2001年 · 第114卷第07期

研究胎儿肝干细胞宫内移植是否可以建立血小板的人工杂合嵌合体，并评估其在治疗格兰兹曼血小板无力症中的潜在用途。

血小板糖蛋白（GP）II b Bak a/b（或GP II b I le843Ser）用作遗传标记。从42名因流产住院的孕妇中筛选了一名纯合子16周大的Bak a/A胎儿（作为供体）和一名纯合子16.5周大的Bak b/b胎儿（作为受体）。使用具有等位基因特异性引物的PCR和基于PCR产物的FOK I消化。制备流产供体胎肝细胞悬液，通过输注4ml胎肝细胞(22 × 10⁵）在超声可视化下进入受体脐静脉。

在妊娠终止（流产）时，移植后21天，用FOK 1酶切法检测受体GpⅡb、Bak a/b嵌合体，并用血小板RNA RT-PCR检测受体血小板RNA。

胎儿肝细胞宫内移植可能为治疗GT或其他遗传性疾病提供有效途径。中国医学杂志2001;114(7):676-679

在鼠移植物抗宿主病模型中研究阻断CD40/CD40L与人CD40-Ig融合蛋白相互作用的保护作用。

将人CD40基因细胞外区插入质粒plG1，其含有基因组人IgG1 Fc基因。将含有CD40-Fc融合基因的瞬时载体转染到COS-7细胞中。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测CD40-Ig融合蛋白。还通过将CD40-Fc融合基因连接到pcDNA3.1中并将其转染到CHO细胞中来产生组成型载体。通过蛋白A亲和层析纯化CD40-Ig。SDS-PAGE、Western blot和配体结合测定用于鉴定CD40-Ig的质量。通过静脉注射C57BL/6J(H-2)诱导小鼠急性移植物抗宿主病(GVHD)^b）脾细胞转化为亚致死照射的BALB/c（H-2^d）小鼠。评价了通过体内施用CD40-Ig对鼠移植物抗宿主病的保护作用。

如上所述构建哺乳动物表达载体pIG/40Ig和p3.1/40Ig。嵌合蛋白在COS-7和CHO细胞培养上清液中表达，并通过ELISA和Western印迹证实。SDS-PAGE显示融合蛋白具有二硫键连接的二聚体结构，以同源二聚体形式存在。纯化的CD40-Ig可与CD40L结合。CD40-Ig体内给药可预防移植物抗宿主病小鼠GVHD的发生，并显著延长移植物抗宿主病小鼠的平均存活时间。

这些结果表明CD40/CD40L相互作用在移植物抗宿主病的发病机制中起重要作用，并表明CD40-Ig在预防和治疗人类移植物抗宿主病中的临床潜力。中国医学杂志2001;114(7):685-689

目的建立逆转录病毒介导的人凝血因子Ⅷ高效表达系统。

通过将人B结构域缺失(760aa~1639aa)因子Ⅷ(FⅧ)cDNA(FⅧcDNA BD)克隆到逆转录病毒载体pLNCX中，构建了LNC-FⅧBD逆转录病毒载体。用来自最高产生病毒的PA317克隆的病毒上清液转导几种哺乳动物细胞系，包括NIH3T3、CHO、Cos-7和人肝细胞系L-02。用ELISA法和一步法分别测定细胞培养液中人FⅧ的抗原和凝血活性。RT-PCR检测FⅧBD mRNA。

人FⅧ在所有四个靶细胞中均有表达，在NIH3T3中观察到最高的FⅧ表达。分泌型FⅧ的凝血活性可达1.6 U/10⁶细胞•24小时^-1FⅧ抗原为500 ng/10⁶细胞•24小时^-1转导CHO细胞的凝血活性和抗原表达均为0.12 U/10⁶细胞•24小时^-1和62.4 ng/10⁶细胞•24小时^-1，分别。人FⅧ在Cos-7和L-02细胞中的表达相对较低。RT-PCR结果显示FⅧcDNA BD在靶细胞中转录。

