2005年 · 第28卷第04期

毛细管电泳(CE)是90年代最重要的分离分析技术，在医药、环保、各类检验和生命科学领域显示了及其重要的应用前景，是人类进入纳米时代一种有重要潜在价值的分析手段。它与通常检验方法相比，CE有分析速度快、准确、灵敏度高、分析成本低等，从小分子、离子到生物大分子均可分析。随着人类基因组计划的完成，后基因组时代的到来，基因组学和蛋白质组学的快速发展，

卵磷脂-胆固醇酰基转移酶(LCAT)是循环中游离胆固醇酯化的主要酶,它转移卵磷脂sn-2位的脂肪酰基至胆固醇,生成胆固醇酯和溶血卵磷脂.LCAT与高密度脂蛋白(HDL)结合,故胆固醇酯化主要发生于HDL.LCAT在HDL代谢和胆固醇逆转运中发挥重要作用[1,2],而HDL代谢及胆固醇逆转运与动脉粥样硬化关系密切.LCAT功能和活性研究一直受到重视,研究内容之一是LCAT活性与某些病理生理状况的关系.研究LCAT活性的方法有多种,其中一种是测定胆固醇酯化速率[3].血浆(或血清)在适当温度下温育,由于LCAT的作用,血浆游离胆固醇降低,胆固醇酯等幅升高,游离胆固醇降低或胆固醇酯升高速率可在一定程度上反映LCAT的活性。

近大半个世纪以来,随着临床医学及实验室技术的不断进步,尿液检查已成为评估健康、疾病状态,尤其是判断肾脏疾病的一种最常用且不可取代的检查项目.然而,目前对尿液分析无论是临床或实验室,投放的研究精力均显不足;临床与实验室缺乏相应的对话及沟通;实验室对尿液分析的重视程度不够;实验室对尿液分析存在的问题及发展远景认识不甚明确.因而迄今为止,尿液分析并不能完全满足肾脏病临床研究的需求.纵观肾脏病临床及尿液分析领域,以下几方面的问题应引起我们的高度重视:

20世纪后期,抗生素的发现和应用控制了大多数由细菌引起的感染,明显降低了与感染相关的死亡率.但细菌耐药性的出现和传播使得某些抗生素逐渐失去其抗菌活性.抗生素耐药性的全球化,耐药菌株的传播,要求我们必须进行全球范围的细菌耐药性监测和研究工作[1-3]。

随着高效广谱抗生素的广泛应用,抗肿瘤治疗的深入开展,器官移植和外科其他介入性治疗的不断应用,皮质类固醇激素的广泛应用,以及获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者的不断增多,侵袭性真菌感染的发生呈现上升趋势,真菌感染的病情亦十分严重,念珠菌已经成为引起血行感染的第4位的病原菌,侵袭性曲霉病已经成为白血病和骨髓移植受者等重症免疫受损(immunocompromised)机体发生死亡的主要原因[1,2].除了常见病原真菌感染的数量不断增多外,一些少见或罕见真菌引起的感染也时有报告,因此,越来越多的临床和科研工作者都在关注着真菌感染的防治.面对病原真菌的种类和真菌感染类型的不断增多,以及新型抗真菌药物的不断问世,临床工作者如何正确选择高效敏感的抗真菌药物,并有效防治真菌感染,尤其是挽救重症真菌感染患者的生命,具有特别重要的意义。

临床实验室的职能就是准确、迅速、及时地为临床医生提供具有诊断意义的检验信息和数据,因此,异常检验结果的处理及"危急值"的建立就显得尤为重要.所谓检验"危急值"也被称为"panic value"[1],即当这种检验结果出现时,这说明患者可能正处于危险的边缘状态,此时如果临床医生能及时得到检验信息,迅速给予患者有效的干预措施或治疗,就可能挽救患者生命,否则就有可能出现严重后果,失去最佳抢救机会.所以,"panic value"是表示危及生命的检验结果,故把这种检验数据称为危急值(critical value).这种"危急值"制度的建立是<医疗事故处理条例>举证中的重要部分,也是临床实验室认可的重要条件之一。

