2004年 · 第117卷第04期

预防β-地中海贫血的临床方案目前基于前瞻性携带者筛查和产前诊断。本文报道了一例未受影响胚胎妊娠的成就体外受精和胚胎移植（IVF-ET），结合植入前基因诊断（PGD），用于有生育p-地中海贫血子女风险的夫妇。

一对携带不同地中海贫血突变（密码子41-42突变和IVS II 654突变）的夫妇接受了标准IVF治疗，包括胞浆内单精子注射、胚胎活检、单细胞聚合酶链反应（PCR）和DNA分析。只有未受影响或携带者胚胎被转移到子宫腔。确认怀孕后，进行了产前诊断。

在分析β-珠蛋白突变的总共13个胚胎中，PGD表明2个正常，3个受影响，6个是携带者。其他2个胚胎无法做出诊断。取卵后第3天将3个胚胎移植到子宫。超声检查显示双胎妊娠，其中一个卵子受损。产前基因诊断显示，两个胎儿均未受影响，两个健康男孩出生，证实了PGD的结果。

我们开发了一种基于单细胞的引物延伸预扩增（PEP）-PCR测定法来检测p-地中海贫血突变。化验是在手术的所有阶段都高效、准确，并在中国出生了经PGD确认的无β-地中海贫血儿童。PEP在PGD用于p-地中海贫血。117(4)：483-487

胰岛素样生长因子结合蛋白-1（IGFBP-1）是胰岛素样生长因子（IGFs）的载体，通过作为控制IGFs与其受体结合的活性因子来调节胎儿发育。本研究旨在研究IGFBP-1与妊娠6-10周人类胚胎发育之间的关系。

将44例单胎妊娠孕妇分为两组；一个胚胎发育异常（n=32），另一个胚胎发育正常（n=12）。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测母体血清和蜕膜组织中IGFBP-1水平。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测蜕膜中IGFBP-1 mRNA的表达。

异常组母体血清IGFBP-1蛋白水平[(125.36±47.93)μ g/ml]显著高于正常组[(70.72±21.21)μ g/ml]。蜕膜IGFBP-1和IGFBP-1 mRNA在异常组[分别为(1.60±1.39)μ g/ml和1.66±1.64]均高于正常组[分别为(0.35±0.23)μ g/ml和0.40±0.20]。母体血清中IGFBP-1水平与IGFBP-1 mRNA呈正相关（r=0.90,P<0.05）和IGFBP-1蛋白（r=0.92,P<0.05)在蜕膜组织中。

在妊娠6-10周期间，异常胚胎发育与IGFBP-1升高相关。母体血清中IGFBP-1的水平与蜕膜组织中IGFBP-1mRNA和IGFBP-1的浓度有关。母体血清中的IGFBP-1水平可用作评估胚胎发育的预测标志物。117(4)：488-491

DNA分析表明，与正常生育夫妇相比，受不明原因复发性自然流产（URSA）影响的夫妇之间缺乏显著的相容性，⁸尽管一项利用PCR序列特异性寡核苷酸（SSO）方法的研究确实观察到患者和流产胎儿之间HLA-DQA1和DQB1等位基因显著相容性的证据。⁹本研究旨在调查URSA是否与特定的DQ等位基因或启动子等位基因相关。

32名URSA患者和54名至少成功妊娠一次的妇女被纳入本研究。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法进行HLA-DQ基因分型。通过SSO和序列特异性引物（SSP）方法检测HLA-DQB1启动子。将患者的DQA1、DQB1和DQB1启动子（QBP）基因频率与正常对照组的基因频率进行比较。数据采用统计学分析χ²还有费舍尔的精确测试。

结果显示，与正常对照组相比，患者组DQB1*0604/0605的频率显著升高，DQB1*0501/0502的频率显著降低。此外，相对于对照组，患者中DQA1*01-DQB1*0604/0605和QBP6.2-DQB1*0604/0605单倍型的频率过高。我们的结果没有显示URSA患者和对照组在DQA1和QBP等位基因频率方面有任何差异。

我们的数据表明URSA与HLA-DQB1编码区相关，与其上游调控区无关。DQB1*0604/0605、DQA1*01-DQB1*0604/0605和QBP6.2-DQB1^*0604/0605单倍型可能赋予对URSA的易感性，而DQB1*0501/0502等位基因可能保护女性免受URSA的侵害。117(4)：492-497

据信雌激素在卵泡/卵母细胞成熟和卵母细胞受精能力的调节中起关键作用。它还参与输卵管用于随后配子相互作用的功能准备，参与输卵管微环境中发生的早期胚胎发育，以及参与子宫用于植入的准备。本研究旨在确定卵泡和胚胎发育是否需要雌激素。

