2014年 · 第37卷第01期

近年来，国家对检验医学科研基金项目投入力度持续加大，加强科研项目的科学管理、保障项目的有效执行、完善项目的评价体系、提高项目的完成质量已成为科研管理者和执行者面临的一项重要课题。本文就检验医学科研项目执行和实施过程中存在的主要问题进行分析，从课题负责人的主导作用、实验进展的定期讨论、组织同行专家的定期指导、实验进度的科学管理、项目经费的有效使用及建立适当的奖惩机制等方面提出对科研项目执行和实施管理的建议，以期为检验医学科研项目如期顺利完成提供一定的参考依据。（中华检验医学杂志，2014,37：1-4）

免疫学和分子生物学的发展日新月异，为临床免疫学检验带来许多新的启示和思路，在以临床路径管理和个体化医学为主要特点的时代背景下，如何准确把握这些变化，构建完善的临床免疫学检验质量体系、理清免疫学检验的路径并将其融入到临床路径管理中、扎实推进个体化诊断技术的推广和应用、准确评估临床免疫学检验新技术新项目的诊断价值，是值得每一个临床免疫学检验工作者深思的问题，本文对这些领域的现状和思考作一评述。（中华检验医学杂志，2014,37：13-16）

临床医学的发展要求临床实验室持续改进质量管理体系，几乎达到检验报告无风险或零缺陷的目标。因此，应该不断更新实验室质量管理的理念和方法，从而保证患者医疗安全。本文旨在阐述风险管理和6 sigma管理体系与临床实验室质量管理体系的整合。（中华检验医学杂志，2014,37：17-20）

微生物室的重要职责是为临床提供快速准确的病原学诊断，微生物送检不规范是影响检测结果可靠性的主要因素之一。微生物室应与临床建立良好的对话机制，实验室人员不仅需要积极走进临床，加强临床送检意识，提高送检率，推动和指导临床规范送检；同时，还要主动学习临床知识，了解临床的需求和进展。以患者为工作中心，多学科密切合作，共同提高病原学诊断水平。（中华检验医学杂志，2014,37：21-23）

本文系统阐述了近40年来血细胞分析仪形态学分析技术发展进程。阐明了不同时期生产的不同功能的血细胞分析仪在白细胞分类中的临床价值、优势与局限性。明确指出目前不管多么精尖的自动识别技术,都不能代替人工显微镜检查。只不过不同档次的设备“筛选”水平不同而已。建议要从循证医学的角度，使用适宜检验技术。购置设备要考虑既满足临床诊断标准，又符合国家惠民政策和医改的要求。同时呼吁业界重视形态学检查，加强基本技能培训，不断提高医学检验技术人员的素质和学术水平。（中华检验医学杂志，2014,37：5-8）

随着生命科学技术的进步，临床检验相关支撑技术的迅速发展，对当今临床生物化学检验提出了更高的要求，在完善的质量管理体系保障下，最大限度地发挥其为临床服务的能力和应用价值。以循证医学为基础，结合我国具体国情及医疗改革的现状，深入评估新项目、新技术的临床价值，加强质量监管措施，为实际应用提供更加客观可靠的依据，科学指导临床决策，对合理配置和利用有限的医疗资源具有深远的意义。同时逐步推进个体化医学发展进程，尝试改变目前较为“被动”的医疗模式，关注疾病的早期预测和预防，以人为本，合理优化治疗方案，加强药物的安全性和有效性，将成为临床生物化学检验的热点问题。（中华检验医学杂志，2014,37：9-12）

长期以来，我国一直缺乏检验人员执业准入与注册制度，人员素质参差不齐，影响了检验结果的可靠性与人才梯队的建设管理。本文将从检验人员教育背景、认可和执业准入、继续教育与人才缺口四个方面介绍美国医学检验人员的工作现状和准入管理情况，为我国的检验人员执业准入管理提供一些借鉴。（中华检验医学杂志，2014,37：24-26）