所构建的逆转录病毒载体能够指导人FⅧ在多种哺乳动物细胞系中的高水平表达。它在未来血友病a的基因治疗中具有潜在的用途。中国医学杂志2001;114(7):690-693

探讨环孢素A(CsA)对再生障碍性贫血(AA)患者骨髓细胞凋亡的影响。

采用TUNEL法和FACS法分别检测25例AA患者和10例正常人骨髓单个核细胞（MNC）凋亡和Fas抗原表达。

CD的百分比₃₄⁺与正常对照组相比，AA患者的细胞显著减少（P<0.05），CD的百分比也是₃₄⁺Fas⁺细胞（P<0.05).AA患者凋亡细胞百分比高于对照组（P<0.01).患者接受CsA治疗2个月后，AA患者凋亡细胞百分比下降。

Fas参与CD的凋亡₃₄⁺AA患者的细胞。CsA可降低AA患者骨髓细胞凋亡率。中国血液学杂志2001;22：189-191

评价检测痰标本p53基因点突变的价值及其作为可疑患者肺癌早期诊断监测指标的有效性和可靠性。

痰标本采集自54例肺癌和114例肺部良性疾病。进行聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)以检测p53基因外显子5-8处的点突变，并且还对每个样品使用痰涂片。

肺癌组55.56%（30/54）的突变检出率显著高于对照组1.75%（2/114）（P<0.001).在肺癌组中，p53突变作为肺癌诊断标志物的敏感性、特异性和阳性似然比（PLR）分别为55.56%、98.25%和31.75%。涂片检出率为35.19%（19/54），PCR-SSCP-银染检出率为55.56%（30/54）。率和一致性的差异均具有统计学意义（P<0.01和P<0.05）。此外，统计分析显示p53突变与性别、吸烟习惯、组织类型和分期等临床参数之间没有显著关系，但老年患者（≥60岁）的p53突变检出率显著高于年轻患者（P=0.02).对照组1例外显子5有p53突变的病例，随访4年后证实为鳞癌。

PCR-SSCP-银染法检测痰标本中p53基因改变可作为可疑患者肺癌早期诊断的随访监测指标。中国医学杂志2001;114(7):694-697

分析急性心肌梗死（AMI）后年龄与卡托普利治疗的关系。

在一项随机试验中，822例首次AMI患者接受了常规药物治疗，包括静脉溶栓治疗和口服阿司匹林或美托洛尔，然后被随机分配到卡托普利组【剂量从最初的6.25 mg到25 mg/t.i.d，209例年轻患者（≤64岁），269例老年患者（65-75岁）】或仅接受常规治疗组（131例年轻患者，213例老年患者）。采用Kaplan-Meier法计算四组的生存率。进行多变量分析以了解多变量（包括年龄）对在医院或长期随访期间服用卡托普利的患者生存率的影响程度。

服用卡托普利患者的生存率与年龄显著相关（P<0.001).接受卡托普利治疗的老年患者的生存率确实增加了（P<0.0001），但不是年轻的（P>0.05）住院期间。随访期间，服用卡托普利患者的生存率与年龄无显著相关性（P>0.05），但老年和年轻患者均有良好的生存率（均P<0.01）和较低的心脏事件（均P<0.01）当他们服用卡托普利时。

卡托普利对AMI后住院期间的年轻患者作用较弱，但对老年患者有益。然而，年轻人和老年人在预后方面没有差异，当他们在随访期间长期服用卡托普利时，两者都有良好的生存率和较低的心脏事件。中国医学杂志2001;114(7):698-702

探讨环孢素A（CsA）联合雄激素治疗慢性再生障碍性贫血（CAA）的疗效。

通过随机对照临床试验比较雄激素单用或联合CsA治疗CAA的疗效。

雄激素联合CsA的疗效（87.9%）高于单用雄激素（57.1%）。外周血单核细胞（PBMNCs）抑制正常集落形成单位—粒细胞和巨噬细胞（CFU-GM）试验阳性和阴性患者之间的联合治疗效果显示出显著差异（P<0.005).

