2006年 · 第42卷第02期

视网膜退行性变性疾病包括多种眼科常见病(如视网膜色素变性、年龄相关性黄斑变性等),严重影响患者的视力.视网膜细胞的凋亡是此类疾病的重要病理特征.近年来在防止视网膜细胞凋亡方面已经取得了一些可喜的进展,但如何从抗凋亡的角度来探索预防和治疗视网膜退行性变性疾病的新途径,仍是今后眼科应用基础研究的重点。

青光眼是全球第二位致盲眼病,其病因尚未完全明了,目前的有效治疗是降低眼压,因眼压是导致青光眼患者视野丧失的最危险因素,一旦确诊需长期治疗。

目的 探讨视神经损伤后Bcl-2高表达小鼠再生的视神经如何能长入脑内正常的靶组织.方法对生后3 d(P3)的C57Bl/6J野生小鼠和Bcl-2转基因小鼠进行左眼视神经夹闭损伤,立刻摘除对侧眼球,4 d后处死小鼠,做视神经和脑组织切片,评估视神经的再生.视神经损伤后玻璃体内注射一种顺行性标记物--带有荧光的霍乱毒素B(CTB-F),来标记视网膜神经节细胞轴突,并在视神经切片上用抗生长相关蛋白43抗体免疫荧光染色显示再生的神经轴突.结果 C57Bl/6J小鼠视神经损伤后不能再生,而Bcl-2转基因小鼠的视神经活跃地再生了相当长的距离,但再生的视神经轴突不能进入两侧正常的视路,而长入前脑白质.结论生后3 d的Bcl-2转基因小鼠一侧视神经损伤,同时摘除对侧眼球,去除正常视路的引导后,视神经轴突仍能再生,并可长入脑内,但再生的视神经轴突失去了视路中的引导,不能长入双侧中脑内的靶组织,而是在前脑形成异位神经分布。

目的 探讨流式细胞分析技术、免疫荧光及3H-Thymidine分析对大鼠胚胎视网膜前体细胞性质及其体外增殖进行鉴定的可行性.方法来源于19 d胚胎大鼠视网膜的视网膜前体细胞,使用流式细胞分析及免疫荧光技术从数量及形态上对细胞性质进行鉴定.采用无血清培养基体外培养,通过3H-Thymidine分析、形态学观察及统计学分析,研究细胞增殖情况.结果从胚胎大鼠全层视网膜分离出的原代视网膜前体细胞,流式细胞分析结果显示:培养0 d时,22.23%的细胞神经上皮干细胞蛋白(Nestin)呈阳性表达,16.04%的细胞 Sox-2呈阳性表达,19.66%的细胞钙结合蛋白呈阳性表达,其余终末视网膜细胞标记物(胶质纤维酸性蛋白、CD90、视紫红质、C反应蛋白、突触前膜列阵蛋白)均呈极微量阳性或阴性.免疫荧光结果显示大部分细胞及细胞球(>90%) Nestin呈阳性表达.培养6 d后,流式细胞分析显示43.36%的细胞Nestin阳性,免疫荧光显示Nestin及胶质纤维酸性蛋白呈阳性.连续4 d 3H-Thymidine分析及形态学观察、统计学分析原代视网膜前体细胞初期增殖良好.结论流式细胞分析、免疫荧光及3H-Thymidine等免疫学技术可很好的对视网膜前体细胞性质及其增殖情况进行鉴定.大鼠胚胎原代视网膜前体细胞表现出神经干细胞的特性,根据检测手段不同,阳性结果不同,其原代视网膜前体细胞体外培养初期增殖良好。

