2010年 · 第33卷第12期

"超级细菌"是指对其有效治疗药物几乎均耐药的细菌.目前世界范围内流行的主要"超级细菌"有甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌、万古霉素耐药肠球菌、万古霉素耐药金黄色匍萄球菌和碳青霉烯类抗生素耐药革兰阴性杆菌.由于抗菌药物的不合理使用,新的"超级细菌"不断出现,须规范抗菌药物使用,加强"超级细菌"监测和医院感染控制。

日前,一种泛耐药超级细菌"NDM-1"引起热议.此种菌株对所有β内酰胺类(包括碳青霉烯类)耐药,仅对替加环素和黏菌素较敏感,经研究它产生了一种新型的金属β内酰胺酶;由于分离出此种菌株的患者多在印度接受过治疗,故大多观点认为该菌株来源于印度并将其命名为NDM-1.超级细菌"NDM-1"并非单指某种细菌,而是指携带blaNDM-1基因能产生NDM-1金属酶的所有细菌.NDM-1引起的耐药谱广,传播速度快,患者治疗效果差,应该引起人们的重视.本文基于目前对NDM-1的研究,简要阐述其流行病学特点、基因属性、实验室检测、预防控制措施和治疗等.

AID泛指机体免疫效应细胞或免疫效应分子针对自身组织或细胞产生的病理性免疫应答反应,由自身免疫反应参与发病机制导致组织损伤或功能障碍的疾病,其总体发病率占世界人口的3%～5%,其致残率与死亡率的增长幅度也逐年提高.AID因作用对象不同,可表现为器官特异性、非器官特异性或系统性的AID.它可累及任何器官,且女性患者远远多于男性,患病程度也比男性严重.目前,人类已从组织学、血清学及细胞学水平对其发病过程的病理和免疫学异常有了较详细的了解,但对其病因及发病机制尚未完全清楚.现在越来越多的研究表明遗传因素与AID易感性的关系不可忽视。

2010年7月24-29日,一年一度的美国临床化学学会(American Association for Clinical Chemistry,AACC)年会在美国Anaheim召开.作为全球检验医学最重要的盛会,AACC年会吸引了众多的检验工作者.今年年会规模空前,超过100个国家的约20 000名代表参加了此次会议。

第五届圣托里尼大会--功能基因组学与个体化医疗于2010年9月30日至10月2日在希腊圣托里尼岛隆重召开,来自世界各地的200余名检验界学者参加了此次盛会.本次大会由生物前景和心血管基因组学组EA4373主办,中华医学会检验分会和美国临床化学学会也应邀参加组织了本次大会。

第12届亚太地区临床生化大会于2010年10月3-7日在韩国首尔隆重召开,会议由亚太地区临床生化联合会(APFCB)主办、韩国临床生化学会承办.大会邀请了临床生化检验和分子诊断领域的5位著名专家分别就临床生化检验进展及分子诊断的应用等专题做了大会特邀报告,并组织了26场专题报告交流会议,8个国家学会组织的专题会议和11个厂商技术交流会.大会还举办了论文壁报展示和检验设备与技术展览会。

2010中欧检验医学高峰论坛于2010年9月6-7日在辽宁省沈阳市隆重举行.会议由中华医学会检验分会主办,欧洲检验医学专家给予了大力支持.来自欧洲临床化学会的9位专家、中华医学会检验分会全体委员和青年委员、中华医学会辽宁省检验分会委员及中华检验医学杂志编辑部主任等130余人出席了本次会议.本次盛会是中国检验界的学术代表们与欧洲检验专家的一次深入的面对面国际交流。

