2013年 · 第36卷第11期

随着肿瘤个体化治疗的发展，寻找肿瘤相关靶向生物标志的任务也日趋紧迫，相比在肿瘤组织中的检测，血清肿瘤标志物因其取材简易，检测方式便捷灵活等优点而显得愈发重要。目前，随着筛选手段和策略的不断发展，发现了很多可供临床进行早诊，疗效和预后评价的新型血清肿瘤生物标志物，相信随着临床研究的不断深入和临床实践的不断验证，必将对肿瘤临床诊疗起到巨大的推动作用。（中华检验医学杂志,2013,36:961-964）

肝细胞癌是常见的高致死性肿瘤，在亚太地区，尤其是我国具有很高的发病率，实现早期诊断对肝细胞癌的治疗和预后具有重要意义。根据近年来肝细胞癌血清学标志物的研究进展，在此阐述了具有应用前景的新型血清标志物，并对应用于该领域的新技术方法进行了分析和探讨。（中华检验医学杂志,2013,36:974-977）

乳腺癌的实验室诊断传统策略主要是基于抗原-抗体反应的免疫学诊断，如CA-153、细胞角蛋白CK8/18/19等；以及基于核酸（DNA/mRNA）的分子诊断，如BRCA1/2、HER2等。本文阐述了循环DNA、循环miRNA、核酸适配子、循环肿瘤细胞等基于核酸策略的新兴技术在乳腺癌实验诊断中的进展。（中华检验医学杂志,2013,36:978-982）

肺癌是危害人类健康与生命的主要恶性肿瘤之一。转移和复发是肺癌患者死亡的主要原因。早期诊断及监测复发和转移，对提高肺癌患者生存率尤为重要。循环肿瘤细胞作为一种新型实时监测的非侵入性诊断工具，可被看作液体活检样本，为肺癌早期预测转移、评估预后以及监测复发开辟了一个新的研究领域。（中华检验医学杂志,2013,36:983-986）

拷贝数变异是基因组中广泛存在的一种结构变异，为个体间基因差异的重要来源之一。近年来，随着基因芯片及基因测序技术的成功研发，拷贝数变异的检测技术也日益标准化、自动化，也使得拷贝数变异在自身免疫性疾病等复杂疾病中的作用越来越受到学界的关注和重视。拷贝数变异的检测技术可以分为定点分析技术和基于全基因组水平的分析平台。目前拷贝数变异在自身免疫性疾病中的研究多集中在系统性红斑狼疮和类风湿关节炎，受限于检测技术和检测成本，研究尚处于起步阶段。（中华检验医学杂志,2013,36:987-991）

目的探讨流式细胞术检测非小细胞肺癌（NSCLC）特异性循环肺癌细胞（SCLCC）的临床应用价值。方法采用特异性识别SPC-A1的单克隆抗体NJ001进行荧光标记，建立流式细胞术检测SCLCC的方法。采用病例对照研究方法，对收集到的2013年3至7月南京医科大学第一附属医院43例NSCLC患者、15例肺部良性疾病患者和35名健康对照者外周血进行SCLCC水平检测，用秩和检验分析各组之间的差异，并绘制ROC曲线分析。同时将43例NSCLC患者的SCLCC水平与电化学发光法检测癌胚抗原（CEA）、角质蛋白19片段（CYFRA21-1）和神经元特异性烯醇化酶（NSE）水平采用χ2检验进行比较。结果NSCLC患者的SCLCC水平为75（16~128）/20万个PBMC，高于肺部良性疾病患者的5（0~30）/20万个PBMC和健康对照者的0（0~15）/20万个PBMC，差异有统计学意义（Z=-3.373、-5.240，P<0.05）；NSCLC患者SCLCC的ROC曲线下面积为0.831，最佳诊断临界值为30/20万个PBMC，对应的敏感度为65%，特异度为92%；其中25例NSCLC患者手术之前的SCLCC为78（12~120）/20万个PBMC，显著高于手术之后的17（0~104）/20万个PBMC，差异有统计学意义（Z=-2.005，P<0.05）；另外43例NSCLC患者的SCLCC阳性率为65%，显著高于电化学发光法的CEA、CYFRA21-1和NSE（35%、14%和23%），差异有统计学意义（χ2=5.76、16.96、13.14，P<0.05）。结论应用流式细胞术检测SCLCC具有较高敏感度、特异度和准确性，具有重要的临床价值。（中华检验医学杂志,2013,36:1002-1007）

