2008年 · 第31卷第10期

近年来我国HIV检测工作在政府"四免一关怀"政策的推动下得到了飞速发展.全国HW检测数量迅速增加,检测的领域也在不断扩大,从单一以血清学检测的诊断和血液筛查为主,扩展到为临床治疗、科学研究和为国家防治策略服务.HIV检测工作已逐渐由CDC系统为主转变为多系统共同参与,而且许多HIV检测新领域是由临床医疗部门的实验室开拓的.这既适应了我国AIDS检测工作的实际需求,也推动了我国HIV检测技术水平的稳步提高。

我国已进入了艾滋病(AIDS)流行的快速增长期,全国34个省、自治区和直辖市均已发现HIV感染病例,HIV正由高危人群向一般人群扩散.我国政府十分重视AIDS防治工作,采取了切实有效的应对措施,开展了大量综合预防、治疗、关怀和支持工作.目前已建立了较完善的AIDS检测和监测实验室网络,大规模AIDS抗病毒治疗已在我国全面展开.中国的AIDS防治形势发生了重大变化。

HIV感染的实验室检测是HIV感染者和AIDS患者的最基本诊断依据.但是,HIV检测不是单纯的业务项目,与其他传染病实验室检测项目不同,特别要求HIV检测的敏感度和特异度几近100%.如果其结果假阳性,会影响个人、家庭和社会的稳定,甚至导致受检者过激行为,有自杀举动;如果是假阴性,则会造成受检者不能及时接受医学干预,可以通过血液和性生活辗转传播,增加对社会的传染性.截至2007年底,全国已批准了HIV筛查实验室6 918家,确认实验室202家.为此卫生部正式颁布的<全国艾滋病检测工作管理办法>(下称办法),其目的 是使HIV检测工作走上法制化管理,是当前AIDS作为我国重点防治疾病的一项技术保障措施.本文还就<办法>发展和出台的过程,以及当前医院检验科要特别关注对<办法>执行过程中某些条款的理解,均作了简要说明。

目的 探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIRs)2D基因及其配体HLA-Cw等位基因与强直性脊柱炎的遗传易感性是否相关.方法 以PCR-SSP基因分型技术检测105例强直性脊柱炎患者KIR2D基因(KIR2DL1、2DS1、2DL2、2DL3、2DS2)和HLA-Cw01～08等位基因,并将HLA-Cw01～08分成HLA-Cwlys和HLA-Cwan两组,分别计算KIR2D基因、HLA-Cw等位基因及活化性KIR/HLA-Cw组合基因型频率,并与51例骨关节炎患者和120名健康人群比较.结果 强直性脊柱炎组患者HLA-Cwlys基因频率为0.269 7,高于骨关节炎组患者的0.148 2(P=0.024)和健康对照者的0.138 8(P=0.001).强直性脊柱炎组患者KIR2DS1/HLA-Cwlys组合基因型阳性率为26.67%,明显高于骨关节炎组的11.76%(P=0.039)和健康对照组的13.33%(P=0.018).结论 HLA-Cwlys可能与强直性脊柱炎遗传易感性相关;当抑制性受体KIR2DL1的特异性配体HLA-Cwlys存在时,KIR2DS1基因携带者可能是强直性脊柱炎的高危人群。

目的 筛查耐氟康唑白念珠菌ERG11基因突变,探讨其与耐药的关系.方法 用柯玛嘉显色培养基和25S rDNA转座内含子保守区分型方法,收集鉴定白念珠菌临床株.联用微量稀释法和Rosco药敏纸片扩散法体外测定试验菌株对氟康唑的敏感性.以ERG11序列明确的白念珠菌标准耐药株ATCC 76615-19和达令顿株为质控,以标准敏感株C1b和临床敏感株02928为对照,分3段扩增临床耐药株ERG11基因并测序.结果 获得15株A型白念珠菌临床耐药株.ERG11基因测序共发现16处同义突变和11处错义突变.质控株突变与既往报道一致.敏感株共出现9处同义突变和3处错义突变G640A(E165K)、A945C(E266D)、G1609A/G(V488I).耐药临床株中的14株均出现2处共有的错义突变G487T(A114S)和T916C(Y257H),不伴其他突变;另1株出现8处同义突变和4处错义突变R541C(Y132H)、T495A(D116E)、A530C(K128T)、T1493A(F449Y),其中T1493A(F449Y)未见报道.结论不同来源的白念珠菌临床耐药株集中发生G487T(A114S)和T916C(Y257H)突变,暗示这2处突变极可能参与菌株耐药.耐药株可以发生T1493A(F449Y)突变。