目的 评估改良Hodge试验在碳青霉烯类药物敏感性降低的肠杆菌科细菌中检测碳青霉烯酶的效能.方法 收集2004-2008年我国16家教学医院的49株碳青霉烯类药物敏感性降低(亚胺培南、美罗培由或厄他培南的MIC≥2μg/ml)的肠杆菌科细菌;采用对倍琼脂稀释法测定其对亚胺培南、美罗培南和厄他培南的MIC;通过改良Hodge试验检测碳青霉烯酶;利用加苯硼酸或苯唑西林的改良Hodge试验区分碳青霉烯酶或AmpCs/ESBLs导致的阳性结果 ;采用PCR检测包括NDM-1型碳青霉烯酶基因在内的多种β内酰胺酶基因,并对PCR阳性产物测序鉴定.结果 49株菌中,36株菌对亚胺培南不敏感(MIC>4μg/ml),31株菌对美罗培由不敏感(MIC>4μg/ml),47株菌对厄他培南不敏感(MIC>2μg/ml).49株临床分离菌中23株菌改良Hodge试验刚性,包括9株弱阳性和14株强阳性.经过对菌株进行β内酰胺酶基因PCR和测序,发现9株Hodge弱阳性菌株中2株携带blaKPC-2,7株不携带碳青霉烯酶基因,但携带blaampC/blaESBL;14株强阳性菌株中4株携带blaKPC-2,8株携带blaIMP-4,2株携带blaIMP-8;26株改良Hodge试验阴性菌株均未携带碳青霉烯酶基因.所有49株菌均未检测到blaNDM-1.以碳青霉烯酶基因检测为标准,则改良Hodge试验对检测碳青霉烯类药物敏感性降低的肠杆菌科菌中碳青霉烯酶的敏感度为100%,特异度为79%,阳性预测值为70%,阴性预测值为100%,准确性为86%.结论 改良Hodge试验具有很好的敏感性,但存在一些假阳性结果 .利用苯硼酸和苯唑西林可有效区分改良Hodge试验的假阳性和真阳性。

目的 应用流式细胞微球捕获技术检测肾移植受者外周血细胞因子,分析其在巴利昔单抗应用前后、肾移植手术前后以及移植物排斥反应发生时的含量变化及临床意义.方法 72例肾移植受者根据术后移植物功能状况分为2组:肾功能稳定组53例,急性排斥反应组19例.根据巴利昔单抗使用与否分为2组:巴利昔单抗使用组32例,巴利昔单抗未使用组40例.采集72例肾移植受者术前、术后、急性排斥反应发生时和30名健康供者的外周血,应用流式细胞微球捕获技术分析IFN-γ、TNF-α、IL-10、IL-5、IL-4、IL-2共6种细胞因子含量.对肾移植供者与受者组、肾移植受者术后功能稳定组与急性排斥反应组、术后4周巴利昔单抗使用组与未使用组、巴利昔单抗使用前后细胞因子含量进行比较.结果 术前肾移植受者组外周血TNF-α、IL-10、IL-5、IL-4、IL-2分别为(1.65±0.10)、(2.55±0.19)、(1.88±0.14)、(1.85±0.12)、(2.12±0.09)ng/L,低于健康供者组的(3.04±0.17)、(3.33±0.26)、(4.03±0.25)、(2.73±0.16)、(4.03±0.26)ng/L,差异有统计学意义(t值分别为6.890、2.375、7.851、3.955、7.153,P值分别为<0.01、<0.05、<0.01、<0.01、<0.01);术前肾移植受者组IFN-γ含量为(2.50 ±0.18)ng/L,健康供者组为(3.00±0.24)ng/L,差异无统计学意义(t=1.625,P>0.05).肾功能稳定组IFN-γ、IL-10分别为(2.71±0.11)、(3.91±0.52)ng/L,低于急性排斥反应组的(3.30±0.36)、(12.01±5.35)ng/L,差异有统计学意义(t值分别为5.061、11.465,P值分别为<0.01、<0.05).使用巴利昔单抗的肾移植受者,在巴利昔单抗使用后IFN-γ、TNF-α和IL-10分别为(2.78±0.17)、(1.58±0.07)、(2.77±0.24)ng/L,与使用前的(2.90±0.21)、(1.67±0.12)、(2.45±0.16)ng/L比较,差异有统计学意义(t值分别为5.605、6.011、4.126,P值分别为<0.01、<0.01、<0.05).术后4周巴利昔单抗使用组IFN-γ、IL-10、IL-4分别为(2.90±0.31)、(9.08±0.16)、(2.73±0.11)ng/L,与未使用组的(3.28±0.11)、(4.17±0.21)、(2.11±0.20)ng/L比较,差异有统计学意义(t值分别为4.268、4.263、3.762,P值分别为<0.01、<0.01、<0.05).结论 流式细胞微球捕获技术使用微量标本可同时检测6种细胞因子.联合检测肾移植受者外周血中的细胞因子能够为临床诊疗提供更有意义的指导依据。

