2004年 · 第84卷第23期

人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)是获得性免疫缺陷综合征(艾滋病)(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)的病原体.艾滋病的流行已对世界经济发展和社会进步产生了重要影响,被称为"世纪瘟疫".国内外众多临床及科研工作者致力于艾滋病的研究,以期有效控制其在全球的流行.目前已明确HIV的传播途径主要为性接触、血液及母婴垂直传播,其主要靶细胞为CD4+T淋巴细胞.人体感染HIV后,免疫功能逐渐被破坏,经8～10年的无症状期进入艾滋病期,因各种机会性感染及肿瘤而死亡。

脑血管病是一个高患病率、高发病率、高死亡率和高致残率的"四高"疾患.一级和二级预防可以降低高患病率和高发病率,对急性期脑血管病的积极治疗可以减少高死亡率,但一旦患病,高达2/3或3/4的患者会致残.因此,早期康复治疗和持续康复治疗就成为降低高致残率的重要手段.可是,虽然既往很重视对急性期脑血管病的治疗,各种急性期脑血管病治疗药物的评估屡见于文献,但是三级康复治疗却很少有大规模的、规范化的临床报道。

严重急性呼吸综合征(SARS)大范围的流行,艾滋病感染人数的快速上升,部分地区血吸虫病的死灰复燃,结核病的大量新发与众多死亡,疫苗针对性传染病的抬头趋势,高致病性禽流感对人类健康和生命的威胁,均使得我们不得不再度审视我们的传染病控制体系的构架、管理及其运作机制,查找其中存在的主要问题,并提出有针对性的改进措施,制止不该发生的传染病的流行。

目前,脑卒中的发病率仍然居高不下(约280/10万),卒中后痴呆(post-stroke dementia)的发病率也随之增多.多数研究报道,卒中后痴呆发生率占脑血管病患者的26%～30%,9倍于年龄匹配的正常人[1].卒中后痴呆作为最近国际学术界提出的一个新概念,受到广泛的关注,已成为研究的热点。

第二部分抗菌药物临床应用的管理。一、抗菌药物实行分级管理。各医疗机构应结合本机构实际，根据抗菌药物特点、临床疗效、细菌耐药、不良反应以及当地社会经济状况、药品价格等因素，将抗菌药物分为非限制使用、限制使用与特殊使用三类进行分级管理。

成年动物脑梗死后,脑室管膜下区(subventricular zone, SVZ)的神经干细胞(neural stem cell, NSC)虽然有增殖和迁徙反应,但分化为神经元的数量太少而难以改善神经功能[1].外源性表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)可促进正常成年鼠SVZ内NSC的增殖而改善认知行为能力[2],表明EGF可作为活体成年脑SVZ内NSC的调控因素之一.本实验研究脑梗死大鼠脑室内注入外源性EGF对SVZ内NSC增殖、迁徙和分化的作用,并探讨梗死灶边缘增生星形胶质细胞的来源。

本研究应用碱性单细胞凝胶电泳技术(SCGE)对缺血性脑卒中患者急性期、恢复期血液中单个核细胞的DNA损伤与修复情况进行检测,并与同龄健康对照比较,以判断缺血性脑卒中患者DNA的损伤水平及与病程的关系。

目的 探讨血小板反应蛋白-1(THBS-1)基因G1678A(Ala523Thr)多态性与中国汉族人群脑卒中易感性的关系.方法采用聚合酶链反应和限制性片段内切酶的方法检测了来自于全国6个临床中心病例-对照的THBS-1基因G1678A多态性.疾病组为1634例经头颅CT或磁共振检查证实的脑卒中患者(其中脑血栓731例,腔隙性脑梗死477例,脑出血426例),对照组为1171例经严格检查排除脑卒中且性别、年龄匹配的患者.结果 THBS-1基因G1678A多态性在对照组和脑血栓组人群中的分布差异有显著意义,脑血栓组的AA基因型频率(0.503)显著高于对照组(0.441,P=0.008),G等位基因频率(0.299) 显著低于对照组(0.339,P=0.009). 在腔隙性脑梗死组和脑出血组THBS-1 G1678A多态性与对照组比较差异均无显著意义 (P>0.05).多元Logistic回归分析结果显示:在调整了其他危险因素后,具有AA基因型者脑血栓的相对危险度增加 [相对危险度(OR)=1.4; 95%可信区间(CI)1.083 ～ 1.693; P=0.008].结论 THBS-1基因G1678A(Ala523Thr)多态性的AA基因型与汉族脑血栓的易感性有关,可能是影响脑卒中发病的遗传因素之一。