目的 了解上海地区肺炎链球菌中大环内酯类抗生素高耐药菌株的同源性.方法 采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法对47株临床分离大环内酯类抗生素耐药肺炎链球菌(MRSP)进行同源性分析,并运用多位点序列分型(MIST)对其中6株多重耐药MRSP进行分子遗传学分析,结合血清分型推测其与国际流行克隆株的关系.结果 上海地区ermB和mefE基因阳性大环内酯类抗生素高耐肺炎链球菌中存在流行克隆A型(45%)、B型(17%).PFGE图谱A型的6株多重耐药MRSP菌株都属于亚洲流行克隆CC236(Taiwan19F-14 clone).上海地区发现一个新的MIST型别ST2116(15-16-19-15-6-20-125),推测其由CC236经基因水平交换进化而来.结论上海地区大环内酯类高耐肺炎链球菌的快速增加部分是由于耐药克隆株的播散所致。

目的 了解初筛试验疑似产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)但确证试验未能确认,而对头孢吡肟敏感的大肠埃希菌和克雷伯菌属中的ESBLs和质粒介导的AmpC酶.方法 纸片扩散法检测18株细菌对常用抗菌药物的敏感性;PCR及多重PCR法检测细菌中的ESBLs和质粒AmpC酶基因;质粒转移接合试验检测耐药质粒的可传递性;细菌基因间重复一致序列(ERIC)-PCR法检测供体大肠埃希菌和受体E.coli J53及其接合子的同源性;脉冲场凝胶电泳(PFGE)对11株大肠埃希菌和6株肺炎克雷伯菌进行同源性分析.结果 18株细菌均为2005年1月至12月期间上海华山医院临床分离的菌株,其中大肠埃希菌11株,肺炎克雷伯菌6株,产酸克雷伯菌1株,按常规方法对细菌进行重新鉴定和药敏试验.18株细菌经美国临床和实验室标准协会(CLSI)推荐的ESBLs初筛试验结果均为ESBLs产生可疑菌株,但确证试验未能确认;所有菌株的头孢吡肟抑菌圈直径均在18 mm以上,显示敏感.PCR检测结果显示,11株大肠埃希菌中有9株产CIT型质粒AmpC酶,DNA测序及序列比对结果证实为CMY-2型AmpC酶,未发现TEM、SHV、CTX-M、PER、VEB、SFO等广谱或ESBLs;6株肺炎克雷伯菌中有5株产DHA型质粒AmpC酶,DNA测序及序列比对结果证实为DHA-1型AmpC酶;5株产DHA-1型AmpC酶的肺炎克雷伯菌株中,4株同时伴有广谱或ESBLs:其中2株产SHV-11型广谱酶,另2株分别产CTX-M-14型ESBLs和SHV-62型ESBLs;1株产酸克雷伯菌亦单产DHA-1型AmpC酶;质粒转移接合试验结果表明,携带耐药基因的质粒可从供体菌转移至敏感细胞中;PFGE结果显示,6株肺炎克雷伯菌的谱型各不相同,而11株大肠埃希菌可分为5种谱型,其中B型包含7株细菌,这7株细菌均产生质粒介导的CMY-2型AmpC酶,并分离自外科病房,提示可能存在克隆菌株的流行传播.结论在确证试验未能确认的疑似产ESBLs中,对头孢吡肟敏感的大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌主要产生质粒介导的AmpC酶,但尚有少数菌株同时伴有产ESBLs.对同时产生ESBLs和AmpC酶的菌株,临床微生物实验室必须报告这些菌株对头孢吡肟耐药。