目的 用高效液相色谱法分析T2DM患者血浆游离脂肪酸谱的变化.方法 收集武汉大学中南医院体检人群和住院患者,其中健康对照组94名、单纯T2DM组101例、T2DM合并高脂血症组77例.取受试者空腹静脉血,分离新鲜血浆,以正十七酸作为内标,以改良Doles法萃取游离脂肪酸,溴苯乙酮作为柱前衍化剂,采用Dionex Summit高效液相色谱法分析系统检测血浆游离脂肪酸谱,内标标准曲线法定量.结果 健康对照组、单纯T2DM组与T2DM合并高脂血症组3组之间的总游离脂肪酸浓度分别为(355.63±100.35)、(421.21±200.83)、(473.04±213.40)μmol/L,3组之间差异有统计学意义(X2=13.08,P<0.01),不饱和游离脂肪酸浓度依次为(206.29±61.94)、(218.11±110.28)、(240.94±116.79)μmol/L,3组之间差异无统计学意义(x2=2.17,P>0.05).单纯T2DM组与健康对照组比较,总游离脂肪酸升高[(421.21±200.83)μmol/L vs(355.63±100.35)μmol/L,x2=7.22,P<0.05],不饱和游离脂肪酸浓度和健康对照组差异无统计学意义.T2DM合并高脂血症组与健康对照组比较,总游离脂肪酸浓度升高[(473.04±213.40)μmol/L vs (355.63±100.35)μmol/L,x2=27.93,P<0.01].日间及日内RSD均<5%,最低检测浓度为0.05～0.35 μmol/L,高、中、低浓度下的回收率为96.4%～104.8%.结论 T2DM患者血浆总游离脂肪酸浓度升高,以饱和游离脂肪酸升高为主,不饱和游离脂肪酸改变差异无统计学意义.可能与T2MD的发生发展有关,有望成为糖尿病脂代谢紊乱的临床早期监测新指标。

目的 比较分析用于美国医院临床微生物实验室的5种艰难梭菌感染检测方法 ,从中选择1种适于早期诊断艰难梭菌感染的灵敏、特异、简单、快速及经济的实验方案.方法 对174份临床送检的腹泻患者粪便标本同时用TGC、Premier Toxin A&B EIA(A/B-EIA)、C.Diff Quick Chek Complete(D-EIA)、BD GeneOhm Cdiff assay(BD-PCR)和实验室发展的PCR(LD-PCR)方法 进行艰难梭菌的检测.以金标准TGC法作为参比标准,评价各种检测方法 的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值.结果 TGC法检测174份腹泻患者大便标本,艰难梭菌感染的阳性率为13.8%(24/174).与TGC法比较,4种检测方法 的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为:A/B-EIA 62.5%、99.3%、93.8%、94.3%;D-EIA 66.7%、98.7%、88.9%、94.9%;BD-PCR 83.3%、98.7%、90.9%、97.4%;LD-PCR 79.2%、93.3%、65.5%、96.6%.所有标本中,至少1种方法 检测为阳性的标本共计34份,其中15份标本5种方法 检测结果 均为阳性.D-EIA法检测结果 中,18份标本GDH及毒素A/B均为阳性,23份仅GDH阳性,133份GDH及毒素A/B均为阴性.18份D-EIA检测阳性标本全部与BD-PCR检测结果 一致,16份与TGC法检测结果 一致.24份TGC阳性标本中,有22份包括在41份GDH抗原呈阳性的标本中.D-EIA检测为假阴性的8份标本中,4份BD-PCR检测为阳性.根据本实验结果 ,D-EIA与BD-PCR相结合的二步法检测方案灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为83.3%、98.7%、90.9%、97.4%.结论 从技术角度评价,以BD-PCR法为最优.结合D-EIA与BD-PCR的二步法检测方案,是对临床送检标本进行艰难梭菌感染检测的灵敏、特异、简便、快速、经济的检测方案。