目的 评价脂质体介导的内皮抑素(ES)基因转移抑制缺氧诱导的小鼠视网膜新生血管的效果.探讨基因转移抑制视网膜新生血管的可行性.方法制备阳离子脂质体及PCDNA3-ES复合物.选1周龄C57Bl/6N小鼠置于氧浓度为(75±2)%的氧箱中5 d.回到正常环境中诱导视网膜新生血管模型.在小鼠离开氧箱的当日,向ES注射组鼠玻璃体腔注射2 μl脂质体PCDNA3-ES复合物;载体对照组注射等量脂质体空白载体复合物;空白对照组小鼠注射等量PBS.采用ES抗体免疫组化方法检测ES蛋白在视网膜的表达;回到正常环境中后5 d,采用荧光标记的右旋糖酐血管灌注下视网膜铺片方法观察视网膜新生血管的分布;组织学切片观察比较突破视网膜内界膜的血管内皮细胞数量;透射电镜观察ES转移对视网膜超微结构的影响.结果免疫组化检查发现ES 注射组小鼠玻璃体腔注射ES后24 h 开始有ES表达,主要位于视网膜神经纤维层细胞中,维持至少2周仍见表达;视网膜铺片观察可见空白对照组在无灌注区边缘均可见新生血管芽及荧光渗漏.ES注射组见新生血管芽明显减少;组织学检查ES注射组较其他两组突破视网膜内界膜的细胞数量减少,差异有统计学意义;ES转移后电镜下视网膜各层超微结构未见明显改变.结论采用玻璃体腔注射方法行脂质体介导的内皮抑素基因转移可以一定程度抑制缺氧诱导的小鼠视网膜新生血管生长,对视网膜无明显的毒副作用.应进一步优化转移条件以提高治疗效果。

目的 研究发状分裂相关增强子-1(HESR-1)基因在血管形成和维持中的作用.方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),构建PcDNA3.1+HESR-1重组质粒、RNA干扰用pSIREN+HESR-1质粒.脂质体将这两个质粒分别转染到HUVEC,并以转染空白质粒体作为对照.在HUVEC内分别高表达HESR-1、下调HESR-1的表达,采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法检测HUVEC内HESR-1不同表达状态时血管内皮生长因子第2受体(KDR)、激活素受体样激酶1(ALK-1)、血管生成因子1(Ang-1)表达的改变.结果在HUVEC内高表达HESR-1基因能下调KDR的表达,上调ALK-1、Ang-1的表达;当抑制HESR-1基因,KDR的表达上调,ALK-1、Ang-1的表达下调.结论 HESR-1基因可调控HUVEC中KDR、ALK-1、Ang-1的表达,在血管的形成和维持中发挥关键作用。

目的 研究培养人视网膜色素上皮细胞(RPE)受机械牵拉力后细胞骨架的变化.方法将胶原包被的磁珠悬液加入培养的人RPE细胞后孵育,洗去未结合的磁珠.在磁场垂直方向力作用下0、4、8、12和24 h,以及加入细胞松弛素D (0.05 mmol/L, 25 min)预处理后,用免疫荧光双标染色法着染细胞中的肌动蛋白和波形蛋白,并用激光共聚焦显微镜观察.结果机械牵拉作用4 h后,人RPE细胞的形态和微丝的极性发生改变.肌动蛋白微丝的排列与受力方向一致.细胞骨架微丝表达主要在细胞核周及磁珠聚集处周围.而加入细胞松弛素D预处理的细胞,在8 h时发生以上变化.结论机械牵拉可引起人RPE细胞骨架分布的改变,使其表现出肌细胞的某些生物学特征,这对细胞的移行和增生可能有促进作用。

目的 以遗传性视网膜变性RCS大鼠为模型,探讨视网膜下间隙移植表达睫状神经营养因子(CNTF)的人胚肺(HFL)成纤维细胞治疗视网膜变性的可行性.方法通过脂质体将编码CNTF的表达质粒转入HFL成纤维细胞、MTX及ELISA筛选高水平表达CNTF的细胞克隆.手术显微镜直视下经角膜缘后1 mm 注射5 μl 含1×105个高水平表达CNTF的HFL成纤维细胞至4～5周龄RCS大鼠右眼视网膜下间隙,左眼不手术或注射PBS作为对照.分别于移植术后2、4、6、8、10、12及15周随机取1只鼠摘除眼球作光镜观察,随机取2只鼠摘除眼球作电镜观察.结果稳定转染CNTF的HFL成纤维细胞能高水平表达CNTF (91 046.15 pg/ml),7只经光镜观察的移植眼中的4只,其视网膜外颗粒层明显较对照眼厚,保存的光感受器数量明显较对照眼多(P≤0.002).14只经电镜观察的移植眼中的10只,视网膜外颗粒层光感受器凋亡明显较对照眼少.在光感受器与视网膜色素上皮间堆积的盘膜碎片亦较少.宿主视网膜色素上皮细胞的形态保存较好,并可见吞噬小体.结论经过CNTF基因修饰的HFL成纤维细胞视网膜下间隙移植能够延缓RCS大鼠视网膜光感受器变性。

