2004年 · 第117卷第10期

梗死面积决定了急性心肌梗死（AMI）患者的远期预后。人们对通过移植骨髓干细胞修复瘢痕区域越来越感兴趣。然而，冠状动脉内注射骨髓间充质干细胞（BMSCs）在AMI患者中的有效性仍不清楚。

将69例经皮冠状动脉介入治疗（PCI）后的AMI患者随机分为冠状动脉内注射BMSCs组（n=34）和生理盐水组（对照组，n=35）。在BMSCs移植或盐水注射后6个月，以设计的时间间隔进行连续单正电子发射计算机断层扫描（SPECT）、心脏回波和心脏机电标测。

骨髓间充质干细胞移植后3个月功能缺损的比例[(13±5)%]较移植前[(32±11)%]和对照组[(28±10)%]显著降低(P<0.05)。BMSCs组梗死区室壁运动速度显著增加[(4.2±2.5)cm/s vs(2.2±1.3)cm/s，P<0.05]，而对照组则无[(2.2±1.5)cm/s vs(2.7±1.7)cm/s，P>0.05]。骨髓间充质干细胞组移植后3个月左室射血分数（LVEF）较植入前和注射后3个月均显著升高[（67±11）%vs（49±9）%和（53±8）%，P<分别为0.05]。SPECT扫描结果显示，3个月后BMSCs组灌注缺损较对照组明显改善[(134±66)cm²vs(185±87)cm², P<0.01].同时，左室舒张末期容积[(136±31)ml vs(162±27)ml，P<0.05]和收缩末期容积[(63±20)ml vs(88±19)ml, P<0.05]同步下降。收缩末期压与收缩末期容积之比[P_系统/ESV，(2.84±1.30)mmHg/ml vs(1.72±1.23)mmHg/ml，P<0.05]明显增加。与注射前相比，BMSCs植入后3个月心脏机电标测显示，左线局部短路两种心脏机械能力均有显著改善[LLS，（11.29±1.64）%vs（7.32±1.86）%，P<0.05]和左室心内膜单极电压[UV，(10.38±1.12)mV vs(7.61±1.09)mV，P<0.01];灌注缺损由(36.2±6.2)%降至(20.3±5.31)%(P<0.01).24小时心电图监测显示3个月随访时未发生心律失常。

骨髓间充质干细胞移植可改善心功能，安全可行，无死亡或恶性心律失常。117(10)：1443-1448

自身免疫机制可能参与特发性扩张型心肌病（IDC）亚组的发病机制，主要组织相容性复合体的成分可能作为发生免疫介导的心肌损伤倾向的标志物。人类白细胞抗原（HLA）Ⅱ类基因，特别是高度多态性的HLA-DQ基因在免疫应答的激活中起重要作用，从而控制IDC的易感性或保护IDC。本研究旨在调查IDC患者HLA-DQA1等位基因多态性，探讨IDC的潜在免疫学机制和遗传易感性。

采用聚合酶链反应序列特异性引物（PCR-SSP）技术分析3组DQA1第2外显子的多态性：72例按世界卫生组织标准诊断的IDC患者（IDC组）；100名患有已知病因的疾病的终末期心力衰竭患者(HF组)；以及在常规健康调查期间入组研究的100名健康受试者（对照组）。IDC组患者根据射血分数（EF）分层。EF值高于35%者被置于亚组1；亚组2包括EF值为15%-35%的患者；亚组3由EF值小于15%的患者组成。

HLA-DQA1的频率^*0501等位基因在IDC组(0.39)显著高于HF组(0.12)和对照组(0.09)(均P<0.05).对三个IDC亚组的进一步分析显示DQA1的频率较高^*0501在EF值较低的患者中（均P<0.05，与亚组1和2相比)。DQA1的频率^*对照组0201高于IDC组（P<0.05).

