2022年 · 第45卷第01期

检验医学作为医学科学的重要支撑学科，在疾病早期诊断、病情监测、预后判断与风险评估等方面发挥着重要作用。21世纪是数字信息时代，高新检测技术、计算机科学及互联网大数据等，为检验医学的发展带来巨大的机遇与挑战，新时代下如何借助信息科技革命实现检验医学新发展是检验工作者面临的重要课题。该文回顾检验医学的发展历程，重点关注检验医学在新时代的发展定位及未来发展方向，以求开创检验医学发展新局面。

脑脊液（CSF）是充满脑室系统、蛛网膜下隙和脊髓中央管内的无色透明液体，能直接反映人体中枢神经系统（CNS）的疾病状态。随着新技术用于CSF检验，为中枢神经系统疾病的诊断、预后判断和治疗监测提供了全新的视角。当前主要的挑战是克服生物标志物变异、选择适宜的技术以及检测标准化。

阿尔茨海默病（AD）是一种老年期的神经退行性疾病，早期干预是目前延缓该病进展的唯一可靠手段。该文汇总并分析近年来各类AD生物标志物研究的代表性文献，分类评述了各类脑脊液（GSF）标志物对AD诊断及鉴别诊断的效能。其中CSF Aβ42、Aβ42/Aβ40、tau蛋白、Aβ42/p-tau、生长相关蛋白43、突触相关蛋白25、神经颗粒素、人视锥样蛋白1等对AD诊断、鉴别诊断均具有较大价值。CSF标志物可用于AD诊断及鉴别诊断。实验室应根据自身条件，针对AD选择适宜的CSF标志物。

感染性眼病是发展中国家重要致盲原因之一，病原微生物检查是感染性眼病诊断的金标准。由于眼部组织取材困难、标本量少，实验室诊断阳性率偏低，严重影响疾病的诊断和预后。我国大多数医疗机构感染性眼病实验室诊断能力不足，缺乏眼部微生物检测的标准化方法。为此，北京医学会检验分会组织专家和相关课题组通过讨论和临床验证，总结出适合我国眼科临床实践的病原学诊断路径，形成感染性眼病实验室诊断专家共识。该共识从常见感染性眼病临床表现和送检指征入手，规范眼部标本采集、转运、质量评估的方法和流程；强调眼科医师应与微生物检验人员充分配合，正确选择适宜的微生物检测方法，提倡床旁接种，同时针对刮片细胞学检查、传统微生物培养、棘阿米巴培养以及核酸检测、宏基因组测序等技术提出建议。

目的 分析自身免疫性脑炎（AE）患者短期预后的危险因素，并评估其预测价值。 方法 收集2016年3月至2021年1月于福建医科大学附属第一医院及福建省神经医学中心诊治的81例AE患者资料进行回顾性分析。根据患者出院时的临床表现，采用改良Rankin评分量表（mRS）将AE患者分为预后良好组（mRS≤2分，48例）和预后不良组（mRS>2分，33例），比较2组患者的基本人口学资料、主要临床表现、头颅磁共振和脑电图，以及血液和脑脊液（CSF）检测指标。采用logistic回归模型分析AE患者短期预后的危险因素，并通过受试者工作特征（ROC）曲线评估其预测效能。 结果 与预后良好组比较，预后不良组患者的住院时间较长（P<0.05），入院病情严重、精神行为异常、异常脑电图δ波和δ刷比例较高（P均<0.05）。2组间血白细胞计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、单核细胞计数、C反应蛋白、降钙素原、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、载脂蛋白A1/B、Ca2+、Na+、阴离子间隙、CSF寡克隆带、CSF-IgG指数和血清抗体滴度比较，差异均有统计学意义（P均<0.05）。多因素logistic回归分析显示，入院病情严重（OR=1.816，95%CI 1.250~2.639，P=0.002）、血清降钙素原（OR=1.345，95%CI 1.008~1.794，P=0.044）、血清抗体滴度（OR=1.422，95%CI 1.071~1.888，P=0.015）、CSF-IgG指数（OR=1.802，95%CI 1.035~3.138，P=0.037）和阴离子间隙（OR=1.640，95%CI 1.191~2.259，P=0.002）是AE患者短期预后的危险因素，5项指标联合预测AE短期预后的ROC曲线下面积为0.920（95%CI 0.834~0.971），敏感度83.87%，特异度88.37%。 结论 入院病情严重、血清降钙素原、血清抗体滴度、CSF-IgG指数和阴离子间隙是AE患者短期预后的独立危险因素，5项指标联合可较好地预测患者短期预后。