目的 探讨高糖条件下培养的牛视网膜微血管内皮细胞、周细胞线粒体活性氧产生量的变化及导致此种变化的原因和所致影响.方法采用选择性培养方法培养牛视网膜微血管内皮细胞、周细胞,通过共聚焦显微镜检测不同葡萄糖浓度下内皮细胞、周细胞线粒体活性氧产生量的变化,同时采用流式细胞仪检测线粒体膜电位、细胞死亡率的变化,RT-PCR检测培养细胞锰超氧化物歧化酶及解藕联蛋白(UCP)1、2、3表达情况和不同葡萄糖浓度下的变化.结果 (1)随着培养基中葡萄糖浓度的增加,内皮细胞、周细胞线粒体活性氧的产生呈增多趋势.(2)随着培养基中葡萄糖浓度的增加,内皮细胞线粒体膜电位逐渐升高,细胞死亡率逐渐增多,而周细胞则无此变化趋势.(3)培养的视网膜微血管内皮细胞、周细胞中,通过RT-PCR检测到UCP1、2 mRNA,未检测到UCP3.UCP1、2及锰超氧化物歧化酶表达量随培养基中葡萄糖浓度的变化而变化.结论高糖可以诱导培养的视网膜微血管内皮细胞、周细胞线粒体活性氧产生增多;内皮细胞活性氧产生的增多与线粒体膜电位增高间存在反馈调节;高糖条件下UCP1、2及锰超氧化物歧化酶表达量代偿性增多调节活性氧的产生,但是当糖浓度达到一定程度时,代偿机制消失;内皮细胞、周细胞在高糖条件下表现出的不同特征,说明其在糖尿病性视网膜病变的发生中起着不同的作用。

目的 探讨间歇性外斜视患者手术前后近零视差、交叉视差及非交叉视差的临床变化规律.方法将100例间歇性外斜视患者分为4组,使用立体视觉检查图检测手术前后的近零视差、交叉视差及非交叉视差,使用同视机测定远融合范围和远立体视,分析、比较检查结果.结果在全部患者中,手术前后均无近零视差仅与非交叉视差共存者和交叉视差仅与非交叉视差共存者,也无交叉视差、非交叉视差独立存在者.4组患者术后近零视差、交叉视差、非交叉视差、远融合范围及远立体视均较术前明显改善,差异有统计学意义(P<0.01).手术前后远融合范围4组患者比较,差异均无统计学意义(P>0.05).术后远立体视4组患者比较,差异有统计学意义(P<0.01),1组和2组患者远立体视的重建均优于3组和4组.结论 (1)间歇性外斜视患者近零视差立体视锐度、交叉视差和非交叉视差立体感知度不健全,损伤次序依次为非交叉视差、交叉视差、近零视差,重建顺序与之相反.(2)非交叉视差立体感知度严重受损或消失,也应视为间歇性外斜视的手术指征,此时应立即进行手术治疗,以利双眼视功能的重建。