目的 研究重症监护病房(ICU)出现的碳青霉烯耐药的黏质沙雷菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌等肠杆菌科细菌的分子流行病学及耐药机制.方法 2006年4月-2007年2月,从我院2个ICU病房分离到对碳青霉烯耐药或敏感性降低的21株黏质沙雷菌、10株肺炎克雷伯菌和1株大肠埃希菌.用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和肠杆菌基因间重复性一致序列-PCR(ERIC-PCR)分析这些菌株的分子流行病学.用接合试验、质粒消除试验、质粒图谱分析、等电聚焦电泳(IEF)、特异性PCR扩增和序列分析以及外膜蛋白分析等技术研究细菌对碳青霉烯耐药的分子机制.结果 21株黏质沙雷菌为同一克隆株;10株肺炎克雷伯菌亲缘关系相近.亚胺培南和美罗培南对黏质沙雷菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的MIC为2～8μg/ml,肺炎克雷伯菌K10为128和256μg/ml.所有菌株接合试验均获得成功,亚胺培南和美罗培南对接合子的MIC由原来的≤0.125μg/ml上升到1～2μg/ml.IEF、PCR扩增和序列分析证实黏质沙雷菌产KPC-2型碳青霉烯酶[等电点(p1)为6.7]和pI为6.5的β内酰胺酶;肺炎克雷伯菌产TEM-1(pI5.4)、KPC-2、CTX-M-14(p17.9)和pI为7.3的β内酰胺酶;大肠埃希菌产KPC-2、CTX-M-15(pI 9.0)和pI为7.3的B内酰胺酶;所有接合子均只产KPc-2一种β内酰胺酶.所有接合子质粒DNA的EcoR Ⅰ、Hind Ⅲ和Bcu Ⅰ限制性酶切图谱完全相同.外膜蛋白的十二烷基磺酸钠一聚丙烯酰胺电泳和基因序列分析发现肺炎克雷伯菌KIO由于OmpK36基因中存在插入序列ISEcp1而导致OmpK36膜孔蛋白的缺失.结论我院ICU病房出现大量碳青霉烯耐药的黏质沙雷菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌;KPC-2是引起这些细菌对碳青霉烯耐药或敏感性降低的主要原因;KPC-2合并膜孔蛋白缺失可导致肺炎克雷伯菌对碳青霉烯高水平耐药;同一种编码blaKPC-2的质粒在3种不同属的细菌之间传播。

目的 探讨联合检测炎症性肠病(IBD)患者血清中抗酿酒酵母细胞抗体(ASCA)和抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)对IBD诊断和鉴别诊断的应用价值.方法 用ELISA法和间接免疫荧光法分别测定159例IBD患者[溃疡性结肠炎(UC)97例,克罗恩病(CD)62例],167例主诉为腹痛、腹泻并除外IBD的患者和25名健康人血清中IgG型与IgA型ASCA和ANCA.结果 ASCA-IgA/IgG在CD组、UC组、疾病对照组和健康对照组中的阳性率分别为43.5%、14.4%、29.3%和0;CD组的阳性率显著高于UC组和疾病对照组(X2值分别为16.76、4.12,P分别<0.01、<0.05).ANCA在以上各组中的阳性率分别为8.1%、56.7%、4.8%和0;UC组中阳性率显著高于CD组和疾病对照组(X2值分别为38.08、90.47,P均<0.01);ASCA+/ANCA-组合诊断CD的敏感度、特异度、阳性预测值分别为40.3%,93.8%和80.6%;而ANCA+/ASCA-组合诊断UC的敏感度、特异度和阳性预测值分别为48.5%,98.4%和97.9%;ASCA在手术治疗与未手术治疗CD患者中的阳性率差异具有统计学意义(P=0.03).结论 ASCA或ANCA单项检测不能有效的筛选IBD患者,但2项指标联合检测有助于对UC和CD进行鉴别诊断.同时检测IgA型和IgG型ASCA可提高CD诊断的敏感度.中国人群中ASCA阳性可能与手术治疗相关。

目的 探讨荧光定量PCR(fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)技术对Rh阴性孕妇血浆中游离胎儿DNA进行非创性产前诊断胎儿RhD血型的可行性.方法 选取78份妊娠11～40周、B超确诊为单胎的Rh阴性孕妇血浆.采用9个短串联重复序列(short tandem repeat,STR)多态性位点及Y染色体性别决定区基因(sex-determining region Y chromosome,SRY)确定胎儿DNA的存在;运用FQ-PCR技术对血浆中游离胎儿DNA进行RHD基因外显子5、7、10和内含子4定量分析,以确定胎儿RhD血型的基因型;其基因型结果与产后新生儿脐血血清学检测结果进行对比分析,回顾性评价胎儿基因定型结果的准确性.结果 78份标本中,41份检测到SRY基因,平均浓度为(214.7±120.9)拷贝/ml,产后证实皆为男性.70份FQ-PCR基因定型结果与血清学结果相符,另有5份确定为假阳性,3份基因定型结果不可确定,检测结果总符合率为90%(70/78).5份假阳性标本通过检测RHD1227A等位基因鉴定了4份RhD放散型,FQ-PCR最终结果准确率达到95%(74/78).结论应用FQ-PCR方法进行非创性胎儿RhD血型检测可用于新生儿溶血病的预防和诊断。

