中华检验医学杂志
2014年 · 第37卷第02期
出版日期 2014-02-11电子版 ¥16.00元
中华检验医学杂志
述评
重视自身免疫性肝病相关自身抗体的规范检测与合理应用
胡朝军 李永哲
中华检验医学杂志2014年 37卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2014.02.001
摘要
自身免疫性肝病相关自身抗体的检测对自身免疫性肝病(特别是自身免疫性肝炎和原发性胆汁性肝硬化患者)的诊疗具有重要价值。随着临床确诊的自身免疫性肝病患者不断增加,自身免疫性肝病相关自身抗体的检测逐渐受到临床的关注和重视。由于自身免疫性肝病相关自身抗的体检测受到各种因素影响,自身免疫性肝病相关自身抗体检测和临床应用仍存在许多问题。我们应做好自身免疫性肝病相关自身抗体检测的推广普及,重视检测质量管理,不断提高检测质量,加强自身免疫性肝病相关自身抗体的规范检测与合理应用。(中华检验医学杂志,2014,37:81-83)
专家论坛
肝癌的实验室标志物检测现状与展望
段秀枝 陶志华
中华检验医学杂志2014年 37卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2014.02.002
摘要
肝癌在我国一直具有较高的发病率和死亡率。随着新研究技术和实验室检测方法发展,寻找高灵敏度和特异性的肝癌实验室诊断标志物及其检测方法是研究者共同目标。临床实验室只有系统地了解这些实验室标志物及其在肝癌进展中变化规律,并将其运用于肝癌诊断、治疗监测和预后判断,切实提高肝癌的实验室诊断能力,才能更好更有效地服务于临床。(中华检验医学杂志,2014,37:84-86)
建设HBV耐药突变和基因分型实验诊断平台
曾勇彬 刘灿 欧启水
中华检验医学杂志2014年 37卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2014.02.003
摘要
尽管经过几十年的预防和控制,我国仍是HBV感染率较高的国家之一。创新HBV耐药突变和基因分型实验诊断平台、提升CHB患者管理水平已势在必行,具体应包括三个方面:一是要根据实验室的实际情况,合理选择耐药突变检测平台;二是要创建简便实用的基因分型平台,实时监测HBV基因型;三是要结合临床,探究不同药物治疗中基因型耐药-表型耐药-临床耐药的相互关系,确定导致表型耐药的突变株的比例或阈值,明确HBV基因组的多态性(即基因型)对临床预后的影响,为CHB个体化诊疗和预后判断奠定基础。(中华检验医学杂志,2014,37:87-89)
重视乙型病毒性肝炎病毒基因变异的研究和转化应用
高春芳 吴孟超
中华检验医学杂志2014年 37卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2014.02.004
摘要
我国仍属于HBV感染的中高流行区,HBV基因型、基因亚型和基因突变等是影响慢性HBV感染者病理转归的重要因素。HBV基因变异一方面通过改变病毒的复制、分泌,改变其致病性,另一方面则可通过改变宿主免疫微环境、改变与宿主的相互作用,影响疾病病程及抗病毒疗效等。HBV基因型、基因亚型以及关键热点突变位点的变异或缺失检测有助于判断HBV感染者罹患肝硬化和肝癌危险度及治疗后复发转移等预后的辅助预测。应持续重视HBV基因变异与临床致病性的相关研究,并注重转化应用,为临床HBV相关肝病的个体化、规范化、精细化管理提供依据。(中华检验医学杂志,2014,37:90-92)
肝脏纤维化的血清学标志物检测的现状和展望
沈立松 周韵斓
中华检验医学杂志2014年 37卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2014.02.005
摘要
肝脏纤维化是各种慢性肝病所致的肝脏损伤的共同通路。它的非侵入性评估方法方便易行,便于疾病动态监测,具有临床应用价值。肝纤维化的血清学标志物包括反映细胞外基质生成的直接标志物和体现肝脏合成、代谢、储备功能的间接标志物。各种综合血清学标志物评估模型可确定显著性纤维化和肝硬化,减少不必要的肝脏穿刺活检,可辅助疾病的诊断分期、预后评估、治疗监测。现有的血清学标志物检测平台和试剂的分析性能具有较大的差异,检测的标准化将有助于提高结果的可比性。大规模、多中心的临床验证研究对推广适合中国慢性肝病人群的综合血清标志物评估模型非常必要。(中华检验医学杂志,2014,37:93-95)