目的 以变性高效液相色谱(DHPLC),分析检测家族性高胆固醇血症(FH)一汉族家系成员的低密度脂蛋白受体(LDLR)基因突变,以明确诊断.方法收集临床诊断为家族性高胆固醇血症的汉族一个家系共37名成员,其中30人为一级和二级亲属,7名为亲属配偶作为对照,提取基因组DNA,聚合酶链反应(PCR)方法扩增LDLR基因包含启动子和全部基因编码区(1-18外显子)及临近的内含子序列共21个片段, 琼脂糖凝胶电泳鉴定产物.采用DHPLC技术检测了LDLR基因,对洗脱曲线异常者进行核苷酸序列分析.结果该家系中发现4处变异,其中1处经核苷酸序列测定明确了突变的性质为第3内含子的剪接突变,并在此家系5名成员中得到证实,而对照组中未检出.结论成功地建立了以DHPLC筛查LDLR基因点突变的方法及技术参数, 该方法简便,结果稳定,可作为大样本筛查突变位点的一种便捷可靠手段。

目的 检查全血贮存对血清总胆固醇(TC)和高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)的影响,并探讨其可能机制.方法建立高效液相色谱(HPLC)方法,测定不同个体全血样品经不同温育后血清TC、总游离胆固醇(TFC)、HDLC和高密度脂蛋白游离胆固醇(HDLFC),计算有关参数或指标并做统计分析.结果建立的HPLC方法平均批内变异系数0.22 %～0.51 %;全血温育造成血清TC和HDLC变化(平均0.6 %～2.1 %和2.0 %～4.1 %),有些个体变化明显(TC >±3 %,HDLC>±5 %).结论建立血清TC、TFC、HDLC和HDLFC的精密测定方法;血清TC和HDLC在不同条件下的全血贮存中,受血清体积变化、血细胞-脂蛋白间胆固醇交换或转移等许多复杂因素的影响而发生变化;血脂测定标本应尽量减少不必要的贮存。

目的 探讨白细胞介素6(interleukin 6, IL-6)基因启动子上游-174G/C和-634C/G基因多态性,在冠心病患者和正常人群中的分布及与冠心病的相关性.方法应用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性技术,对汉族199例冠心病患者及189名正常人群,白细胞介素6基因-174G/C、-634C/G位点进行研究,同时结合血脂、脂蛋白和载脂蛋白水平,探讨两者之间的关系.结果正常人群和冠心病患者的-174 G等位基因频率均为0.99.-174 C等位基因频率均为0.01.-634C等位基因频率在正常人群和冠心病患者分别为0.82和0.76,G等位基因频率分别为0.18和0.24,两者差异有统计学意义(P< 0.05).冠心病患者-634GG基因型频率(0.08)明显高于对照组(0.02)(P< 0.05).结论白细胞介素6基因-174位点多态性与冠心病无关,而-634位点多态性与冠心病有相关性.G等位基因可能是汉族人群冠心病的易感性标志。

目的 探讨汉族人肝脂酶(HL)基因启动子-514C/T多态性与2型糖尿病合并冠心病的关系.方法采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测了114例2型糖尿病合并冠心病患者、127例2型糖尿病患者和106名健康对照组汉族人HL基因启动子-514C/T多态性基因型,探讨了其对血脂、脂蛋白和载脂蛋白水平的影响.结果糖尿病组与对照组HL基因启动子-514C/T多态性基因型和等位基因频率分布差异无统计学意义,糖尿病合并冠心病组的CT和TT基因型频率分布明显低于对照组(0.439 比 0.613,P＜ 0.05),但是等位基因频率分布差异无统计学意义.3组研究对象中,HL基因启动子-514C/T多态性基因型和等位基因分布频率与性别、家族史、吸烟史及体重指数无明显关联性.当调整了性别、年龄、体重指数(BMI)、吸烟史、冠心病和高血压家族史等因素后,Spearman相关及线性回归分析显示,所有2型糖尿病患者(糖尿病组与糖尿病合并冠心病组)中,T等位基因与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白AⅠ(apoAⅠ)呈明显正相关;Logistic回归分析显示,T等位基因不是冠心病发生的独立危险因素.结论在2型糖尿病及其冠心病合并症中,HL基因启动子-514C/T基因多态性对血脂水平有一定影响.CT和TT基因型分布频率低可能与2型糖尿病大血管病变的发生相关联。