目的 探索规范的三级康复治疗对于卒中偏瘫患者神经功能的影响.方法脑卒中患者52例在脑梗死和脑出血2个层次上随机分成康复组和对照组,每组26例,康复组给予规范的三级康复治疗,对照组不给予规范的三级康复治疗,一般的常规内科治疗两组相同.分别于入选时及发病后第1、3、6个月月末采用临床神经功能缺损程度评分标准进行评测.结果康复组在入选后各阶段的评分明显低于对照组(均P＜0.001) ,康复组入选后各阶段神经功能评分积分差值明显高于对照组(均P＜0.001);入组时及治疗后1、3、6个月时康复组患者的神经功能的积分分别相当于总分的51%、34%、18%和8%,而对照组分别为58%、54%、42%和37%;入组时与治疗后1、3、6个月月末的康复组神经功能积分差值相当于总分的百分数分别为17%、33%和43%,而对照组则分别为5%,16%和21%.结论规范三级康复治疗对于卒中患者各阶段神经功能的提高具有明显的促进作用。

目的 评价急性脑血管病三级康复治疗的疗效.方法在全国一些城市建立以三级甲等医院神经内科、康复科及其所负责的社区医疗机构组成的三级康复网,对初发脑卒中患者进行为期半年的持续康复, 并对其临床神经功能缺损、运动功能、日常生活活动能力及生活质量方面进行评定.在全国共建立了15个三级康复网,各三级康复网按照统一的入选标准筛选急性脑血管病患者,并将患者随机分为康复组及对照组,按照统一的方法进行康复训练并在发病后1周及1、2、3、4、5、6个月末共进行7次评价.结果共有1078例患者入组,其中完成全部7次评价者902例,死亡19例,失访157例.902例中,康复组439例,男性266例,女性173例;年龄61岁±11岁; 脑梗死278例;脑出血161例.对照组463例,男性281例,女性182例;年龄60岁±11岁;脑梗死291例;脑出血172例. 发病后第2个月起,两组之间在临床神经功能缺损、运动功能、日常生活活动能力及生活质量评定等方面的评分差异均有显著意义,康复组明显优于对照组.6个月时,康复组患者基本达到日常生活活动自理,Barthel指数平均值接近85分.对照组也有所恢复,但恢复的程度低于康复组.康复组卒中后抑郁的发生率低于对照组.结论脑卒中的三级康复可以使患者获得更好的运动功能、日常生活活动能力、生活质量及更少的继发合并症。

目的 探讨我国HIV-1 nef特异性CD8+ T细胞应答的特点及其免疫保护作用.方法以长期不进展组(LTNP)7例和艾滋病组9例为研究对象,以覆盖HIV-1 nef全长的26个重叠肽段组成的3个肽段库作为刺激原,用IFN-ELISPOT方法检测LTNP组与艾滋病组患者HIV-1 nef特异性CD8+ T细胞应答,并测定其CD4+ T细胞、CD8+ T细胞和病毒载量,观察两组间HIV-1 nef特异性CD8+ T细胞应答的差异及其与CD4+ T细胞和病毒载量的相关性.结果 LTNP组和艾滋病组HIV-1 nef特异性CD8+ T细胞应答的强度分别为404±334和59±121 SFC/106外周血单个核细胞(PBMC), LTNP组显著高于艾滋病组;HIV-1 nef特异性CD8+ T细胞应答的强度与CD4+ T细胞计数呈正相关,但与病毒载量没有显著的相关性.结论 HIV-1 nef特异性CD8+ T细胞应答在艾滋病发病中具有一定的保护作用,欧美流行株与我国流行株之间具有免疫交叉反应性。