论著
IL-10+CD19+调节性B淋巴细胞在慢性乙型肝炎患者外周血中的表达
龚燕萍 张红星 赵超 崔燕红 熊怀民 仲人前 蒋廷旺
中华检验医学杂志2014年 37卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2014.02.007
摘要
目的分析慢性乙型肝炎患者外周血中IL-10+CD19+调节性B淋巴细胞(Breg)的表达及其免疫调节机制。方法病例对照研究。收集2011年6月—2012年10月常熟市第二人民医院住院患者,急性乙型肝炎(AHB)患者28例,慢性乙型肝炎(CHB)患者31例和健康对照25名。分离外周血单个核细胞(PBMC),经含CpG序列的寡脱氧核苷酸CpG ODN 2006和佛波醇酯(PMA)体外作用后,流式细胞术分析IL-10+CD19+ Breg、CD4+CD25high调节性T淋巴细胞(Treg)的表达及其相关性,ELISA分析培养上清IL-10水平。Mann-Whitney U检验分析两组间差异,Spearman相关分析两组连续变量间的相关性。结果CHB组外周血Breg[1.28%(1.05%~2.20%)]高于AHB组[0.87%(0.55%~1.22%)]和HCs组[0.89%(0.51%~1.37%)](P值分别为0.001和0.006),AHB和HCs组间差异无统计学意义(P=0.669)。CpG ODN 2006和PMA作用后CHB组Breg[14.30%(10.70%~16.70%)]较AHB组[10.30%(7.05%~13.30%)]和HCs组[10.40%(6.85%~12.60%)]显著升高(P值分别为0.003和0.001);CHB组Treg[5.80%(4.20%~9.10%)]较AHB组[4.05%(2.53%~5.40%)]和HCs组[4.50%(2.55%~5.50%)]也显著增高(P值分别为<0.001和0.005)。AHB和HCs组间差异均无统计学意义(Breg:P=0.796;Treg:P=0.227)。Spearman相关性分析发现CHB组Breg与Treg存在正相关关系(r=0.50,P=0.004),而AHB和HCs组无此相关性(r=-0.15,P=0.462;r=0.09,P=0.669)。CHB组IL-10表达高于AHB和HCs组(P<0.001)。AHB和HCs组间差异无统计学意义(P=0.341),Spearman相关性分析表明CHB组IL-10与Breg存在正相关关系(r=0.409,P=0.005)。结论B淋巴细胞Breg和调节性T淋巴细胞在慢性乙型肝炎患者中表达升高,Breg可能通过IL-10的分泌在HBV慢性感染过程中发挥免疫调节作用。(中华检验医学杂志,2014,37:100-104)
慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞表面共刺激分子表达量变化及其意义
王琳 赵春楠 祁松楠 彭群新 史进方 顾国浩
中华检验医学杂志2014年 37卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2014.02.008
摘要
目的探讨慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞表面共刺激分子的表达量变化及其意义。方法临床病例对照研究。收集2012年10月至2013年11月在苏州大学附属第一医院感染科住院的慢性乙型肝炎患者82例,其中男50例,女32例,年龄(42.25±14.22)岁,健康对照组30名来自本院预防保健科,其中男15例,女15例,年龄(42.32±3.74)岁;采用流式细胞术和定量PCR等技术测定慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞表面CD28、CTLA-4、PD-1、Tim-3的表达、T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+、CD4+/CD8+ ),其中未经抗病毒及相关免疫治疗的有40例,经过抗病毒治疗有效的有30例,无效的12例,并结合HBV病毒载量、乙型肝炎e抗原和丙氨酸转氨酶等指标作综合分析。