Volume 117 · Issue 01 · 2004

金属内支架已广泛应用于临床，但较高的术后再狭窄率限制了其应用。本研究的目的是确定胆道内放射对犬胆管球囊损伤后肌肉形成和胆管重塑的影响。

将20只雄性犬（15-20 kg）随机分为治疗组（n=10）和对照组（n=10）。使用横跨胆管放置的球囊导管诱导球囊过度拉伸损伤。随后，一个¹⁰³在治疗组每只动物的靶部位放置Pd放射性支架，为损伤胆管提供12.58 × 10的辐射剂量⁷Bq.对照组犬接受镍钛支架。所有的狗在最初受伤后一个月被杀死。从狗身上解剖出受伤的切片，并进行组织学和形态学研究。横截面用苏木精-伊红、Masson三色和Verhoef-van Giesen染色。使用计算机辅助图像分析系统确定肌肉形成面积和管腔面积。

与对照组相比，¹⁰³Pd放射性支架显著减少了肌肉形成面积（78.3%，P<0.01)，狭窄面积百分比[对照支架：(60.0±21.6)%，¹⁰³Pd放射性支架：(31.6±9.5)%]。此外，治疗组胆管管腔面积明显大于对照组（P<0.01).

¹⁰³放射性剂量为12.58 × 10的Pd放射性支架⁷Bq可有效减少球囊过度拉伸损伤后的肌肉形成和胆管重塑。中国医学杂志2004；117（1）：104-106

鼻咽癌（NPC）表现出高度侵袭性和转移性特征。本研究旨在探讨巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)诱导的鼻咽癌细胞侵袭体外以及对基质金属蛋白酶（MMPs）和白细胞介素-8（IL-8）的影响，研究鼻咽癌早期肿瘤细胞侵袭和转移的机制。

本研究采用两种鼻咽癌细胞系CNE-1和CNE-2。通过微侵袭试验评估NPC细胞的侵袭和迁移。通过流式细胞术在有或没有MIF处理的两种细胞系中检测MMP2或MMP9阳性细胞表达百分比的变化。Western blotting和RT-PCR检测MMP2和MMP9的蛋白和mRNA表达。用ELISA法比较NPC细胞分泌的IL-8浓度与不同处理的细胞进行比较。

用MIF处理48小时后，通过8 μ m滤膜的CNE-1和CNE-2细胞数增加。与未经MIF处理的NPC细胞相比，CNE-1（P=0.005）和CNE-2细胞（P=0.001).两组CNE-1组MMP9阳性细胞百分比均显著升高[由(28.5±2.5)%升高至(82.4±3.5)%,P=0.001]和CNE-2[从(32.8±3.5)%到(86.1±1.6)%，P=0.002].MMP9蛋白表达的相对强度在两种细胞系中也增强(CNE-1：从83.1±6.0增加到242.9±22.9，P=0.002;CNE-2：84.4±4.3至278.9±29.7，P=0.003).相应地，在两种细胞系中均可显著检测到增加的MMP9 mRNA表达水平。处理后CNE-2上清液中IL-8浓度较高[(1201.8±593.3)pg/ml]。也显著高于未经处理的CNE-2上清液（P=0.026).然而，CNE-1中IL-8的浓度变化没有显著差异（P=0.581)，而IL-8 mRNA水平仅在CNE-2中升高。

MIF可诱导NPC细胞系的有效侵袭在体外，鼻咽癌浸润淋巴细胞可能是肿瘤细胞侵袭和转移的原因。这些浸润淋巴细胞分泌的MIF细胞因子可能通过间接途径诱导MMP9和IL-8参与鼻咽癌早期侵袭和转移。中国医学杂志2004；117（1）：107-114