目的 探讨慢性淋巴细胞白血病(CLL)中T淋巴细胞CD38(CD38-T)的表达特征.方法 应用多参数流式细胞术检测83例CLL患者肿瘤细胞中CD38表达(CD38-B)、zeta链相关蛋白-70(ZAP-70)以及CD38-T、CD4/CD8比值的表达情况.结果 在所有患者中,CD38+-T占49.4%(41/83),CD38+-B占50.6%(42/83),CD38+-T和CD38-B表达有高度相关性(r=0.553,P<0.01);表达ZAP-70+CD38+-T和ZAP-70-CD38+-T的患者占67.5%(56/83),CD38-T与ZAP-70的表达有相关性(r=0.349,P<0.01).Binet A期患者中CD38+-T占33.3%(14/42),Binet B+C期患者中CD38+T占65.9%(27/41);XD38+-T与临床分期,CD4/CD8比例倒置有相关性(r=0.312、0.453,P<0.05).结论 CD38-T表达变化与患者病情进展及转归密切相关,CD38高表达的患者多伴有免疫功能调节紊乱或失衡,可作为CLL的一项全新独立的监测指标。

目的 通过对断指再植患者血浆中血管性血友病因子(VWF)与P选择素(GMP-140)水平变化的动态观察,探讨断指再植术患者血液出现高凝状态与再植成活率的关系.方法 选择2004年12月至2006年12月断指再植患者80例(再植组),采用定量ELISA法测定再植组患者术前、术后的VWF与P选择素水平,并与健康对照组比较;观察再植组术后2个指标的动态变化;比较同一观察时间点再植成活组与失败组间VWF与P选择素水平.结果 再植组与健康对照组间VWF水平差异有统计学意义(F=14.76,P<0.01);再植组血浆VWF水平在术后1、4、8、16 h分别为(1 715±493)、(1 396±549)、(1 266±504)、(1 163±436)U/L,与健康对照组(903±187)U/L比较,差异有统计学意义(P<0.01);再植组与健康对照组间P选择素水平差异有统计学意义(F=11.76,P<0.01);再植组血浆P选择素水平在术后1、4、8、16、24 h分别为(14.7±2.6)、(12.5±3.0)、(11.8±3.2)、(11.1±3.0)、(10.5±2.6)μg/L,与健康对照组(9.1±1.2)μg/L比较,差异有统计学意义(P<0.01).再植成活组VWF水平在术前、术后1、4、8、16、24、48、72 h分别为(854±209)、(1 535±389)、(1 177±407)、(1 040±283)、(958±216)、(829±193)、(777±151)、(713±137)U/L;再植失败组分别为(1 202±164)、(2 333±243)、(2 146±161)、(2 039±244)、(1 865±170)、(1 645±283)、(1 427±331)、(1 188±262)U/L,同一时间点组间比较,差异有统计学意义(t值分别为4.44、5.12、6.10、8.43、10.17、8.85、5.10、4.61,P均<0.05);再植成活组P选择素水平在术后1、4、8、16、24、48、72 h分别为(13.9±2.5)、(11.2±2.0)、(10.2±1.6)、(9.6±1.2)、(9.2±0.9)、(9.5±0.6)、(9.3±0.4)μg/L;再植失败组分别为(17.2±1.0)、(16.9±1.0)、(17.0±1.3)、(16.1±1.1)、(14.9±1.5)、(13.8±1.4)、(12.8±1.2)μg/L;同一时间点组间比较,差异有统计学意义(t值分别为5.22、9.91、10.35、12.79、9.46、9.45、9.33,P均<0.01);术后不同时间段VWF、P选择素有动态变化,在术后1～4 h升高明显,持续至24、48 h后逐渐恢复至术前水平.结论断指再植术后血液呈高凝状态与VWF与P选择素水平有关.动态监测两者水平对判断血液出现高凝状态和抗凝治疗有一定的指导意义。