目的 分析人苍白杆菌的耐药性及AmpC酶. 方法回顾性分析2001年至2003年我院分离到的83株人苍白杆菌耐药性,并对2004年2月保存的8株菌株,采用浓度梯度法测定12种抗菌药物的最低抑菌浓度,三维试验分析β内酰胺酶及PCR扩增耐药基因,脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)分析同源性.结果 83株人苍白杆菌均来自肝移植患者的血液标本,对大多数β内酰胺类抗生素有很强的耐药性,但对喹喏酮类、碳青霉烯类和氨基糖苷类抗菌药物有较好的敏感性,敏感率均在80%以上.8株人苍白杆菌PFGE条带完全一致,来自同一克隆株,且均产AmpC酶,与OCH-4酶(CAC17624)同源性最高为99%.结论人苍白杆菌对大多数头孢菌素和青霉素类抗生素有很强的耐药性与其产AmpC酶有关。

目的 探索表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术(SELDI)在传染性非典型肺炎又称[严重急性呼吸综合征(SARS)]早期诊断中的应用价值.方法用SELDI检测SARS患者组和对照组血清,建立诊断模型,然后进行单盲模型验证.结果通过检测37例SARS患者和74名健康对照者血清,发现早期SARS患者血清中有4种特异性蛋白质荷比峰(M/Z)-3 939.08、4 137.71、8 136.64和11 514.20,其中4 137.71下调,另3种上调,并以此建立SARS诊断模型,对37例SARS患者和73名对照者血清进行单盲检测,敏感性为97.3%(36/37),特异性为91.8%(67/73).结论用SELDI可从早期SARS患者中筛选出4个特异蛋白质荷比峰,以此建立的诊断模型可配合临床对SARS患者进行早期诊治。

目的 监测北京地区2000-2003年与腹泻有关的肠道致病菌的组成及耐药状况,为本地区的流行病学研究、疫苗的制备及临床合理用药提供依据.方法通过常规大便培养,筛出致病菌后经生化及血清学进一步鉴定到种、群或血清型,并以纸片扩散法测定了抗菌药物的敏感性.结果肠道病原菌1 542株,以男性为主,儿童和青年发病为多,7～9月为腹泻发病高峰.病原以志贺菌属居首位占65.1%,其次是弧菌属占23.4%,而单胞菌属、沙门菌属及大肠杆菌分别占5.7%、4.4%及1.5%.各菌属对抗菌药物的敏感率有差异,福氏志贺菌和沙门菌属多重耐药较多,而宋内志贺菌和弧菌属对多种抗菌药物敏感.结论北京地区感染性腹泻的病原种类多,有性别、年龄、季节的分布特点,耐药性不同,应重视监测.

目的 探讨医院真菌感染,分析病原菌及病因.方法采集近3年住院患者感染的深部标本进行真菌培养API鉴定,浓度梯度法抽样做白念珠菌的药敏试验及临床资料分析.结果 3年共检出1 225株真菌,2001-2003年检出率分别为24.2%、27.8%、48.0%.除念珠菌外还分离到隐球菌、马尔尼非青霉菌、组织胞浆菌等.两性霉素B耐药率仅3.3%,而氟康唑的耐药率3年分别为3.4%,8.3%,13.3%.结论真菌感染及其耐药率逐年上升,并与基础疾病及抗生素的使用有关。

目的 了解健康儿童不同月份流感嗜血杆菌的携带状况及血清分型.方法对2002年9月至2003年6月杭州某甲级幼儿园2～5岁的入托儿童随机进行每周1次的咽拭子培养,用V因子、X因子试验鉴定流感嗜血杆菌,用玻片凝集法进行血清分型,用纸片扩散法进行药敏试验.结果连续10个月中受检儿童848例,217例(占25.6%)携带流感嗜血杆菌,其中1月份的携带率最高,达34.8%,6月份的携带率最低,为12.6%,儿童在12月、1月、2月、3月4个月中的总携带率显著高于其他6个月(χ2=10.95,P<0.001).217例携带者共分离到223株流感嗜血杆菌,不可分型菌株180株,占80.7%;可分型菌株占19.3% (43株),包括a型4株,c型2株,d型35株,e型1株和f型1株,未分离到b型流感嗜血杆菌.61株(27.4%)菌株产生β内酰胺酶,28.6%的菌株对氨苄西林耐药,且不可分型菌株对氨苄西林的耐药率显著高于可分型菌株(χ2=4.19,P<0.05).结论本研究中健康儿童对流感嗜血杆菌的携带率以12月、1月、2月和3月份为高,可分型流感嗜血杆菌以d型占绝对优势,新型菌苗的研制已成为一项紧迫的任务。