目的 探讨结核分枝杆菌临床分离株对12种抗结核药物的MIC值及其药敏检测结果 与耐药程度的关联规律,从而为临床制定治疗方案提供借鉴依据.方法 采用液体培养基联合MTT技术进行抗结核药物的MIC检测.对上海市肺科医院2009年1-6月间的163株结核分枝杆菌临床分离株进行RFP、INH、SM、EMB、OFLX、LVFX、MOX、AMK、CPM、PTA、CLA和PAIN的MIC检测和Bactec MGIT快速培养仪药敏检测,并进行MIC与耐药程度的关联性分析.结果 67%(42/62)的SM耐药株MIC≥16 μg/ml,63%(51/81)的INH耐药株MIC≥8 μg/ml,77%(50/65)的RFP耐药株MIC≥8 μg/ml,20%(12/60)的EMB耐药株MIC≥4 μg/ml;43%(25/58)的OFLX耐药株MIC≥8 μg/ml;41%(15/37)的AMK耐药菌株MIC≥16 μg/ml,41%(12/29)的CPM耐药菌株MIC≥4 μg/ml.OFLX耐药株的3个氟喹诺酮类药物的MIC(OFLX、LVFX和MOX的MIC分别为2～128、1～32和0.0625～1 μg/ml)差异有统计学意义(F=16.874,P<0.01);SM、INH、RFP、EMB、OFLX、AMK和CPM在任6种及7种药物同时耐药株中的MIC值(分别为0.5～128、2～64、0.25～128、1～32、1～64、0.5～128和1～128μg/ml)明显高于任1种及2种药物耐药菌株的MIC值(MIC值分别为0.25～128、0.0625～64、0.25～32、0.25～2、0.125～2、0.5～4和1～4 μg/ml,F值分别为20.066、40.499、47.197、70.373、91.432、41.840和21.547,P均<0.05);SM、INH、RFP、EMB在4种药物同时耐药菌株中MIC值(分别为1～128、2～64、0.25～128和1～32μg/ml)显著高于任1种及2种药物耐药株(MIC值分别为0.25～128、0.0625～64、0.25～64和0.25～2 μg/ml,F值分别为26.242、23.563、31.541和64.469,P均<0.05);RFP在MDR酶株的MIC值(2～64 μg/ml)显著高于非MDR的耐药菌株的MIC值(0.25 μg/ml,F=5.613,P<0.05).结论 本研究揭示了常用的12种抗结核药物的耐药程度与常规药敏检测结果 之间的关联规律,为临床医生根据常规药敏结果 制定更加有效的抗结核治疗方案提供重要的借鉴。

目的 评估不同检测方法 对纸片法头孢西丁敏感,苯唑西林耐药葡萄球菌耐药性状的检测能力,并对非mecA基因介导苯唑西林耐药的匍萄球菌进行药敏谱分析.方法 收集2007年1月至2009年5月间复旦大学附属华山医院就诊患者呼吸道、尿、分泌物和无菌体液标本中分离得到的255株金黄色葡萄球菌,采用苯唑西林纸片法、苯唑西林MIC法、头孢西丁纸片法、头孢西丁MIC法枪测金黄色葡萄球菌对苯唑西林的敏感性:用苯唑西林MIC法和头孢西丁纸片法检测75株凝固酶阴性萄萄球菌对苯唑西林的敏感性:将所有葡萄球菌进行mecA基因检测,结合试验结果 分析葡萄球菌苯唑西林耐药原因,并对非mecA基因介导的苯唑西林耐药葡萄球菌用MIC法进行抗菌药敏谱分析.结果 255株纸片法头孢西丁敏感、青霉素耐药的金黄色葡萄球菌苯唑西林纸片法检测出6株中介,4株耐药;头孢西丁纸片法、头孢西丁MIC法、苯唑西林MIC法全敏感、mecA基因检测全阴性.75株纸片法头孢西丁敏感、青霉素耐药的凝固酶阴性葡萄球菌,苯唑西林MIC法59株敏感,16株耐药;mecA基因阴性为71株,阳性为4株.12株非mecA基因介导苯唑西林耐药的葡萄球菌庆大霉素敏感为10株,克林霉素8株、环丙沙星11株、红霉素6株、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑11株,头孢菌素类、替考拉宁、万古霉素、哌拉西林/他唑巴坦、四环素12株.结论 金黄色葡萄球菌用头孢西丁检测mecA基因介导的苯唑西林耐药,具有很好的可靠性.凝固酶阴性葡萄球菌最好同时使用头孢西丁纸片法和苯唑西林MIC法检测mecA基因介导的苯唑西林耐药,以提高检出率.非mecA基因介导的苯唑西林耐药,临床可依据实际药物敏感实验结果 选择性使用β内酰胺酶稳定的青霉素、β内酰胺酶抑制剂复合药、头孢类和碳青霉烯类药物治疗。