使用3-4周龄的C57B6 F1雌性小鼠，通过以100 μ g/d的剂量每日注射芳香酶抑制剂Arimidex来阻断雌激素的生物合成。在实验1(n=10)中继续注射3天，在实验2(n=23)中继续注射5天。对照组(n=27)的小鼠被给予相同量的生理盐水。第2天给予外源性促性腺激素[7.5 IU孕母马血清促性腺激素(PMSG)]诱导卵泡生长发育。在实验1中，我们测试了雌激素和孕酮水平，并在两天后检查了卵巢形态。在实验2中，PMSG注射后47小时，给予5IU人绒毛膜促性腺激素(hCG)，然后将两只雌性小鼠与一只雄性小鼠关在笼子里过夜。两天后，我们测量了雌激素和孕酮水平。然后我们取出胚胎，培养它们，并每24小时检查胚胎发育，持续3天。

在注射hCG之前，Arimidex组小鼠的雌激素水平被抑制94%，孕酮水平被抑制75%。两组之间每只动物平均总卵泡数无差异（对照组30.4个卵泡/动物，Arimidex组27个卵泡/动物）。注射hCG后2天，Arimidex组的雌激素水平显著低于对照组（P<0.01），而孕酮水平没有显著降低（P>0.05).胚胎、桑椹胚、囊胚和孵化囊胚的发育率在两组之间没有显著差异（P=0.20、0.10、0.44和0.38)。

在本研究中，通过剥夺小鼠正常雌激素支持，我们已经能够排除雌激素水平升高以完成卵泡成熟过程和胚胎发育的绝对需要体外。117(4)：498-502

染色体畸变是植入前和植入后胚胎浪费的主要原因，一些研究表明，一半的人类受孕具有染色体异常。人类精子的染色体畸变也是导致体外受精。本研究旨在确定精子染色体非整倍体是否是男性不育的危险因素。

将12例不育男性分为两组：10例为少弱畸形精子症（OAT，A组），2例精液分析正常（B组）。两名正常健康精子供体作为对照（C组）。我们使用荧光原地X、Y和18号染色体的杂交（FISH）和探针，以确定非整倍体的频率。

B组X、Y和18号染色体的精子二体发生率分别为0.30%和0.30%。百分比与C组无显著差异（0.15%和0.16%）。B组X、Y和18号染色体无效性的频率分别为0.15%和0，C组为0和0.15%（P>0.05).A组二体的发生率分别为1.13%和0.96%，无体的发生率分别为1.13%和1.60%。在这三组中，二倍体的发生率分别为0.60%、1.00%和0.30%。A组X、Y和18号染色体的二体和无体精子以及二倍体精子的频率均显著高于B组和C组。三组精子的总非整倍体率估计分别为42.44%、6.05%和2.59%。

这些结果表明，精子中的染色体非整倍体可能是不育的一个危险因素。117(4)：503-506

尽管在使用来自母体外周血的胎儿细胞的非侵入性产前诊断技术方面已经取得了很大进展，但目前的技术不能满足临床使用所需的需求。在这项研究中，我们旨在建立可靠的方法对母体外周血中的胎儿细胞进行基因分析。

引物延伸预扩增(PEP)-聚合酶链反应(PCR)，多重引物原地标记（PRINS）和巢式PCR分别用于检测从母体外周血收集的单个胎儿细胞中的性别决定区Y（SRY）基因。

PEP-PCR检测SRY基因的敏感性为97.39%(149/153),特异性为99.17%(119/120)。PRINS的敏感性为97.56%(40/41)，特异性为100%(35/35)。巢式PCR的敏感性为80.00%(24/30)，特异性为87.50%(14/16)。

PEP-PCR和PRINS由于其高灵敏度和特异性，是对母体外周血单个胎儿细胞进行基因分析的可靠技术。PEP-PCR和PRINS可用作使用来自母体外周血的单个胎儿细胞的无创产前诊断的标准方法。117(4)：507-510

本研究旨在评估中国老年人高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平与急性心肌梗死(AMI)和冠心病(CHD)死亡的关系，并探讨HDL对CHD的保护作用。

从1986年开始，1211名退休人员（92%为男性）连续入组并进行前瞻性研究。平均起始年龄为70±9岁，研究结束时为80±9岁。在随访研究期间，所有参与者从1986-2000年接受了年度体检和血液化学调查。随访研究的平均持续时间为11.2年。这项研究的终点是AMI发作或因CHD和其他原因导致的死亡。采用logistic回归分析筛选冠心病危险因素。根据HDL-C水平，将病例分为低（<1.03 mmol/L)、中(或正常，1.03~1.56 mmol/L)和高(>1.56 mmol/L)水平组，分析各组AMI和CHD死亡发生率的差异。