目的探讨pro-GRP与NSE水平对SCLC临床诊断、疗效监测的意义及治疗后标志物水平与生存期的关系。方法回顾性研究。收集2008年5月1日至2011年4月30日由郑州人民医院确诊的41例SCLC（男30例，女11例，年龄46~78岁）、95例NSCLC（男55例，女40例，年龄42~88岁）和127名健康人（男80名，女47名，年龄35~78岁）样本，检测pro-GRP和NSE的血清学水平，分析评价2项指标在SCLC患者治疗前后的水平变化。采用SPSS 16.0单因素方差分析、随机区组设计的方差分析和log-rank test进行统计分析。结果SCLC患者治疗前血清pro-GRP中位数水平为357.8 ng/L，NSE治疗前中位数水平为89.5μg/L，两者均显著高于NSCLC组指标的中位数水平（pro-GRP：39.9 ng/L；NSE：11.43μg/L）和健康人组指标的中位数水平（pro-GRP：12.7 ng/L；NSE：10.03μg/L）（F值分别为41.05、100.42，P均<0.001）。pro-GRP和NSE诊断SCLC的敏感度分别为80.4%和78.0%，特异度分别为92%和87%；两指标血清水平上相关性较低（r=0.2750），联合检测SCLC敏感度可达95%，特异度可达85%；SCLC-LD患者治疗前、后pro-GRP水平的差异有统计学意义（F=3.53，P=0.038），NSE的水平在SCLC-ED患者治疗前、后的差异有统计学意义（F=16.049，P=0.000）。部分缓解的SCLC患者治疗后NSE水平低于界值的患者生存期长于高于界值的患者（P=0.001）。结论pro-GRP和NSE联合检测诊断SCLC的灵敏度优于单指标；pro-GRP水平更能反映SCLC-LD患者的治疗效果，NSE水平则更能反映SCLC-ED患者的治疗效果。治疗后NSE水平对评估部分缓解患者的生存期有一定价值。（中华检验医学杂志,2013,36:1008-1012）

目的研制血清总胆固醇（TC）、总甘油（TTG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）冰冻血清标准物质。方法实验性基础研究。2008年11月在卫生部北京医院募集年龄20~50岁的健康志愿者28名，男14名，女14名，采集志愿者血清，根据TC的浓度制备3种不同水平的混合血清池。用常规方法进行均匀性和同步稳定性研究。用同位素稀释液相色谱串联质谱（ID-LC/MS/MS）和高效液相色谱（HPLC）法为TC定值，HPLC、ID-LC/MS/MS和同位素稀释气相色谱质谱（ID-GC/MS）法为TTG定值，DCM法和超速离心/HPLC法分别为HDL-C和LDL-C定值。计算各检测项目的不确定度。结果均匀性数据的方差分析结果显示3种血清池的P值均大于0.05，说明均匀性良好。同步稳定性研究结果显示3种物质在-70℃保存至少可稳定1年。3种血清的定值结果（标准值±扩展不确定度，mmol/L）为：TC分别为6.798±0.075，4.470±0.050，3.221±0.042；TTG分别为1.327±0.024，0.824±0.017，0.659±0.014；HDL-C分别为1.640±0.028，1.652±0.027，1.184±0.022；LDL-C分别为4.577±0.097，2.492±0.072，1.788±0.041。结论本研究成功研制了TC、TTG、HDL-C和LDL-C冰冻血清标准物质。（中华检验医学杂志,2013,36:1013-1017）

目的探讨降钙素原检测在终末期肝衰竭患者发生急性肾损伤中的价值。方法病例对照研究。收集四川大学华西医院2009年1月至2012年1月90例住院患者临床资料，其中终末期肝衰竭伴急性肾损伤患者40例（急性肾损伤组），终末期肝衰竭且肾功能正常患者50例（对照组）。记录两组患者年龄、性别、肝衰竭病因、Child-pugh分级、终末期肝病模型（model for end-stage liver disease，MELD）评分、感染发生率及类型及全身炎性反应（systemic inflammatory response，SIRS）评分。同时采集两组患者血液，采用罗氏Modular-P800全自动生化分析仪检测肾功能并采用罗氏Cobas E170全自动电化学发光分析仪检测降钙素原水平。比较两组患者的临床资料和检测指标。计数资料采用χ2检验；正态分布计量资料采用成组资料的t检验；非正态分布计量资料采用Wilcoxon秩和检验。急性肾衰竭组降钙素原水平与肾功能指标的相关性采用Spearman秩相关分析。结果急性肾损伤组感染发生率为82.5%，高于对照组的26.0%，差异有统计学意义（χ2=26.68，P<0.05）。急性肾损伤组降钙素原水平和SIRS评分分别为8.72（3.14，31.68）μg/L和2.15±1.11，高于对照组的0.11（0.04，0.45）μg/L和0.67±0.59（H=81，t=6.36，P<0.05）。急性肾损伤组降钙素原与尿素显示较好的相关性（r=0.67，P<0.05）。结论终末期肝衰竭并发急性肾损伤患者感染率和降钙素原水平增高，提示感染引发的脓毒血症与终末期肝衰竭患者发生急性肾损伤密切相关，降钙素原检测对终末期肝衰竭患者急性肾损伤的发生有提示作用。（中华检验医学杂志,2013,36:1018-1021）