目的 探讨胃瘦素在幽门螺杆菌(Hp)相关性胃炎中的病理生理学作用.方法根据胃镜和组织学检查诊断为慢性胃炎的61例患者作为研究对象.用Hp-ureA-PCR、14C呼气试验、快速尿速酶试验对受检对象做Hp感染诊断用酶联免疫吸附试验检测Hp感染阳性和阴性患者胃黏膜组织上清液、血清瘦素的水平,用放射免疫实验检测胃黏膜组织上清液IL-1β、IL-1Ra的水平.结果其中Hp 感染阳性的慢性胃炎患者31例,Hp感染阴性的慢性胃炎患者30例. Hp感染阳性组胃瘦素水平明显高于Hp感染阴性组,两组间比较差异有统计学意义(P< 0.01),血清瘦素水平两组间比较差异无统计学意义(P> 0.05);胃组织上清液IL-1β水平两组间比较差异无统计学意义(P> 0.05).相关性分析显示Hp感染阳性组胃瘦素与IL-1β显著负相关(r=-0.78,P< 0.01) .结论胃瘦素可能通过自分泌或旁分泌作用局部影响胃的功能,同时可能通过调节IL-1β/IL-1Ra的平衡而在Hp相关性胃炎的发生发展及转归中起作用。

目的 建立定量检测多药耐药基因(MDR1)甲基化状态的方法.方法在MDR1基因启动子区含甲基化位点的-102～+186 bp片段间设计1条正义引物和2条反义引物,采用不同的反义引物,经3次聚合酶链反应(PCR)获得较目的片段缺失30 bp的竞争内标DNA片段,以Pbluescriptsk+为载体构建竞争内标DNA质粒;待检基因组DNA经甲基化敏感的限制性内切酶HpaⅡ消化后与竞争内标DNA竞争扩增MDR1基因; PCR产物经琼脂糖凝胶电泳和凝胶成像分析仪扫描,目的片段量等于反应体系中竞争内标量乘以目的片段与竞争内标片段的光密度比值, HpaⅡ酶切与未经酶切标本所得目的片段量的比值为甲基化率.结果倍比稀释的基因组DNA与最佳量竞争内标共扩增MDR1基因启动子区目的片段,两扩增产物量的比值与基因组DNA量呈显著正相关,相关系数r=0.992,P<0.001.结论本方法用于MDR1 基因甲基化定量检测,操作相对简单,定量准确可靠,适用于临床研究中大量样本检测。

目的 探讨应用基因免疫法制备凝血酶调节蛋白 (throbomodulin, TM) 抗体.方法运用基因免疫法,即PCR特异性扩增TM胞外编码区所有碱基片段(包括信号肽,TMLEO),构建pcDNA3.1/TMLEO真核表达质粒.以碱裂解法提取,PEG沉淀法纯化质粒.将纯化后的质粒pcDNA3.1/TMLEO经生理盐水稀释后直接肌肉注射免疫BALB/c小鼠,检测质粒pcDNA3.1/TMLEO在小鼠体内有无表达以及TM抗体的效价和特异性.结果通过RT-PCR以及TM含量测定在RNA以及蛋白水平上均说明质粒pcDNA3.1/TMLEO在小鼠体内有表达.以EVC-304包板的cell-ELISA检测抗体滴度, 随着免疫次数的增加,小鼠血清抗体滴度明显增加,到第五次达到最高1∶ 8 000,第6～7次均保持在这一水平.小鼠抗血清通过免疫印迹(Western blot)和免疫组织化学鉴定,特异性好.结论在天然TM提取纯化困难的情况下,通过基因免疫制备抗体是可行的。