目的 分析我国HIV-1流行株的生物学表型及其与V3环序列变异的相关性.方法采用传统的共培养方法从HIV-1感染者新鲜外周血单个核细胞(PBMC)中分离病毒并在MT-2 细胞上测定分离株的融合诱导性,用表达CD4 和趋化因子受体CCR5或CXCR4的GHOST(3)测定毒株的辅助受体利用情况,用巢式-聚合酶链反应(nest-PCR)扩增V3环及两侧区序列并对其序列进行测定,用GCG软件分析氨基酸序列.结果在所分析的5个原代毒株中,LTG0213和LTG0214为合胞体诱导型(SI),利用CXCR4辅助受体;XJN0021、XJN0091和SHXDC0041为非合胞体诱导型(NSI),利用CCR5辅助受体.X4/SI病毒和R5/NSI病毒在V3环氨基酸序列方面,存在明显的区别.CCR5表型中国株第8、11、18及第25位氨基酸的共同基序为:8-TXXS/GXXXXXXR/QXXXXXXE/D-25,CXCR4表型株在这些位置出现碱性氨基酸取代(第25位除外),引进正电荷.结论 HIV-1中国流行株的生物学表型与V3环序列变异密切相关,V3环上第8、11、18及第25位积累碱性氨基酸(或由酸性氨基酸转变为中性氨基酸),可以使病毒由NSI/R5表型转变为SI/X4表型,可以根据V3环氨基酸序列预测病毒的生物学表型。

目前用于戒断症状治疗的西药种类很多,但大多有成瘾性,如美沙酮亦有依赖性,易造成撤药困难或形成新的依赖,制约了其长期应用.戒毒中药中不含阿片类成瘾成分,对阿片类戒断症状的控制具有独到之处,可长期使用,备受关注[1-5].丁丙诺啡为阿片受体部分激动剂,可缓解阿片类戒断症状,依赖性潜力低,且毒副作用小,但对中、重度海洛因依赖戒断症状在治疗早期控制不够完全.本研究根据两种药物特性,探索中药合并小剂量丁丙诺啡对海洛因依赖自愿戒断人员急性戒断症状的治疗效果,并与戒毒标准药物美沙酮比较.现将结果报道如下。

目的 探讨肺炎衣原体(CP)感染对血脂紊乱者患冠心病的影响.方法选择1998年6月至2001年5月在阜外医院进行冠状动脉造影或诊断为急性心肌梗死的患者1719例,其中血脂紊乱523例,非血脂紊乱1196例,应用间接酶联免疫吸附实验检测患者血清中的特异性CP IgG抗体.多元Logistic 回归方法分析冠心病的危险因素.结果调整年龄、性别、吸烟、高血压和糖尿病的影响后,在血脂紊乱组,CP感染对冠心病危险度比值比(OR)为2.5,95% 可信区间为1.4～4.6(P= 0.002),显著高于非血脂紊乱组OR为0.967(0.7～1.4,P=0.851).CP感染和吸烟同是男性血脂紊乱者冠心病的独立危险因素,调整OR分别为2.1(1.1～4.1)和3.3(1.9～5.9);但在女性血脂紊乱组,只有CP感染能显著增加冠心病易感性,调整OR值为4.4(1.4～14.6,P = 0.016).结论 CP感染能增加血脂紊乱者患冠心病的危险性,此影响在女性血脂紊乱者中尤为重要。

目的 明确动力型微泡清除器(DBT)在冠脉搭桥患者体外循环(CPB)全过程中减少动脉灌注管道和大脑中动脉内微气泡的效果及其对血细胞和凝血机能的影响.方法 20例患者随机分组,DBT组在动脉滤器与主动脉插管之间接入DBT.检测DBT前、后的动脉灌注管内和对照组相应位置的微气泡量和患者双侧大脑中动脉内微栓信号(MES)量.术前、CPB停止和术后6 h分别测定血浆游离血红蛋白(PFH)、乳酸脱氢酶(LDH)、血小板计数、纤维蛋白原、凝血因子Ⅱ活性、抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)活性.结果 DBT组动脉灌注管内不同直径微气栓的清除率分别为68%～74 %(10～120 μm ), 79%～81% (20～120 μm)和 88%～96% (40～120 μm ).整个CPB期间大脑中动脉内MES总值,DBT组(178±122)比对照组(197±137)有减少的趋势,但差异无显著意义.血细胞破坏和凝血机能各指标在两组间差异无显著意义.结论 DBT能高效清除体外循环动脉灌注管内微气泡并且不加重血细胞的破坏或凝血抗凝机制的紊乱.要最大程度消除入脑气体微栓须采取综合临床措施,而DBT是有效手段之一。