目的 探讨MIF在AD患者PBMC、血清及泪液中的表达水平及其在AD诊断中的临床意义.方法 AD患者按SCORAD指数分3个亚组,轻度AD组11例、中度AD组23例、重度AD组9例;并用实时定量RT-PCR检测43例AD患者和31名健康对照者(健康对照组)PBMC中MIFmRNA的表达水平,用ELISA法检测血清和泪液中MIF含量.结果 AD组PBMC中MIF mRNA的表达水平为7.46(3.38～8.90),明显高于健康对照组[1.67(1.24～2.45),Z=-6.141,P<0.05];轻、中、重度AD组MIF mRNA的表达水平分别为2.35(2.12～2.49)、7.83(6.54～8.90)和8.76(8.22～9.73),中、重度AD组均显著高于健康对照组(Z值分别为-6.237、-4.520,P均<0.05).AD组血清中MIF的含量为36.32(11.89～43.80)μg/L,明显高于健康对照组[7.89(6.13～9.54)μg/L,Z=-6.180,P<0.05];轻、中、重度AD组血清中MIF的含量分别为8.98(7.90～10.51)μg/L、36.50(29.78～43.23)μg/L、45.70(41.27～48.84)μg/L,中、重度AD组均显著高于健康对照组(Z值分别为-6.238、-4.521,P均<0.05).AD组泪液中MIF的含量为12.66(2.01～20.12)μg/L,较健康对照组[0.85(0.77～1.06)μg/L]明显升高(Z=-4.118,P<0.05);轻、中、重度AD组泪液中MIF的含量分别为1.10(0.83～1.35)μg/L、12.66(9.76～15.87)μg/L、24.65(19.29～30.94)μg/L,中、重度AD组均显著高于健康对照组(Z值分别为-4.062、-3.372,P均<0.05).中、重度AD组PBMC中MIF mRNA表达水平及血清、泪液中MIF的含量与疾病严重程度SCORAD指数均呈明显正相关(r值分别为0.395、0.404、0.515,P均<0.05).结论 不同AD病程患者PBMC、血清和泪液中MIF表达增高,MIF可作为判断AD病情活动和评价AD疾病严重程度的有效检验指标。

目的 探讨Tim-3、Th17细胞及Treg细胞在ITP患者中的表达及其临床意义.方法 应用流式细胞术检测42例ITP患者与39名健康对照者Th17细胞及Treg细胞的表达;采用ELISA法检测外周血血浆中IL-17、IFN-γ和IL-4的表达;应用RT-PCR方法 检测Tim-3、IFN-γ、IL-4、T-bet等细胞因子和转录因子的mRNA表达.结果 ITP患者Th17细胞比例为(2.41±1.43)%,明显高于健康对照组的(1.08±0.59)%,差异有统计学意义(t=5.35,P<0.05);ITP患者Treg细胞比例为(1.64±0.74)%,明显低于健康对照组的(3.12±0.52)%,差异有统计学意义(t=10.33,P<0.05).IL-17在ITP患者血浆中的表达水平为(14.42±6.37)ng/L,健康对照组为(13.91±4.47)ng/L,差异无统计学意义(t=0.42,P>0.05);而ITP患者血浆IFN-γ含量为(55.74±15.25)ng/L,较健康对照组的(31.33±12.99)ng/L明显升高,IL-4含量为(7.42±1.50)ng/L,较健康对照组的(18.17±5.19)ng/L明显降低,差异均有统计学意义(t=7.72、2.87,P均<0.05).ITP患者的T-bet mRNA和IFN-γmRNA表达水平明显升高,分别为健康对照组的(3.34±1.32)倍和(8.57±3.44)倍,差异有统计学意义(t=6.41、13.21,P<0.05);而Tim-3 mRNA和IL-4 mRNA表达水平明显下降,分别为健康对照的(0.29±0.15)倍和(0.25±0.15)侪,差异均有统计学意义(t=9.61、10.02,P<0.05).结论 Th17/Treg细胞亚群比例失调和Tim-3的表达下降可能是ITP发生和发展的重要决定因素。