HLA-DQA1^*0501等位基因赋予IDC易感性，而DQA1等位基因赋予IDC易感性^*0201等位基因赋予对它的保护作用，这表明参与IDC和心力衰竭的遗传背景是不同的。HLA-DQA1基因参与自身或外源抗心肌抗体对特异性免疫应答的调节。117(10)：1449-1452

源自微泡破坏/再填充序列并使用心肌对比超声心动图(MCE)记录的时间-强度曲线可以提供与冠状动脉血流相关的参数。这些参数对腺苷血管舒张的反应与通过荧光微球技术（FMT）测量的冠状动脉血流储备（CFR）相关。目前，没有关于生理变量（如缺氧）对MCE测定CFR的影响的数据。本研究的目的是确定血氧分压降低的影响₂）通过MCE测量的CFR。

在9头闭胸猪中进行了研究。在输注BR的同时，在乳头肌水平的短轴视图中使用商业仪器进行低能量实时MCE₁以30毫升/小时。高能超声脉冲（称为闪光帧）每15个心动周期破坏气泡，并且从这些序列导出的所得时间-强度曲线拟合到指数函数y=a(1-e^{-英国电信})+c，由此获得信号上升速率(b)。CFR计算为腺苷输注后b值与基线的比率，并在对照期和降低血PO后获得₂通过呼吸器提供氮气来制造人工缺氧条件。CFR由FMT独立测定。

氮导致平均PO显著降低₂，从(120.6±18.9)mmHg降至(51.8±15.9)mmHg(P<0.01).在对照期间，通过MCE和FMT评估，腺苷产生了相似的CFR增加（2.5倍对3.1倍）。PO的减少₂氮气后，静息时的值略有增加：b为0.46±0.15~0.53±0.18，(1.39±0.66)ml·min^-1·克^-1至(1.72±0.30)ml·min^-1·克^-1心肌血流量(MBF)（均P<0.05).此外，两种技术对腺苷的响应值均下降：b组为1.05±0.35~0.82±0.27，(4.30±3.16)ml·min^-1·克^-1至(3.93±1.27)ml·min^-1·克^-1对于MBF（均P<0.05).低氧条件下CFR显著降低，MCE测定为1.4（P<与基线相比0.05)，FMT法为2.5(与基线相比P>0.05)。

根据MCE和FMT，CFR值在缺氧条件下降低。CFR的降低涉及静息值的增加和腺苷后测量值的减少，如通过两种技术测定的。使用MCE在缺氧下CFR的降低略大于使用FMT。通过MCE评估CFR时，必须考虑生理变量，如缺氧。117(10)：1453-1458

雷帕霉素洗脱支架减少再狭窄的临床试验结果相当有希望。本研究的主要目的是在小型猪冠状动脉模型中表征高剂量雷帕霉素（Rapa）洗脱支架的体内药代动力学。

10例mimiswines在左前降支和右冠状动脉中放置了18个高剂量Rapa洗脱支架。在第1.5、12、24小时、第3、7和28天的计划时间，在完成冠状动脉造影后对动物（分别为n=1、1、2、2、2和2）实施安乐死。在0、10、20、30分钟获得血样；1、2、6、24小时；和3、7、28天测定全身Rapa水平。通过高效液相色谱/质谱法测定全血、动脉壁、心脏、肾和肝组织中的Rap a水平。

全血峰浓度（C_马克斯）、达到峰值浓度的时间（t_马克斯）、消除半衰期（t_{1/2 β})、曲线下面积(AUC)、表观全身清除率(Cl/F)分别为(10.91±1.28)ng/ml、(2.0±0.2)h、(7.25±0.63)h、(1.15±0.11)ng·h·ml^-1，和(180±12)ml·h^-1·公斤^-1，分别。超过95%检测到的Rapa位于支架和心脏周围的冠状动脉中。

通过共聚物支架基于支架递送Rap a是可行且安全的。该策略有望预防支架再狭窄。117(10)：1459-1463

动脉损伤后的血管平滑肌细胞（VSMC）增殖在多种血管增生性疾病中起关键作用，如动脉粥样硬化和球囊血管成形术后的再狭窄。单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV-TK）/更昔洛韦（GCV）和大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶（CD）/5-氟胞嘧啶（5-Fc）自杀基因系统已分别成功用于心血管基因治疗。我们推断HSV-TK与CD自杀基因的共表达将导致细胞杀伤增加。为了测试这种想象，开发了表达TK和/或CD基因的腺病毒载体，并在血管平滑肌细胞上进行了测试。