组间比较采用单因素方差分析和Kruskal-Wallis H检验,两样本均数的比较采用t检验和Mann-Whitney U检验,相关分析用Spearman′S检验。结果CD4+ CD28+组间表达量健康对照组最高[404.65(331.65~536.09)],治疗无效组最低[277.15(249.90~344.25)],差异有统计学意义(H=29.81,P<0.001);CD4+ PD-1+组间表达量未治疗组最高[32.89(29.69~39.69)],治疗无效组最低[19.26(11.90~20.56)],差异有统计学意义(H=43.13,P<0.001);CD8+ PD-1+组间表达量未治疗组最高[15.47(12.50~17.78)],健康对照组最低[3.05(1.41~3.97)],差异有统计学意义(H=56.60,P<0.001);CD4+ Tim-3+组间表达量治疗无效组最高[199.62(55.61~239.45)]、健康对照组最低[70.62(53.88~112.32)],差异有统计学意义(H=41.03,P<0.001);CD8+Tim-3+组间表达量未治疗组最高[82.50(78.69~84.58)],健康对照组最低[3.07(1.56~6.87)], 差异有统计学意义(H=74.84,P<0.001);与低病毒载量组相比,治疗前CD8+ PD-1+在高病毒载量组中的表达量[17.87(13.38~20.94)]升高,差异有统计学意义(U=25.00,P<0.001),治疗后CD8+ PD-1+在高病毒载量组中的表达量[16.95(5.39~18.27)]升高,差异有统计学意义(U=63.50,P<0.001);治疗后PD-1表达量与ALT也有明显的正相关性,其中CD4+ PD-1+(r=0.689, P<0.001)、CD8+ PD-1+(r=0.751,P<0.001)。结论在慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗过程中,可能伴随有CD28、PD-1、CTLA-4和Tim-3的异常表达。共刺激分子的检测可为临床合理治疗慢性乙肝提供新线索。(中华检验医学杂志,2014,37:105-109)
酶学参考测量系统量值传递方法的研究
童清 陈宝荣 王清涛
中华检验医学杂志2014年 37卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2014.02.009
摘要
目的应用酶学参考方法实验室网络赋值的人源新鲜冰冻血清作为准确量值的媒介物,探寻酶学参考测量系统向常规检测系统量值传递的方法。方法量值传递研究。由首都医科大学附属北京朝阳医院、北京航天总医院、首都医科大学附属北京世纪坛医院、中国医学科学院北京协和医院、北京利德曼生化股份有限公司、四川迈克生物科技股份有限公司6家实验室组成的酶学参考方法实验室网络使用国际临床化学和检验医学联合会(IFCC)推荐的肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)参考测量程序为新鲜冰冻混合人血清赋值。北京市临床检验中心于2013年2月用此赋值血清(B Cal)对北京市49家三级医院互认实验室常规检测系统进行校准或验证。各实验室分别在厂家校准品及B Cal校准后,重复检测B Cal、水平1患者样本(S1)和水平2患者样本(S2)2次,记录并收集实验数据。通过统计患者样本B Cal校准前、校准后的均值、标准差、变异系数等统计学指标,观察系统间酶学检测结果可比性的改善。结果使用B Cal校准后,S1和S2 CK的CV分别由4.67%和5.96%降至1.86%和1.47%; LDH的CV分别由5.72%和5.04%降至3.67%和3.62%。 仪器分组数据显示:对于可应用B Cal校准的A、B仪器组,CK项目,校准后两个仪器分组B Cal、S1、S2检测结果的系统间CV均小于2.0%;LD项目,系统间CV分别为1.64%~3.80% 和1.45%~4.05%。