2011年 · 第34卷第03期

大规模的医院人群血清乙型肝炎标志物阳性率调查显示,我国人群HBV感染率逐步下降,其中以低龄人群下降最为显著.按照流行病学原理设计、技术标准化、多中心调查是保证医院人群乙型肝炎感染率数据可靠的前提,可以作为乙型肝炎预防和控制决策的重要依据。

戊型肝炎(戊肝)是全球最主要的病毒性肝炎之一,由戊型肝炎病毒(HEV)感染引起[1-2].据估计世界上有三分之一的人口曾经感染过HEV[3].近年来大量证据表明戊肝是一种人兽共患疾病,猪是HEV的最主要动物宿主和人类戊肝的重要传染源[4-7].戊肝多数表现为急性自限性肝炎,其症状与甲型病毒性肝炎类似,但症状更重,病死率更高.戊肝的严重程度随年龄的增加而增加,总病死率为1%～3%.患戊肝的孕妇病死率高达5%～25%[8],存活者的流产率和死胎率约为66.7%[9]。

目的 建立流式微球技术检测血小板特异性自身抗体的方法,探讨其临床应用价值.方法 用包被抗GP Ⅰ b(单抗SZ2)、抗GPⅡb(单抗SZ22)、抗GPⅢa(单抗SZ21)、抗GPⅡb/Ⅲa(单抗7E3)单克隆抗体的微球捕获血小板特异性抗原抗体复合物,加入FITC标记的羊抗人多克隆抗体,在流式细胞仪上进行检测分析.各取1份SZ2、SZ22、SZ21、7E3抗体阴性和阳性的血小板标本进行批内精密度测定,重复制备20次,上流式细胞仪检测MFI,计算批内CV.各取1份SZ2、SZ22、SZ21、7E3抗体阴性和阳性的血小板标本,每天上流式细胞仪检测1次,共测定8 d,计算批间CV.选取2006年3月至2008年12月苏州大学附属第一医院85例ITP患者、17例NITP患者和50名健康对照者,利用流式微球技术检测4种血小板自身抗体SZ2、SZ22、SZ21、7E3的MFI,利用ROC曲线分析4种血小板自身抗体对诊断ITP的敏感度和特异度.同时采用MAIPA技术对4种血小板自身抗体进行检测,并与流式微球技术检测的敏感度进行比较.结果 SZ2、SZ22、SZ21、7E3抗体阴性标本的批内CV分别为3.26%、2.86%、1.65%、4.94%,阳性标本的批内CV分别为6.16%、4.88%、5.20%、5.85%.SZ2、SZ22、SZ21、7E3抗体阴性标本的批间CV分别为5.86%、4.74%、5.69%、7.56%,阳性标本的批间CV分别为7.53%、5.49%、7.11%、6.25%.ITP组、NITP组和健康对照组SZ2抗体的MFI分别为1.49(0.88～16.24)、1.12(1.00～1.33)、1.01(0.83～1.37),差异有统计学意义(H=36.89,P＜0.01＝,SZ22抗体的MFI分别为1.55(0.84～11.30)、1.13(1.00～1.29)、0.98(0.85～1.24),差异有统计学意义(H=28.41,P＜0.01＝,SZ21抗体的MFI分别为1.50(0.87～11.04)、1.13(0.97～1.32)、1.05(0.85～1.48),差异有统计学意义(H=54.42,P＜0.01＝,7E3抗体的MFI分别为1.51(0.84～9.81)、1.05(0.86～1.13)、1.03(0.74～1.28),差异有统计学意义(H=31.97,P＜0.01＝.流式微球技术检测4种抗体SZ2[临界值(cut-off值)=1.37]、SZ22(cut-off值=1.24)、SZ21(cut-off值=1.48)和7E3(cut-off值=1.28)所对应的AUC分别为0.86、0.90、0.87和0.84,确定的敏感度分别为58.82%(50/85)、52.94%(45/85)、52.94%(45/85)、51.76%(44/85).流式微球技术联合检测4种血小板特异性自身抗体对诊断ITP的敏感度为74.12%(63/85),高于改良间接MAIPA技术的50.59%(43/85),差异有统计学意义(χ2=6.78,P＜0.05＝.结论 流式微球技术可以同时进行4种自身抗体的联合检测,为ITP的临床诊断提供了一种新方法。