国内建立的多发性骨髓瘤（MM）细胞株仅3株。在本研究中，我们成功地建立了一种新的MM细胞系，并分析了其生物学特性。

在培养基中培养从晚期MM(λ轻链型)患者的外周血(PB)和骨髓(BM)中分离的单核细胞。通过Wright-Giemsa染色和细胞化学染色分析细胞形态，通过流式细胞术进行免疫表型分析，通过染色体RHG显带技术进行细胞遗传学分析。采用定量荧光聚合酶链反应（PCR）检测EB病毒（EBV）DNA。

建立的细胞系可以在饲养细胞或条件培养基存在下存活和增殖。细胞分泌λ轻链并且对EBV呈阴性。Wright-Giemsa染色显示典型的浆母细胞或浆细胞形态。细胞的细胞化学染色显示以下反应模式：酸性磷酸酶阳性，髓过氧化物酶阴性。细胞的免疫谱与MM细胞一致：CD阳性₁₀, CD₂₈, CD₃₈, CD₁₃₈, CD₅₆, CD_49d, CD₄₄, CD₅₄和CD₅₈，CD阴性₁₉, CD₄₀, CD₉₅, CD_95L, CD₃₄, CD₂和CD₅细胞遗传学分析显示i(1q+)、8q+、13q+、i(17q)、i(18q)和+M的复杂染色体异常。来自PB和BM的细胞在形态学、免疫表型和细胞遗传学方面没有差异。

建立了分泌λ轻链的MM细胞系CZ-1。来自PB和BM的细胞具有相同的生物学特性。中国医学杂志2004；117（1）：115-119

新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)是由肺表面活性物质(PS)缺乏引起的，是新生儿死亡的主要原因之一。本研究旨在评估羊膜内给予肺表面活性物质预防NRDS的有效性和安全性。

将45例早产且胎儿肺未成熟的孕妇分为两组。15名女性（研究组）接受了一剂肺表面活性物质注射到羊膜腔中，并在几小时内递送。对照组30例女性羊膜腔内未注射任何物质。分析新生儿窒息比例、NRDS、死亡率和住院时间，以确定两组之间是否有任何差异。

两组新生儿窒息情况无显著差异。泡沫试验显示研究组新生儿比例高于对照组(56.3%vs 13.3%,P<0.05)肺成熟度。与分娩前经羊膜腔给予PS的新生儿(1/16, 6.3%)相比，对照组新生儿(11/30, 32.3%)发生NRDS的比例更高，P<0.05).研究组新生儿住院天数比对照组少近10天[(32.4±7.6)天vs(42.0±15.7)天，P<0.05]，但两组死亡率差异无统计学意义。

羊膜腔内给予肺表面活性物质可显著降低早产儿NRDS的比例和住院时间。这种方法是否能降低早产儿的死亡率还需要进一步评估。羊膜内施用肺表面活性物质为预防NRDS提供了额外的有效手段。中国医学杂志2004；117（1）：120-124

严重急性呼吸综合征（SARS）既是一种非典型肺炎，又是一种有效的医院传播。然而，病原体的传染性和毒力是否会在整个连续传播过程中发生变化仍然未知。本研究旨在比较由超级传播者引发的多代SARS患者的临床特征和管理方案。

回顾性研究了84例医院暴发的流行病学相关SARS患者的临床资料。所有可以注意到明确传播世代的患者都直接或间接接触了指标患者，并且流行病在短时间内通过多代病例连续传播。

本组女性66例，男性18例，平均年龄(29.2±10.3)岁；其中96.4%为医护人员。详细的接触者追踪确定了35例（41.7%）第一代病例，34例（40.5%）第二代病例和15例（17.8%）第三代病例。多代传播在年龄、性别、潜伏期和住院时间方面未发现统计学差异。随着传播世代的增加，初始体温降低，干咳病例数减少。发热峰值温度和持续时间、其他伴随症状、白细胞减少无统计学差异；然而，从最初的肺浸润到放射学恢复的时间缩短了（P<0.05).在多个传播世代中，受累肺野的最大数量、从发热到发生肺浸润的持续时间以及从初始肺浸润到其峰值的时间没有发现差异（P>0.05).在不同传播世代之间，氧疗模式和开出的抗生素种类没有统计学差异（P>0.05);然而，与晚期传播世代一样，服用甲泼尼龙、人γ-球蛋白、干扰素-a、抗病毒药物（口服利巴韦林或奥司他韦）的病例数增加了（P<0.05）和从入院到开始这些药物治疗的时间缩短（P<0.05).