目的研究苯唑西林敏感mecA阳性的金黄色葡萄球菌在我国的流行、分布及分子生物学特点。方法回顾性研究。采用琼脂稀释法对2010至2012年我国10个城市12所教学医院收集的1588株金黄色葡萄球菌进行20种抗生素药物敏感性检测。对苯唑西林敏感而头孢西丁耐药的金黄色葡萄球菌，进一步比较头孢西丁纸片扩散法、头孢西丁琼脂稀释法和苯唑西林琼脂稀释法的耐药结果。PCR法检测金黄色葡萄球菌特异基因nuc、femB及mecA，并进行分子分型，包括spa分型和SCCmec分型。 使用SPSS18.0进行统计分析， 以P≤0.05为差异有统计学意义。结果根据头孢西丁和苯唑西林MIC水平，鉴定出60株苯唑西林敏感的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）。2010至2012年苯唑西林敏感MRSA在我国逐渐升高 (P=0.05, 95%CI 0.045～0.056，χ2=6.099)。这些菌株主要分布在我国9个城市，其中广州分离率最高，占30.0%（18/60），其余依次为北京（18.3%，11/60），武汉（15.0%，9/60）和杭州（13.3%，8/60）。这60株菌最常见于皮肤软组织感染标本（35%，21/60），其次为血标本（30%,18/60）和呼吸道标本（18.3%,11/60）。药物敏感性分析显示，这些菌株对头孢西丁、红霉素、克林霉素和四环素耐药率分别为100%(60/60)、86.7%(52/60)、66.7%(40/60)和50%(30/60)。根据分子分型结果显示，共有21种spa分型、5种SCCmec分型，spa t437-SCCmecⅣ最常见，占25.0%（15/60），其次为spa t437-SCCmecⅤ，占13.3%（8/60）。结论2010至2012年苯唑西林敏感MRSA在我国9个城市均有检出，并且检出率呈升高趋势。这种菌株主要是spa 437-SCCmecⅣ型。应当用头孢西丁代替苯唑西林检测这种类型的MRSA。mecA阳性而苯唑西林敏感的金黄色葡萄球菌是否能够用β内酰胺类进行治疗，尚需要进一步研究。（中华检验医学杂志，2014,37：27-31）

目的采用多重荧光PCR结合Allglo探针技术，建立一种快速、特异、灵敏的鉴定艰难梭菌相关毒素基因的方法，并对浙江杭州地区腹泻患者的产毒型艰难梭菌感染现状进行调查研究。方法应用型研究。针对艰难梭菌毒素tcdA和tcdB基因设计引物和相应的Allglo探针，优化PCR扩增体系，并评价其特异性、灵敏度、重复性。收集2012年8至12月杭州市第一人民医院的门诊腹泻患者粪便标本共180份，对粪便中携带tcdA和tcdB基因的产毒型艰难梭菌进行鉴定，同时通过对tcdA和tcdB基因直接测序进一步验证荧光PCR检测结果的可靠性。结果本试验建立的结合Allglo探针的多重荧光PCR方法可同时、准确、特异地鉴定艰难梭菌tcdA和tcdB基因，灵敏度可达10 CFU/ml。定量检测tcdA基因的循环阈值（Ct）值变异系数分别为2.30%、0.42%、0.81%，检测tcdB基因的Ct值变异系数分别为1.91%、1.02%、1.18%，均小于5%。在180份腹泻粪便样本中，检测出26份阳性样本，阳性率为14.4%，其中tcdA和tcdB毒素基因均阳性的样本为23份(23/26，88.5%)，仅tcdA毒素基因阳性的样本为2份(2/26，7.7%)；仅tcdB毒素基因阳性的样本为1份(1/26，3.8%)。同时，采用直接测序方法对样本进行扩增检测和序列比对，与荧光定量PCR结果完全一致。结果显示浙江杭州地区腹泻患者感染的产毒型艰难梭菌以同时携带tcdA和tcdB毒素基因的菌株为主。结论本研究建立的Allglo探针的多重荧光PCR方法可用于临床上快速、准确地检测产毒型艰难梭菌。（中华检验医学杂志，2014,37：32-35）

目的分离和研究海南地区发现的携带blaNDM-1基因肠杆菌科细菌。方法回顾性研究。收集2012年海南省临床上对亚胺培南或美罗培南耐药或中介的肠杆菌科细菌30株；用法国生物梅里埃公司API20E进行菌种鉴定和VITEK2全自动细菌鉴定仪进行药敏试验；亚胺培南/亚胺培南和抑制剂复合物(IP/IPI)E-test试纸条法协同试验检测产金属β内酰胺酶的菌株，试验菌株进行NDM-1耐药基因PCR特异性扩增，扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳和测序分析；将阳性菌株进行质粒接合试验，并对接合前后的药敏结果进行比较。结果30株目标细菌经IP/IPI E-test试纸条法协同试验检出阳性菌株21株，再经PCR扩增和测序获得9株携带blaNDM-1基因的耐药菌株，其中4株为肺炎克雷伯菌，2株为大肠埃希菌，2株为阴沟肠杆菌，1株为产气肠杆菌。这些携带blaNDM-1基因菌株对广谱抗生素β内酰胺酶抑制剂、头孢类、碳青霉烯类抗生素耐药；经质粒接合转移试验后，9株试验菌全部接合成功，这9株细菌的接合子药敏试验结果表示其对亚胺培南和美罗培南的药物敏感性有较大差异，对氨曲南、头孢吡肟和头孢替坦的药物敏感性有轻度差异，其他药物的敏感性无明显差异。结论海南发现的耐碳青霉烯酶类肠杆菌科细菌主要携带blaNDM-1基因，产碳青霉烯酶是肠杆菌科细菌对β内酰胺类抗生素耐药的主要机制之一，且其NDM-1可通过质粒在不同菌株之间传递。（中华检验医学杂志，2014,37：36-40）