对于不适用B Cal校准的C仪器组,CK、LDH检测结果的偏移分别为-4.75%和-13.10%;最大CV分别为3.64% 和7.57%。试剂分组数据显示:校准后,CK项目各试剂组CV从1.60%~4.44%减少至0.23%~1.62%;LDH项目各试剂组CV从0.93%~6.07%减少至1.06%~2.72%。结论应用参考方法实验室网络赋值的新鲜冰冻人源血清通过校准或验证方式进行量值传递是一种可行的方式,可有效解决酶学检测结果的溯源与可比问题。对于不适用B Cal校准的检测系统,可使用B Cal进行正确性判定,并制定相应标准。(中华检验医学杂志,2014,37: 110-114 )
贫血患者1 528例骨髓细胞形态学检查结果分析
白萍 王娟 刘伟玲 李莉
中华检验医学杂志2014年 37卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2014.02.010
摘要
目的探讨骨髓细胞形态学检查在寻找贫血病因中的作用,了解1998至2002年和2008至2012年2个5年间贫血疾病谱的变化。 方法回顾性研究。对1998至2002年和2008至2012年2个5年间1 528例上海交通大学附属第一人民医院初诊为贫血待查患者的骨髓穿刺标本进行瑞氏染色和细胞化学染色,显微镜下观察细胞形态和染色结果,并结合临床资料统计分析1998至2002年和2008至2012年2个5年间疾病种类变化。 结果确诊为造血和淋巴组织疾病患者1 139例(74.54%),其中以缺铁性贫血、白血病和巨幼细胞性贫血为3种主要类型致贫血的病因。感染性贫血骨髓象及描述性诊断骨髓象389例(25.46%)。贫血疾病谱发生了明显变化:缺铁性贫血由(30.34%,139/458)降至(18.69%,200/1070),白血病由(13.31%,61/458)增长至(21.77%,233/1 070),骨髓描述性诊断比例由(15.72%,72/458)增长到(21.86%,234/1 070)。结论骨髓细胞形态学检查是查找贫血病因的重要手段,有助于指导针对病因的有效治疗。 (中华检验医学杂志,2014,37:115-118)
无需抽提RNA直接定量血浆microRNAs的实时荧光定量PCR方法的建立与评价
张莹莹 焦志军 段唐海 刘美红 王文红 陈艳 刘强 熊御云
中华检验医学杂志2014年 37卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2014.02.011
摘要
目的建立无需抽提RNA直接以血浆中的microRNAs(miRNAs)作为模板进行实时荧光定量PCR检测的新方法。方法方法学建立。采集健康人EDTA-K2抗凝静脉血并分离血浆,取7.5 μl血浆用等量含2.5%(体积比)Tween20的缓冲液处理后进行逆转录及PCR,建立血浆miRNAs直接检测法。用该方法检测健康人血浆标本中U6 snRNA、miR-24-1-5p和miR-4634表达水平,评估其扩增的特异性和扩增效率。同时与传统的抽提RNA定量PCR检测法的阈值循环数(Cq)值进行比较并作相关性分析。另外,应用建立的血浆直接检测法,比较了混合引物和单个引物逆转录法检测健康人血浆标本中U6 snRNA、miR-24-1-5p和miR-4634结果的一致性。结果血浆直接检测法融解曲线显示健康人血浆标本中U6、miR-24-1-5p和miR-4634扩增产物分别在81、83、84.2 ℃时出现单一峰,无引物二聚体峰和其他非特异峰出现。血浆直接检测法检测miR-24-1-5p扩增效率为1.1,同一份样本中U6、miR-24-1-5p和miR-4634这3种基因的扩增曲线平行,说明扩增斜率一致。直接检测法检测miR-4634的Cq值为30.98±0.17,高于RNA抽提法的29.22±0.21,差异有统计学意义(t=8.475,P<0.01),而2种方法检测U6(直接检测法32.43±0.08,RNA抽提法32.57±0.06;t=1.354,P>0.05)、miR-24-1-5p(直接检测法20.73±0.14,RNA抽提法21.06±0.21;t=1.749, P>0.05)结果差异均无统计学意义。2种方法检测U6(r=0.860 5,P<0.01)、miR-24-1-5p(r=0.728 9,P<0.05)和miR-4634 (r=0.748 5,P<0.01)结果具有较好的相关性。混合引物和单个引物逆转录后PCR的Cq值之间无明显差异。结论建立的血浆直接检测法只需对血浆标本进行简单的预处理,并可使用混合引物进行逆转录定量PCR,具有操作简便、检测成本低等优点,值得进一步推广应用。 (中华检验医学杂志,2014,37:119-122)