没有证据表明SARS感染会以一种方式进化或传播，使其在短时间内的连续传播中变得不那么强大。中国医学杂志2004；117（1）：14-18

慢性缺氧可引起肺动脉高压和肺心病，死亡率高。蛋白激酶C（PKC）信号转导通路在慢性肺动脉高压中起重要作用。因此，有必要研究PKC对电压门控钾的影响⁺）慢性缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞中的通道。

雄性Wistar大鼠随机分为对照组（A组）和慢性缺氧组（B组）。B组每天缺氧[氧浓度(10±1)%]8小时，连续四周。使用急性酶分离法获得单个肺动脉平滑肌细胞。采用常规全细胞膜片钳技术记录静息膜电位、膜电容和电压门控K⁺电流。电压门控K的变化⁺比较两组应用PKC激动剂对甲氧基安非他明（PMA）（500 nmol/L）和PKC抑制剂PMA加葡萄糖、果糖和木糖醇（GFX）的碳水化合物混合物（30 nmol/L）前后的电流。

B组静息膜电位显著低于A组：-(29.0±4.8)mV(n=18)vs-(42.5±4.6)mV(n=35)(P<0.01).但两组间膜电容无变化：(17.9±4.6)pF(n=40)vs(19.7±5.8)pF(n=31)(P>0.05).电压门控K⁺在A组中，PMA显著抑制电流，这种作用被GFX逆转。然而，电压门控K⁺B组的电流不受PMA的影响。

静息膜电位和电压门控K⁺慢性缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞电流显著降低。PKC似乎对电压门控K有不同的影响⁺不同条件下肺动脉平滑肌细胞的电流。中国医学杂志2004；117（1）：19-23

哮喘在临床上与嗜酸性粒细胞炎症程度相关。哮喘气道炎症是如何受到影响的仍知之甚少。因此骨髓来源的造血细胞表达CD的影响₃₄（CD₃₄⁺）和白细胞介素-5（IL-5）受体信使RNA（IL-5R mRNA⁺）对哮喘气道炎症的影响。

将Balb/c小鼠致敏并用卵清蛋白(OVA)攻击以建立哮喘模型，而将对照小鼠致敏并暴露于无菌盐水。在用OVA和无菌盐水攻击后，在不同时间点杀死小鼠。然后，制备支气管肺泡灌洗液(BALF)、外周血(PB)和骨髓(BM)。PB中嗜酸性粒细胞（PB_EOS）和BALF（BALF_EOS)，计数BALF、PB和BM中的有核细胞。通过流式细胞术，CD的百分比₃₄⁺PB、BM中有核细胞与CD的相对数量₃₄⁺铅中的细胞（铅_CD34⁺）和BM（BM_CD34⁺）进行了计算。采用免疫细胞化学和原位杂交技术研究CD共定位表达的造血细胞₃₄和BM中的IL-5R mRNA_CD34⁺_{IL-5R mRNA}⁺).BM的百分比_CD34⁺_{IL-5R mRNA}⁺到BM_CD34⁺是计算出来的。

用OVA、BALF攻击后12小时_EOS和铅_EOS实验组显著高于对照组（P<0.01).OVA攻击后24小时，BALF_EOS,铅_EOS和BM_CD34⁺_{IL-5R mRNA}⁺升高最大，与对照组有显著差异（P<0.01).OVA激发后48小时，BALF_EOS和BM_CD34⁺_{IL-5R mRNA}+仍显著高于对照组（P<0.01).其他标记物恢复正常。在60只小鼠中，BM_CD34⁺_{IL-5R mRNA}⁺与BAL密切相关_EOS,铅_EOS, BM_CD34⁺和BM_CD34⁺(%)(P<0.05).