目的了解湖北地区临床耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）标本中异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌（hVISA）的分离率，并探讨一种可用于本实验室筛选hVISA的简便易行的方法。方法采用琼脂稀释法检测214株临床MRSA菌株的苯唑西林、头孢西丁、万古霉素、替考拉宁的MIC，并分别用含有5 mg/L替考拉宁的M-H琼脂（MHA5T），宏量E-test法（MET）及菌群分析曲线（PAP/AUC）法检测hVISA。以PAP/AUC法作为金标准，比较MHA5T和MET法的敏感度及特异度。采用Triton X-100诱导自溶的方法检测hVISA和万古霉素敏感金黄色葡萄球菌（VSSA）菌株的自溶性,并用SPSS18.0软件分析其差异性。结果PAP/AUC、MET、MHA5T三种方法检测hVISA的阳性率分别为17.8%（38/214）、20.6%（44/214）、45.8%（98/214）。以PAP/AUC作为金标准，MET和MHA5T的敏感度、特异度分别为82%（31/38）、93%（163/176）和90%（34/38）、64%（112/176）。hVISA 4 h后自溶性降至52%，VSSA 4 h后自溶性降至28%，与VSSA相比，hVISA的自溶性明显下降（χ2=18.3486，P=0.024）。结论湖北地区hVISA检出率为17.8%，应引起临床高度重视。MHA5T可作为hVISA的初筛方法，以减少PAP/AUC的繁琐工作量及E-test的使用。（中华检验医学杂志，2014,37：41-45）

目的应用孕妇体重对早、中孕期整合筛查唐氏综合征（DS）的血清标志物中位数倍数（MoM）进行校正，降低假阳性率。方法同一个孕妇分别于孕11～13周+6d和15～20周+6d用无菌真空采血管采取静脉血，采用时间分辨免疫荧光法（DELFIA）检测甲胎蛋白(AFP)、游离-β亚基-促绒毛膜性腺激素(Free-βhCG)、妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)等3种血清标志物筛查指标，利用筛查风险评估软件，计算血清标志物的MoM，对7997例本地孕妇进行DS的风险评估，用非线性加权回归法，构建本地人群的体重方程，应用孕妇体重对本地人群的血清标志物MoM进行校正，比较校正前后各筛查指标MoM的变化情况，χ2检验比较检出率和假阳性率。结果AFP、Free-βhCG、PAPP-A的MoM值随体重增加而减少，筛查指标MoM经体重方程校正后，人群筛查的假阳性率由4.12%减少到3.86%（χ2=0.021，P>0.05）。设定临界值（cut-off值）为1/270，本地人群体重方程校正前后检出率均为71.4%。结论孕妇体重对DS筛查的结果有影响，为了得到精确的风险计算结果，筛查时建议建立、并用孕妇体重校正本地区血清标志物中位数倍数。 （中华检验医学杂志，2014,37：46-49）