目的 对一个遗传性FⅦ缺乏症家系进行F7基因突变检测,探讨其分子发病机制.方法 采用ELISA法检测先证者及家系成员FⅦ∶Ag,采用一期凝固法检测先证者及家系成员PT、FⅦ∶C等凝血指标进行实验表型诊断.基因检测采用DNA直接测序法分析先证者及家系成员F7基因的全部外显子及侧翼、5'和3'非翻译区,发现突变位点用反向测序加以证实;用CLC Protein Workbench软件分析基因突变位点的物种保守性和蛋白质二级结构改变.选择100名健康对照者以排除基因多态性.结果 先证者及其妹妹的PT、FⅦ∶C、FⅦ∶Ag明显异常,分别为36.3 s、5.0%、40.7%和33.4 s、5.0%、37.4%;先证者的父亲、母亲、女儿、外甥女的PT稍延长,分别为14.9 s、14.6 s、15.5 s、14.6 s;其FⅦ:C稍减低,分别为70%、85%、59%、79%.先证者F7基因8号外显子c.784T＞C杂合突变导致Ser269Pro,8号外显子c.964T＞G杂合突变导致Cys329Gly;先证者妹妹为c.784T＞C和c.964T＞G双重杂合突变,母亲为c.784T＞C杂合子,父亲、女儿、外甥女均为c.964T＞G杂合子.蛋白质生物学特性分析发现,Cys329Gly导致蛋白质空间构型发生改变,Ser269Pro导致氨基酸极性及疏水性发生改变.结论 F7基因Ser269Pro和Cys329Gly双重杂合突变是导致该例遗传性FⅦ缺乏症的分子发病机制。

目的 探讨人群调查中尿白蛋白标本留取及检测方法.方法 选取659名北京市居民,收集其24 h尿测定UAER;并留取次日随机尿和晨尿,分别采用尿ACR及半定量尿白蛋白试纸法测定尿白蛋白.以24 h UAER作为标准,建立应用两种方法检测晨尿和随机尿白蛋白的ROC曲线,比较敏感度、特异度及ROC曲线下面积.结果 晨尿和随机尿ACR分别为9.36(5.12～33.29)mg/g及11.29(6.34～41.29)mg/g,组间比较差异无统计学意义(t=-1.382,P＞0.05),相关分析显示两者高度相关(r=0.932,P＜0.01).晨尿和随机尿ACR与24 h UAER具有高度相关性,相关系数分别为0.853及0.874,P均＜0.01.随机尿ACR诊断白蛋白尿的敏感度为77.9%,特异度为91.0%,晨尿ACR诊断白蛋白尿的敏感度为78.4%,特异度为95.7%.随机尿白蛋白试纸法诊断白蛋白尿的敏感度为90.3%,特异度为41.1%,特异度明显低于ACR法.随机尿与晨尿ACR的ROC曲线下面积分别为0.918±0.012及0.929±0.015,组间比较差异无统计学意义(χ2=2.13,P＞0.05).随机尿白蛋白试纸法ROC曲线下面积0.661±0.021,低于随机尿ACR(χ2=248.41,P＜0.01).结论 随机尿的ACR兼具简便及准确的特点,是人群调查中诊断白蛋白尿的良好指标。

目的 研究导管相关性MRSE分离株的分子遗传特征及生物学特征,为导管相关性血流感染的诊断与防控提供依据.方法 收集2006年1月至2009年12月间,首都医科大学附属北京同仁医院住院患者30例,其中男20例,女10例.采集全血及导管血标本,分离导管相关性MRSE30株.对所有菌株采用MLST方法进行遗传背景分析;采用PCR方法检测菌株icaA基因(编码与致病性相关的胞间多糖黏附素)携带情况;纸片扩散法进行药物敏感试验.结果 30株MRSE包含15种ST型,17株集中在ST259、ST20、ST2和ST235,并发现4种新ST型,将其上传到http://www.mlst.net数据库中,得到序列号为ST259(6株)、ST260(1株)、ST261(1株)和ST262(1株).其中ST259为本院导管相关性MRSE血流分离株的优势克隆株,3株携带icaA基因.结论 4种新ST型中,部分ST259致病性强,可能成为医院内感染的流行株,对医院内感染的预防和控制造成威胁。

