2010年 · 第33卷第10期

国产HBV和HCV感染检测试剂与国外同类试剂相比,存在过度追求操作简便化和定量检测缺乏量值溯源等问题.将HBsAg的双抗体夹心ELISA试剂的"一步法"改为"两步法",并保证足够的温育时间;同时,选择多个单抗作为包被抗体,不但可以避免"钩状效应"或HBsAg变异造成的假阴性结果,而且将改善试剂的测定下限.将HBV和HCV核酸检测试剂的标本处理由简单的煮沸裂解改为核酸纯化,并增加用于核酸提取的标本量和提取后扩增加样量,同时加入内标,不但可以改善测定下限和检测重复性,而且可以有效地监控假阴性结果的出现.定量检测试剂标准品系列与国家或国际标准物质的量值溯源,可使不同试剂得到的检测结果具有可比性。

肝炎病毒核酸检测试剂在临床广泛应用,国内外相关试剂质量存在较大差异.本文从试剂的生产工艺、检测原理、操作过程等方面分析了国内外试剂质量存在差异的主要原因,同时阐述了国内外相关试剂质量控制的现状.提出为提高国产试剂质量,应加强上市后监管和实验室内部质量控制。

目的 建立HME的基因突变筛查方法,并探讨其基因型与临床表型的关系.方法根据临床诊断将15例HME先证者分为轻度(M)和重度(Ⅰ S、ⅡS、ⅢS)4型,运用PCR扩增产物直接测序法对先证者及其家系成员进行EXT1和EXT2基因序列分析,筛查其EXT1和EX72基因突变,并分析基因型与临床表型之间的关系.结果 15例HME先证者中有9例为EXT1基因突变,6例为EXT2基因突变,其中EXT1基因I8+2T＞G、c.1182deIG、c.1108G＞T(p.E370X)、c.335de1A、c.361C＞T(p.Q121X)和c.1879_1881delCAC为国际上新发现的基因突变位点.EXT1基因突变患者临床表型分别为M型2例(22.2%,2/9)、Ⅰ S型2例、ⅡS型4例和ⅢS型1例,而EXT2基因突变患者M型有5例(83.3%,5/6),另1例为ⅡS型.结论本研究建立了HME准确、简便的EXT1和EXT2基因突变筛查方法,6个EXT1基因突变I8+2T＞G、c.1182delG、c.1108G＞T(p.E370X)、c.335delA、c.361C＞T(p.Q121X)和c.1879_1881delCAC为国际首次报道,EXT1基因突变患者相比EXT2基因突变患者临床表型要更严重。

目的 研究粪肠球菌esp、gelE、ebpA基因和QS-fsr系统与粪肠球菌生物被膜形成的相关性.方法收集2007年10月至2008年6月从湘雅三医院临床尿路感染患者尿液及导尿管中分离的粪肠球菌24株,按生物被膜阳性粪肠球菌及相应的生物被膜阴性粪肠球菌分为2组.使用RT-PCR分别对生物被膜阳性组和阴性组细菌的esp、ebpA、gelE和fsrB基因荧光强度比进行检测;利用real-time PCR分别检测生物被膜阳性组和阴性组细菌的esp、ebpA、gelE和fsrB 4种与生物被膜形成相关的基因的表达,并通过2-△△Ct方法进行相对定量.分析粪肠球菌esp、gelE、ebpA基因及QS-fsr系统与生物被膜形成的关系.结果 real-time PCR检测显示生物被膜阳性组粪肠球菌esp和ebpA表达量分别是生物被膜阴性组的298倍和59倍,生物被膜阳性组粪肠球菌gelE和fsrB表达量分别是生物被膜阴性组的1/244和1/249.生物被膜组和浮游生物组细菌esp、ebpA、gelE和fsB基因的荧光强度比,差异无统计学意义(秩和检验^值分别为92、79、42和34,P均＞0.05).结论 esp、ebpA、gelE和fsrB基因与粪肠球菌生物被膜形成密切相关.esp和ebpA能促进生物被膜形成,gelE和fsB能抑制生物被膜形成.提示fsr系统能调节esp、ebpA和gelE基因的表达。