雄激素联合CsA治疗CAA的疗效远优于单用雄激素。患者的PBMNCs抑制正常CFU-GM生长试验可作为治疗结果的指标。联合治疗的副作用低且可耐受。中国血液学杂志2001;22：186-188

探讨幽门螺杆菌vacA基因型、cagA基因、vacA、血清cagA抗体（幽门螺杆菌)和胃十二指肠疾病。

62例vacA基因型和cagA基因幽门螺杆菌从慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者中分离的菌株通过聚合酶链反应和体外Hela细胞试验检测VacA活性。采用EIA法测定同一患者血清CagA抗体。

全部62个幽门螺杆菌菌株具有vacA基因，所有菌株的vacA基因型均为s1a/m2型。cagA基因总阳性率为56.45%;cagA基因阳性率幽门螺杆菌慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者分离菌株分别为55.56%、54.17%和63.64%（P>0.05).VacA总阳性率为37.10%;VacA阳性率幽门螺杆菌慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者分离菌株分别为33.33%、29.17%和63.64%（P>0.05).慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者CagA抗体阳性率分别为70.37%、79.17%和40.00%（P>0.05).CagA抗体总阳性率为68.85%。

cagA基因与vacA基因型无相关性幽门螺杆菌、VacA、血清CagA抗体和各种胃十二指肠疾病。中国医学杂志2001;114(7):703-706

探讨降低重型再生障碍性贫血（SAA）早期病死率、提高治疗效果的更有效方案。

在一项前瞻性随机临床试验中，对73例SAA患者给予抗淋巴细胞球蛋白/抗胸腺细胞球蛋白（ALG/ATG）和环孢素A（CsA）（序贯强化免疫抑制治疗，SIIST），联合或不联合造血生长因子（HGFs），以测试添加HGFs对患者的有效性。

SIIST联合HGFs组的缓解率显著高于单纯SIIST组（89.2%vs 63.9%），早期感染率（24.3%vs 55.3%）和死亡率（4.0%vs 16.7%）更低，血细胞减少和输血依赖持续时间更短，骨髓造血恢复更快。在SIIST中加入HGFs在所有患者中均耐受良好。GM-CSF加Epo或G-CSF加Epo两组的治疗结果无差异。

HGFs与SIIST联合使用可降低早期感染率和死亡率，从而提高SAA患者的缓解率。中国血液学杂志2001;22：182-185

为了建立有效的运动处方，对肥胖受试者的运动能力进行了调查。

在71名26-77岁的男性肥胖（体重指数：BMI≥26.4）日本人中，测定了身体成分和身体素质，如有氧运动水平、肌肉力量和柔韧性，并与年龄和性别匹配的71名临界（24.2≤BMI）进行了比较<26.4）和71名正常日本男性（19.8≤BMI<24.2).在肥胖受试者中评估了身体成分和其他参数之间的关系。

在肥胖受试者中，体重、BMI、体脂百分比、腰臀比和皮褶厚度高于临界和正常受试者。肥胖受试者的有氧运动水平和负重指数（WBI）较低。腰臀比与有氧运动水平（通气阈值摄氧量）呈负相关（r=-0.509,P<0.01）以及腰臀比和WBI之间（r=-0.315,P<0.01).