血红蛋白变异体对糖化血红蛋白测定结果的干扰及处理
温冬梅 张秀明 索明环 王伟佳 陈亚琼 徐全中 吴剑杨 李曼 萧金丽 阚丽娟 等
中华检验医学杂志2014年 37卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2014.02.012
摘要
目的分析糖化血红蛋白(HbA1c)测定结果与血糖结果不相符的原因,探讨不同血红蛋白变异体对离子交换高效液相色谱法(IE-HPLC法)检测HbA1c的干扰程度及实验室应采取的处理措施。方法方法学比较。收集IE-HPLC法检测HbA1c测定结果与血糖结果不相符的患者4例,采用血红蛋白毛细管电泳法对全血样本进行血红蛋白电泳分析,采用双脱氧链终止法进行血红蛋白基因测序,采用免疫抑制比浊法(TINIA法)对HbA1c进行重新检测。 结果4例患者中,2例为Hb J-Bangkok,血红蛋白基因型分别为β41-42/βJ-Bangkok和βN/βJ-Bangkok,Hb J-Bangkok含量各占93.9%和52.4%。1例为Hb E,血红蛋白基因型为βN/βE,Hb E含量占23.6%。1例为Hb G-Taipei,血红蛋白基因型为βN/βG-Taipei,Hb G-Taipei含量占39.4%。其中β-地贫合并Hb J-Bangkok(血红蛋白基因型为β41-42/βJ-Bangkok)患者IE-HPLC法和TINIA法HbA1c测定结果均受干扰,另外3例患者IE-HPLC法HbA1c测定结果受干扰,而TINIA法HbA1c测定结果不受干扰。结论β-地贫合并Hb J-Bangkok、Hb J-Bangkok、Hb E和Hb G-Taipei等血红蛋白变异体对IE-HPLC法检测HbA1c存在不同程度的干扰,此类患者应采用其他不受干扰的方法检测HbA1c,或选用其他替代指标对血糖水平进行监测。(中华检验医学杂志,2014,37:123-126)
中国154家实验室检测抗平滑肌抗体和抗线粒体抗体的比对分析
邓垂文 胡朝军 白依娜 董晓娟 李萍 李丽君 宋宁 史艳萍 张奉春 李永哲
中华检验医学杂志2014年 37卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2014.02.013
摘要
目的调查分析中国检测平滑肌抗体(ASMA)和抗线粒体抗体(AMA)工作现状,为改进其检测质量提供依据。方法调查性研究。共有154家实验室(至少参加1个项目的检测比对工作)自愿报名参加全国自身免疫性肝病相关抗体检测多中心比对分析。由卫生公益性行业科研专项“风湿免疫病诊疗关键技术临床推广及转化应用研究”项目组(以下称“项目组”)制备比对样品(液体血清),包括5份ASMA比对样品和5份AMA(包括AMA-M2亚型抗体检测)比对样品,并于2012年12月15日常温下将比对样品发放至各实验室。要求各实验室在2012年12月31日之前按照各自实验室常规方法检测比对样品,并于2013年1月14日前将检测结果以及检测所用方法填入统一表格寄回项目组。项目组采用Excel软件对检测结果进行分析,主要包括符合率分析和滴度回报率分析。结果ASMA-1为ASMA阳性,余为ASMA阴性。AMA-3和AMA-4为AMA及AMA-M2双阳性,余为AMA及AMA-M2双阴性。参加ASMA、AMA和AMA-M2检测比对工作的实验室数目分别为103家、103家和138家。ASMA、AMA和AMA-M2比对品检测结果阳性符合率分别为57.3%、66.5%和93.5%,阴性符合率分别为96.8%、99.0%和97.8%。间接免疫荧光法是检测ASMA和AMA的主要方法,但该法阳性符合率较低,分别为57.6%和65.2%,且2个项目的滴度回报率亦较低,分别为39.1%和43.5%。同时回报AMA和AMA-M2检测结果的实验室占总回报实验室的57.0%。结论2012年我国临床实验室检测ASMA和AMA比对品的阳性符合率尚不理想,阴性符合率较好。AMA-M2检测符合率均较好。IIF法检测ASMA和AMA的滴度回报率较低。目前亟需规范和提高自身免疫性肝病相关自身抗体谱检测质量。(中华检验医学杂志,2014,37:127-131)