目的 利用气-质联用技术测定尿液中有机酸种类及含量的变化,为先天性遗传代谢病,特别是有机酸代谢紊乱提供新的诊断依据.方法 收集临床高度怀疑为有机酸代谢紊乱的195例患儿的尿液标本,根据肌酐含量取相应体积的尿样和内标,加盐酸羟胺对带羟基的有机酸进行圬化反应生成酮体后,用乙酸乙酯和乙醚萃取有机酸,三甲基硅烷衍生;测定采用Agilent GC/MS 6890/5973i气相质谱仪,选择扫描模式检测,测定质荷比(m/z)范围在50～550 m/z的所有有机酸,数据处理采用Agilent GCMSD ChemStationGl701DA软件.用健康对照样本中加人的内标和阳性对照样本中加入的阳性有机酸进行分析方法的线性范围、精密度、准确性、样本回收率和残留分析.结果 该方法可测定尿液中100余种有机酸,以健康对照者尿样中加入的二甲基丙二酸(MMA)和2-苯基丁酸(2-PA)内标为参考,最低检测极限为2.5～2.8μmol/L;批内和批间变异系数均<10%,样本前处理批间变异系数为11.4%;样品回收率为95%～105%,残留分析<1%,所有参数均符合临床检测的要求.用该方法检测的临床患儿尿样中,发现诊断阳性病例12例,包括6例甲基丙二酸血症、1例丙酸血症、3例酪氨酸血症Ⅰ型、1例枫糖尿病和1例Ketosis病(酮症病).结论本研究建立了气-质联用技术分析测定尿液中有机酸的方法,可用于先天性遗传代谢性疾病的筛查诊断。

目的 通过基因克隆在巴斯德毕赤酵母中表达人自身抗原Sm B'.方法 PCR扩增Sm B'基因,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-Sm B'.用电穿孔法转化酵母菌Sm D1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上清液用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(WB)鉴定,并用免疫酶斑点法和免疫印迹法(immunoblot,IBT)检测与评价分析30例系统性红斑狼疮(SLE)患者、30例混合结缔组织病患者和30名健康体检者血清中抗-Sm B'水平差异.结果 PCR产物约700 bp,与预期657 bp接近,pPIC9k-Sm B'重组阳性克隆测序结果与核酸数据库报道完全一致,双酶切鉴定正确,表达产物Sm B'的相对分子质量约32 000,WB法证实表达产物具有天然Sm B'分子的免疫原性,阴性对照菌未见目的 表达条带.免疫酶斑点法检测阳性率为46.7%(42/90),IBT的检测阳性率为51.1%(46/90);2种方法检测结果一致性较佳(Kappa值=0.911 2,P<0.01).结论 Sm B'在巴斯德毕赤酵母中分泌表达成功,这为Sm B'试剂盒研究奠定了基础。

目的 研究冻存大鼠胚胎神经干细胞(NSCs)异体移植对脊髓损伤(SCI)的修复作用.方法 45只Wistar大鼠于SCI后2 d随机分为A、B、C 3组,每组15只,分别在SCI处注入相同体积的生理盐水、NSCs、低温冻存后复苏的NSCs.术后分别通过免疫组化和组织切片鉴定移植细胞的分化与存活、BBB运动评分和斜板实验评定大鼠功能恢复,细胞存活率,以及评价NSCs低温冻存情况.结果 免疫组化及组织切片显示,B、C组在移植区均有NSCs的特异性表达nestin阳性细胞存活,而A组无表达;脊髓空洞面积A组[(3.9±0.1)mm2]与B组[(1.2±0.3)mm2]和C组[(1.1±0.3)mm2]比较,组间差异有统计学意义(F=423.949,P<0.01),而B、C组间的差异无统计学意义(P＞0.05).BBB评分:A组[(2.0±0.5)分]与B组[(16.4±0.8)分]和C组[(16.0±1.4)分]间的差异有统计学意义(F=970.157,P<0.01),但B、C组间差异无统计学意义(P＞0.05);斜板实验评分:A组[(31.3±2.9)度]与B组[(46.8±2.1)度]和C组[(46.5±2.4)度]间的差异有统计学意义(F=151.099,P<0.01),B、C组间差异无统计学意义(P＞0.05).低温冻存后复苏液的NSCs细胞存活率[(55.9±5.2)%]与未冻存[(65.1±3.4)%]差异无统计学意义(t=3.334,P＞0.05).结论冻存NSCs复苏后仍具有活跃的增殖和分化潜能,是SCI移植治疗有价值的细胞资源。