急性冠脉综合征（多为AMI）累计发作214例，其中冠状动脉死亡89例，随访研究期间其他疾病死亡308例。正常HDL-C组的AMI发生率和CHD死亡分别比低HDL-C组低40%和53%;高HDL-C组分别比正常组低56%和50%。血脂正常病例统计分析（411例，总胆固醇<5.17 mmol/L，甘油三酯<1.69 mmol/L）显示低HDL-C水平的病例与全组（包括高脂血症）的AMI事件率和CHD死亡率相似；然而，在正常和高HDL-C水平下，AMI发作和CHD死亡显著降低。结果表明，高密度脂蛋白对冠心病的保护作用在低脂人群中更为突出。

低HDL是老年人AMI发作和CHD死亡的重要独立危险因素；高HDL对冠心病有明显的保护作用。117(4)：511-515

据报道，右心室心尖部起搏会降低心功能。但与窦性心律相比，双腔（DDD）起搏对心功能影响的报道很少。在这项研究中，我们使用平衡放射性核素血管造影评估了右心房和心室DDD起搏对心功能和心室收缩同步性的影响。

10例植入右心房和心室DDD起搏器的患者接受了平衡放射性核素血管造影。在窦性心律和起搏心律期间获得闪烁显像数据。半手动获得心功能参数。相位分析用于研究心室激动顺序和心室同步性。

起搏时左室1/3射血分数较窦性心律时显著降低[(23.4±6.1)%vs(27.7±4.5)%,P=0.01].起搏期间局部射血分数也降低，尽管差异无统计学意义。相位分析显示，起搏时右心室比左心室激活早，起搏时相移明显大于窦性心律时[64.13°±16.80^ovs 52.88°±9.26°，P=0.007].窦性心律时两心室同时激活，激活顺序为左心室近间隔或基底至心尖。起搏过程中最早的激活发生在右心室心尖，随后扩散到基底和左心室。

右心房和心室DDD起搏损害左心室收缩功能和心室同步性。117(4)：516-520

本研究的目的是使用血管内超声成像（IVUS）和冠状动脉内多普勒（ICD）血流测量评估胸痛但冠状动脉造影正常的患者的冠状动脉形态学变化和生理功能，以阐明X综合征的机制。

本研究共纳入126例经历胸痛但冠状动脉造影正常的患者【67例男性，59例女性，平均年龄（53.1±13.0）岁】。使用Cardiometrics FloMap II系统进行左冠状动脉前降支（LAD）的ICD流量测量。冠状动脉流速储备(CFVR)定义为充血期间的平均峰值速度与基线时的平均峰值速度之比，由冠状动脉内推注18 μ g腺苷诱导。3.2 F或2.9 F 30 MHz机械旋转超声导管(CVIS，Boston Scientific)或3。20MHz电子超声导管（Endosonics）用于IVUS。

LAD平均CFVR值为2.71±0.74。CFVR降低（<3.0）在126例患者中的82例（65.1%）中发现。109例患者的LAD IVUS图像可用。在76/109（69.7%）患者中检测到斑块形成。根据有无斑块形成以及CFVR降低或不降低，将患者分为四组；I组（n=10），IVUS检查结果正常，CFVR正常；II组（n=23），IVUS检查结果正常，CFVR降低；III组（n=29），IVUS证据显示斑块形成，但CFVR正常；和IV组（n=47），斑块形成的IVUS证据，CFVR降低。

本研究显示了IVUS和ICD联合应用在诊断冠状动脉造影正常患者中的重要临床价值。只有10%的研究患者（I组）被发现真正没有冠状动脉疾病，而20%的患者（II组）被诊断为患有X综合征。117(4)：521-527

一些研究证实，大多数啮齿动物，如犬和人的右心室壁都有明显的瞬时外向钾电流_to1）不均一性，而这种不均一性与J点抬高、J波形成以及一些室性心动过速如Brugada综合征引起的心室颤动密切相关。本研究旨在从4-氨基吡啶敏感性和钙非依赖性l的角度研究犬右心室复极（1期）期间的跨壁电异质性_to1.

将成年犬单个右心室心外膜（Epi）细胞、心肌中部（M）细胞和心内膜（Endo）细胞酶解离。进行全电池电压钳记录以比较l_to1三种单元格类型的值。

在37℃下，使用0.2 Hz和+70 mV去极化测试电位，平均峰值l_to1Epi细胞和M细胞的平均值分别为（4070±1720）pA和（3540±1840）pA。活化和失活的Epi和M细胞动力学过程符合Boltzmann分布。与l相比_to1在Epi细胞和M细胞中，平均峰l_to1在Endo细胞中非常低，平均为（470±130）pA。

这些结果表明，l存在明显的差异和有效的梯度_to1在三种心脏细胞类型之间，尤其是Epi和Endo细胞之间。这些差异是右心室电异质性的突出表现之一，并可能形成右心室某些恶性心律失常的重要离子基础和先决条件，包括由Brugada综合征和其他疾病引起的心律失常。117(4)：528-531