目的 探讨有晶状体眼前房型人工晶状体(PAC-IOL)植入术矫正超高度近视眼的有效性、安全性及可预测性.方法 15例(29只眼)超高度近视眼患者植入Phakic 6H2型PAC-IOL.术后观察患者的视力、屈光度数、眼压、角膜内皮细胞计数、晶状体位置、对比敏感度、眩光敏感度、手术并发症及视觉不良症状.结果术后3个月时患者裸眼视力≥0.5者占79.3%(23/29),6个月时占82.6%(24/29);术后3个月时患者最佳矫正视力≥0.8者占69.0 %(20/29),6个月时占69.0%(20/29),裸眼视力及最佳矫正视力均较术前明显提高,差异有统计学意义(P<0.05).术后3个月时患者裸眼视力较术前最佳矫正视力提高两行及两行以上者占70.0%(20/29),6个月时占72.4%(21/29).术后3、6个月时屈光度中位数均为-1.00D,较术前均明显减少,差异有统计学意义(P<0.05).患者术后3、6个月时眼压、角膜内皮细胞计数与术前相比,3个月与6个月相比,差异均无统计学意义(P>0.05).PAC-IOL与角膜内皮和晶状体均保持了有效的安全距离,且弹性襻均位于前房角.术后6个月时,各频段对比敏感度和眩光敏感度较术前均明显提高,差异有统计学意义(P<0.05).术后3个月时3只眼,6个月时2只眼均可见PAC-IOL表面炎性反应物沉积;1只眼瞳孔呈轻度椭圆形;8只眼发生PAC-IOL旋转.3例(5只眼)主诉夜间出现眩光症状,其他患者均无明显不适,满意程度较高.结论 PAC-IOL植入术矫正超高度近视眼具有良好的有效性、安全性及可预测性,是补充角膜屈光手术不足的有效眼内屈光手术,但其远期效果有待进一步观察。

目的 探讨宽带巩膜环扎修复视网膜脱离手术对眼球、玻璃体腔容积和三维径线的影响.方法 2002年7月至2003年12月间,对行巩膜宽带环扎术并手术成功的26例孔源性视网膜脱离患者,采用眼科超声仪、角膜地形图及磁共振成像(MRI)技术检测眼球相关指标.其中对13例患者(13只眼)分别于术前、术后1周用MRI连续薄层快速扫描技术和层面叠加方法测量眼球、玻璃体腔的尺寸和容积.结果 13只视网膜脱离眼经宽带巩膜环扎术复位后,用MRI检测,显示眼球容积较术前减小(1.72±0.49) ml(t＝12.68,P<0.01),玻璃体腔容积较术前减小(1.73±0.46) ml(t=20.13,P<0.01);前房容积增加(0.01±0.04) ml(t=0.51,P=0.62);环扎带凹陷最深处的水平径、垂直径较术前赤道后2.5 mm预环扎部位分别减小(7.84±1.86) mm(t=15.20,P<0.01)、(7.70±2.79) mm(t=9.96,P<0.01).环扎带凹陷最深处的周长较术前显著减小(t=13.18,P<0.01),缩短量为(24.42±6.68) mm,缩短比例为(33.11±8.69)%.环扎嵴平均高度为(3.80±0.58) mm;平均嵴宽:颞侧(3.82±0.60) mm,鼻侧(3.51±0.76) mm.术后眼球前后径平均仅缩短(0.22±0.79) mm(t=1.01,P=0.33).结论应用MRI生物学测量技术,较直观地测量和分析巩膜环扎术对眼球玻璃体腔容积和三维径线的影响.其检测指标可为巩膜环扎术修复视网膜脱离的最佳定量解剖复位和视功能恢复的相关性研究提供参考数据。

为了尽快地反映我国眼科学的创新性科研成果和临床经验，本刊已于2002年开辟了发表优秀学术论文的“快速通道”，简化了论文从审查到正式发表的程序，缩短了发表周期。鉴于目前申请“快速通道”的作者逐渐增多，本刊编委会在前段时间运作的基础上，补充和完善了申请进入“快速通道”的具体条件，并再次重申“快速通道”的有关规定，以使具有创新性内容的学术论文尽早、尽快发表。

我国著作权法公布以来，已得到社会各界的广泛重视，作为医学科技期刊必须不折不扣地执行著作权法。为此将本刊对作者署名和志谢的有关要求重申如下。

1.统计研究设计：应交代统计研究设计的名称和主要做法。如调查设计（分为前瞻性、回顾性或横断面调查研究）；实验设计（应交代具体的设计类型，如自身配对设计、成组设计、交叉设计、析因设计、正交设计等）；临床试验设计（应交代属于第几期临床试验，采用了何种盲法措施等）。主要做法应围绕4个基本原则（随机、对照、重复、均衡）概要说明，尤其要交代如何控制重要非试验因素的干扰和影响。