尼克酰胺N-甲基化酶(nicotinamide N-methytransferase,NNMT)是S-腺苷-L-蛋氨酸依赖的胞质酶.其主要的生物学作用是参与生物转化,催化一些吡啶衍生物,如吡啶、喹林、β-咔林等的甲基化。

健康人尿液的颜色一般呈淡黄色,但会随着气候、饮食的不同而变化.尿液颜色变化较大的原因主要与尿液的酸碱度、尿中色素成分的浓度有关.而紫色尿液是非常罕见的情况,往往提示着病理变化.笔者在门诊患者中发现1例紫色尿袋综合征,现报道如下,以引起检验人员的注意。

患者女,0岁.2006年11月14日因"腹痛、腹腔透析液混浊3 d"入院.既往有糖尿病、高血压病史.体检体温36.3℃,搏84次/min,吸21次/min,压160/90mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa).腹胀,非征(+).腹腔积液常规:浊,BC 460×1066/L,核白细胞0.45,核0.55.血生化:蛋白49.7 g/L,蛋白24 g/L,酐891mmol/L,素23.4 mmol/L,萄糖2.72 mmol/L;血常规:WBC 7.7×109/L,性粒细胞0.88,b 67 g/Lo确诊为:1)慢性肾功能不全(尿毒症);(2)腹腔透析置管术后细菌性腹膜炎。

患者女,4岁,民,"发热、腹痛16 d,嗽,血丝痰2 d"住院.患者16 d前无明显诱因出现畏冷、发热,温最高38.5℃,左上腹部闷痛,食后频发呕吐, d前腹痛加剧, d前无明显诱因出现咳嗽,血丝痰,量约35 ml/d。

患者男,5岁.因"确诊1型糖尿病25年,力、纳差2个月"入院. 　　患者20岁时确诊为1型糖尿病,时予以胰岛素替代治疗,糖控制良好.目前患者胰岛素剂量为48 U/d,3次皮下注射.未发现患者有肾功能不全、外周神经病变等严重的糖尿病并发症.患者2个月前始感乏力,时伴有头晕、心悸现象,时感食欲较前明显减退,餐仅进食1两,进餐时有早饱、恶心不适。

血清胆固醇升高是心血管病重要危险因素,而胆固醇检测是一项重要的常规检验项目.笔者简述胆固醇生物化学、临床意义、测定方法及胆固醇测定标准化的历史沿革。

答：1997年Hayashi等在干燥综合征（SS）患者血清中发现了一种针对唾液腺导管上皮细胞的器官特异性自身抗体，其靶抗原经鉴定为人类骨架蛋白α-胞衬蛋白（α-fodrin）。α—fodrin是相对分子质量为120000的器官特异性抗原，也是SS患者涎腺组织中的一种特异性自身抗原，可从NFs／sld鼠模型的腮腺组织中纯化。

答：胆碱能受体3（M3）是一种主要分布于外分泌腺及平滑肌的胆碱能受体，也是一种G-蛋白偶联受体，可介导腺体的分泌。目前发现干燥综合征（SS）患者免疫功能异常可导致抗M3抗体产生。以人工合成的M3 25肽及鼠眶泪腺泡细胞膜提取物为抗原，ELISA法测定SS患者血清中抗M3抗体的敏感度为80％-90％，特异度可达90％，

答：临床上少部分患者符合系统性红斑狼疮（SLE）的诊断标准，抗核抗体（ANA）却持续阴性；此组患者约占全部SLE患者的2％，被称为SLE的1个亚型。其原因可能为无ANA抗体产生；抗体被受累组织（如皮肤或肾组织）所结合，或由于它们隐藏在循环免疫复合物中；或因应用肾上腺皮质激素及免疫抑制剂所致；或因病情进入肾病终末期，大量蛋白从尿排出，肾基底膜消耗增加，患者呈低蛋白血症有关。