目的 通过动态监测患者住院期间MRSA携带情况,分析在未实施严格接触隔离措施的情况下,CP与MRSA交叉传播之间的相关性,进而评估CP在预测MRSA交叉传播中的作用.方法分别对2009年3-12月间我院急诊病房240例患者和RICU 94例患者进行动态MRSA定植调查.MRSA菌株经rep-PCR方法进行同源性分析.计算MRSA的WCP、CP界值和交叉传播率.分析患者暴露于不同CP时,MRSA交叉传播的相对危险度.结果急诊病房和RICU的MRSA入院携带率分别为6.25%(15/240)和13.83%(13/94),分别在13周和14周出现MRSA交叉传播;两个病房CP界值分别为6.49%和17.66%.高CP作用下,急诊病房MRSA交叉传播率(6.674‰)显著高于低CP时的交叉传播率(0.694‰,x2=7.10,P＜0.01),MRSA交叉传播RR为9.61(95%CI:1.25～74.00),RICU的MRSA交叉传播率(4.710%)显著高于低CP时的交叉传播率(0.297%,x2=12.60,P＜0.01),交叉传播RR为15.87(95%CI:2.06～122.10).结论高CP是MRSA交叉传播的重要危险因素,平均CP可作为预测MRSA交叉传播或加强隔离防控措施的指标。

目的 评估2010年CLSI M100-S20(S20)及2009年CLSI M100-S19(S19)文件中CAZ、CTX、CRO新旧折点变化对我国如何解释产ESBL大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌体外药物敏感性试验结果的影响.方法收集2005-2007年中国15家医院SEANIR监测项目中3种细菌琼脂稀释法药敏结果,用PCR-基因序列分析法和(或)药敏表型分析法去除产AmpC酶的菌株.用CLSI琼脂稀释法确定ESBL表型.3种抗菌药物对2 733株大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌的敏感性用WHONET5.4软件分别按S19和S20折点进行回顾性分析.对北京协和医院同时有琼脂稀释法和纸片扩散法药敏结果的207株3种肠杆菌科细菌用WHONET5.4软件进行散点图和回归性分析,观察S19和S20折点下3种抗菌药物两种方法的相关性.结果产ESBL的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌对CTX的耐药率分别由S19折点(64μg/m1)下的65.2%、55.5%和14.6%上升为S20折点(4 μg/ml)下的99.7%、96.2%和93.8%,敏感率则由S19折点(8 μg/ml)下的6.0%、11.5%和33.3%下降至S20折点(1μg/ml)下的0%、0.2%和0%.CRO的结果与CTX相近.虽然在我国产ESBL的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对CAZ的敏感率比CTX和CRO高,它们的耐药率也由S19折点(32μg/ml)下的30.3%和43.2%升为S20折点(16μg/ml)下的41.9%和55.9%,敏感率则由S19折点(8μg/ml)下的58.1%和44.1%降至S20折点(4 μg/m1)下的44.7%和28.0%.不产ESBL的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌在CTX、CRO和CAZ新旧折点下的敏感率为99.2%～100.0%,耐药率为0%～0.4%.琼脂稀释法CTX和CRO S20折点与ESBL表型分布具有良好的对应关系;琼脂稀释法和纸片扩散法回归性分析得CAZ、CTX和CRO的r值分别为0.67、0.79和0.77,P均＜0.01,S20与S19相比,纸片扩散法药敏正确分类均在可接受范围内.结论应用S20 CTX和CRO的新折点,药敏结果与ESBL检测结果一致性大大提高,临床医生可根据药敏结果结合临床情况合理选择抗菌药物,细菌室可不报告ESBL表型情况.S20 CAZ新折点与我国临床治疗结局相关性还有待进一步评估。