目的应用酶学参考方法实验室网络赋值的人源冰冻血清做校准品，探求实现不同检测系统间检测结果一致性的途径，为实验室确定适合的项目校准方式提供参考方法。方法量值溯源研究。由首都医科大学附属北京朝阳医院、北京航天总医院、首都医科大学附属北京世纪坛医院、中国医学科学院北京协和医院、北京利德曼生化股份有限公司、四川迈克生物科技股份有限公司6家实验室组成的酶学参考方法实验室网络使用国际临床化学和检验医学联合会（IFCC）推荐的磷酸肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）参考测量程序为新鲜冰冻混合人血清赋值，再用此赋值血清做统一的酶校准品，于2012年2月校准8套北京地区的单点校准模式的常规检测系统。每日校准程序校准各系统后顺序检测定值血清、原系统厂家校准品、质控品和患者样本；患者样本为北京市临床检验中心于2011年9月至11月收集的中国医学科学院阜外心血管病医院患者验后血清样本。再固定10日平均校准系数（以下简称：固定K均值），并用它替换每日校准系数，以固定K均值重新计算获得上述相应的结果，比较两者的室内精密度。计算患者样本校准前、后的均值、标准差、变异系数（CV）以及原系统校准品的偏移等统计学指标。结果定值血清校准后，8台常规检测系统原系统校准品赋值的偏移有不同，CK、LDH各有2个校准品赋值偏移＞5%；患者样本CK结果系统间CV分别由3.78%和4.44%下降到0.74%和0.89%；LDH由4.11%和4.08%下降到1.08%和1.28%。每日校准与固定K均值两种校准方式比较结果显示：CK项目K值的CVs≤1.00%、LDH项目CVs≤2.50%的检测系统，各样本的系统内CVs分别小于1.50%和3.00%；且两种校准方式原系统校准品、质控品及患者样本的CV均没有明显差异；而对于CK项目K值CV＞1.00%、LDH项目CV＞2.50%的系统，系统内CV明显增大；并有系统显示，各样本固定K均值的CV较每日校准的CV明显增大。结论使用参考方法实验室网络赋值的冰冻人源血清做统一的酶校准品，校准不同的单点校准模式的开放检测系统，可实现CK、LDH检测结果的一致性，并使结果溯源至参考方法。实验室应基于检测系统的稳定性确定适宜的校准方式。（中华检验医学杂志，2014,37：50-55）

目的克隆细粒棘球绦虫亲环素A（EgCypA）基因并体外表达纯化该蛋白以评价EgCypA的血清学免疫检测价值。方法利用生物信息学方法分析细粒棘球绦虫cDNA文库中的EgCypA的理化及生物学特性并设计引物，以细粒棘球绦虫cDNA为模板进行PCR扩增得到EgCypA基因，将该基因克隆到原核表达载体pET28a中，将重组载体导入大肠埃希菌， IPTG诱导该重组菌株表达EgCypA，使用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)明确重组蛋白表达情况；利用Western blot法进行纯化的重组蛋白对细粒棘球绦虫感染血清及其他寄生虫感染血清免疫反应性的鉴定，以此评价该重组蛋白的免疫检测价值。结果SDS-PAGE显示重组菌株在相对分子质量18 400～25 000表达了大量蛋白，该蛋白的分子量同生物信息学分析的EgCypA的分子量吻合。Western blot结果显示细粒棘球绦虫相关血清与重组蛋白作用后于17 000～26 000之间出现了特异性的反应条带，其他寄生虫血清则无此反应。结论EgCypA具有良好的抗原性，是很有前景的细粒棘球绦虫特异性诊断抗原，可以作为免疫学检查细粒棘球绦虫早期感染的候选分子。（中华检验医学杂志，2014,37：56-59）

目的探讨三磷酸腺苷结合盒转运体B1（ABCB1）、三磷酸腺苷结合盒转运体C2（ABCC2）和溶质转运蛋白1B1（SLCO1B1）基因多态性与急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿大剂量甲氨蝶呤(MTX)化疗毒性作用的相关性。方法病例对照研究。收集2005年9月至2011年12月南京医科大学附属南京儿童医院142例ALL患儿外周血，采用均相酶放大免疫分析法(EMIT)测定MTX血药浓度，采用聚合酶链反应-连接酶检测(PCR-LDR)技术对ABCB1、ABCC2和SLCO1B1基因单核苷酸多态性（SNPs）进行基因分型。结果MTX存在排泄延迟时，其毒性作用发生风险显著增加（OR=2.828, 95%CI:1.217～6.571，P<0.05)，SLCO1B1基因rs4149081和rs11045879位点存在强连锁不平衡（R2=0.979, P<0.05）。多因素分析显示，SLCO1B1基因rs4149081 AA或rs11045879 CC基因型患儿MTX化疗后易出现排泄延迟（OR=4.41, 95%CI:1.537～12.654, P=0.042），且发生MTX毒性作用的风险显著高于其他基因型患儿（OR=4.118, 95%CI:1.135～14.944, P=0.022）。未发现其他SNPs与MTX排泄延迟或毒性作用的相关性。结论SLCO1B1基因rs4149081 AA或rs11045879 CC基因型可能是MTX毒性作用的危险因素。（中华检验医学杂志，2014,37：60-65）