构建腺病毒载体，包括共表达CD和TK双自杀基因的Ad-EF1 α-CD-巨细胞病毒(CMV)-TK，分别表达CD和TK的Ad-EF1 α-CD和Ad-CMV-TK，以及对照载体Ad-CMV-LacZ，并在RecA中同源重组制备⁺大肠杆菌细胞。通过PCR和Western blot鉴定CD和/或TK基因的整合和表达。在暴露于其匹配的前药5-Fc和GCV的情况下，以20的感染复数(MOI)感染原代培养的VSMC。通过甲基噻唑基四唑(MTT)测定法测量细胞死亡率。流式细胞术分析用于检测细胞死亡，使用Hoechst 33342荧光染料作为DNA探针分析凋亡细胞。通过琼脂糖凝胶电泳测试凋亡VSMCs的基因组DNA切割。

成功构建了表达CD和/或TK自杀基因的重组腺病毒。单自杀基因和双自杀基因都可以整合到腺病毒基因组中并表达。Ad-EF1 α-CD-CMV-TK双自杀基因联合5-Fc和GCV的细胞毒性作用高于Ad-CMV-TK和Ad-EF1 α-CD单基因组。Ad-EF1 α-CD-CMV-TK组细胞存活率仅为(9±3)%, Ad-CMV-TK组为(37±3)%, Ad-EF1 α-CD组为(46±4)%(P<0.05).流式细胞术分析表明各组的杀伤机制不同。坏死和凋亡参与了双基因组的机制。根据Hoechst 33342 DNA染色，Ad-EF1 α-CD-CMV-TK[(11.0±2.1)%]和Ad-CMV-TK[(12.0±2.2)%]组的VSMCs凋亡率高于Ad-CMV-LacZ[(1.2±0.11)%]和Ad-EF1 α-CD[(5.0±1.8)%]组(P<0.05)。在施用前药后，在Ad-CMV-TK和Ad-EF1 α-CD-CMV-TK组中均可观察到DNA涂片。

腺病毒CD/TK双自杀基因介导的对大鼠VSMCs的杀伤作用优于单自杀基因。共表达CD/TK双自杀基因重组腺病毒的杀伤机制主要是通过细胞毒作用和细胞凋亡。117(10)：1464-1470

SMAD蛋白最近被鉴定为推定的转化生长因子-β的第一家族₁（TGF-β₁)信号换能器。本研究旨在探讨TGF-β的作用₁和信号蛋白Smad3对大鼠心肌肥大的影响。

纳入[³用H]-亮氨酸测定不同剂量TGF-β培养的心肌细胞肥大程度₁在培养的新生儿心肌细胞中。采用腹主动脉缩窄法制作大鼠心肌肥厚模型。术后不同时间处死大鼠，测定其左心室质量指数（LVMI）。TGF-β mRNA的表达₁通过RT-PCR评估培养细胞和肥厚左心室的Smad3。通过Western印迹评估Smad3的蛋白表达。

在培养的新生儿心肌细胞中，TGF-β₁显著促进了[³H]-亮氨酸。在3 pg/L的浓度下，15分钟后增加Smad3在mRNA和蛋白水平上的表达，并持续长达8小时的培养心肌细胞。LVMI与TGF-β的表达₁（mRNA）和Smad3（mRNA和蛋白）在术后第3天升高，并持续至第4周。它们的表达高峰出现在术后第二周。

TGF-β₁对大鼠心肌细胞肥大有积极作用。信号蛋白Smad3可能与大鼠心肌肥厚的病理进展有关。117(10)：1471-1475

低功率氦氖（He-Ne）激光在心血管疾病治疗中的应用日益广泛，其血管舒张作用已被证实。本研究的目的是确定低功率氦氖激光照射Wistar大鼠心前区对心肌毛细血管通透性和心肌血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。

将16只大鼠随机分为对照组和照射组（每组n=8）。照射组用632.8 nm的He-Ne激光照射，剂量为60.5 J/cm²将铁蛋白灌注到左股静脉中，并在电子显微镜下检查毛细血管通透性。通过免疫组织化学方法、RT-PCR和图像分析研究心肌中VEGF的表达。

检查心肌毛细血管的超微结构。与对照组相比，在照射组中观察到更多的高密度颗粒（铁蛋白），其存在于心肌内层的毛细血管内皮和心肌细胞的线粒体内。照射组心肌VEGF染色强于对照组。照射组光密度(0.246±0.015)显著高于对照组(0.218±0.012，P<0.05).结果表明，辐照大鼠VEGF165 mRNA的RT-PCR产物水平是对照组的2.79倍。