目的 研究儿童腹泻患者粪便分离的沙门菌属临床分离株的耐药特点及分子流行病学特征.方法 从儿童腹泻患者粪便中分离沙门菌72株,采用血清学凝集试验确定沙门菌血清型;采用K-B纸片扩散法检测抗菌药物的敏感性;采用琼脂稀释法测定头孢噻肟(CTX)和头孢他啶(CAZ)的MIC值;ESBL、ISEcpI和AmpC基因采用PCR法和DNA测序法;采用接合试验测定耐药基因的转移性;PFGE法测定鼠伤寒沙门菌的同源性.结果 从感染性腹泻患儿粪便中共分离出72株沙门菌,其中鼠伤寒沙门菌为主要血清型,占86%(62/72).鼠伤寒沙门菌和汤普森沙门菌通常对临床常用抗菌药物耐药.其中鼠伤寒沙门菌对氨苄西林的耐药率最高(90%,56/62),其次是四环素(81%,50/62),甲氧苄啶/磺胺甲基异(噁)唑(74%,46/62)和氯霉素(66%,41/62).17株(27%,17/62)鼠伤寒沙门菌和2株汤普森沙门菌对CTX耐药.对氨苄西林耐药的49株鼠伤寒沙门菌和2株汤普森沙门菌经PCR扩增后并测序为blaTEM-1b,62株鼠伤寒沙门菌中ESBL基因阳性的有13株(21%,13/62),且主要是blaCTX-M型,其中8株为blaCTX-M-14,3株为blaCTX-M-15,1株为blaCTX-M-55,另外1株为同时blaCTX-M-14和blaCTX-M-55阳性.所有blaCTX-M阳性的菌株均检测出存在上游的插入序列ISEcpl.在1株对头孢西丁耐药的汤普森沙门菌检测出blaDHA-1型AmpC.62株鼠伤寒沙门菌经PFGE分型,发现A型和D型是最主要两个克隆,分别占19%(12/62)和50%(31/62).7株产blaCTX-M型ESBL基因的菌株属于D型.结论 鼠伤寒沙门菌和汤普森沙门菌耐药性严重且blaCTX-M型ESBL基因检出率高;在沙门菌属中发现blaCTX-M-55,在汤普森沙门菌中发现blaDHA-1°克隆性传播是造成鼠伤寒沙门菌流行的主要原因。

目的 调查碳氢霉烯类非敏感肺炎克雷伯菌中获得性碳氢霉烯酶的分布情况,探讨其在医院感染流行病学中的作用.方法 收集2008年11月至2009年3月武汉市儿童医院住院患儿临床分离的非重复的碳青霉烯类抗生素非敏感肺炎克雷伯菌20株,使用生物梅里埃公司生产的GNS-142检测菌株的MIC值,PFGE技术分析耐药菌株间的同源性,改良的Hodge试验筛选产碳青霉烯酶阳性菌株,亚胺培南-EDTA,美罗培南-EDTA及头孢他啶-EDTA协同试验筛选产金属酶菌株,PCR扩增常见获得性碳氢霉烯酶及整合酶基因并进行基因测序,质粒接合转移试验研究细菌耐药的传播方式和Southern杂交定位耐药基因.结果 PFGE共检出4种细菌基因型,包括A型5株(A1型3株、A2型2株)、B型2株、C型12株、D型1株.A型及C型为主要克隆株.8株细菌同时携带KPC-2及IMP-4两种碳氢霉烯酶基因,10株只携带IMP-4基因,2株只携带KPC-2基因.未检出NDM-1、GIM、SPM、SIM、OXA-23、VIM型碳氧霉烯酶基因.所有20株菌株均携带Intl基因,Southern 杂交提示Intl及IMP-4基因均定位于染色体.结论 IMP-4及KPC-2基因是武汉地区肺炎克雷伯菌中最主要的获得性碳氢霉烯酶基因,Intl介导IMP-4耐药基因的水平传播及C型耐药克隆株在武汉市儿童医院临床多个科室间的传播是肺炎克雷伯菌碳青霉烯类耐药性传播的主要方式。