目的 在毕赤酵母中表达出高免疫反应性和特异性的重组乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg),探讨该表达产物在乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)免疫检测中的应用.方法用PCR从含有乙型肝炎病毒DNA模板的质粒中扩增出编码HBcAg 的C基因,插入pPIC9酵母表达载体.携带有C片段的pPIC9转化毕赤酵母菌株GS115,经甲醇诱导表达HBcAg.分别用分子筛纯化毕赤酵母表达的HBcAg(A)、单克隆HBcAb特异结合纯化毕赤表达的HBcAg(B)、分子筛纯化大肠杆菌表达的HBcAg(C)、单克隆HBcAb特异结合纯化大肠杆菌表达的HBcAg(D)作为固相抗原,辣根过氧化物酶标记多克隆HBcAb为探测抗体,用竞争抑制法酶联免疫吸附测定(competitive inhibition ELISA)检测HBcAb标准品及含有乙型肝炎病毒PCR阳性和阴性血清的临床标本.结果聚丙烯酰胺凝胶电泳、immunoblot、ELISA显示HBcAg在毕赤酵母中高效表达;分别用抗原A、B、C、D制备的试剂检测中国药品生物制品检定所HBcAb国家参考品:试剂A与B结果相同: 阴性符合率(-/-)15/15,阳性符合率(+/+)15/15;最低检出量(稀释度):灵敏度参考品?=1∶ 128,3#=1∶ 16,4#=1∶ 64.试剂C与D结果相同:阴性符合率(-/-)15/15;阳性符合率(+/+)14/15;最低检出量(稀释度):灵敏度参考品2#=1∶ 32;3#=1∶ 16;4#=1∶ 32;大肠杆菌抗原的灵敏度明显低于毕赤酵母抗原.对乙型肝炎病毒PCR阳性及阴性的临床标本进行检测,结果如下: PCR阳性组HBcAb阳性检出率:试剂A 97.8%; 试剂B 98.1%;试剂C 96.6%;试剂D 91.4%;A、B、C三组间比较差异无统计学意义(P＞0.05);D分别与A、B、C相比较差异均有统计学意义(P＜0.005).PCR阴性组HBcAb阴性检出率:试剂A 80.3%;试剂B 80.9%;试剂C 75.0%;试剂D 85.7%;AB两组比较差异无统计学意义(P＞0.05); AC、AD、BC,BD、CD相比较差异均有统计学意义(P＜0.005);分子筛纯化的大肠杆菌HBcAg含有干扰检测的杂质,结果出现假阳性;大肠杆菌HBcAg存在表位缺失导致结果出现假阴性.结论毕赤酵母表达系统高效表达出具有良好免疫反应性和特异性的HBcAg,用于HBcAb的检测灵敏度及特异性均优于大肠杆菌表达产物。

目的 利用小片段干扰RNA(siRNA)在肝癌细胞内诱导RNA干扰(RNAi),抑制端粒逆转录酶(hTERT)基因表达,在体外进行RNAi对肝癌治疗的试验研究.方法构建针对hTERT基因的siRNA(siRNA-hTERT),转导入肝癌细胞7721,在瘤细胞内诱导RNAi,采用流式细胞分析、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法、免疫组化等技术检测siRNA处理前后细胞增殖及hTERT基因表达变化.结果 siRNA-hTERT对肝癌细胞生长抑制率达37.5%;细胞周期中S期细胞明显减少,G1/G0期细胞显著增加;hTERT基因的mRNA表达由99.4%下调到53.1%,其蛋白表达由86.3%下调到46.6%.结论 RNAi在体外明显抑制了肝癌细胞中hTERT基因的表达和瘤细胞增殖。