结核感染T细胞斑点实验在结缔组织病患者中辅助诊断结核感染的应用
钟一鸣 谷秀梅 刘文恩 李艳明 金燕 彭婉婵
中华检验医学杂志2014年 37卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2014.02.014
摘要
目的探讨结核感染T细胞斑点实验(T-SPOT.TB)T-SPOT.TB对结缔组织病(CTD)合并结核感染的辅助诊断价值。方法病例对照研究。选取2011年9月至2012年7月中南大学湘雅医院风湿免疫科收治的CTD合并结核感染患者44例,并随机选取同期未有结核感染的CTD患者44例作为对照,比较结核感染T细胞斑点实验(T-SPOT.TB)和结核菌素皮肤试验(TST)对CTD合并结核感染患者的辅助诊断价值,评价两组T-SPOT.TB结果斑点形成细胞频数,分析导致T-SPOT.TB假阴性的相关危险因素,采用t检验、χ2检验及受试者操作特征 (ROC) 曲线进行统计学分析。结果T-SPOT.TB诊断CTD合并结核感染的敏感度为70.5%(31/44),显著高于TST(27.3%,12/44,χ2=16.42,P<0.001),两项指标的特异度分别为93.2%(41/44)和88.6%(39/44),差异无统计学意义(χ2=0.14,P=0.711),T-SPOT.TB诊断CTD合并结核感染的阳性预测值为91.2%(31/34),阴性预测值为75.9%(41/54),约登指数为0.64,阳性似然比为10.3,均高于TST(0.16和2.4),而其阴性似然比为0.32,低于TST(0.82)。当T-SPOT.TB斑点形成细胞频数取值为38个斑点形成细胞(SFC)/106外周血单个核细胞时,诊断结核感染有最佳截断值。对T-SPOT.TB诊断假阴性分别进行相关危险因素分析,发现年龄、激素或免疫抑制剂的使用、淋巴细胞减少症和低白蛋白血症均不是T-SPOT.TB诊断假阴性的危险因素。结论T-SPOT.TB对CTD合并结核感染的辅助诊断价值明显高于TST。(中华检验医学杂志,2014,37:132-135)
2型糖尿病并发颌面部感染来源的肺炎克雷伯菌的分子分型﹑耐药性及毒力研究
李莹莹 明亮 刘红春 康运凯 明昭
中华检验医学杂志2014年 37卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2014.02.015
摘要
目的了解临床分离自2型糖尿病并发颌面部感染的98株肺炎克雷伯菌的脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型和对常用抗菌药物的耐药情况,揭示其相关耐药机制,并对其毒力性进行探讨。方法前瞻性研究。本研究采取定点连续抽样的方法,选择2010年3月至2012年10月郑州市7家医院颌面外科确诊为2型糖尿病合并颌面部感染患者为研究对象,共连续收集431例患者脓液标本,分离鉴定出98株肺炎克雷伯菌,K-B法检测肺炎克雷伯菌对15种抗菌药物的敏感性试验。用XbaⅠ酶对菌株进行限制性酶切,PGFE分离酶切片段,Fingerprinting指纹图谱分析软件分析PFGE图谱,并分析PFGE基因组型与耐药表型之间的关系。产超广谱β内酰胺酶(ESBL)菌株检测应用双纸片协同及确认试验。通过PCR检测耐药基因型、血清型及毒力基因。并将TEM、SHV及CTX-M耐药基因的PCR扩增产物纯化、克隆后进行基因测序。黏液丝实验确定菌株的高黏液型(HM)表型。结果98株肺炎克雷伯菌对15种抗生素的耐药情况严重,ESBL检出率达57.1%(56/98)。PFGE将肺炎克雷伯菌分为13型,未发现优势带型及特异的ESBL电泳条带。PCR结果显示56株ESBL菌株中,产SHV型β内酰胺酶40株(占71.4%)、TEM型28株(占50.0%)和CTX-M型21株(占37.5%),测序结果证实均为TEM-1、CTX-M-3及多种SHV型。K1、K2、K3、K5、K20、K54和K57血清型及3种毒力基因均有检出,但不以强毒性血清型为主。HM阳性率为31.6%(31/98)。结论2型糖尿病伴发颌面部感染来源的肺炎克雷伯菌的耐药性严重,耐药机制多样复杂,并且存在强毒性血清型和毒力基因,需引起临床的高度重视。 (中华检验医学杂志,2014,37:136-139)