AmpC酶属于分子生物学分类中的C类酶及功能分类(Bush分类)中的Ⅰ类酶,能水解第一、二、三代头孢菌素及单酰胺类抗生素,且不受酶抑制剂抑制,外膜蛋白丢失的菌株甚至出现对碳青霉烯类抗生素耐药[1].虽然质粒型AmpC酶不及ESBL常见,但由其所致严重感染的病死率更高,危害更严重.Pai等[2]报道,在产质粒型AmpC酶肺炎克雷伯菌血液感染患者中,最初接受抗生素治疗的失败率较高,尤其是头孢菌素治疗,并认为产生AmpC酶菌株常规体外药敏试验中出现的致命性错误是假敏感问题。

流感嗜血杆菌是急性呼吸道感染的常见病原菌,其中b型最容易引起肺炎和脑膜炎等侵袭性疾病[1].氨苄西林曾经是治疗流感嗜血杆菌感染的首选药物,但近年来,随着抗生素的广泛使用,世界各地流感嗜血杆菌对氨苄西林等β内酰胺类抗生素耐药率上升较快,且不同地区差异很大.其耐药主要机制是产生β内酰胺酶,而产β内酰胺酶的主要基因为TEM和ROB基因.因此耐药基因的检测对流感嗜血杆菌感染的防治有重要意义.本研究对流感嗜血杆菌进行了耐药基因检测和耐药模式探讨。

目的 调查和分析浙江地区婴幼儿和学龄前儿童乙型肝炎(简称乙肝)病毒血清学模式及其与年龄、性别相关的分布特征,为当地儿童乙肝的预防与控制提供依据.方法 采用电化学发光技术在Roche e601免疫分析仪上检测乙肝病毒血清学标志物.应用实验室信息管理系统(LIS)将2006年7月至2010年3月期间所有乙肝病毒血清学检测结果导出为EXCEL数据文件,通过排除重复检测者、年龄＞7周岁和住址非浙江地区者,最终筛选出24 892名研究对象,男15 810名,女9082名.采用SPSS 13.0和EXCEL 2003对乙肝病毒血清学检测结果进行统计分析.结果 乙肝疫苗平均覆盖率在浙江地区15 413名男孩和8 840名女孩中分别为99.16%(15 413/15 543)和99.17%(8 840/8 914).所有24 892名7岁内儿童中检出乙肝病毒血清学模式17种,最主要模式为"单antiHBs(+)",占65.997%(16 179/24 892);其次为"阴性"、"anti-HBc(+)anti-HBs(+)"和"anti-HBe (+)anti-HBc(+)anti-HBs(+)",依次占18.231%(4 538/24 892)、9.911%(2 467/24 892)和4.395%(1 094/24 892);其他13种低频模式检出率为0.004%～0.992%."单anti-HBc(+)"和"anti-HBe(+)、anti-HBs(+)"两种模式在男女间的检出率差异有统计学意义(χ2值分别为7.143、8.123,P均＜0.01＝,其余15种模式性别间差异无统计学意义(P均＞0.05).共检出HBsAg阳性者94名,占0.38%.总anti-HBs阳性儿童19 899名,占79.94%,其中"单anti-HBs(+)"16 178名,占总anti-HBs阳性者的81.30%.单anti-HBs阳性率最高为＞1～2岁组(87.27%),最低为2 d～2周组(13.13%);16 178名儿童在3种抗体浓度组(10～100、＞100～1 000和＞1 000 mIU/ml)的比率依次为23.64%、27.66%和13.70%.总的anti-HBc(+)儿童有3 904名,占15.68%,阳性率最高为2～4周组(57.63%),最低为3～4岁组(3.46%).1 565名"阴性"模式儿童中,阴性率最低为9～12个月组(3.25%),最高为6～7岁组(36.21%).结论 本地区学龄前儿童中"单anti-HBs(+)"检出率最高,其抗体浓度多位于100～1 000 mIU/ml间;其次为"阴性"模式.HBsAg的检出率很低.乙肝模式检出率在本地区儿童男女间无差异,而与年龄相关.分析1岁内(主要为3个月内)儿童乙肝血清学模式应考虑母亲血清乙肝抗原抗体的影响。