答：C1q是一种由18个多肽链组成的糖蛋白，含3个不同的亚单位，相对分子量分别为29000、26000和19000。C1q与2个C1r和C1s分子形成复合物，即补体系统的第一个成分C1，在补体经典激活途径中起重要作用。同时还参与介导单核巨嗜细胞系统清除感染因素，凋亡产物及免疫复合物。1971年，Agnello等最先在SLE患者血清中发现一种能够与固相C1q结合的小分子反应物。

答：亚细胞蛋白质组学（Subcellular proteomics）是近年来随着细胞器分离技术和蛋白质组学技术发展而产生的新领域，也是现在蛋白质组学研究的新方向。亚细胞蛋白质组学充分利用细胞器分离技术的优势，引入蛋白质组学研究中的蛋白定量技术、定位技术和差异分析技术，致力于亚细胞结构的蛋白组成、功能分析以及在某些生理或病理条件下的变化研究。

答：代谢组学（Metabonomics）的概念最早是1999年由Nicholson提出，从整体上研究复杂生命现象的一门新兴学科，亦是系统生物学的重要组成部分。代谢组学主要研究生物整体、系统、器官或细胞的内源性代谢物质及其所受内在或外在因素的影响，代谢物质种类、数量及其变化规律。代谢组学与基因组学和蛋白组学比较有其独特的优点，

目的 分析237例HIV/AIDS患者中原发性耐药的发生率和病毒亚型分布情况.方法 从河南、云南、上海等20个地区采集237例未经抗病毒治疗的HIV/AIDS患者血浆HIV-1进行基因测序,通过病毒亚型分析软件REGA HIV-1 Subtyping Tool确定测序样本的HIV-1亚型,并与斯坦福大学HIV耐药数据库比对确定测序样本HIV-1耐药相关突变位点.采用b-DNA方法检测患者血浆病毒载量,采用流式细胞仪检测CD4+ T淋巴细胞计数.结果 237例未接受抗病毒治疗的HIV/AIDS患者感染的HIV-1毒株分布为A1、B、C、CRF01-AE、CRF02-AG、CRY7-BC、CRF08-BC、CRF12-BF、G等9个不同亚型,可能的感染时间分布在1990-2006年.237例患者中仅有3例分别对核苷类逆转录酶抑制剂高度耐药、蛋白酶类抑制剂低度耐药和非核苷类逆转录酶抑制剂高度耐药,原发性耐药的发生率为1.3%(3/237).结论我国部分地区未经抗病毒治疗的HIV/AIDS患者中HIV-1原发性基因型耐药的发生比例处于较低水平,病毒亚型分布在9个亚型。

目的 建立耐药变异研究队列,以明确我国HIV/AIDS患者抗病毒治疗反应及耐药变异发生和变化情况.方法 招募HIV感染者116例,每半年进行1次问卷调查,同时进行CD4+ T淋巴细胞计数、病毒载量和耐药检测.结果 应用AZT/DDI/NVP或D4T/DDI/NVP方案者,治疗36个月后CD4+ T淋巴细胞计数仍维持在较高水平[(470±251)个/ml],病毒载量低于治疗前水平,随着治疗时间的延长,耐药逐渐增加;更换为AZT/3TC/NVP或D4T/3TC/NVP方案者,随着治疗时间的延长,CD4+ T淋巴细胞计数逐步下降,病毒载量升高,耐药明显上升;治疗前仅1例存在原发非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTI)高度耐药突变,治疗6个月有2例出现了交叉耐药,治疗12个月后出现了蛋白酶抑制剂(PI)LPV的中度耐药,治疗18个月后NNRTI的高度耐药明显增加,治疗36个月后5例出现多药耐药和交叉耐药.结论我国艾滋病抗病毒治疗前原发耐药很少,随着治疗时间延长,耐药突变逐渐增加,虽然治疗方案较少,但坚持长期治疗仍能保持治疗效果,建议根据耐药检测结果更换治疗方案。