目的 研究肾骨髓联合移植与嵌合体发生及急性排斥反应的关系.方法采用供体骨髓与肾脏联合移植,进行24例造血干细胞微嵌合体诱导,采用聚合酶链反应(PCR)技术检测受者嵌合状态,与单纯肾脏移植组37例比较嵌合发生率及急性排斥反应发生率.结果随访1年,肾骨髓联合移植组术后嵌合体发生率(87.5%,21/24)明显高于单纯肾脏移植组(40.5%,15/37),差异有显著意义(P﹤0.001);嵌合阳性组急性排斥反应发性率(19.4%,7/36)与嵌合阴性组(44%,11/25)相比差异有显著意义(P<0.05).结论肾骨髓联合移植可诱导嵌合体发生并增加受者对供体器官的免疫耐受,降低急性排斥反应发生率,嵌合现象与免疫耐受具有相关性。

目的 检测肿瘤特异性共享抗原NY-ESO-1/LAGE-1基因在肝癌中的表达情况及其诱导肝癌患者体液免疫应答的能力,为利用NY-ESO-1/LAGE-1为抗原进行肝癌的疫苗免疫治疗提供依据.方法利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测了34例肝癌患者癌和癌旁组织NY-ESO-1/LAGE-1基因mRNA水平的表达;利用酶联免疫吸附实验检测了NY-ESO-1/LAGE-1在37例肝癌患者中诱导自身抗体产生的能力.结果 34例肝癌组织中9例(26.5%)表达NY-ESO-1,12例(35.3%)表达LAGE-1.其中,同一标本中共表达NY-ESO-1/LAGE-1的病例数为7例;表达其中至少一种基因的14例,占总数的41.2%.所检测的37份肝癌患者血清中,6例患者血清抗NY-ESO-1抗体阳性,5例为Ⅲ期及以上患者,1例为Ⅱ期患者.结论 NY-ESO-1/LAGE-1在肝癌患者中表达率较高,并可诱导自身体液免疫应答,提示可作为疫苗的备选抗原成分。

目的 分析Survivin蛋白在膀胱移行细胞癌(TCC)组织中的表达,探讨其潜在的临床意义.方法用免疫组织化学SP法检测75例膀胱TCC患者的肿瘤组织和7份正常膀胱黏膜组织中Survivin蛋白的表达.结果在75例膀胱TCC患者的肿瘤组织中,有58例Survivin蛋白表达阳性,阳性率为77.3%;而在7份正常膀胱黏膜组织中Survivin蛋白均未表达.Survivin蛋白的表达与膀胱TCC的组织学分级密切相关(P<0.05)而与临床分期则无明显的相关性(P>0.05).结论凋亡抑制蛋白Survivin 在膀胱TCC患者的肿瘤组织中过度表达,提示Survivin基因在膀胱TCC的发生发展中可能起重要作用;Survivin蛋白的表达与膀胱TCC的组织学分级有明显的相关性,可能成为膀胱TCC不良预后的指标之一。

已有研究表明缺氧性肺动脉高压时,肺血管和右心室胶原表达增加[1].心力衰竭时也存在不同程度的肺动脉压的升高[2].福辛普利和洛沙坦是心力衰竭的有效治疗药物,而二者对心力衰竭时肺血管和心肌间质中胶原含量的影响仍不清楚.因此,我们通过建立心力衰竭大鼠动物模型,观察肺血管和心肌间质中胶原含量,分析这种改变与肺动脉压的关系,探讨福辛普利和洛沙坦对肺血管和心肌间质胶原的作用。

缺血性脑血管病以其高发病率、高死亡率、高致残率严重危害人类的身心健康.梗死的脑组织已是不可逆损伤,失去了临床研究价值;而惟一的希望是及时挽救缺血半暗带(IP),使之恢复为正常组织.因此,探讨缺血半暗带形成的分子机制具有特别重要的临床意义[1].在组织学及细胞学方面对半暗带的认识取得了一些进展[2].但尚未见水通道蛋白-4(AQP4)与半暗带和磁共振成像(MRI)相结合的研究报道。