目的 应用丙型肝炎病毒抗体确证试验检测肝病患者血清抗HCV,进一步确认HCV感染.方法 对北京万泰生物药业股份有限公司初步研制重组免疫印迹法检测抗HCV试剂(简称CWT)与CHIRON RIBA HCV 3.0 Strip Immunoblot Assay进行比较,采用477份血清标本进行检测分析(慢性丙型肝炎病毒感染者血清350份、非甲非戊型肝炎患者血清7份、对照组采用乙型肝炎患者血清30份、戊肝肝炎患者血清30份及正常献血人员血清60份).结果 120份对照组非丙型肝炎患者血清均为抗HCV阴性;350份慢性丙型肝炎病毒感染者血清,国产试剂检出阳性341份,9份不确定;CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA试剂检出阳性343份,不确定7份.7份非甲非戊型肝炎患者血清两种试剂检测均为阳性2份,阴性4份,不确定结果1份.两种试剂比较,检测结果一致率为99.16%(473/477),两者有很强的一致性(Kappa=0.98).结论 两种试剂对丙型肝炎病毒抗体的检测方法具有高度的一致性.特别是对于非甲-非戊型肝炎患者中的HCV感染者更有一定的诊断意义。

TP是一种严重威胁人类健康安全的病原体,其诊断方法主要有甲苯胺红不加热血清试验、快速血浆反应素试验、螺旋体血球凝集素试验、梅毒螺旋体明胶凝集试验等[1].近年来,随着分子生物学技术的发展,采用基因工程技术表达梅毒螺旋体包膜蛋白作为诊断性抗原,应用于梅毒感染的诊断,取得了良好的效果[2-3].本研究分析选取梅毒螺旋体膜蛋白TpN15、TpN17、TpN44.5和TpN47最主要的优势抗原表位,经串联设计后运用基因工程技术表达梅毒螺旋体多表位重组抗原,并以之为基础,建立ELISA双抗原夹心法,用以临床检测梅毒感染。

目的 建立PCR-MALDI-TOF MS检测乙型肝炎病毒针对核苷类药物耐药突变位点的检测方法,探讨PCR-MALDI-TOF MS技术的影响因素,为正确应用该技术提供参考.方法 采用PCR-MALDI-TOF MS检测10份HBV质粒标准品及100份HBV阳性临床标本(均单独或者联合使用过拉米夫定、阿德福韦酯、恩替卡韦和替比夫定等核苷类药物),并用PCR产物测序进行验证.结果 100份HBV阳性的临床标本,PCR-MALDI-TOF MS检测耐药阳性结果31份,阴性结果69份.与测序结果相比完全一致的有94份(94%),6份检测结果不一致,其中3份质谱与测序结果均为耐药阳性,但质谱检测结果耐药位点多于测序.PCR-MALDI-TOF MS检测灵敏度为100 copies/μl,突变型的检出阈值为5%.结论 PCR-MALDI-TOF MS技术检测HBV耐药位点变异具有高灵敏度,高准确率,高通量和自动化的特点,适合用于临床对HBV耐药位点进行基因检测。