目的 探讨河南省46例HIV/AIDS患者外周血单个核细胞载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3G(APOBEC3G)mRNA表达水平与艾滋病疾病进展的相关性.方法 采用实时定量PCR方法检测HIV感染不同疾病进展期患者外周血单个核细胞APOBEC3G mRNA表达水平;采用流式细胞仪进行CD4+T淋巴细胞的绝对和相对计数;采用全自动载量仪检测血浆HIV病毒载量.结果 河南省46例HIV/AIDS患者外周血单个核细胞APOBEC3G mRNA水平明显低于健康对照(t=4.887,P<0.01),缓慢进展组APOBEC3G mRNA水平显著高于HIV组和AIDS组(P<0.05).HIV/AIDS患者APOBEC3G mRNA表达水平与CD4+T淋巴细胞数呈正相关(R2=0.190,P=0.002),与病毒载量呈负相关(R2=0.094,P=0.038).结论河南省HIV/AIDS患者外周血单个核细胞APOBEC3G mRNA表达水平与HIV感染疾病进程密切相关,APOBEC3G高表达可能是延缓疾病进程的保护性因素之一。

目的 通过对HIV感染者和AIDS患者血常规总淋巴细胞数(TLC)、Hb、PLT、WBC与CD4+ T淋巴细胞计数相关性的研究,探讨用血常规多项指标检测联合预测HIV/AIDS患者CD4+ T淋巴细胞计数的可行性.方法 778例HIV/AIDS患者共采集1 038份血样,血常规中四项指标:TLC、Hb、WBC、PLT与CD4+T淋巴细胞计数相关分析采用Spearman秩和相关.绘制受试者工作特征(ROC)曲线以判断各项指标预测CD4+T淋巴细胞计数的真实度及其最佳临界值,计算各临界值的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值.采用联合试验评价多指标联合预测CD4+ T淋巴细胞计数<200个/μl的可行性.结果 TLC、Hb、WBC、PLT与CD4+T淋巴细胞计数之间均存在正相关,相关系数分别为r=0.64,P=0.000;r=0.36,P=0.000;r=0.24,P=0.000;r=0.09,P=0.000.TLC、Hb预测CD4+ T淋巴细胞计数的ROC曲线下面积分别在0.82～0.84、0.66～0.70之间.单独使用TLC预测CD4+ T淋巴细胞计数<50、200、350个/μl的最佳临界值分别为TLC<1 100 × 106/L、1 200 ×106/L、1 400 × 106/L.TLC<1 200 × 106/L与Hb<120 g/L联合预测CD4+ T淋巴细胞计数<200个/μl的敏感度为45.3%,特异度为82.8%.结论本研究结果显示TLC<1 200 ×106/L与Hb<120g/L联合预测CD4+ T淋巴细胞计数<200个/μl的临床使用价值不高。

近年来许多报道国内优秀科研成果的论文首先投向国外，特别是被美国科学引文索引（SCI）收录的高水平国际期刊上，有助于促进国际间的学术交流，让世界更好地了解中国。为了将这些高质量、有影响的论文介绍给国内的广大读者，《中华检验医学杂志》将开设“在国外发表的中国论文介绍”栏目，目的是使国内更多的读者共享我国的科研成果和相关学科的进展。

编辑同志: 　　贵刊2008年第3期刊登了杨绍敏等[1]的<艾滋病合并隐球菌脑膜炎17例临床与实验室诊断分析>一文,中作者使用氟康唑(FCA)加两性霉素B(AmB)对艾滋病合并隐球菌脑膜炎(CM)的患者进行治疗,将FCA作为推荐药物使用.笔者认为治疗药物选择存在不妥。

编辑同志: 　　阅读贵刊2008年第3期李琼芬等[1]的<外周血涂片中检出组织胞浆菌一例>一文,者认为该病例的诊断缺乏真菌培养的资料,从末梢血涂片中出现圆形或卵圆形小体即判定为组织胞浆菌(Histoplasma capsulatum)难以使人信服,其实马尔尼菲青霉菌(Penicillium marneffei)也可见于血涂片中.马尔尼菲青霉菌病与组织胞浆菌病的临床与病理表现非常相似,多数检验人员对其缺乏认识.真菌培养对这两种病的诊断和鉴别诊断极其重要,菌培养是确定病原菌最为可靠的方法.这2种真菌都是温度双相性真菌,25℃及37℃下培养时均有不同的特征。

编辑同志: 　　编辑部转来的张晓宁的读者来信已阅,信中有关"隐球菌脑膜炎治疗药物"提出以下看法供参考: