断肝内血流进行治疗.术后采用超声检查及螺旋CT增强扫描评价RFA疗效.结果腹腔镜RFA中,发现2个术前影像学未发现的新病灶,开腹RFA中发现4个新病灶.全部病例均顺利完成RFA治疗.Pringle法阻断肝内血流后,术中平均出血量明显减少(P<0.01),单个病灶平均射频治疗时间明显缩短(P<0.01).腹腔镜RFA中,15例因慢性结石性胆囊炎同时行胆囊切除术,2例因病灶累及胆囊床行胆囊切除术,3例行肝囊肿开窗引流术.开腹RFA中,5例因胆囊病变同时行胆囊切除术,1例行肝囊肿部分切除术,3例因胆总管结石行胆总管探查术.29例出现术后发热及血清转氨酶升高,1例出现一过性血尿,未发现与RFA治疗相关的严重并发症.随访6～36个月,病灶完全坏死率为99%(103/104).1例经皮RFA治疗后6个月发现边缘残留病灶,再次行经皮RFA治疗.结论 RFA治疗HCH安全可行,疗效肯定,并可以根据病灶大小、数量、部位及患者临床状况选择经皮、腹腔镜或开腹进行治疗.阻断肝内血流后进行腹腔镜或开腹RFA治疗可减少出血量,提高疗效。

目的 研究视紫红质基因(RHO)和视网膜色素变性1(RP1)基因在香港地区汉族视网膜色素变性(RP)患者中的突变频率及特征,并进一步探讨它们在RP发病机理中潜在的相互作用.方法运用高通量构象敏感凝胶电泳和直接测序方法,对151例香港地区汉族RP先证者和150名对照者进行了RHO和 RP1基因全编码区和邻近剪切位点的内含子区域序列突变的检测.对携带基因突变的12例RP先证者的46名亲属进一步作分离分析.运用单因素分析、多因素分析和基因型家系不平衡分析研究RHO和 RP1基因对RP的作用.结果 RHO基因和RP1基因的突变检出率各为1.3%.RHO基因中-26G>A可增高RP危险性,而RP1基因中R872H则可降低RP危险性.多因素Logistic回归分析揭示了RHO基因 IVS4-23G>A分别与RP1基因N985Y和C2033Y之间存在相互作用.结论在香港地区汉族RP患者中,RHO和 RP1基因的突变率比其他人群中RP患者的突变率低.除了致病性基因突变,非编码区的序列改变也可改变RP的易感性.部分RP患者由双基因突变引起,当然多基因共同作用也完全可能存在。

目的 探讨罗格列酮对肾间质纤维化的保护作用及其机制.方法以大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)为模型,在不同的时间点(3 d、7 d、14 d)观察梗阻侧肾间质基质含量;各组肾皮质间质巨噬细胞浸润情况;致纤维化的转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达情况;肾皮质多种与肾脏纤维化相关的结缔组织生长因子(CTGF)、骨形态发生蛋白7(BMP-7)、Smad6信号蛋白等的mRNA表达及BMP-7、PAI-1的蛋白表达.结果罗格列酮能改善UUO所致的肾间质纤维化程度(P＜0.05);显著减少间质巨噬细胞浸润数量;下调肾脏组织TGF-β1的表达(P＜0.05);减少TGF-β1下游致纤维化因子CTGF及PAI-1的表达;同时上调TGF-β1信号传导中抑制性因子BMP-7和Smad6的表达(P＜0.05).结论罗格列酮能保护UUO所致的肾间质炎症和纤维化损伤.其可能的作用机制包括抑制肾间质炎症细胞浸润;减少TGF-β1表达、阻止TGF-β信号传导、抑制TGF-β1下游效应因子CTGF和PAI-1的表达,增加抗纤维化抗炎作用的BMP-7蛋白表达等,从而从多层面阻断TGF-β1的致纤维化作用。

目的 建立含肾上腺种植体肾移植模型,探讨肾上腺种植体对植肾的保护作用.方法在成功制备含肾上腺种植体供肾的基础上,再行同种异体肾移植,实验动物分为Ⅰ组(含肾上腺种植体肾移植组)和Ⅱ组(单纯肾移植组),均未用任何免疫抑制剂,术后7 d切除受体右肾(左侧为移植肾);观察右肾切除术后受体存活时间,检测肾上腺种植术和右肾切除术前、后不同时间点肾上腺种植体及植肾的形态学变化和血清皮质酮、肌酐和尿素氮浓度.结果肾上腺种植术后7 周,肾上腺种植体成活良好并恢复内分泌功能;右肾切除术后7 d,肾上腺种植体逐渐出现萎缩、变性和点状坏死,但Ⅰ组大鼠生存期10.2 d±2.2 d较Ⅱ组7.3 d±1.2 d明显延长,且前者植肾形态学观察和功能状态均明显优于后者.结论肾上腺种植体在移植术后早期对植肾具有保护作用。