目的 探讨抗郎飞结区和结旁区相关抗体在慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经根神经病（CIDP）的检测及其临床特征。 方法 收集2018年1月至2021年7月在复旦大学附属华山医院住院和门诊就诊及外院送检的212例临床诊断CIDP患者血清样本，采用细胞底物法检测抗郎飞氏结区和结旁区相关自身抗体（抗NF155、抗NF186、抗CNTN1抗体）和IgG亚型。根据检测结果分为抗NF155抗体阳性、抗NF186抗体阳性和抗CNTN1抗体阳性组，回顾性分析各组患者肢体无力、深浅感觉异常、震颤、脑脊液蛋白水平、臂丛核磁共振（MRI）等临床特点，并进行对比。 结果 共发现抗NF155抗体阳性患者23例（10.8%，23/212），抗NF186抗体阳性12例（5.7%，12/212），抗CNTN1抗体阳性4例（1.9%，4/212）。抗NF155抗体阳性组和抗CNTN1抗体阳性组抗体均为IgG4亚型。抗NF186抗体阳性组（12例）患者IgG均阳性，4例可检测到抗体亚型，但优势亚型不明。抗NF155抗体阳性组（23例）患者均有肢体无力和深感觉障碍，19例有（19/23，82.6%）浅感觉障碍，22例（95.7%，22/23）为对称性受累，18例（78.3%，18/23）有震颤；19例行臂丛MRI，均为异常。抗NF186抗体阳性组（12例）患者均有肢体无力，浅感觉和深感觉障碍分别有9和6例，8例为不对称性受累，仅1例出现震颤；7例行臂丛MRI，1例异常。抗CNTN1抗体阳性组（4例）患者均表现为对称性肢体无力和深浅感觉障碍，3例有震颤，4例均有臂丛MRI异常。抗NF155抗体阳性组、抗NF186抗体阳性组和抗CNTN1抗体阳性组在发病年龄［分别为（25.8±13.8）、（43.4±20.7）和（61.2±5.1）岁］、深感觉异常、震颤和臂丛MRI异常上的差异均有统计学意义（P均<0.01）。 结论 抗NF155、抗NF186、抗CNTN1抗体阳性CIDP患者在发病年龄、深感觉异常、震颤和臂丛MRI异常等临床特征上有差异。

目的 采用串联质谱标签（TMT）联合液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）筛选免疫介导性脱髓鞘疾病诊断与鉴别诊断的潜在生物标志物。 方法 选择首都医科大学附属北京天坛医院2020年1月至2021年1月收治的20例脱髓鞘疾病患者（脱髓鞘组），包括10例吉兰-巴雷综合征（GBS）患者（GBS亚组）与10例多发性硬化（MS）患者（MS亚组）。以及10例神经系统非炎性疾病（NND）患者（NND组），通过TMT蛋白质组学技术筛选出脱髓鞘组与NND组、GBS亚组与MS亚组间具有表达差异的蛋白质（差异倍数>2或<0.5且差异有统计学意义），借助String数据库对组间差异蛋白质所参与的通路进行基因本体（GO）富集分析和京都基因和基因组百科全书（KEGG）富集分析。另选择同期就诊的80例脱髓鞘疾病患者（脱髓鞘病验证组）以及40名健康体检者（健康对照组）用于血脂一般指标的回顾性分析，脱髓鞘病验证组包括40例GBS患者（GBS验证组）及40例MS患者（MS验证组）。绘制受试者工作特征（ROC）曲线评价血脂一般指标对脱髓鞘病诊断及GBS与MS间鉴别诊断的价值。 结果 经TMT蛋白质组学技术检测出362种蛋白质，脱髓鞘组与NND组比较共有101个差异蛋白，GBS亚组与MS亚组比较共有45个差异蛋白。GO富集分析结果显示，脱髓鞘组与NND组相比，富集度前5条通路为巨噬细胞集落刺激因子及受体复合物、胆固醇输入负调控、极低密度脂蛋白颗粒清除负调控、含甘油三酯丰富的脂蛋白颗粒重构、胆固醇逆向转运。GBS亚组与MS组相比，富集度前5条通路为高密度脂蛋白颗粒受体结合、极低密度脂蛋白颗粒重塑负调控、胆固醇输入负调控、极低密度脂蛋白颗粒清除负调控、中等密度脂蛋白颗粒。KEGG富集分析显示，脱髓鞘组与NND组的差异蛋白富集到8条通路，为磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B信号通路、补体和凝固级联反应、细胞外基质及其受体交互、金黄色葡萄球菌感染、胆固醇代谢、Ras信号通路、吞噬体、丝裂原活化蛋白激酶信号通路。GBS亚组与MS亚组的差异蛋白富集到9条通路，为胆固醇代谢、补体和凝固级联反应、血小板激活、过氧化物酶体增殖物激活受体信号通路、维生素消化吸收、新型冠状病毒感染、脂肪消化吸收、轴突引导、中性粒细胞胞外陷阱形成通路。脱髓鞘病验证组与健康对照组比较，甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）及载脂蛋白（apo）B水平较高（P均<0.01），高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）及apoA1水平较低（P均<0.01）。GBS验证组与MS验证组比较，LDL-C及apoB水平较高，HDL-C及apoA1水平较低（P均<0.05）。TG、TC、HDL-C、LDL-C、apoA1与apoB单独及联合检测对免疫介导性脱髓鞘病诊断的ROC曲线下面积分别为0.746、0.643、0.798、0.703、0.806、0.708和0.868。HDL-C、apoA1、LDL-C及apoB单独及联合检测对与GBS与MS鉴别诊断的ROC曲线下面积分别为0.692、0.653、0.632、0.695和0.718。 结论 免疫介导性脱髓鞘疾病患者与NND、GBS与MS患者脑脊液蛋白质组学存在差异，且差异蛋白主要存在于血脂代谢相关通路，血脂相关指标或可作为今后免疫介导性脱髓鞘疾病诊断及鉴别诊断的生物标志物。