我们的研究表明，He-Ne激光照射（剂量为60.5 J/cm²)增加心肌毛细血管通透性以及心肌微血管和心肌中VEGF的产生。我们的研究提供了实验形态学证据，表明使用He-Ne激光照射可以改善心肌微循环。117(10)：1476-1480

慢性阻塞性肺疾病（COPD）有许多候选基因。基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在与COPD发展相关的组织重塑和修复中起重要作用。本研究探讨了MMP-9基因多态性与中国南方汉族人群COPD易感性的相关性。

我们通过限制性片段长度多态性检测了100例COPD患者和98例健康吸烟者MMP-9启动子（-1562C/T）多态基因型的频率。

COPD组MMP-9启动子多态性基因型频率C/C86%, C/T14%;对照组C/C 98%, C/T 2%。两组比较有显著性差异（P<0.01).COPD组与对照组的等位基因频率也有显著性差异（C等位基因频率：93%vs 99%，T等位基因频率：7%vs 1%，P<0.05)。

MMP-9基因启动子的遗传多态性与中国南方汉族人群COPD易感性相关。117(10)：1481-1484

最近的研究表明，循环DNA可能是肺癌的潜在肿瘤标志物，但这些研究大多是在健康对照和肺癌患者之间进行的，很少或没有包括良性肺部疾病患者。本研究的目的是评估血浆DNA定量在区分肺癌与健康和良性肺部疾病方面的性能。

用QIAamp DNA血液Midi试剂盒提取血浆DNA，并用Pico Green定量⁹44名健康个体、36名良性肺部疾病患者和67名肺癌患者的dsDNA定量试剂盒。通过接收器工作特性曲线评估辨别能力。

肺癌患者，尤其是有转移的肺癌患者和良性肺部疾病患者血浆DNA值较健康人显著升高（P<0.001)。肺癌患者与良性肺部疾病患者相比，各值均显著升高（P<0.001).健康人与肺癌的曲线下面积为0.96[95%置信区间(CI)0.92-0.99]，肺癌与良性肺部疾病的曲线下面积为0.73(95%CI 0.64-0.83)，肺癌与健康人和良性肺部疾病的曲线下面积为0.86(95%CI 0.80-0.91)。

血浆DNA定量具有很强的区分肺癌与健康以及健康和良性肺部疾病的能力，但较弱的区分肺癌与良性肺部疾病的能力。血浆DNA定量可用作肺癌的筛查工具。117(10)：1485-1488

局部肺通气和灌注的评估对于评估各种肺部疾病是必不可少的。使用吸入氧气作为造影剂的肺通气MRI可以通过临床MR扫描仪获得，无需额外设备，并且已被证明是评估动物模型和一些临床患者通气的可行手段。然而，很少有研究报道MR通气灌注成像。在这项研究中，我们评估了氧增强通气联合首过Gd-DTPA增强灌注MRI在肺栓塞和气道阻塞犬模型中的有效性。

通过在肺段动脉水平静脉注射明胶海绵条在8只狗中产生外周肺栓塞，并且通过将自行设计的球囊导管插入次级支气管在其中5只狗中产生气道阻塞。通过减去吸入纯氧前后的图像产生氧增强MR通气图像。采用动态三维快速梯度回波序列采集肺灌注MR图像。读取MR通气和灌注图像，并与病理解剖、通气灌注闪烁扫描和肺动脉造影的一般检查结果进行对比。

使用MR通气和灌注成像确定为气道阻塞的区域匹配，但肺栓塞区域不匹配。使用MR通气成像的气道阻塞缺损面积小于使用通气闪烁显像的气道阻塞缺损面积。根据信号强度变化的时间过程，将肺栓塞引起的异常灌注区分为缺陷区和减少区。通气灌注MRI诊断肺栓塞的敏感性为75.0%，特异性为98.1%，与通气灌注闪烁显像和肺动脉造影结果一致(K：0.899, 0.743)。

氧增强通气结合肺灌注MRI可用于诊断肺内气道和血管的异常，并可提供空间和时间分辨率较高的区域功能信息。该方法具有很大的临床应用价值。117(10)：1489-1496