目的 建立血小板微粒(platelet derived microparticles,PMPs)的流式微球技术(cytometric bead array,CBA)检测方法并对其进行方法学评价.方法采用包被针对血小板膜糖蛋白Ⅲa(CD61)单克隆抗体的检测微球捕获PMPs,用CD41 PE结合捕获的PMPs,利用流式细胞仪对微球-PMPs-CD41 PE复合物进行检测.通过试验优化检测条件;并对方法的重复性和检测线性进行评价.对45例健康人PMPs水平进行检测.结果检测微球在4℃可以稳定保存90 d以上,变异系数0.65%,基本可以满足临床检测的要求.应用CTAD抗凝管采集标本可以有效的抑制PMPs的体外释放;室温反应4h可以达到PMPs最大的结合;利用PBS洗涤可以去除检测微球对PMPs的非特异性吸附.该方法批内变异系数6.8%;批间变异系数10.4%,有较好的重复性;利用该方法检测血小板活化上清中的PMPs,在0～200 μl之间有较好的线性(r=0.9962).45例正常健康成人血液PMPs参考范围为1.031～1.766(相对荧光强度).结论流式微球技术可以简便、快捷、准确地检测PMPs,对于临床出血、血栓性疾病的诊治具有重要意义。

目的 探讨五味子乙素(SchB)对转染多药耐药1基因(MDR1)的人乳腺癌细胞MCF-7的多药耐药逆转作用及相关机制.方法将人MDR1基因导入MCF-7细胞,形成耐药细胞株MCF-7/MDR1;用该细胞株为模型评价SchB的体外逆转多药耐药作用,用MTT法进行化疗药物单独或与SchB联合作用时对耐药细胞的IC50比较,计算逆转倍数.结果转染细胞MCF-7/MDR表现为P糖蛋白高表达,对阿霉素、长春新碱、紫杉醇、高三尖杉酯的抗药性均增加;SchB(25 μmol/L)显著减少阿霉素、长春新碱、紫杉醇和高三尖杉酯对MCF-7/MDR细胞的IC50,逆转倍数达6.03～23.94倍;SchB(25 μmol/L)使MCF-7/MDR细胞对若丹明123的胞内积聚增加约5倍,效果与维拉帕米10 μmol/L浓度时相当;但SchB(25 μmol/L)不影响MCF-7/MDR细胞的P-糖蛋白表达.结论 SchB能有效逆转转染MDR1的MCF-7细胞的多药耐药,其机制可能是抑制了P-糖蛋白的药物外排生物学活性。

近期国家科研管理部门在对部分重大临床研究项目中期检查或终期评审时发现,虽然评审项目的研究设计方案的质量有明显提高,但项目实施仍存在许多问题,突出表现为研究者依从性不好,即研究者不能严格按设计方案执行,导致数据质量下降.据此,作者对研究者依从性问题进行了调研,并在一些临床研究项目中探索改善研究者依从性的方法。

"声门下"指声带下缘至环状软骨下缘之间的上部气道腔隙.良性声门下狭窄可发生于外伤后,以医源性(主要是气管内插管后)多见[1],其次有炎症,吸入性灼伤和性质不明的特发性病变等,少数为先天性[2].病理表现为纤维瘢痕性改变,有的可以向上累及声门,声门上,向下累及上部气管(即联合病变),管腔阻塞常达70%以上.患者出现明显呼吸困难,通常需长时间留置气管切开导管.颈部X线摄片,CT扫描和磁共振均呈现出全周性狭窄的影像.内镜于声带下方即见狭窄、不能伸入.由于传统观点认为:于环状软骨水平横断声门下气道会导致双侧喉返神经麻痹[3],故治疗上多采用内镜下扩张,激光气化,气管切开和喉成形后加内支撑等方法[4-6]。

前列腺癌尤其是高分化腺癌在组织学上与前列腺增生或腺病难以鉴别.我们采用免疫组织化学方法观察了p504s-p63混合抗体在前列腺癌与良性增生组织的表达情况,探讨前列腺癌的特异性标记物及前列腺癌鉴别诊断方法。

实体瘤的脑膜转移临床很少见,但近20年来约增加了4%～15%[1,2],可是乳腺癌的脑膜转移却呈下降趋势,这种趋势很可能与日益增加的新辅助化疗有关[2].实体瘤引起脑膜转移多见于乳腺癌约12%～34%﹑肺癌17%～25%﹑黑色素瘤17%～25%﹑消化系统恶性肿瘤4%～14%[3].1995-1999年之间,我们在法国Gustave Roussy 肿瘤治疗中心共收治了80例皮革样胃癌,其中有4例并发脑膜转移,患病年龄均在48～58岁之间,其中男3例,女1例.3例患者术前检查未发现异常,即接受手术治疗,1例患者在确诊时发现合并有腹膜转移.现将临床诊治经过报道如下。