目的 建立基于圆盘式（CD）微流控芯片的CALR基因突变的快速检测方法，初步评价其用于脑梗死患者CALR-1和CALR-2基因突变检测的应用价值。 方法 基于微流控技术和环介导等温扩增（LAMP）技术建立一个用于CALR-1和CALR-2基因突变同步检测的CD微流控芯片检测平台，并验证该平台检测的灵敏度、特异性、重复性和准确性。前瞻性选取2019年11月至2021年3月复旦大学附属华山医院收治的124例脑梗死患者为脑梗死组，80名健康体检者为对照组。用CD微流控芯片法检测抗凝外周全血样本中的CALR-1和CALR-2基因突变情况，每块芯片同时检测4个样本，同步检测每个样本的3个指标，等温扩增40 min后读取结果。同时采用测序法对检测结果进行验证，比较2种检测结果的一致性。 结果 采用CD微流控芯片平台，无需热循环，40 min即可完成样本中3个指标的同步扩增，样本的整个检测过程在60 min内完成。对核酸靶标浓度较高的样本，扩增10 min即可出现阳性信号，收到样本后30 min内报告检测结果。CD微流控芯片法针对CALR-1和CALR-2的检测灵敏度分别为1.0%和0.5%突变负荷浓度，对于其非靶标的核酸样本均未发生任何非特异性扩增，特异性良好，批内重复性和批间重复性的符合率均为100%（20/20）。在脑梗死组中发现2例CALR基因突变，且均为CALR-1突变（L367fs*46），对照组中未发现CALR-1和CALR-2基因突变。CD微流控芯片法与测序法结果一致率为100%（204/204）。 结论 CD微流控芯片法用于检测脑梗死患者样本中CALR-1和CALR-2突变具有灵敏度高、特异性好、检测速度快和检测通量高等优势，有助于明确脑梗死患者的病因。

目的 分析比较脑脊液髓样分化因子88L265P（MyD88L265P）突变和白细胞介素10（IL-10）与原发性中枢神经系统淋巴瘤（PCNSL）预后的关系。 方法 收集2013年8月至2016年12月间复旦大学附属华山医院北院经手术或定位穿刺病理确诊的39例初发PCNSL患者（男18例，女21例，年龄40~73岁）的病例资料、脑脊液检测（包括细胞学、细胞计数、蛋白及IL-10）及治疗经过进行回顾性分析。采用微滴式数字PCR检测39例石蜡组织和35例脑脊液标本中MyD88L265P基因突变。针对可能与PCNSL的首次无疾病进展生存期（PFS）和生存期相关的指标进行单因素分析，用Log-rank检验对不同分类因素组别进行比较，Cox回归进行多因素分析。 结果 39例PCNSL患者年龄59（53，65）岁，30.8%（12/39）的患者在初诊及治疗过程中出现眼内受累。组织MyD88L265P突变率为74.4%（29/39），脑脊液MyD88L265P突变率为40.0%（14/35），组织、脑脊液同时检测到该突变率为51.9%（14/27），单因素分析显示眼内累及、脑脊液高IL-10（≥45 pg/ml）及脑脊液MyD88L265P突变具有更短的PFS时间且差异有统计学意义（P<0.05），眼内累及患者较其未累及者具有更短的生存期，2组患者均未达到中位生存期，但差异具有统计学意义（HR=6.5，95%CI 1.7~47.3，P<0.05）。多因素分析显示：眼内累及（HR=2.4，95%CI 1.3~7.8，P<0.05）和脑脊液MyD88L265P突变（HR=2.1，95%CI 1.1~5.7，P<0.05）是患者PFS预后不良的独立危险因素。 结论 PCNSL患者中出现眼内累及和脑脊液MyD88L265P突变提示预后不良的因素，脑脊液IL-10水平与其预后无关。