目的 探讨高纯度眼镜蛇毒因子(CVF)对非协调性异种大鼠肝脏移植超急性排斥反应(HAR)和存活时间的影响及其机制.方法实验分为CVF治疗组和对照组,每组各20对.在豚鼠到大鼠肝脏移植前24 h实验组大鼠静脉注射CVF(50μg/kg),异种肝脏移植后记录受体生存时间,并观察移植肝的病理变化,免疫荧光法检测肝脏血管C3沉积情况,用大鼠TNF-α ELISA试剂盒检测异种肝脏移植术后1h血清中细胞因子TNF-α水平.结果肝脏移植后,对照组均发生了HAR,肝内小血管血栓形成,间质出血,肝窦和中央静脉可见C3沉积,肠系膜淤血明显. 实验组均无HAR发生,可见延迟性异种排斥反应(DXR)的病理特征,血管内皮细胞(EC)肿胀,单核细胞和中性粒细胞浸润,肝窦和中央静脉无C3沉积,肠道淤血不明显,血清TNF-α水平下调,受体平均存活时间显著延长(1.8±0.6与7.4 ±2.1 h, P<0.01).结论高纯度CVF清除补体可克服非协调性异种肝脏移植的HAR,延长受体存活时间.CVF用于豚鼠到大鼠肝脏移植这一生命支持模型可以更深入地研究非协调性异种肝脏移植的相关机制。

目的 研究表达轮状病毒主要抗原VP7、VP6的非复制型重组腺病毒在恒河猴模型上的免疫反应性和安全性,为轮状病毒基因工程疫苗的进一步研究奠定基础.方法将重组腺病毒通过滴鼻或灌胃途径免疫恒河猴,用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测恒河猴血清中轮状病毒特异性抗体IgG,并监测免疫前后各组恒河猴血、尿常规及一系列反映肝功能和肾功能的生化指标.在整个实验过程中,常规监测恒河猴的体温、体重及临床症状.结果重组腺病毒通过滴鼻或灌胃途径免疫均能诱导恒河猴产生针对轮状病毒抗原的特异性血清IgG;在重组腺病毒免疫整个过程中,各免疫组恒河猴无不良反应,体温基本正常,体重增长正常;和正常对照组相比,免疫后各免疫组恒河猴血、尿常规及肝功能、肾功能无显著性变化.结论表达轮状病毒抗原的重组腺病毒免疫恒河猴能产生针对轮状病毒的特异性免疫反应,并且不影响其正常的生长发育及健康状况,初步证明我们制备的重组腺病毒用作疫苗的有效性和安全性。

目的 研究力学刺激对猪骨髓基质干细胞(BMSC)体外构建组织工程化软骨的影响.方法取第二代猪BMSC以5×107/cm3的密度接种于聚羟基乙酸/聚羟基乳酸(PGA/PLA)圆盘形支架上,一周后均改用软骨诱导液[高糖DMEM培养基含10%胎牛血清(FBS) 、转化生长因子(TGF)β110 ng/ml、胰岛素样生长因子(IGF)-I 50 ng/ml、地塞米松 40 ng/ml]体外培养.根据不同的施加力分为3组:离心组设定离心力100 g,2次/d,30 min/次,间隔12 h;摇床组设定为80 r/min,每天施力8 h;静止培养作为对照组.分别于第4周、第8周进行大体观察、组织学、组织化学、免疫组织化学,蛋白聚糖(GAG)定量等检测,比较不同力学刺激对诱导BMSC体外软骨形成的影响.结果第4周时两实验组,即摇床组及离心组形成的细胞材料复合物基本保持原来的体积与外形,软骨陷窝形成,呈结节状或巢状分布并伴有GAG沉积及胶原合成,Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性.静止组体积缩小,有少量软骨陷窝结构形成;8周时两实验组形成的细胞材料复合物形状保持良好,浅灰白色,光泽好;HE染色结果显示大量成熟软骨陷窝形成,核仁清楚并有多处分裂相,细胞外基质沉积均匀;Safranin-O染色显示有大量的GAG形成,Masson染色显示有较多新生胶原组织形成,免疫组化检测Ⅱ型胶原表达强阳性.静止组可见部分陷窝结构分布在复合物外周,其间分布大量纤维样组织,组织化学及免疫组化检测阳性表达区域明显少于实验组.GAG含量两实验组分别为5.98 mg/g和5.62 mg/g,约为正常耳软骨含量的80%左右,明显高于对照组.结论利用BMSC为种子细胞体外构建组织工程化软骨中,施加力学刺激可以促进软骨组织成熟。