CD的数量₃₄⁺哮喘模型小鼠BM中表达IL-5R mRNA的细胞增加，这有利于嗜酸性粒细胞生成和嗜酸性气道炎症。肺和骨髓之间存在信号通路，参与哮喘气道炎症的启动和维持。中国医学杂志2004；117（1）：24-29

气道平滑肌增生在哮喘气道重塑中起重要作用。但对哮喘气道平滑肌细胞增殖的细胞内信号通路知之甚少。本文的目的是研究蛋白激酶C（PKC）及其α亚型对被动致敏人气道平滑肌细胞（HASMCs）增殖的贡献。

用来自哮喘患者的10%血清被动致敏培养的HASMCs，将非哮喘人血清处理的HASMCs用作对照。通过细胞周期分析、3-（4, 5-二甲基-2-噻唑基）-2, 5-二苯基溴化四唑（MTT）比色法和增殖细胞核抗原（PCNA）免疫荧光染色检测HASMCs的增殖情况。还通过相同的方法检测PKC激动剂佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯(PMA)和PKC抑制剂RO-31-8220对暴露于人哮喘血清和非哮喘对照血清的HASMCs增殖的影响。采用免疫荧光染色和逆转录—聚合酶链反应检测被动致敏HASMCs中PKC-a的蛋白和mRNA表达。

哮喘血清被动致敏HASMCs的S期百分率、吸光度（A值）和PCNA蛋白表达阳性百分率分别为(16.30±2.68)%、0.430±0.060和(63.4±7.4)%，与对照血清处理的HASMCs相比显著增加[分别为(10.01±1.38)%、0.328±0.034和(37.2±4.8)%](P<0.05).哮喘血清被动致敏HASMCs后再用PMA处理，其S期百分率、A值和PCNA蛋白表达阳性率分别为(20.33±3.39)%、0.542±0.065和(76.0±8.7)%，与未用PMA处理的哮喘血清致敏HASMCs相比显著升高(P<0.05).哮喘血清被动致敏的HASMCs经RO-31-8220处理后，其S期百分率、A值和PCNA蛋白表达阳性百分率分别为(11.21±1.56)%、0.331±0.047和(38.8±6.0)%，与未使用RO-31-8220的哮喘血清致敏的HASMCs相比显著降低(P<0.05).被动致敏hASMCs PKC-A mRNA的A值相对比值和PKC-a蛋白表达阳性百分比分别为1.23±0.10和(61.1±9.4)%，与对照血清处理的HASMCs相比显著升高[分别为1.05±0.09和(34.9±6.7)%]（P<0.05).

用人哮喘血清被动致敏的HASMCs增殖增加。PKC及其α亚型可能有助于这种增殖。中国医学杂志2004；117（1）：30-36

人尾加压素Ⅱ（UⅡ）是迄今为止发现的最有效的哺乳动物血管收缩剂。我们先前的研究表明，UⅡ是气道平滑肌细胞（ASMC）的一种有效的有丝分裂原，可诱导ASMC增殖，并呈剂量依赖性。UⅡ促有丝分裂作用的信号转导途径尚待阐明。本研究旨在探讨UⅡ诱导ASMC增殖的信号转导途径。

在原代培养的大鼠ASMCs中，测定UⅡ诱导的蛋白激酶C(PKC)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和钙调磷酸酶(CaN)的活性。通过加入CaN特异性抑制剂环孢素A（CsA）研究CaN对PKC和MAPK的影响。使用H₇和PD₉₈₀₅₉、PKC和MAPK的抑制剂，研究PKC和MAPK对CaN的影响。用Fura-2/AM测定UⅡ诱导的胞浆游离钙浓度。

UⅡ10^-7mol/L刺激ASMC PKC和MAPK活性分别提高44%和24%（P<0.01)，孵育20分钟后。它以时间依赖性方式增加CaN活性，24小时是对照组的1.68倍（P<0.01).它促进胞浆游离钙浓度增加18%（P<0.01).CsA 10^-6mol/L和H₇50 μ mol/L抑制UⅡ刺激的CaN活性45%（P<0.01）和21%（P<0.05），而PD₉₈₀₅₉50 μ mol/L对CaN活性无影响（P>0.05).CsA 10^-6mol/L抑制UⅡ刺激的PKC活性14%（P<0.05），而对MAPK活性没有影响（P>0.05).