目的 探讨甘油三酯/胱抑素C（TG/Cys-C）比值联合糖尿病视网膜病变、糖尿病病程、收缩压3项指标对糖尿病肾病（DKD）的诊断及鉴别诊断价值。 方法 回顾性分析2013年1月至2021年2月徐州市4家三甲医院肾脏病科已行肾活检的2型糖尿病合并肾损伤患者的临床资料。根据肾脏病理分型分为DKD组（51例）和非糖尿病肾病（NDKD）组（49例）。选取同期于徐州医科大学附属医院内分泌科住院治疗的2型糖尿病不伴肾损伤的50例患者作为对照组。收集所有患者当次入院信息及血生化指标，计算TG/Cys-C比值。采用Logistic回归分析影响2型糖尿病肾损伤患者发生DKD的相关因素。采用受试者工作特征（ROC）曲线评价TG/Cys-C比值、糖尿病视网膜病变、糖尿病病程、收缩压及联合检测对2型糖尿病肾损伤患者发生DKD的诊断价值。 结果 在肾活检的2型糖尿病肾损伤患者中，膜性肾病是NDKD组患者最常见的病理类型，占63.3%（31/49）。与对照组比较，DKD组和NDKD组患者的收缩压、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、胱抑素C、肌酐、尿酸、纤维蛋白原水平、合并高血压及尿活动性沉渣改变比例较高，且血红蛋白、白蛋白、肾小球滤过率较低，差异有统计学意义（P均<0.05）。与NDKD组比较，DKD组患者收缩压、舒张压、Cys-C、血肌酐、合并高血压及糖尿病视网膜病变比例较高，糖尿病病程较长，血红蛋白、肾小球滤过率、甘油三酯、TG/Cys-C比值较低，差异均有统计学意义（P均<0.05）。在2型糖尿病出现肾损伤患者中，多因素Logistic回归分析显示，TG/Cys-C比值（OR=0.298，P=0.007）是2型糖尿病合并肾损伤患者发生DKD的相关因素，糖尿病视网膜病变（OR=12.209，P=0.005）、糖尿病病程（OR=1.016，P=0.034）、收缩压（OR=1.049，P=0.006）是2型糖尿病合并肾损伤患者发生DKD的独立危险因素。ROC曲线显示，TG/Cys-C截断值为2.06时，对DKD诊断的曲线下面积为0.866，敏感度为88.2%，特异度为71.4%；TG/Cys-C比值联合糖尿病视网膜病变、糖尿病病程、收缩压3项指标检测对DKD诊断的曲线下面积为0.952，敏感度为92.2%，特异度为89.8%。 结论 TG/Cys-C比值对DKD有一定的诊断价值，TG/Cys-C比值联合糖尿病视网膜病变、糖尿病病程、收缩压对DKD诊断及鉴别诊断的意义较大。