环介导等温扩增快速检测临床常见曲霉菌方法的建立和应用
鲁勇 汪一萍 应建飞 俞燕红 贺明阳
中华检验医学杂志2014年 37卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2014.02.016
摘要
目的建立一种环介导等温扩增(LAMP)反应快速检测临床常见曲霉菌方法。方法根据GenBank上提交的烟曲霉(登录号AY660917)、土曲霉(登录号AF454183)、黄曲霉(登录号AF454158)以及黑曲霉(登录号AF454169)菌的特异28S rRNA基因序列比对后的相对保守区设计特异LAMP引物,分别提取标准曲霉、临床对照菌株以及临床标本DNA,然后以LAMP技术扩增靶基因,通过反应体系中的荧光染料显色作用,直接肉眼观察结果。并将每种曲霉菌约103孢子加入到正常对照血清中模拟临床标本,用LAMP方法进行检测验证。结果15种非曲霉菌属以及人全血基因组的LAMP和PCR检测结果均为阴性、30份临床非曲霉菌血液感染标本以及10份正常对照血清标本的LAMP检测结果也均为阴性,无非特异反应发生。4种上述标准曲霉菌属的LAMP和PCR检测结果均为阳性;每种曲霉菌的双份共8份模拟临床标本,约含103孢子,经LAMP检测也均为阳性。另对系列每反应管分别含有500、50、5、0.5、0.05 pg模板进行灵敏度分析,LAMP最低检测限可达到0.05~0.5 pg每反应管。结论LAMP是一种简便、快速、特异和敏感的检测方法,可以用来检测临床和环境标本中的常见曲霉菌属。 (中华检验医学杂志,2014,37:140-143)
短篇论著
降钙素原上转发光免疫层析定量检测方法的建立
李鲁平 于洋 谷海峰 闵微 赵焕生 郭兆彪 杨瑞馥 周蕾
中华检验医学杂志2014年 37卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2014.02.017
摘要
降钙素原(procalcitonin,PCT)以其高灵敏度、高诊断特异性以及持续稳定的特点作为脓毒症诊断指标之一[1-3],2009年JAMA文章报道基于PCT为指导可以减少抗生素使用[4]。目前PCT的临床检测方法主要有半定量胶体金比色法、电化学发光法和酶联免疫荧光法,此3种方法各有缺陷,均无法满足急诊科、重症监护室等对患者体征状况进行快速、及时的评价监测的需求。本研究将PCT与即时检验(point of care testing,POCT)的概念结合,建立一种上转发光免疫层析技术(up-converting phosphor technology based lateral flow assay,UPT-LF)快速定量检测PCT,并对其性能进行了系统评价,并以罗氏电化学发光法(Elecsys BRAHMS PCT)做为参比试剂进行了临床验证。
全自动血液分析仪对体液标本中细胞检测的临床应用
陈小剑 余玲玲 陈荣发 王晓欧 李绵绵 蒋伟燕
中华检验医学杂志2014年 37卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2014.02.018
摘要
体液细胞检测在当前实验室里还是采用人工显微镜计数与分类,操作步骤复杂并费时,影响因素较多,重复性差,实验室之间缺乏可比性,不利于建立实验室室内和室间质量评价,影响临床医师对患者资料的分析。为了探求简便、快捷、准确的自动化检测方法,我们参照美国临床实验室标准化委员会(Clinical and Laboratory Stadard Institute,CLSI)和国际血液学标准化委员会(International Council for Standardization in Haematology,ICSH)相关文件[1-4],研究Sysmex XE-5000 全自动血液分析仪中的独立体液分析模式(body fluid,BF)在检测体液细胞计数和分类上应用的可行性。