目的 建立临床不同背景情况下HA患儿产前诊断方案.方法对前来要求作HA产前诊断的15例孕妇进行遗传咨询,根据孕周和临床资料不同采取不同诊断方法.孕妇孕周＜23周,有先证者且已明确基因突变类型,抽羊水进行直接基因诊断和间接遗传连锁分析;有先证者但未明确基因突变类型,抽脐血进行间接遗传连锁分析和FⅧ活性检测;孕妇孕周＞23周且无先证者,抽脐血做FⅧ活性检测和性别染色体检查,但不能诊断携带者.直接基因诊断采用长距离PCR技术,对F8基因内含子22和内含子1倒位进行检测,找不到倒位者,行核苷酸测序;连锁分析采用F8基因内外的7个位点(DXS1108,F8Civs13,INTRON22,DXS1073,DXS9901,DXS15,DXS8069)以及性别位点(Amelo).产前诊断标本均需做母血污染鉴定.结果 15例产前诊断标本均无母血污染.明确诊断血友病A胎儿5例,其中脐血FⅧ活性＜1%的3例,1例伴21三体;F8基因22内含子倒位1例;F8基因23外显子错义突变p.Arg2182Cys 1例.结论对临床不同背景情况下采取不同方案进行HA产前诊断,可提高HA患儿检出率和准确性,最大程度地预防出生缺陷儿的发生。

目的 评价结肠癌和癌旁正常组织中TLR4 mRNA和NF-κB p65蛋白表达水平与结肠癌发生发展的相关性.方法 取手术切除的新鲜结肠癌组织和距癌组织2 cm以上的癌旁组织各63份,其中:结肠癌高分化型组23份,中分化型组17份,低分化型组20份,其他分化类型3份;伴淋巴结转移组27份,不伴淋巴结转移组36份;Dukes A期组18份,Dukes B期组14份,DukesC期组22份,Dukes D期组9份.采用实时荧光定量RT-PCR检测结肠癌组织和癌旁组织中TLR4 mRNA的表达水平;用WB法检测NF-κB p65蛋白的相对表达水平.结果 结肠癌组织中TLR4 mRNA表达量为86.42±15.16,明显高于癌旁组织的32.74±9.44,差异有统计学意义(t=22.354,P＜0.01).高、中、低分化型结肠癌TLR4 mRNA表达量分别为69.58±11.27、64.57±13.91、97.12±15.44,低分化型结肠癌表达量高于高、中分化型结肠癌(t值分别为11.304、12.223,P均＜0.01).伴淋巴结转移组TLR4 mRNA表达量(89.91±13.33)与不伴淋巴结转移组(81.16±13.59)比较,差异无统计学意义(t=0.959,P＞0.05).Dukes A期组TLR4 mRNA表达量(59.05±11.66)低于Dukes B～D期组的表达量(分别为92.32±17.51、91.41±15.21、101.46±17.43),差异有统计学意义(t值分别为8.708、9.664、9.525,P均＜0.05);结肠癌组织和癌旁组织NF-κB p65蛋白表达量分别为0.63±0.11、0.34±0.08,结肠癌组织NF-κB p65表达量高于癌旁组织(t=18.266,P＜0.01),高、中、低分化型结肠癌组织中NF-κB p65蛋白表达量分别为0.46±0.09、0.72±0.11、0.77±0.14,中低分化型组表达高于高分化型(t值分别为11.223、10.875,P均＜0.01),伴淋巴结转移组与不伴淋巴结转移组NF-κB p65表达量分别为0.82±0.17、0.57±0.12,且差异有统计学意义(t=18.269,P＜0.05).Dukes A期的NF-κB p65表达量(0.39±0.06)低于Dukes B～D期(分别为0.72±0.12、0.69±0.14、0.76±0.13),且差异有统计学意义(t值分别为10.442、9.889、9.721,P均＜0.01).结论 TLR4/NF-κB p65信号通路的表达水平升高与结肠癌的临床进展和病理分级密切相关;NF-κB p65可能是结肠癌转移的分子指标之一,TLR4/NF-κB p65升高可促进结肠癌的发生发展。