目的 检测11株耐万古霉素肠球菌(VRE)的耐药表型、基因型以及多耐基因.方法采用纸片扩散法、微量稀释法、自动化仪器、浓度梯度法测定11株VRE对万古霉素(Van)、替考拉宁(Tec)的耐药表型,微量稀释法测定11株VRE对10种抗菌药物的最低抑菌浓度;多重聚合酶链反应检测vanA、vanB、vanC1、vanC2并对van基因产物进行测序,聚合酶链反应检测TEM、tetM、ermB、aac(6′)/aph(2′′)、ant(6)-Ⅰ、aph(3′)-Ⅲ基因.结果不同药敏方法测得11 株VRE对Van、Tec的药敏结果有差异;11 株VRE对红霉素(9/11)、环丙沙星(7/11)、左氧氟沙星(7/11)、利福平(8/11)、氯霉素(7/11)耐药程度较高,高水平庆大霉素耐药株(HLGR)、高水平链霉素耐药株(HLSR)分别占10/11和9/11.11株VRE检出1株VanA、4株VanB、5株VanC1,1株VanC2,基因型和表型一致;耐药基因TEM(8/11)、tetM(6/11)、ermB(7/11)、aac(6′)/aph(2′′)(7/11)、ant(6)- I(5/11)、aph(3′)-Ⅲ(9/11)检出率高.结论 VRE确证试验以及准确检测其 MIC值是筛查VRE不漏诊的可靠方法;van基因的检测是从分子水平确定VRE准确特异的方法;耐药基因的高检出率体现了VRE复杂的耐药机制。

目的 了解深圳地区艾滋病患者中Ⅰ型人类免疫缺陷病毒 (HIV-1)毒株各亚型的感染情况,及其不同亚型对患者疾病进程的影响.方法采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法对26例艾滋病患者血浆中的HIV-1毒株的env基因片段进行扩增,并对扩增片段进行序列测定和分析,同时检测其CD4+细胞计数与血浆病毒载量.结果基因系统树显示深圳地区26例艾滋病患者的HIV-1毒株env基因序列,B亚型12例,其中1例与欧美B亚型序列十分接近,11例与中国云南B亚型序列十分接近;循环重组亚型AE(CRF01-AE)13例,均与泰国AE亚型序列十分接近.比较B、AE亚型感染患者的CD4细胞计数与病毒载量之间的差异无统计学意义.结论深圳地区艾滋病患者中以HIV-1毒株以B亚型和循环重组亚型AE最常见,尚未观察到B、AE亚型对艾滋病进展的影响。

目的 采用实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ-PCR) 技术分析肝癌组织中增殖诱导配体(APRIL)及其受体mRNA的表达水平.方法在APRIL及其受体基因的高保守区设计相应引物和荧光探针,实时检测PCR产物的荧光强度,根据标准品建立的标准曲线,由软件自动计算出待测样本中靶基因mRNA准确含量,并以靶基因和内参β2M mRNA含量的比值作为评价靶基因表达水平的指标.结果 RFQ-PCR检测靶基因mRNA含量的线性范围为10～109 pg/ml,批内和批间重复性测定的变异系数v分别为3.87%～10.12%和6.86%～12.29%.20例肝癌组织样本的检测结果显示肝癌及癌旁组织中APRIL和BCMA的水平均显著高于远端正常组织(P<0.01),而TACI的表达水平在三组间差异无统计学意义(P>0.05).结论成功建立RFQ-PCR检测APRIL及其受体mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性;而且发现APRIL在肝癌发生、发展过程中可能起了重要作用,有可能还参与了肿瘤细胞的转移,并主要是通过受体BCMA而不是TACI发挥作用。

固定化抗体与相应细胞表面抗原结合常用于造血干细胞分选,白血病免疫分型,及磁性微球在血液病中的应用等.但均不能满足高通量分析与研究的要求.我们已用蛋白质微阵列技术研究多克隆抗体检测RBC的价值[1],但鲜见固定单克隆抗体检测WBC的研究报道.人白细胞分化抗原(CD)45为WBC表面共同抗原,我们通过观察固定CD45单克隆抗体与WBC结合效果,找出最佳试验条件,为WBC检测及分型的蛋白质微阵列芯片研制和应用奠定基础。