目的 建立EpCAM抗体偶联纳米磁珠阳性分离上皮来源的实体瘤外周血CTC的方法(简称"磁珠分离法"),探讨该方法分离CTC的灵敏度和应用意义.方法 用7.5 ml健康志愿者外周血裂解红细胞分别倍比稀释加入5、10、20、50、100个乳腺癌细胞系MCF7、食管癌细胞系KYSE70、胰腺癌细胞系BxPC-3及胃癌细胞系9811P,通过磁珠分离法富集癌细胞,荧光显微镜下检测体外加入癌细胞的回收率.然后,用磁珠分离法富集未治疗的30例食管癌(Ⅰ期+Ⅱ期6例、Ⅲ期+Ⅳ期24例)、35例乳腺癌(Ⅰ期+Ⅱ期15例、Ⅲ期+Ⅳ期20例)、30例胰腺癌(Ⅰ期+Ⅱ期5例、Ⅲ期+Ⅳ期25例)、33例胃癌患者(Ⅰ期+Ⅱ期13例、Ⅲ期+Ⅳ期20例)和30例慢性胃炎及30名健康志愿者的CTC,同时结合IF和HE染色鉴定各组的CTC.另外,用FISH分别检测分析食管癌、乳腺癌、胰腺癌、胃癌患者200个CTC中8号和20号染色体拷贝数水平.结果 用4,6-二眯-2苯吲哚(DAPI)染色食管癌、乳腺癌、胰腺癌、胃癌等4种癌细胞系并加入健康志愿者7.5 ml外周血的组内试验中,荧光显微镜下计数4种癌细胞的组内的平均回收率分别为87%、87%、86%和88%;5种稀释梯度的细胞数在4种癌细胞系的组间的平均回收率分别是88%、85%、87%、88%和87%.在107的外周血白细胞中能富集到1个癌细胞.采用磁珠分离法从食管癌、乳腺癌、胰腺癌及胃癌患者中检出≥2个CTC的阳性率分别为50%(15/30)、63%(22/35)、70%(21/30)及61%(20/33),健康志愿者和炎症患者均未检出CTC.食管癌、乳腺癌、胰腺癌组分别与健康对照组和炎症组比较,经精确概率法分析,差异均有统计学意义(P值均为0.000).80%的食道癌、75%的乳腺癌、65%的胰腺癌和59%的胃癌患者CTC中均发生8号和20号染色体非整倍体改变.结论 建立的磁珠分离法对富集分离实体瘤外周血CTC具有较好的分选灵敏度和准确性.食道癌、乳腺癌、胰腺癌和胃癌患者中的CTC多发生8号和20号染色体非整倍体改变。

目的 探讨I-FISH技术检测MM基因组异常的临床意义.方法 应用CC技术(常规R显带)和I-FISH技术[包括GLP13q14(RB1基因)、GLP17p13.1(P53基因)、GLP13q14.3(D13S319)、GLP1q21及GLP14q32(IgH基因)DNA序列探针]分别对20例初治的MM患者(按Bataille分期,Ⅰ期7例、Ⅱ期5例、Ⅲ期8例)进行基因组检测;比较两种方法对MM染色体和基因组异常的检出率;并分析基因组异常与Bataille分期的关系.结果 CC技术从20例MM患者中检出1例[5%(1/20)]染色体异常,且为复杂核型--46,XX,-2,del(3)(p21),add(6)(q26),der(10)(q26),der(14)(32),+mar,inc[6].I-FISH检出12例[60%(12/20)]基因组异常,其中基因组异常发生频率在RB1、D13S319和P53均为30%(6/20),IgH和1q21均为20%(4/20);经配对χ2检验,I-FISH的检出率高于CC技术(χ2=9.09,P=0.001).在20例MM患者中,RB1基因异常的6例,Ⅰ期占1/20,Ⅱ期占1/20,Ⅲ期占4/20;D13S319异常的6例,Ⅰ期占2/20,Ⅱ期占1/20,Ⅲ期占3/20;P53基因异常的6例,Ⅰ期占2/20,Ⅲ期占4/20;1q21异常的4例,Ⅰ期和Ⅲ期占2/20;IgH基因异常的4例,Ⅰ期占1/20,Ⅲ期占3/20.结论 I-FISH对MM患者基因组异常检出率较高,其可检出不同Bataille分期的MM患者。