目的 探讨乳腺癌组织和癌旁正常组织中MDR1、BCRP、LRP的mRNA及其相应蛋白P-gp、BCRP、LRP的阳性表达情况及临床意义.方法 采用RT-PCR检测42份乳腺癌组织及其相应癌旁正常组织中MDR1、BCRP、LRP mRNA的相对表达量,同时采用IHC检测126份乳腺癌组织及42份相应癌旁正常组织中P-gp、BCRP、LRP蛋白的阳性率,并观察3种耐药相关基因及其蛋白与乳腺癌患者临床病理因素、腋窝淋巴结转移及5年复发转移与未复发转移之间的关系.结果 RT-PCR检测MDR1、BCRP、LRP mRNA在乳腺癌组织中的相对表达量分别为0.81±0.17、0.78 ±0.14、0.79±0.13,癌旁正常组织中的相对表达量分别为0.33±0.11、0.45±0.09、0.36±0.10;3种耐药基因在2组中的相对表达量的差异均有统计学意义(t值分别为4.613、4.850、8.089,P均<0.01).IHC检测P-gp、BCRP、LRP蛋白在乳腺癌组织中的阳性率分别为41%(52/126)、39%(49/126)和66%(83/126),癌旁正常组织中的阳性率分别为14%(6/42)、17%(7/42)和19%(8/42),3种耐药蛋白在2组中的表达差异有统计学意义(x2值分别为10.147、7.020、27.820,P均<0.01).MDR1 mRNA和P-gp与乳腺癌患者不同临床分期及腋窝淋巴结有无转移有关(r=0.369、0.39 8,P均<0.05),BCRPmRNA及其蛋白与乳腺癌患者腋窝淋巴结有无转移有关(r=0.355,P<0.05);5年内发生复发转移的39例患者与5年内未发生复发转移的32例患者P-gp、BCRP及LRP阳性率比较,P-gp阳性率在2组中的差异有统计学意义(x2=11.771,P<0.01),BCRP及LRP阳性率在2组中的差异无统计学意义(x2=2.261、0.078,P均>0.05).3种耐药基因及其蛋白在乳腺癌组织中阳性表达的一致率分别为90.48%、92.85%和85.71%(Kappa值分别为0.806、0.751和0.697,P均<0.01).结论 乳腺癌中存在着广泛的原发性多药耐药现象,3种耐药基因MDR1、BCRP、LRP的mRNA及其P-gp、BCRP、LRP蛋白均参与了乳腺癌多药耐药的形成;检测3种耐药基因和蛋白的表达可为乳腺癌患者有目的 地选择化疗方案提供一定的理论依据及策略;特别是对于P-gp阳性表达者不宜使用CAF(环磷酰胺+阿霉素+5-氟尿嘧啶)方案化疗。