TOX是一种对人类具有极大潜在危害的细胞内寄生原虫,我国人群感染率为5%～20%[1].当患有艾滋病、肿瘤等免疫功能受损或抑制性疾病时,TOX作为一种机会性感染寄生虫可引起广泛的临床症状,甚至死亡[2].TOX还是引起先天性感染疾病的病原体之一,孕妇妊娠期间感染可造成胎儿宫内感染,常致畸胎、死胎,存活者也常有畸形、弱智及发育障碍[1,3].目前国内外对TOX感染的实验室诊断主要是血清IgG和IgM抗体检测.我们研制双标记TRFIA分析法定量检测TOX-IgG/IgM的试剂盒,并与德国赛润公司的ELISA试剂盒检测临床标本结果进行比较评价。

乳腺癌是女性常见恶性肿瘤,常发生同侧腋窝淋巴结及远处脏器转移,其中最常见的为骨转移[1],早诊断、早治疗是提高患者生活质量,延长生存时间的前提;同时临床上对发生骨转移和未发生骨转移患者的治疗方法有很大差别[2].因此,寻找乳腺癌骨转移标志,对临床乳腺癌诊断与治疗有重要意义.本研究检测206例乳腺癌患者血清ICTP和BGP,以评价其在乳腺癌骨转移中的临床价值。

目的 制备人类白蛋白来源一段小分子多肽的多克隆抗体,建立毛细管电泳检测该小肽方法,为临床早期诊断GVHD提供新的手段.方法人工合成序列为LVRYTKKVPQVSTPTL的16个氨基酸残基的人来源多肽,按兔100μg/kg体重肽抗原标准制成免疫原.按常规方法,每次取2.5 ml抗原悬液,在脊柱两侧皮下和腹股沟处多点注射,分3次免疫动物,制备多克隆抗体.采用异硫氰酸酯荧光素(FTTC)标记小肽抗原,用获得的抗体通过LIF-CE-IA建立该肽的检测方案.结果获得该肽的多克隆抗体的效价为1∶1000,且它与正常人血清、尿液以及牛血清间没有交叉反应;标记抗原出峰时间为5.93 min,抗原-抗体复合物分离时间为6.47 min,所建立的检测方法的线性范围为16～512 ng/ml,最低检出限为10 ng/ml.结论实验所获得的多克隆抗体具有较高的滴度和特异性,所建立多肽的检测方法简便、快速,可为今后临床早期诊断GVHD提供一种新的手段。

目的 建立血友病A患者血浆FⅧ同种抗体的ELISA检测方法,以评估经替代治疗的血友病A患者血浆FⅧ同种抗体的发生率.方法选取血友病A患者140例,其中重型84例,中型34例,轻型22例,所有患者均已经过FⅧ替代治疗;同时选取健康对照者80名.以本室制备的FⅧ单克隆抗体包被酶标板,封闭后加入重组人FⅧ,洗涤后加入待测稀释血浆,再次洗涤后加入辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG,邻苯二胺显色,记录490 nm处的吸光度(A490)值.所有患者血浆样本同时采用改良的Nijmegen方法检测抑制物活性.结果通过ELISA法检测,血友病A患者产生血浆FⅧ同种抗体阳性率为40.0%(56/140),重型、中轻型患者产生抗体的阳性率分别为47.6%(40/84)、28.5%(16/56),两组患者产生同种抗体的阳性率差异有统计学意义(x2=5.079,P＜0.05);采用改良的Nijmegen方法检测,血友病A患者产生FⅧ抑制物阳性率为24.3%(34/140),重型、中轻型患者产生抑制物的阳性率分别为33.3%(28/84)、10.7%(6/56),两组患者产生抑制物的阳性率差异有统计学意义(x2=9.349,P＜0.05).其中,25例通过ELISA法检测出同种抗体阳性的患者未被检出抑制物活性.ELISA法与改良的Nijmegen法检出的阳性率分别为40.0%(56/140)、24.3%(34/140),差异有统计学意义(x2=15.75,P＜0.01),具有相关性(rn=0.59,P＜0.01);且两种方法检出结果存在一致性(Kappa=0.55,P＜0.01).结论 ELISA法能够提高FⅧ同种抗体的检出率,血友病A患者经替代治疗后,血浆FⅧ同种抗体发生率并不低,重型患者产生抗体的阳性率高于中轻型患者。