目的探讨血凝素样氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）受体-1（LOX-1）、CX3C趋化因子受体1（CX3CR1）与冠状动脉狭窄性疾病关系及其预后价值。方法临床病例对照研究。选取天津泰达国际心血管病医院心内科2011年5月至2013年4月收治的176例冠状动脉狭窄性疾病患者，均经冠状动脉造影（CAG）确认（冠状动脉血管狭窄达到或超过50%）。对照组为同期本院经CAG证实无冠状动脉病变的非冠心病的患者，均排除心脏疾病，肝、肾功能不全，脑部疾病，血液系统疾病以及其他导致动脉粥样硬化及栓塞类疾病。记录两组的一般资料及实验室指标，检测LOX-1、CX3CR1、尿酸（UA）、肌酐（CREA）。对各组检测指标进行比较, 对病例组中单支病变与多支病变LOX-1、CX3CR1进行比较,对LOX-1、CX3CR1与Gensini积分及各变量进行相关分析。对随访1.5年发生主要心脏不良事件（MACE）组与无MACE组的LOX-1、CX3CR1进行比较，同时比较不同LOX-1、CX3CR1水平患者随访1.5年的MACE。采用SPSS 16.0软件进行统计分析。运用独立样本t检验，Mann-Whitney U检验，χ2检验，Spearman相关分析，Logistic回归分析，Kaplan-Meier概率对数据进行分析。结果病例组与对照组比较，LOX-1分别为：3.72(1.44，8.15) μg/L与0.75(0.50，1.19) μg/L，z=11.072，P<0.001；CX3CR1分别为：（2.82±1.85） μg/L与（2.32±0.79） μg/L，t=2.021，P<0.05；UA分别为：（351.34±94.82） μmol/L与（326.74±79.51） μmol/L，t=2.094，P<0.05；CREA分别为：（70.86±20.94） μmol/L与（65.55±12.96） μmol/L，t=2.077，P<0.05。多支病变患者CX3CR1水平（2.84±1.78）μg/L明显高于单支病变患者（2.48±1.64） μg/L，差异有统计学意义（t=2.207，P<0.05）。LOX-1、CX3CR1与Gensini积分均无相关性（R分别为0.032、0.079，P均>0.05）。LOX-1与左心室射血分数（LVEF）呈负相关(R2=0.272，P<0.01), LOX-1与左心室舒张末期内径（LVDD）呈正相关(R=0.190，P<0.05), LOX-1与UA呈正相关(R=-0.121，P<0.05)。MACE组与无MACE组比较，LOX-1：7.38（4.97,11.88） μg/L与3.52(1.45,7.75) μg/L, z=2.762，P<0.01；CX3CR1：（4.02±2.90） μg/L与（2.67±1.48） μg/L，t=3.086，P<0.01。LOX-1、TG是冠状动脉狭窄性疾病发病的危险因素。高、低LOX-1组间比较，非MACE概率分别为：87.1%(115/132)和97.7%(43/44)，Log-ran K检验，χ2=6.957，P<0.01。高LOX-1水平组经皮冠状动脉介入治疗（PCI）术后1.5年内发生MACE风险增大。结论LOX-1、CX3CR1可能参与了冠状动脉狭窄性疾病的过程，且高水平LOX-1可能与左心室收缩功能受损相关。 LOX-1升高与冠状动脉狭窄性疾病患者PCI术后远期MACE事件发生率密切相关。（中华检验医学杂志，2014,37：66-71）

无创早期诊断有助于降低大肠癌的致死率并减少受检者的痛苦，粪便DNA检测是进行大肠癌无创早期诊断的重要途径之一，从粪便中提取大量的且高质量的人基因组DNA产物是保证诊断正确性的前提。然而，由于粪便样本的成分十分复杂，使粪便DNA提取较为困难。因此，开发高效的粪便人基因组DNA提取技术，对提高基于粪便DNA检测的大肠癌早期诊断水平起到关键作用。目前，用于粪便人基因组DNA提取方法主要包括两类：粪便DNA直接提取和富集粪便中肠壁脱落细胞后提取。本文就这两类粪便人基因组DNA提取方法进行简要介绍，并对其应用前景进行了展望。（中华检验医学杂志，2014,37：72-75）

血流感染［1］是指各种病原微生物和毒素侵入血循环，引起全身感染、中毒和炎症反应。包括败血症、菌血症、脓毒症、导管相关血流感染、细菌性心内膜炎等。是一种严重的全身感染性疾病，病死率高，危害严重。

南方医科大学医学检验系紧密结合现代医学检验学科发展趋势，依据学科建设的内在规律，对医学检验专业的课程体系、实践教学、创新教育、教学技术等方面进行系列研究和改革实践，逐步形成一套特色鲜明的医学检验创新人才培养模式，务实推进系统、有效、持久的创新教育，培养具有创新素质和创新能力的人才，取得可喜的阶段性成果，具备良好的发展前景。（中华检验医学杂志，2014,37：78-80）