传统的CD4阳性淋巴细胞的检测方法是通过计数外周血总白细胞和淋巴细胞百分比来计算T淋巴细胞亚群的绝对数.这一方法需用手工或血细胞计数仪来计数总白细胞(WBC)和各分类白细胞,再用流式细胞仪或显微镜得出淋巴细胞亚群百分比,相乘得出CD4T淋巴细胞的绝对数.这种双平台方法由于多步骤测定方法,得到的结果误差很大,一定程度上限制了其临床应用.FACSCount系统是BD公司最近研发的一个是专门设计用来自动计数CD3+,CD3+CD4+(CD4+), CD3+CD8+(CD8+)阳性细胞及CD4+/CD8+比值的集成细胞计数仪,样本标记步骤简捷,可以直接测量T细胞各亚群细胞的绝对数量而无须计数外周血白细胞和淋巴细胞百分比[1].本研究选用另一种单平台计数淋巴细胞各亚群的方法,以FACS MultiSET系统作为参照系统来比较两个系统得到数据的精确性、重复性以及操作特点等,评价使用FACSCount系统临床应用的可行性。

高原缺氧,低氧分压,低大气压,致使吸入气氧分压(PIO2)明显低于平原,从而使长期居住在高原的人群动脉血氧分压(PaO2)显著低于平原地区人群,加之心脏畸形及肺血管病变,从而使得肺血管阻力增高,右心室增大肥厚,气血交换差,出现紫绀.本研究旨在研究高原单纯室间隔和室间隔缺损伴肺动脉高压患者在体外循环围术期动脉血气-酸碱的变化。

禽流感病毒(AIV)不仅对禽类有较高的易感性,现对人也有感染性.快速诊断是对AI的防治的首要步骤.巢式聚合酶链反应(PCR)检测方法比鸡胚分离法方法快速、敏感[1].本研究对巢式PCR技术进行优化,较好地解决了操作中相对繁琐和易引起交叉污染的问题。

血栓与止血(thrombosis and hemostasis)的检测,对研究出血病和血栓病的发病机制、临床诊断、观察疗效、监测用药以及估计预后等都有重要的价值.下面作一简述。

类孟买型是一种罕见的血型,我们在献血者中发现1例类孟买型OAHm,报告如下. 先证者男,46岁,汉族,云南宣威县双河乡人.曾在宣威县血站献血多次,均作为O型血给同型患者输用.首次到我血液中心献血,初检血型发现其正反定型不符,经进一步检查,证实为类孟买型OAHm.

掌黑癣,又称黑色角质真菌病,是一种多发生在热带和亚热带的由暗色孢科真菌引起的皮肤角质层感染,本病属浅表的暗色丝孢霉病,我院于2004年6月收治1例。

目的 制备定值可溯源至WHO国际参考物质的载脂蛋白A1/B工作校准品.方法采用中生北控生物科技股份有限公司生产的载脂蛋白A1/B免疫透射比浊试剂盒,在OLYMPUS AU400全自动生化分析仪上,按照美国西北脂类研究实验室(NWLRL)制定的方案,进行载脂蛋白国际参考物质靶值转移及相关性试验考核. 结果三期试验结果表明,将国际参考物质的靶值转移到中生北控公司制备的工作校准品(Lot 030310)后,载脂蛋白(apo)A1/apoB测定的准确度和精密度达到NWLRL的要求;测定NWLRL提供的40份血清样品.与NWLRL定值相比较,apoA1和apoB的相关系数分别为0.983和0.987,平均绝对偏差分别为2.7 %和3.0 %,达到方案规定的合格标准.结论 NWLRL已向中生北控公司颁发了WHO apoA1/apoB国际参考物质靶值转移合格证书。

西安杨森制药有限公司作为美国强生公司的全资子公司,比利时杨森制药有限公司在中国的合资企业,在经过了20年的发展,今天已经拥有1400名员工,总部设在北京,以西安为生产基地,销售覆盖全国276个城市,西安杨森正以世界一流的生产水平、高科技的制药产品和国际化的经营理念,赢得医生、患者和业界伙伴的推崇和信赖. 作为20世纪发明新药最多的科学家杨森公司的创始人--保罗杨森博士在麻醉、止痛、精神病、真菌病及肠胃病等诸多领域取得了非凡的成就,然而,最为令世人瞩目的是保罗杨森博士及其创立的"杨森真菌实验室"对人类与真菌抗争所作出的杰出贡献。

生物梅里埃公司创建于1897年.百年来,公司依赖自身的科技研究和工业生产资源,始终致力于微生物检测产品及仪器的研究、开发和生产,包括细菌学、血清学、临床生化学、凝血等方面,使其检验试剂闻名全球。