2010年全国临床生化检验学术会议暨"医学检验在心脑血管疾病中的应用"研讨会于2010年8月5-7日在大连隆重召开,会议由中华医学会检验分会主办,大连市医学会检验医学分会承办.本届会议主席、中华医学会检验分会临床生化学组组长张捷教授主持了开幕式,大连市卫生局王范铭副局长到会祝贺并致词,中华医学会检验分会副主任委员郭健教授参加会议并发言,大连市医学会沈丽韫秘书长和中华检验医学杂志编辑部史红主任出席了大会开幕式。

浆细胞骨髓瘤的浆细胞胞质中可含有少许紫红色颗粒,有的可含有空泡或Russell小体,但出现短杆状或细针状包涵体者非常罕见,李早荣[1]称此为类Auer小体,国内郭步云等[2]报道了一例浆细胞Auer小体.我们在临床工作中遇到2例骨髓瘤患者的浆细胞中含有Auer样包涵体,对其形态学特点进行了详细观察,并以10种细胞化学染色方法进行了染色观察.现报告如下。

近年来,随着各类检测仪器和技术的不断发展,血栓与止血检测已从传统手工法发展为自动血凝仪测定,使血栓与止血实验室检测日趋简便,结果更加精确.与此同时不少公司研发了小型POCT设备,可监测口服抗凝药物患者的PT和INR,指导抗凝药用量,使其在安全和有效的浓度范围内.然而,由于POCT受到众多因素影响,检测结果可能出现较大误差.本研究利用美国Hemosense公司生产的英锐血凝仪,对不同专业人员使用血凝仪检测PT及INR结果进行比较,了解人员因素是否对POCT血凝检测结果产生影响。

目的 采用内含HCV RNA 5'非编码区的耐RNase病毒样颗粒作为质评血清阳性样本用于全国室间质量评价,评价临床实验室定量检测HCV RNA的能力,分析我国HCV RNA定量检测商品试剂盒存在的问题,以促进我国HCV RNA检测质量的提高.方法 2008年和2009年卫生部临床检验中心向全国开展HCV RNA检测的临床实验室每年寄发2次定值质评血清,每次包括5份样本,各实验室在规定时间内进行检测并回报结果.质评血清中的阳性样本为与WHO标准物质(NIBSC 96/798)比对定值的病毒样颗粒,实验室检测阳性样本的结果需在质评血清靶值对数值±0.5范围内.2008年2次质评血清涵盖了国内常见的HCV基因型,2009年2次质评血清为1b型病毒样颗粒系列稀释样本.对2009年第2次室问质评3种试剂(21001、21078和21097)阳性样本定量检测结果进行单因素方差分析,方差不齐则采用Dunnett'S T3和Tamhane'S,T2法进行统计.结果 回报定量检测结果的实验室2008年为390家,而2009年达到428和426家,不同基因型检测结果对数值均在靶值对数值±0.5范围内的实验室数有所差别,1b型样本为大于91.0%,2a型样本分别为93.7%和74.2%,6型样本分别为83.3%和80.3%,同一年检测结果含量低的样本CV高于含量高的样本CV,发生假阴性结果的样本均为低含量样本.2008年第1次、第2次及2009年第1次质评分别有5、1和10家实验室低于检测限样本出现了假阳性.2009年第2次室间质评3种试剂检测4种质评血清,检测结果比较差异均有统计学(F值分别为288.23、324.79、291.98和261.16,P均＜0.01).结论实验室检测低含量样本的能力有待提高,不同基因型检测中,2a和6型样本检测能力有待提高。

患者男,58岁.因2008年7月26日凌晨4时在无明显诱因的情况下出现腹痛、腹泻,脐周围阵发性绞痛,解黄色稀水便10余次,量较多,同时伴有发热、恶心、呕吐,来北京积水潭医院就诊.入院后体检:体温38.8℃,无畏寒、寒战,无里急后重以及其他不适症状.患者否认病前不洁饮食史,否认伤寒,无其他慢性病史。

患者,女,43岁,临床诊断为骨髓增生异常综合征,有多次输血史.2009年10月26日再次入院申请输注4 U红细胞.患者交叉配血不合,主侧发生较强凝集(盐水、抗人球蛋白介质均凝集),次侧无凝集,随即进行血型血清学检查。

病历摘要 　　患者男,77岁.2010年2月因"乏力、腹胀、双下肢浮肿2个月,气急半个月"入院.2个月前患者无明显诱因出现乏力、腹胀,呈进行性加重,伴有面色苍白,双下肢浮肿,未予重视.半个月前,患者无明显诱因在上述症状基础上出现气急,轻微活动时即感呼吸困难,夜间需半卧位,腹胀进行性加重,遂来浙江大学医学院附属第一医院就诊.实验室检查:贫血,白细胞增高,脾肿大,右侧胸腔积液.既往史:1962年因"胃穿孔"行"胃大部切除术",2003年因"睾丸鞘膜积液"行手术治疗,2008年因"前列腺增生"于本院行"膀胱镜下前列腺电切除术".有"心房颤动"病史1年余,未予特殊治疗.体检:体温36.5℃,心率92次/min,呼吸22次/min,血压137/79 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa).神清,贫血貌,精神疲软,慢性病容,双侧颈部、腋下、腹股沟均可触及数枚直径约1 cm大小的淋巴结,界清,活动度可,无压痛.胸骨压痛阳性.双肺叩诊右下肺呈浊音,听诊呼吸音粗,右下肺呼吸音减弱,未闻及明显干性及湿性哕音.心律不齐,第一心音强弱不等,各瓣膜听诊区未闻及明显病理性杂音.腹膨隆,上腹部正中可见一长约15 cm的纵行陈旧手术瘢痕,全腹无明显压痛及反跳痛.肝右侧肋缘下约2 cm,质中,边缘钝,无压痛.脾左侧肋缘下平脐,厚约8 cm,右侧至正中线,质硬,边缘钝,无压痛,移动性浊音阴性.双下肢轻度凹陷性水肿.神经系统查体无明显阳性发现。

HCV感染的临床检测指标主要有抗-HCV和HCVRNA,此外还有HCV核心抗原,但目前尚未在临床实验室推广应用.由于HCV RNA采用RT-PCR方法检测,对实验室有特定要求,因而临床实验室检测HCV感染的最常用的标志物是抗-HCV.抗-HCV是HCV感染的临床诊断、健康人群体检和血液筛查中的一个重要的血清学指标.抗-HCV初筛检测目前在临床实验室基本上均采用ELISA和化学发光免疫分析方法,确认方法则为RIBA和RT-PCR(针对RIBA不确定的标本).在临床实验室如何建立HCV感染的检测程序以及正确地报告和解释结果,对于及时正确地诊断HCV感染有决定性意义。