身体素质较低被认为是日本男性肥胖的普遍特征，内脏脂肪组织的积累可能会影响运动能力。中国医学杂志2001;114(7);707-710

评价allo-UCBT治疗地中海贫血儿童的疗效。

5例重型β地中海贫血患者（基因型分别为β 41-42、β 654纯合子和β 41-42/β 654、β 41-42/-28、β 654/-28双杂合子）接受allo-UCBT治疗。患者年龄3岁10个月（3^1/2-7^2/12).四个供体—受体对HLA相同，一个1基因座错配。患者接受的中位UCB有核细胞(NC)为5.5 × 10⁷/kg体重[范围(4.7-7.7)× 10⁷/kg]和CD₃₄⁺光盘₃₈^-细胞2.8 × 10⁵/kg[范围(0.6-4.5)× 10⁵/kg]和CFU-GM 1.09 × 10⁵/kg[范围(0.24-230.00)× lO⁵/kg]。预处理方案包括布沙芬16-20 mg/kg、环磷酰胺180-200 mg/kg、马抗胸腺细胞球蛋白(ATG)90 mg/kg或兔抗淋巴细胞球蛋白(ALG)25 mg/kg和美法仑90 mg/m²被添加到四个案例中。3例单用环孢素A（CsA），另2例联合用CsA和甲氨蝶呤。

4例移植，但1例排斥，并在UCBT后第60天复发地中海贫血状态。1例自体重建。在所有中性粒细胞0.5 × 10的患者中均发现重建⁹/L在第19天（14-22），血小板>20 × 10⁹/L在第37天（21-63）。2例分别发生I级和Ⅱ级急性GVHD。无人发生慢性GVHD。3例患者无疾病存活（在地中海贫血状态下存活）。中位随访时间为18个月，生存概率为100%。

同种异体UCBT可以重建造血，低频率和轻度GVHD。是治疗地中海贫血的有效方法。中国血液学杂志2001;22：182-185.

探讨鞘内注射甲氨蝶呤（MIX）联合地塞米松（DXM）治疗系统性红斑狼疮（CNS狼疮）中枢神经系统受累的疗效。

选择24例常规类固醇治疗难治的CNS狼疮患者，MTX 10-20 mg加DXM 10-20 mg治疗。密切观察其作用和副作用。

22/24（91.7%）中枢神经系统狼疮患者的症状和体征显著改善。脑脊液压力、蛋白质和WBC水平从201.5±155.4 mm H下降₂O，145.2±87.6 mg/dl和25.1±14.3/mm³至128.7±108.1 mm H₂O，60.8±38.3 mg/dl和6.8±2.1/mm³分别地。4例患者出现短暂副作用：1例下肢瘙痒感，2例头痛，1例尿失禁。

它联合MTX加DXM是治疗中枢神经系统狼疮的一种有前途的方法，值得进一步研究。中国医学杂志2001;114(7):764-766

研究老年人根面龋的病原菌。

收集实验组和对照组的菌斑样本。在选择性和非选择性培养基中培养后，分离不同的细菌。细菌总数及阳性率，紫色单胞菌集团，佩尔沃泰拉集团，链球菌突变体集团，放线菌集团及乳酸菌组进行比较。

细菌总数、链球菌突变体、放线菌和乳酸菌实验组的高于对照组。阳性率放线菌和乳酸菌实验组的显著高于对照组。

放线菌和乳酸菌是老年人根面龋的主要相关病原体。中国医学杂志2001;114(7):767-768

分析烧伤创面感染病原菌的流行趋势，探讨其影响因素。

对我院1999年1月至2000年12月收治的210例烧伤患者进行了烧伤创面细菌生态学研究，并与20世纪70年代、80年代和90年代进行了比较。

自1999年以来，G⁺与过去三十年相比，球菌显著增加（52.17%）（P<0.01）>而G^-杆菌明显下降(46.48%,P<0.01).过去两年铜绿假单胞菌的比率明显低于70年代初和90年代（P<0.01），而金黄色葡萄球菌的比例远高于20世纪80年代中期和90年代（P<0.01).耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）约占85%，明显高于20世纪80年代中期和90年代初的比率（P<0.01），有增加趋势。

我单位近两年金黄色葡萄球菌发病率增高可能与烧伤感染控制中优先应用亚胺培南密切相关。此外，万古霉素不能降低金黄色葡萄球菌中MRSA的比例。Chin J Burns 2001;17：80-82