目的 研究武汉地区儿童分离CRAB中获得性碳青霉烯酶分子流行病学特征.方法 收集2008年12月至2009年5月期间武汉市儿童医院急救科、新生儿内科、心胸外科、骨外科、呼吸内科及肾内科住院患儿分离的非重复CRAB 40株,使用生物梅里埃公司生产的GNS-142检测菌株的MIC值,PFGE分析耐药菌株的同源性.采用PCR扩增KPC、IMP、GIM、SPM、SIM、OXA-23、VIM 7种获得性碳青霉烯酶基因及整合酶基因,测序确定基因型,质粒接合转移试验分析细菌耐药性的转移方式,Southern blot试验定位耐药基因.结果 40株CRAB对庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星、环丙沙星、左氧氟沙星、复方磺胺甲(口恶)唑的敏感率分别为20%、5%、93%、93%、95%及23%;PFGE分型共检出11种克隆株,其中A型29株,B型2株,C～K型各1株.11株同时产IMP-4型MBL及OXA-23酶,26株只产OXA-23酶;未检出GIM、SPM、SIM、KPC和VIM型碳青霉烯酶基因.36株鲍曼不动杆菌携带Ⅰ类整合子(Int1).Southern blot表明Int1、IMP-4及OXA-23型定位于细菌染色体上.未见质粒接合转移试验阳性菌株.结论 A型克隆耐药株为本地区最常见CRAB菌株,OXA-23酶及IMP-4型是CRAB中主要的获得性碳青霉烯酶类型,其中以OXA-23型最为常见,Int1介导的OXA-23及IMP-4基因的水平传播及A型耐药克隆株的传播是本地区鲍曼不动杆菌中碳青霉烯类耐药性传播的主要方式。

目的 抑制SALL4基因在急性白血病细胞THP-1中的表达,探讨其在白血病发病机制中的作用.方法 将表达SALL4干扰序列的质粒载体转染至急性白血病细胞THP-1中,分为4组:(1)空白对照组:不加处理;(2)转染对照组:加入空pRS质粒载体;(3)转染一组:加入SALL4-shRNA-pRS-1干扰质粒的转染复合体;(4)转染二组:加入SALL4-shRNA-pRS-2干扰质粒的转染复合体.采用实时荧光定量PCR和WB技术观察THP-1细胞中SALL4基因mRNA及蛋白表达的变化,建立抑制SALL4表达的体系.实时荧光定量PCR检测SALL4受抑后Wnt/β-catenin信号通路中C-myc、Cyclin D1、β-catenin基因的表达改变,采用流式细胞术分析THP-1细胞凋亡情况.结果 实时荧光定量PCR结果 显示,转染一组、转染二组、转染对照组、空白对照组SALL4基因的表达水平分别为(36.0±4.3)%、(32.0±2.4)%、(102.0±6.5)%、(100.0±2.6)%,差异有统计学意义(F=226.3,P<0.05);转染一组、转染二组的SALL4基因表达水平显著低于空白对照组,差异有统计学意义(t值分别为19.7、19.1,P<0.05);转染对照组SALL4基因表达水平与空白对照组比较差异无统计学意义(t=1.1,P＞0.05).WB检测结果 显示,转染一组、转染二组SALL4蛋白表达与空白对照组和转染对照组相比明显下降.以上基因和蛋白表达水平均提示SALL4干扰效率良好.SALL4基因抑制表达后,转染一组C-myc基因、β-catenin基因、Cyclin D1基因的表达分别为(44.0±6.2)%、(44.0±5.1)%和(107.0±13.6)%,转染二组为(22.0±4.5)%、(25.0±3.5)%和(48.0±7.6)%,转染对照组为(42.0±3.5)%、(59.0±3.7)%及(79.0±5.6)%.转染一组、转染二组C-myc基因表达水平显著低于空白对照组的(103.0±7.5)%,差异有统计学意义(t值分别为10.1、9.5,P均<0.05);转染一组、转染二组β-catenin基因的表达显著低于空白对照组的(100.0±4.1)%,差异有统计学意义(t值分别为23.3、22.9,P均<0.05);转染一组、转染二组Cyclin D1基因的表达显著低于空白对照组的(102.0±6.0)%,差异有统计学意义(t值分别为17.4、12.4,P均<0.05).SALL4基因被抑制后,转染一组、转染二组、转染对照组及空白对照组的细胞凋亡率分别为(57.2±9.1)%、(34.4±8.6)%、(14.4±3.6)%及(14.8±4.8)%,差异有统计学意义(F=42.5,P<0.05).转染一组、转染二组细胞凋亡率显著高于空白对照组(t值分别为9.7、4.5,P均<0.05).结论 抑制急性白血病细胞THP-1中SALL4基因表达后,Wnt/β-catenin信号通路的C-myc、Cyclin D1及β-catenin基因的表达随之下调,并促进了细胞凋亡。