患者女,26岁,两天前夜间睡觉时感右中腹部疼痛,呈持续性绞痛,活动时加剧,无恶心、呕吐,无腹泻.查体:神志清,精神差,痛苦貌,皮肤、巩膜无黄染,腹平软,右腹肌紧张,右中上腹部可扪及15 cm×10 cm大小肿块,质软,边界清,压痛明显,无反跳痛,肝、脾肋下未及.体温:38 ℃.血常规:白细胞11.4×109/L,红细胞3.61×1012/L,中性0.81,淋巴0.10.肝、肾功能正常.临床诊断:右侧腹腔炎性包块。

患者男,28岁,主因"反复骨痛4年"入院.2000年患者无明显诱因出现右髋关节隐痛,症状逐渐加重并出现跛行.在当地医院查血钙、磷"低",骨盆X线示"双侧股骨颈陈旧性骨折",诊为"低血磷抗维生素D佝偻病".给予骨化三醇、碳酸钙以及中性磷溶液等治疗后,症状逐渐减轻.2002年初发现右下颌骨约2.0 cm×1.0 cm骨性隆起.2002年4月患者出现双下肢乏力,在当地医院行X线示"双侧股骨头坏死,股骨颈嵌入性骨折,多发椎体双凹变"。

患者女,14岁,2002年11月初因"反复发热、咳嗽、咳痰、胸痛3个月"就诊南京军区福州总医院.查体时于右侧胸壁发现一约2.5 cm×2.0 cm隆起性肿块,周围炎性渗出明显,表面可见脱屑及少许分泌物,质地较软,其余浅表淋巴结及肝脾无肿大.CT示:右侧中下胸壁软组织及胸膜腔病变并右肋骨骨质破坏、右侧胸腔积液.术中冰冻切片病理提示淋巴瘤,考虑累计范围较广,行胸壁病灶根治性切除可能性小,胸廓重建的难度大,故给予右胸壁切开闭式引流术.术后病理提示:间变性大细胞淋巴瘤;免疫组织化学检查:CD20(-)、CD3(-)、CD15(-)、CD30(++)、ALK(+)、EMA(++)、波形蛋白(+)。

第八届中国北京科技产业博览会于2005年5月23日至27日在北京举行，北京生物工程与医药产业基地(简称CBP)在展会上全新亮相。

由武汉大学人民医院黄从新教授、首都医科大学附属北京安贞医院马长生教授、大连医科大学附属第一医院杨延宗教授、中国医学科学院阜外心血管病医院张澍教授等完成的课题--心房颤动(简称房颤)的基础与临床研究,其成果于不久前获得国家科技进步二等奖。

位于人类1号染色体上(1p34-36)的RHD和RHCE基因分别编码Rh血型系统的核心蛋白RhD和RhCE[1].其中D抗原因为具有强烈的免疫原性而具有重要的临床意义.目前,对弱D表型的分子机理及频率分布等研究大部分集中在欧洲人群中,中国人群中这方面的研究还很少[2-7].我们对1例D突变体进行了研究,发现了一种新的RHD等位基因,现报道如下。

遗传性抗凝血酶(antithrombin, AT)缺陷症是由AT基因突变引起,可分2型:Ⅰ型主要表现为AT抗原(AT:Ag)和活性(AT:A)水平的同步减低,Ⅱ型由AT结构异常所致[1].国外已报道300余例,基因突变种类超过130种;但国内仅我们报道过1例[2].本文对另一个AT缺陷症家系进行研究,发现此家系为I型遗传性AT缺陷症,由AT基因C2757T杂合突变引起。

血栓栓塞尤其是脑卒中是房颤致残、致死的主要原因,但血栓形成机制尚未完全阐明.一氧化氮具有强大的抗血栓、抗动脉硬化作用,它与许多心血管疾病有密切关系[1],但它在房颤中的作用还不清楚.本研究将采用竞争PCR定量测定房颤犬心房内膜纤溶酶原激活剂抑制物-1(PAI-1)mRNA表达,同时应用一氧化氮敏感电极直接测定心内膜一氧化氮含量,在国内外率先开展房颤犬PAI-1mRNA表达与一氧化氮的定量研究,探讨房颤左房血栓形成的可能机制。

原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis, PBC)和自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis, AIH)是两种常见的自身免疫性肝病,具有各自特有的临床表现,但近年来发现部分患者同时具有这两种疾病的特点,称之为"重叠综合征",本文对11例PBC/AIH重叠综合征患者的临床、生化及治疗反应进行分析研究。