病历摘要 　　患者男,9岁,因皮肤黑9年,血压高、肢体无力2年于2001年5月入我院.患儿系第一胎,足月头位顺产,出生时外生殖器无异常.2周岁(1994年)起易感冒.3周岁时睾丸渐增大,阴囊皮肤色素沉着,1995年初开始阴茎勃起,其身高增长快于同龄儿.1995年于北京儿童医院查血压、电解质"正常",CT示"双肾上腺增生",考虑"先天性肾上腺皮质增生症(CAH)",予氢化可的松口服(剂量不详),肤色变浅,阴茎和睾丸仍继续增大,出现变声.1997年自行停用氢化可的松,改服中药.1998年身高超过1.2米.同年夏天,高热,次日出现四肢无法移动,无抽搐和意识改变,当地医院查"血钾1.9 mmol/L,血压160/100 mm Hg"(1 mm Hg = 0.133 kPa),补钾后四肢无力缓解,血压为160/100 mm Hg,仍服中药及缓释钾,劳累后常出现上肢无力,休息可好转,无软瘫,但未再复查血钾水平。

脑出血发病率、死亡率和致残率均较高,但目前为止尚无肯定、有效的治疗方法,同时它的基础研究也远远地落后于脑缺血研究.近年来脑出血的研究又有新进展,结合作者近年来的工作对脑出血系列研究综述如下。

患者男,26岁.右上腹部不适,皮肤、巩膜轻度黄染10 d收住浙江大学邵逸夫医院.10 d前曾发热39℃,按"一般抗炎"治疗4 d后体温下降至正常,现自述右上腹部不适.体格检查:体温36.7℃,皮肤、巩膜轻度黄染,右上腹部压痛阳性.实验室检查:血清:乙肝表面抗原定量23.56 IU/L(正常<10 IU/L),丙氨酸氨基转移酶 150 IU(本院参考值5～45 IU),天冬氨酸氨基转移酶 249 IU(5～35 IU),总蛋白54 g(60～85 g),白蛋白28 g(35～50 g),白蛋白/球蛋白1.08,甲胎球蛋白(AFP)16 ng/ml (正常<20 ng/ml) 。

患者女,67岁.因下腹隐痛、恶心、少尿伴发热3 d于2003年8月6日住院.既往无阑尾炎,无腹部手术史.入院查体:体温35.8℃,脉搏150次/min,呼吸25次/min,血压75/60 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa).腹部稍膨隆,软,未触及肿块,右下腹压痛,无反跳痛,移动性浊音阴性,肠鸣音减弱.血常规检查:白细胞19.6×109/L,中性粒细胞0.81.初步诊断:急性阑尾炎合并感染性休克.给予持续胃肠减压、抗感染、输液等治疗.次日B超示胃腔扩张,内容物潴留,腹部肠管扩张,右下腹部无明显异常.腹部平片示右膈局限性膨隆,散在肠管积气,双膈下未见游离气体.继续上述治疗,病情有所好转,休克纠正,腹痛减轻,但仍感下腹胀,一直未排大便。

我国肝癌患者的特点是大多在肝硬化基础上发生[1].通过建立类似人肝癌的动物模型可以探讨肝癌生长的发生及发展规律,寻找对肝癌生长、发展有抑制作用的药物,探索治疗肝癌的有效方法.二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DENA)因其诱癌变过程与人类肝癌发生过程十分相似,且诱癌成功率近100%,方法简单、易行,因此被广泛用于制作肝癌大鼠模型.其缺点是诱癌过程中大鼠死亡率偏高(20%～40%),诱癌成功后的大鼠一般状况差,对外科手术、化疗等肿瘤治疗手段耐受力差[2,3].本实验采用DENA改良法诱发大鼠原发性肝癌模型,以适应外科治疗手段的实验研究。