《实用眼科诊断》是一本中文眼科大型参考书，包含很多在目前中外书籍中难以找到的资料，为我国眼科与国际接轨铺平道路。作者施殿雄曾在上海医学院和重庆医学院眼科工作了近30年后，又在美国wayne State University医学院Kresge眼科研究所工作20年，根据多年临床和教学经验撰写此书。

经中国科学技术协会批准，由上海市医学会眼科学分会、华东六省医学会眼科学分会、复旦大学附属眼耳鼻喉科医院、中华医学会眼科学分会眼视光学组及中国国际科技会议中心共同主办，复旦大学附属眼耳鼻喉科医院、温州医学院眼视光学院及中国国际科技会议中心共同承办的“第六届国际（上海）眼科学学术会议”和“第六届国际（上海）视光学学术会议”，将于2006年4月14～17日在上海展览中心举行。

特发性黄斑裂孔手术治疗目的是封闭裂孔,提高患者视力.尽管尚存争议,但目前大多数学者认为对视网膜内界膜(internal limiting membrane,ILM)的剥离提高了黄斑裂孔的闭合率及患者预后视力.但自从Morris等[1]于1994年开始将ILM剥离技术应用于黄斑裂孔手术治疗以来,完整﹑彻底地对其进行剥除一直是一项难度很大的操作技术,困难主要在于ILM不易于分辨,边缘不易看清,易于损伤视网膜其他组织,剥离范围也不容易确定。

临床上对于一只眼为角膜白斑的患者,可将其对侧失明眼的透明角膜作为供体与白斑角膜进行交换移植以恢复视力.通常是在钻取失明眼透明角膜后用异体角膜植片临时缝合于植孔,以防止眼内容溢出.但是,当缺乏异体角膜时,则自体角膜交换移植术受到限制.自1999年8月起,我们采用塑胶片制成的临时人工角膜替代异体角膜植片,取得较好的临床疗效。

患儿女性,2004年6月25日出生,胎龄40+6周,出生体重3600 g.因父母发现患儿"双眼视物不见1个月",于2004年11月1日到我院眼科就诊.患儿出生后即出现全身皮肤(除面部外)斑片状脱皮和暗红色丘疹,右上臂数枚脓疱疮.出生后2 d即见前胸、腹部及四肢出现散在水疱,逐渐发展为网状皮肤色素斑。

患者男性,41岁,激光工程师,因激光束灼伤左眼,于2004年11月25日就诊于我科.患者于入院前1 h,因调试高能量的掺钕钇铝石榴石激光(neodymium-yttrium,aluminum,garnet;Nd:YAG)机时,未戴防护目镜,被黑色相纸表面反射的激光束灼伤左眼,当时注视距离20 cm,激光能量400 mJ,反射光束的能量约为总输出能量的1%,光斑直径8 mm,波长1064 nm,频率1 Hz,脉宽10 ns。

患者女性,42岁.因左眼发现肿物伴眼痛、头痛、视力下降2周,于2004年12月15日入住我院眼科.2周前,无诱因患者出现左眼胀痛,伴头痛、呕吐,洗脸时照镜发现瞳孔边有一黑色小肿物,表面粗糟,长大迅速。

眼眶非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma,NHL)组织学类型多为B细胞淋巴瘤.我们现报道2例临床表现酷似蜂窝组织炎的眼眶T细胞淋巴瘤。

患者男性,47岁.因左眼畏光、流泪、视物不清2个月余,于1998年1月4日来我院眼科就诊.体检:全身检查未见异常,患者无咳嗽和胸部异常体征.眼部检查:右眼裸眼视力1.2,左眼0.2;左眼球结膜睫状充血,角膜清亮,房水闪光(+),可见前房内棕色浮游颗粒,玻璃体内可见尘埃状混浊,诊断为"左眼葡萄膜炎",给予抗菌素和糖皮质激素类药物治疗2个月余,眼部病情明显好转。

患者男性,50岁.因右眼进行性眼球突出1年,于2000年12月21日收入我院眼科.23年前患者曾在外院因右眼"眶内肿瘤"行眶内肿瘤切除术.5年前又因右眼球突出,于外院行眶内肿瘤切除术,手术过程不详,病理检查不详.患者自述无外伤史、家族中无同类疾患。