目的 确定中国SFDA批准上市销售的国产HCV RNA扩增荧光定量试剂的量值X(copies/ml,lg)与标准物质的参考值Y(IU/ml,lg)之间的换算公式.方法用人AB型血清将WHO第二代HCV RNA国际标准品(编号:96/798)配制成不同浓度的样本7份,7份标准品的浓度分别为100 000、50 000、25 000、10 000、5 000、2 500、1 000 IU/ml.采用国内3种HCV RNA荧光定量试剂的2个不同的批次检测这7份不同浓度范围的标准品,每个批次重复测定4次.检测方法采用实时荧光定量PCR.结果 HCV RNA荧光定量试剂盒的量值X与标准品参考值Y之间的关系,试剂A:Y=0.902 0 X+0.284 9,R2=0.953 3,P＜0.01,n=56;试剂B:Y=0.875 7 X+0.562 4,R2=0.956 5,P＜0.01,n=56;试剂C:Y=0.843 8 X+0.560 5,R2=0.945 8,P＜0.01,n=56.结论 3种试剂的量值与标准品参考值之间的换算公式不同,提示3种试剂的量值应进行更严格的溯源.3种试剂的换算公式能将其量值初步标准化,使不同试剂的量值之间具有可比性,为HCV感染的临床诊断和治疗监测初步提供统一的HCV RNA载量检测标准。

建立一种基于纳米磁珠为介质的核酸提取和富集方法,提高国产HBV核酸检测试剂的分析灵敏度,用于痕量HBV DNA的测定.方法选择经抗病毒治疗HBV DNA浓度≤1×104 IU/ml的乙型肝炎患者血清标本50份.标准品采用WHO HBV DNA标准品.通过纳米磁珠实现对HBV核酸的吸附浓缩,提高提取的HBV核酸模板的浓度.以瑞士罗氏公司HBV DNA检测试剂和4种国产试剂原有的核酸提取检测方法为对照,评价该方法对国产核酸检测试剂的改进效果.结果纳米磁珠核酸提取方法与国产试剂结合后,国产试剂的分析灵敏度分别达到10和50 IU/ml,与罗氏试剂的分析灵敏度12 IU/ml基本相当.4种国产试剂盒内自带提取试剂检测临床乙型肝炎患者血清中痕量HBV DNA阳性检出率分别为64%(32份)、56%(28份)、62%(31份)和58%(29份),与罗氏试剂阳性检出率88%比较,差异具有统计学意义(x2值分别为7.895、12.698、9.013、11.416,P均＜0.05).纳米磁珠核酸提取方法与国产试剂结合后,阳性检出率分别为88%(44份)、88%(44份)、88%(44份)和86%(43份),与罗氏试剂(88%)比较,阳性检出率差异无统计学意义(x2值分别为0.000、0.000、0.000、0.088,P均＞0.05).HBV核酸浓度为101～103 IU/ml时,病毒核酸浓度对数值与循环阈值呈负相关,但是比103～106 IU/ml浓度范围的相关性下降.结论以纳米磁珠为介质建立的核酸提取方法可显著提高国产HBV DNA检测的分析灵敏度,对监测乙型肝炎患者血液中痕量HBV DNA含量具有重要意义。

目的 分析近6年来HBV血清标志物检出率变化情况.方法收集3家大型医院2003-2008年6年间排除肝炎及相关病区共70 582例住院患者.采用AxSYM微粒子酶免疫分析技术检测HBV血清标志物5项,包括HBsAg、HBeAg、抗-HBc、抗-HBe和抗-HBs结果及相关资料,并将每例5项标志物结果作为一种模式,对各项标志物及模式检出率逐年变化情况进行回顾性分析.结果 HBV血清标志物5项检出率由高到低依次为抗-HBc(55.17%)、抗-HBs(49.57%)、抗-HBe(28.42%)、HBsAg(8.92%)、HBeAg(2.12%),且6年来均呈逐渐下降趋势.HBsAg由2003年的9.30%降至2008年8.70%,1992年以后出生人群HBsAg检出率(2.28%)明显低于总人群检出率(8.92%),且逐年下降趋势明显,从2003年的3.57%降至2008年1.85%.每项标志物检出率男性(HBsAg、HBeAg、抗-HBc、抗-HBe和抗-HBs检出率依次为12.38%、2.72%、56.57%、41.50%、65.48%)均高于女性(HBsAg、HBeAg、抗-HBc、抗-HBe和抗-HBs检出率依次为7.25%、1.58%、53.43%、28.35%、50.00%),差异有统计学意义(x2值分别为509.74、105.78、69.66、1 321.61、1 726.91,P均＜0.01).在70 582例患者中,5项HBV血清标志物结果可归纳为26种模式,检出率≥1%的模式有8种,"全阴性"模式占第一位,6年间无明显变化.近6年来,人群不同年龄段不同检测模式检测结果不同,≤20岁人群以"全阴性"和"抗-HBs单独阳性"模式为主,＞20岁人群以"抗-HBc和(或)抗-HBe、抗-HBs阳性"等模式为主."HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性"和"HBsAg、抗-HBc、抗-HBe阳性"等模式检出率呈两端低、中间高分布,20～70岁人群检出率高.结论近6年HBV血清标志物检出率呈缓慢下降趋势,低龄人群HBsAg检出率明显下降.总人群HBV感染率依然较高,不断改进HBV血清筛查技术对于降低HBV感染率十分重要。