目的 评价快速免疫荧光(RAMP)法检测血浆NT-proBNP的分析性能.方法 RAMP法测定264名健康体检者及78例心衰患者血浆NT-proBNP,参照CLSI方法 学评价方案,评价RAMP法的精密度、线性、稳定性及干扰因素等,并与瑞士罗氏公司Elecsys法检测方法 进行比对.结果 CV=20%时RAMP法功能灵敏度为48 ng/L,CV=10%时灵敏度为57 ng/L,线性范围18～8 000 ng/L.RAMP法NT-proBNP室温下稳定24 h,4℃稳定3 d,-20 ℃稳定20 d,反复冻融3次对检测结果 无影响.EDTA-K2和肝素抗凝血浆RAMP法测定结果 比对,YEDTA-K2=0.953 9X肝素+0.365 2,R2=0.982,P<0.01,n=40.两种类型的抗凝标本在两种方法 间的测量结果 差异无统计学意义(P＞0.05).轻度溶血(Hb=2 g/L)对RAMP法和Elecsys法测定结果 影响较小,偏差<5%,中、重度溶血(Hb=3～4 g/L)对结果 影响大,偏差＞15%.加入3种浓度三酰甘油时RMAP法测定值从390 ng/L降为82 ng/L,Elecsys法测定值从390 ng/L降为178 ng/L;当标本中胆红素含量为16～330 μmol/L,两种方法 测定值从7 777 ng/L降为7 741 ng/L,RAMP法抗乳糜和黄疸的干扰能力与Elecsys法相近.45份EDTA-K2抗凝血浆标本用2种方法 检测比对,Passing和Bablok回归方程显示:YRAMP=0.972 8XElecsys-0.035 2,R2=0.994,P＞0.05,n=45.78份肝素抗凝血浆标本用2种方法 检测比对,Passing和Bablok回归方程显示:YRAMP=0.983 2XElecsys-0.037 6,R2=0.991,P＞0.05,n=78.健康人血浆NT-proBNP水平随年龄递增,与性别相关,女性为105(60～120)ng/L,男性为59(44～91)ng/L,女性高于男性(Z=3.264,P<0.01).结论 RAMP快速免疫荧光法重复性,稳定性较好、线性范围宽,检测结果 与罗氏电化学发光法一致性较好。

cccDNA是HBV DNA在宿主细胞核内主要的存在形式,是HBV复制的中间体,是HBV信使RNA(mRNA)和前基因组RNA(pgRNA)复制模板,长期存在于细胞核中,目前的药物难以将其清除,成为HBV持续感染和抗病毒药物停用后病情反复的关键因素。

染色体畸变是导致自然流产、死胎和畸形儿的重要病因之一[1].细胞遗传学检查发现,最常见的染色体结构变异包括缺失(deletion)、重复(duplication)、倒位(inversion)和易位(translocation).本研究报道1例多发畸形患儿复杂易位核型分析。

为顺应当今期刊网络化、数字化的发展趋势，更好地为广大作者、读者提供高质量的服务，本刊从2009年5月15日起已开通中华检验医学杂志网站及稿件远程管理系统。网站的开通，将为广大读者、作者、编者提供一个学术交流和沟通的平台。通过本刊网站，读者、作者、编者将能及时了解本领域的国内外学术动态及各专业学术会议的召开事宜。

编辑老师: 　　笔者拜读了发表于2005年第28卷第11期<华检验医学杂志>齐振普老师的文章"改良双缩脲试剂两点终点法测定血清总蛋白的研究与应用"[1],收获很大,同时,笔者也有一些疑惑,现与作者讨论如下。

编辑同志: 　　有读者就2005年第28卷第11期"改良双缩脲双试剂二点终点法测定血清总蛋白的研究与应用"一文中关于"线性范围"和"回收试验"中样品与试剂的比例问题提出质疑,答复如下。