目的 研究LAM单独和与IFN-序贯处理对人肝胚瘤细胞株HepG2.2.15细胞的HBV复制的影响,探讨LAM与IFN-α在体外抑制HBV复制的差异.方法 以未处理的HepG2.2.15细胞作为对照组;以1 000 IU/ml浓度IFN-α连续处理HepG2.2.15细胞10 d为单独IFN-α处理组;以0.2、1、5、20、100 μmol/L的LAM处理HepG2.2.15细胞为单独LAM处理组;序贯处理组则以浓度为0.04、0.2、5、25、125、200μmoL/L的LAM连续处理HepG2.2.15细胞7 d,再补充1 000 IU/ml IFN-α与LAM联合处理3 d,然后停止LAM处理,再单独以1 000 IU/ml IFN-α连续处理细胞10 d;分别用ELISA法、点杂交和Southern杂交分析不同处理时期、不同处理组HepG2.2.15细胞分泌的HBV抗原、细胞外HBV DNA、细胞内HBV复制中间体DNA以判断HepG2.2.15细胞内HBV复制情况.结果 LAM连续处理至10 d时,单独LAM处理组HepG2.2.15细胞分泌的HBsAg分别是1.77±0.22、1.65±0.25、1.95±0.19、1.34±0.11、1.07±0.05,分泌的HBeAg是1.41±0.13、1.37±0.09、1.63±0.07、1.26±0.12、1.05 ±0.09,对照组分泌的HBsAg和HBeAg分别是3.34±0.15和3.33±0.05,单独LAM处理组与对照组相比分泌的HBsAg和HBeAg下降,差异有统计学意义(HBsAg的t值为10.21、10.04、9.94、18.62、24.86,HBeAg的t值为23.87、32.97、34.22、27.57和38.35,P均＜0.05).点杂交、Southern杂交分析显示LAM连续处理10 d后,单独LAM处理组的细胞外HBV DNA和细胞内HBV复制中间体DNA不能被检测到.停止LAM处理并代之以1 000 IU/ml IFN-α序贯处理10 d,序贯处理组均有细胞内HBV复制中间体DNA的出现,且细胞外HBV抗原和HBV DNA恢复表达;即HBV颗粒在HepG2.2.15细胞内又重新恢复复制状态并分泌至细胞外.结论 LAM与IFN-α在体外细胞模型中具有不同的抗病毒效应,导致HepG2.2.15细胞内HBV复制的差异性。

目的 对不同检测系统HBV DNA测定结果进行不确定度评定和量值溯源,探讨不同检测系统HBV DNA测定结果的可比性,为实验室检验结果互认和实验室认可提供实验数据.方法 以国家标准物质作为"正确性质控物质",参考NATA颁布的"化学测量结果不确定度评定与报告导则",对不同检测系统HBV DNA测定结果的不确定度进行评定,并将结果溯源至国家标准物质;根据CLSI的EP9-A2文件要求,对不同检测系统HBV DNA测定结果进行比对分析和偏差评估,以检测系统偏倚的不确定度(ub)作为判断依据,将t(0.05sv)√u2b1+u2b2作为临床可接受的判断标准,评价不同检测系统HBV DNA测定结果的可比性.结果 3个检测系统测定HBV DNA国家标准物质所得的均值(-y)不同,分别为6.15、5.88、6.31,除检测系统A的偏倚无统计学意义(P＞0.05)外,检测系统B、C的偏倚均具有统计学意义(P均＜0.05);3个检测系统HBV DNA测定结果的扩展不确定度(U)也不同,但均在卫生部临床检验中心室间质量评价中规定的最大允许范围(±0.5)之内.经溯源至国家标准物质后,3个检测系统测定患者样本HBV DNA结果分别为:(5.45±1.23)、(5.55±1.32)、(5.42±1.25)lg(kIU/L),差异具有统计学意义(F=5.63,P＜0.05).3个检测系统测定结果两两比较显示,检测系统A与C比较,测定结果差异无统计学意义(q=1.85,P＞0.05);检测系统A与B比较,测定结果差异有统计学意义(q=5.12,P＜0.05);检测系统B与C比较,测定结果差异有统计学意义(q=6.85,P＜0.05).3个检测系统中,任意两个检测系统间HBV DNA测定结果的偏差均无统计学意义(P均＞0.05),表明检测系统间测定结果的偏差临床可以接受,测定结果具有可比性.结论 当不同实验室HBV DNA检验结果进行比较与互认时,应对各检测系统进行不确定度评定和量值溯源,并对不同检测系统间测定结果进行偏差评估,判断其临床可接受性,以保证检验结果的准确性和可比性。