HBV在我国以及整个亚洲地区有很高的感染率,根据WHO的统计,全世界三分之一的人口曾感染过HBV,其中2%～5%为慢性感染[1].HBV血清学标志物检测是目前临床诊断、治疗、分析和判断HBV感染者病程及传染性的重要依据之一,也是临床实验室最主要的检测项目.在HBV感染的检测中,HBsAg是最为重要的血清学标志物,血清中检出HBsAg是乙型肝炎的早期诊断指标之一.国外检测HBsAg试剂盒说明书均提出,测定结果有反应性的标本应做中和试验,排除可能的假阳性结果。

编辑同志: 　　拜读了贵刊2010年33卷第6期蒋颜等[1]的研究报道,令人兴奋.应用MALDI-TOF-MS技术鉴定细菌,近年来国外才有开展,作者能在国内迅速开展并取得研究成果,笔者深感敬佩.但也许由于文章字数的限制,使笔者对文中的一些内容不太理解,希作者指教。

编辑同志: 　　就路秀文和吕锦读者对<MALDI-TOF-MS在临床常见菌快速鉴定中的应用研究>一文中提出的疑问做如下说明: 　　实验所用基质液为三氟乙酸(TFA)蒸馏水的肉桂酸(α-cyano-4-hydroxy-cinnamic acid)饱和溶液。

由中华医学会中华检验医学杂志编辑委员会、中华医学会检验分会微生物学组和国家食品药品监督管理局细菌耐药性监测中心共同主办的“第四届全国细菌耐药监测与临床专题学术会议”，定于2010年11月9—12日在珠海召开。

近年来许多报道国内优秀科研成果的论文首先投向国外，特别是被美国科学引文索引（SCI）收录的高水平国际期刊上，以有助于促进国际间的学术交流，让世界更好地了解中国。为了将这些高质量、有影响的论文介绍给国内的广大读者，中华检验医学杂志开设了“在国外发表的SCI论文介绍”栏目，目的是使国内更多的读者共享我国的科研成果和相关学科的进展。

为顺应当今期刊网络化、数字化的发展趋势，更好地为广大作者、读者提供高质量的服务，本刊从2009年5月15日起已开通中华检验医学杂志网站及稿件远程管理系统。网站的开通，将为广大读者、作者、编者提供一个学术交流和沟通的平台。通过本刊网站，读者、作者、编者将能及时了解本领域的国内外学术动态及各专业学术会议的召开事宜。

1．统计研究设计：应交代统计研究设计的名称和主要做法。如调查设计（分为前瞻性、回顾性或横断面调查研究）；实验设计（应交代具体的设计类型，如自身配对设计、成组设计、交叉设计、析因设计、正交设计等）；临床试验设计（应交代属于第几期临床试验，采用了何种盲法措施等）。主要做法应围绕4个基本原则（随机、对照、重复、均衡）概要说明，尤其要交代如何控制重要非试验因素的干扰和影响。