UⅡ增加胞浆游离钙浓度，激活PKC、MAPK和CaN。PKC和CaN之间的信号转导通路存在串扰。中国医学杂志2004；117（1）：37-41

SARS-CoV是严重急性呼吸综合征（SARS）的病原体，其与中国广东、香港和北京以及世界其他地区的SARS爆发有关。来自人类的SARS-CoV已经显示出一些变异，但其来源仍然未知。本文对SARS-CoV的基因分型和系统发育进行了分析和报道。

从GenBank收集了44株SARS-CoV毒株的完整或部分基因组。采用分子生物学、生物信息学和流行病学方法对这些SARS-CoV毒株进行基因型、单核苷酸多态性和系统发育分析。

在33个病毒全基因组中有188个点突变，突变计数增加到297个。在188个突变两次以上的基因座中的36个中进行了进一步分析。所有36个突变位点都出现在编码序列中，22个位点是非同义的。复制酶1 AB、刺突糖蛋白S2结构域和核衣壳蛋白的基因突变率较低(0.079%~0.103%)。刺突糖蛋白S1结构域有4个突变位点。ORF1O基因突变率最高(3.333%)，在该小结构域(120 bp)中有4个突变位点，4个位点中有3个与缺失突变相关。通过生物信息学处理和分析，基因组7个位点（T：T：A：G：T：C：T/C：G：G：A：C：T：C）的核苷酸可以将SARS-CoV分为两种类型。根据这7个突变位点，将GenBank中的40株SARS-CoV分为T：T：A：G：T：C：T和C：G：G：A：C：T：C两种基因型，分别命名为SARS-CoV野新基因型和小红基因型。这两种基因型可以进一步分为一些亚基因型。这些基因型也可以通过突变、刺突糖蛋白基因和全基因组序列三级44个基因座的系统发育树来批准。与SARS-CoV野新基因型和小红基因型的不同毒株相比，野新基因型GD01毒株与动物SARS-CoV样病毒的亲缘关系更密切。

上述结果提示SARS-CoV对宿主免疫应激反应并发生变异，为临床病理、疫苗研制和流行病学调查提供了分子生物学线索、信息和证据。中国医学杂志2004；117（1）：42-48

总结目前对抗炎和促炎机制在动脉粥样硬化和急性冠状动脉综合征发展中的作用的认识，并假设炎症应激是触发急性冠状动脉综合征的最重要因素的新概念。此外，阐明了炎症应激的标志物和阻断相关途径的方法。

使用关键词“炎症和心血管疾病”进行文献检索（MEDLINE 1997至2002）。还审查了相关的书籍章节。

选择了关于炎症和急性冠脉综合征的控制良好、前瞻性的标志性研究和综述文章。

根据我们自己的临床和基础研究，从所选文章中提取和解释了为阐明炎症和急性冠状动脉综合征机制提供了坚实证据的数据和结论。

炎症与动脉粥样硬化和急性冠状动脉综合征密切相关。全身或血管壁中存在的慢性和长期炎症应激可引发急性冠状动脉综合征。

炎症应激在急性冠脉综合征的发病过程中起着重要作用。可以调节促炎和抗炎过程的平衡并减轻炎症应激的药物，如血管紧张素转换酶（ACE）抑制剂/血管紧张素II受体阻滞剂、他汀类药物和细胞因子拮抗剂，当与常规治疗（糖蛋白II b/III a受体拮抗剂、机械干预策略等）一起使用时，可能在急性冠脉综合征的预防和治疗中发挥积极作用。中国医学杂志2004；117（1）：133-139