心脑血管疾病专栏
高敏心肌肌钙蛋白T在急性心肌梗死早期诊断中的临床价值
杨硕 怀伟 刘桂花 吴健 张捷
中华检验医学杂志2014年 37卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2014.02.019
摘要
目的建立临床适用的高敏心肌肌钙蛋白T(hs-cTnT)诊断急性心肌梗死(AMI)的临界值和最佳联合检测方案,以期最大限度的体现其在AMI早期诊断中的临床价值。方法前瞻性研究。选取2012年6月至2013年6月就诊于北京大学第三医院急诊科的胸痛、胸闷、心前区不适患者342例以及慢性肾脏病患者43例、肺炎患者40例、早产儿动脉导管未闭(PDA)患者18例。检测胸痛患者就诊即刻血浆hs-cTnT、N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)以及和肽素浓度。分析不同疾病组hs-cTnT水平,绘制受试者工作特征曲线(ROC)评估比较hs-cTnT和cTnI对于早期诊断AMI的价值和联合检测hs-cTnT、CK-MB、NT-proBNP、和肽素对于提高AMI早期诊断准确性的作用。统计学方法计算hs-cTnT诊断AMI的敏感度、特异度、阴性预测值和阳性预测值等指标。结果ST抬高型心肌梗死(STEMI)组hs-cTnT水平最高(中位数为0.52 μg/L,范围为0.037~7.610 μg/L),其次为非ST抬高型心肌梗死(NSTEMI)组(中位数为0.127 5 μg/L,范围为0.021~4.260 μg/L),但其他疾病组hs-cTnT亦出现不同程度的增高(Chi-square=76.432,P<0.05)。hs-cTnT诊断AMI性的ROC曲线下面积(AUC)为0.862(95%CI:0.900~0.989),床旁检测(POCT)cTnI的AUC为0.748(95%CI:0.666~0.818)(Z=2.713,P<0.05)。以0.014 μg/L作为诊断界值(cut-off)诊断AMI的敏感度高达100%,但特异度仅为44.4%。以0.035 μg/L作为cut-off值的Youden指数最高,敏感度为95.1%,特异度为65.7%。联合hs-cTnT、NT-proBNP和CK-MB使AUC提高至0.915(95%CI:0.838~0.964)(Z=2.147,P<0.05),hs-cTnT与和肽素联合检测使AUC提高至0.921(95%CI:0.820~0.975)(Z=2.589,P<0.05)。结论以0.035 μg/L作为AMI的诊断界值为宜,且多项实验室指标联合检测可有效提高AMI早期诊断的准确性。(中华检验医学杂志,2014,37:150-154)
综述
免疫抑制患者巨细胞病毒感染的实验室检测及临床意义
陈兰兰 倪安平
中华检验医学杂志2014年 37卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2014.02.020
摘要
人巨细胞病毒感染率在我国人群中较高,而感染后潜伏于患者体内的病毒常在机体免疫状态转为抑制时再次激活感染,引起严重的临床后果。由于巨细胞病毒感染的临床症状具有非特异性,故而诊断巨细胞病毒感染多依赖于实验室检测,本文根据文献及国内外各实验室检测情况,就巨细胞病毒感染相关的实验室检测方法以及各检测指标对于免疫抑制患者的临床指导意义进行系统论述。(中华检验医学杂志,2014,37:155-158)
继续教育
不同类型临床标本的微生物培养方法与临床应用
王欣茹 陈凤华
中华检验医学杂志2014年 37卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2014.02.021
摘要
滥用抗生素导致细菌耐药性不断增强,临床出现“多重耐药”或“泛耐药”菌株;致病病原菌谱日益复杂、条件致病菌感染高发是各种感染性疾病发病率和病死率居高不下的主要原因。因此规范进行微生物培养对指导临床合理应用抗生素显得尤为重要。
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