目的 探讨新型布尼亚病毒感染后患者发热伴血小板减少症状（SFTS）发病期和恢复期的凝血和血栓相关指标及其临床意义。 方法 选择2020年4月12日至8月12日在安徽医科大学第一附属医院收治的新型布尼亚病毒感染后SFTS患者，其中SFTS发病期36例，SFTS恢复期18例，并招募36名健康人作为健康对照组，采集血浆标本。回顾性分析血浆凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原含量（FIB）、血浆凝血酶时间（TT）、抗凝血酶-Ⅲ（AT-Ⅲ）、纤维蛋白降解产物（FDP）、D-二聚体（D-D）、血栓调节蛋白（TM）、凝血酶-抗凝血酶复合物（TAT）、纤溶酶-α2纤溶酶抑制物复合物（PIC）、组织型纤溶酶原激活剂-抑制剂1复合物（t-PAIC）浓度。统计比较3组间上述指标的差异。 结果 与健康对照组比较，SFTS发病组PT［12.5（12.1，13.6）s比10.8（10.5，11.5）s，P<0.05］较长，但仍在正常参考值范围内（14.0~21.0 s）；APTT［49.1（42.0，58.2）s比28.5（26.6，30.4）s，P<0.05］较长；FDP［6.07（2.67，8.64）μg/ml比1.00（0.80，1.87）μg/ml］和D-D［2.27（1.04，2.98）μg/ml比0.30（0.21，0.47）μg/ml］较高（P均<0.001）；血浆TAT［16.05（8.05，26.58）ng/ml比3.55（2.60，4.85）ng/ml］和PIC浓度［4.44（2.52，5.54）μg/ml比0.84（0.60，1.35）μg/ml］较高（P均<0.001）；TM［（19.41±8.29）TU/ml比（9.33±1.89）TU/ml］和t-PAIC浓度［（37.52±21.10）ng/ml比（7.06±3.37）ng/ml］较高（P均<0.001）。SFTS恢复组患者血浆中TAT浓度为9.10（3.95，18.40）ng/ml，仍高于正常参考范围（<4 ng/ml），PIC浓度低于SFTS发病组［1.91（1.45，2.93）μg/ml比4.44（2.52，5.54）μg/ml，P<0.05］，TM和t-PAIC低于SFTS发病组（P均<0.05）。 结论 SFTS患者发病期机体凝血系统激活，血管内皮受到损伤；恢复期血管内皮损伤情况减轻，但机体依然存在一定程度的凝血系统障碍，提示当体内病毒清除后，仍需继续监测凝血指标。

目的 了解临沂地区碳青霉烯酶的基因型及耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌（CRE）对头孢他啶-阿维巴坦（CAZ/AVI）的药物敏感性，为临床合理用药提供依据。 方法 选取临沂市人民医院2019年1月至2020年12月临床标本分离获得的179株CRE，用改良碳青霉烯酶灭活试验（mCIM试验）和乙二胺四乙酸（EDTA）协同碳青霉烯酶灭活试验（eCIM试验）与荧光定量PCR快速检测系统GeneXpert 2种方法检测碳青霉烯酶，用K-B法检测CAZ/AVI的药物敏感性。 结果 179株CRE中，mCIM阳性174株（97.2%），eCIM阳性147株（84.5%）；产丝氨酸酶27株（15.5%），金属β-内酰胺酶147株（84.5%）。GeneXpert检测结果与mCIM、eCIM表型检测结果一致。174株mCIM阳性菌株对CAZ/AVI的敏感率为33.3%（58/174），其中27株产丝氨酸酶菌株的敏感率为96.3%（26/27），147株产金属β-内酰胺酶菌株的敏感率为100%。 结论 临沂地区CRE的碳青霉烯酶型以金属β-内酰胺酶为主。产丝氨酸酶CRE对CAZ/AVI有较高敏感性。

差值校验是一种基于患者数据的质量控制方案，用于识别分析各阶段误差或患者病情显著变化。与传统室内质控方案相比，差值校验拥有实时监控、无额外检测成本等特点，已得到越来越多的应用。在检验报告自动审核系统中，差值校验作为一类重要的审核规则用于拦截变化异常的检验报告并提交人工审核。该文阐述差值校验的发展历史、参数选择、在质量控制和检验报告自动审核中的应用价值。

基于患者数据的实时质量控制（PBRTQC）是一种使用患者临床标本检测结果以实时、连续监测检测过程分析性能的质量控制方法。2020年国际临床化学和检验医学联合会PBRTQC工作组建议将该方法广泛应用于临床，但国内临床实验室对PBRTQC的认知、研究与应用尚有一定的差距。本文从PBRTQC的研究进展、运算类型、临床应用价值、国内外行标指南建议、PBRTQC程序建立、性能验证、实施原则、应用现状及展望等方面进行阐述，以促进PBRTQC在国内临床实验室的认知、接受、借鉴和广泛应用。

传统免疫学检测需依靠大型且昂贵的仪器和熟练的操作人员，测量时间较长，敏感性却较低，同时即时检测需求也在不断上涨，故而临床需要一种高敏感、高准确、快速、便携的即时诊断方式。微流控芯片具有高敏感、高通量、自动化等优点，与临床即时诊断需求相契合。基于微流控技术和免疫检测开发的微流控免疫芯片成为近年来研究热点，在肿瘤标志物检测，感染性疾病抗原和抗体检测、自身抗体检测、激素检测等领域成果突出。然而在芯片的研发过程中仍需克服许多难题，例如微流体的操纵、反应信号的收集和分析等。