2005年美国临床实验室标准化研究所(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI/NCCLS)出版的药敏试验手指南M100-S15 [1]中的更新要点,涉及2003年版的纸片法M2-A8 [2]、2003年版的稀释法M7-A6 [3]两个文件。

血清甘油三酯/三酰甘油(TG)是一项重要的临床血脂常规测定指标,特别是随着对其致动脉粥样硬化(AS)作用研究的深入,TG作为冠心病的一项独立危险因素日益受到重视 [1-3].但是目前血清TG测定及其临床应用尚存在很多问题,如生物学变异、游离甘油对测定的影响、测定的标准化系统不完善等等.本综述仅对TG的生物化学、测定方法与标准化、临床意义等方面的近况作一简述。

在细菌耐药机制中,耐药酶扮演着极其重要的角色,其中AmpC酶在革兰阴性杆菌耐药机制中的地位日渐突出,特别是质粒型AmpC酶的出现,使AmpC酶获得了与ESBLs相同的进化背景,使其可以在相同菌种间甚至不同菌种间将耐药质粒相互传播,从而使人类对抗AmpC酶的斗争更加艰难[1-3].AmpC酶属Bush1型酶或AmblerC类酶,是不被克拉维酸抑制的"丝氨酸"头孢菌素酶,主要存在于肠杆菌,枸橼酸杆菌,粘质沙雷菌,摩根摩根菌,铜绿假单胞菌等菌属中.AmpC酶可分为诱导型、结构型、质粒型[4] .本文将着重阐述诱导型AmpC酶与结构型AmpC酶在检测方法和临床治疗上的差异。

由中华医学会检验医学分会血脂专业委员会主办的"2004年全国血脂分析及其临床应用学术研讨会" 、"第七届全国脂蛋白学术会议暨全国血脂分析及其临床应用及进展高级学习班" ,2004年8月18～22日在宁夏银川召开。

目前,人类已发现的特异性较强、灵敏度较高、有一定临床价值的肿瘤标志物(TM)有100多种,而这些TM检测结果的稳定性、准确性、可靠性(特别是假阳性)均可对患者产生直接影响.然而,在实际工作中,影响TM检测的因素很多,涉及分析前、分析中和分析后各个环节.为确保临床获得准确的TM检测结果,规范操作,不断提高检测质量就尤为重要.现在,美国国家临床生化学会(NACB)和欧洲肿瘤标志物专家组(EGTM) 对TM检测制定了比较详细的规定和临床应用指南,我国在卫生部标准化委员会和中华医学会检验分会的领导下,也正在着手制定适合我国的TM检测准则.仅此对临床检验工作规范和标准制定与实施中,值得特别重视的TM检测影响因素进行磋商和研讨。

鲍曼不动杆菌(acinetobacter baumanii, Ab)是医院感染的重要病原菌.近年来的感染在增多,且其耐药性日益严重,已引起临床和临床微生物学者的严重关注.Ab主要引起呼吸道感染,也可引发菌血症、泌尿系感染、继发性脑膜炎、手术部位感染、呼吸机相关性肺炎等.该菌在医院的环境中分布很广且可长期存活,对危重患者和CCU及ICU中的患者威胁很大,也将此类感染称作ICU获得性感染.国外耐碳霉烯类的Ab发展很快,最近又出现"全耐药"的Ab,且出现在我国的台湾,应引起我们的高度警惕。

众所周知,建立临床检验结果量值溯源体系是世界上面临的共同研究课题.作为发展中国家,努力建设我国的参考体系,是加入国际标化进程的基础.随着对临床实验室要求国际标准化(如ISO 17025 /ISO 15189)的进程,进一步明确了对临床实验室检验结果量值溯源性的要求.为此,一些单位为建立参考体系做了大量的工作.参考系统或参考体系通常包括3个基本内容:(1)针对分析项目的检测方法,即参考方法;(2)使用参考方法进行检测的实验室,即参考实验室及由多家参考实验室组成的参考实验室网络;(3)建立完整的参考体系,必须有科学的设计和严谨的技术支持.现以卫生部临床检验中心建立的"血细胞分析溯源体系"为例[1],谈一谈对建立参考体系的看法和思考,与同仁讨论。