1995年由7个国际著名学术组织,包括检验医学中最大的国际组织,国际临床化学联合会(IFCC),正式颁布了在计量学上有深远影响的标准"测量不确定度表示导则(Guide to the Expression of Uncertainty in Measurement 简称,GUM)"[1],对全世界以及中国计量界产生巨大影响.我国计量界进行了大量工作,推广和应用测量不确定度(以下简称不确定度).颁布了"JJF 1059-1999,测量不确定度评定与表示"标准.全国各地每年都开办不少测量不确定度学习班.在网上可搜索到近百本中文专著,用谷歌搜索英文"测量不确定度"多达963 000条,用百度搜索中文有838 000篇。

免疫磁珠是磁性微球与免疫配体结合而成的一种免疫学技术.1979年挪威科学家John Ugelstad通过显微镜首次看到自己制备的尺度均一的聚苯乙烯微球时,可能不会料到这些微球经过磁化在此后30年间引发了一场生物分离技术革命[1].免疫磁珠不仅能分离和检测几乎所有骨髓及血细胞、肿瘤细胞,还可分离细菌等多种微生物,在免疫学检测、生物大分子纯化等方面应用甚广。

CKD的发生率和发病率呈上升趋势,已经成为全球关注的公共卫生问题.2008年我国学者发表于<美国肾脏病杂志>的流行病学资料显示,在北京地区成年人(≥18岁)中CKD发生率为13.0%,在18～39岁、40～59岁、60～69岁及70岁以上年龄组中,CKD发病率分别为10.0%、14.2%、20.8%和30.5%,与欧美工业国家相似[1].临床实践和基于循证医学的大量研究表明,与高血压、糖尿病、高脂蛋白血症、吸烟、酗酒、活动少一样,CKD是CVD又一重要风险因子,CKD主要有两个结局:肾功能损伤导致肾衰竭及发生心血管疾病。

近年来许多报道国内优秀科研成果的论文首先投向国外，特别是被美国科学引文索引（SCI）收录的高水平国际期刊上，以有助于促进国际间的学术交流，让世界更好地了解中国。为了将这些高质量、有影响的论文介绍给国内的广大读者，中华检验医学杂志将开设“在国外发表的SCI论文介绍”栏目，目的是使国内更多的读者共享我国的科研成果和相关学科的进展。

我国著作权法公布以来，已得到社会各界的广泛重视，作为医学科技期刊必须不折不扣地执行著作权法。为此将本刊对作者署名和志谢的有关要求重申如下。

最近有幸拜读了冯仁丰[1]和陈文祥等[2]的文章,与冯教授有同感,应将此问题深入讨论下去.我总的观点是,既然它是测量结果的一个挥之不去的影子,就不能回避,必须面对,只是我们这代人能认识到什么程度、应用到什么程度而已,"绝对概念,有限应用"。

陈东科副主任检验师、孙长贵教授主编，陈民钧、张秀珍和朱建国教授主审的《实用临床微生物学检验与图谱》一书已由人民卫生出版社于2011年1月出版。全书共9篇40章，242．4万字，868页。该书由国内从事临床微生物学检验一线工作的20位专业人员共同编写完成。书中精选了作者数十年潜心积累的临床细菌、真菌和寄生虫等培养、

由中华医学会检验分会、中华检验医学杂志编辑委员会、卫生部艾滋病临床专家工作组、中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心参比实验室共同举办的“第四届中国病毒性肝炎和艾滋病实验室诊断与临床高峰论坛”拟定于2011年4月27—30日在张家界市召开。本次论坛邀请国内外从事病毒性肝炎和艾滋病研究及应用的专家学者作专题讲座，并报告“艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治”科技重大专项研究成果。集中分析我国病毒性肝炎和艾滋病诊断治疗的现状，交流最新的研究进展，探讨临床医生、

2010年4月1日，中华检验医学杂志与国际权威临床检验标准制定机构美国临床和实验室标准化协会（Clinicaland Laboratory Standard Institute，CLSI）就在中国境内翻译并使用CLSI相关检验标准及操作规范一事达成协议。根据协议，中华医学会中华检验医学杂志获得CLSI6个临床微生物检验标准和操作规范的中文翻译权及中文标准在中国境内的永久使用权。今后随着CLSI标准文件每年的更新，中华检验医学杂志也将对相应的中文文件同步补充更新。