目的分析急性心肌梗死（AMI）患者血清代谢轮廓，寻找早期诊断急性心肌梗死的代谢指标。方法病例对照研究。收集2011年5月至2012年3月天津市第三中心医院住院确诊的AMI患者42例及同期体检的健康成人35名采用超高效液相色谱与质谱联用（UPLC-MS）代谢组学研究平台筛选特征代谢物，利用SPSS17.0软件进行统计分析，同时利用ROC曲线对特征代谢物的临床诊断效能进行评估。结果构建了“急性心肌梗死患者-健康对照组”的主成分分析（R2X=75.6%，Q2=39.7%）及正交偏最小二乘代谢轮廓分析模型（R2Y=97.8%，Q2=97.0%）并鉴定了19个差异代谢物，其中甘油磷脂类物质在AMI患者血清中均呈下调趋势，而鞘磷脂类物质大部分均呈上调趋势，鉴定出的代谢物的曲线下面积均大于0.8，验证结果模型的预测准确度达到100%。结论利用代谢轮廓分析方法所找到的特征代谢物具有很好的区分AMI患者与健康人群的能力，可以作为潜在的疾病诊断标志物及新治疗靶点在临床领域做进一步研究。（中华检验医学杂志,2013,36:1022-1026）

目的对胶乳增强免疫比浊法测定血浆和尿液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）进行方法学评价。方法按照美国临床和实验室标准协会（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）评价方案和相关文件的要求进行验证性研究，对胶乳增强免疫比浊法的不精密度、检测限、线性范围、正确度和抗干扰性等进行评价。同时，测定20例急性肾损伤患者（AKI）、166例慢性肾病患者（CKD）以及100名健康对照者血浆和尿液中NGAL水平。结果胶乳增强免疫比浊法测得NGAL低值和高值的重复性估计值为1.90%（低值）和1.22%（高值），实验室内不精密度为4.06%（低值）和2.57%（高值）；空白限（limit of blank，LoB）为3.1μg/L，血浆NGAL（sNGAL）和尿液NGAL（uNGAL）的检出限（limit of detection，LoD）分别为12.5和21μg/L。用胶乳增强免疫比浊法测定血浆和尿液NGAL在25~4250μg/L的线性良好;sNGAL和uNGAL平均回收率分别为98.89%、98.28%（低值）和102.61%、95.44%（高值）；与国外同类试剂盒相比，测定结果基本一致。血红蛋白≤7 g/L，胆红素≤0.6 g/L，维生素C≤0.6 g/L，肝素钠≤5 g/L，内脂≤1%时，对sNGAL测定结果无显著性干扰，血红蛋白≤10 g/L，胆红素≤0.6 g/L，维生素C≤0.6 g/L，uNGAL测定结果在可接受范围内。AKI组、CKD组血浆和尿液NGAL水平与健康对照组比较差异均有统计学意义；AKI组较CKD组显著升高。sNGAL、uNGAL的水平均与肾小球滤过率估算值（eGFR）呈负相关（r=-0.758、-0.692，P均<0.01）。结论胶乳增强免疫比浊法测定血浆和尿液NGAL的不精密度符合要求，线性范围宽，具有自动化程度高、检测速度快等优点。（中华检验医学杂志,2013,36:1027-1032）

目的探讨血清cf-DNA定量检测在宫颈癌早期辅助诊断及预后判断中的价值。方法病例对照研究。收集南通大学附属医院2010年11月至2012年6月收治的40例宫颈癌患者，均经组织病理学证实；其中鳞癌患者36例，腺癌患者4例。选择同期CINⅢ患者32例，门诊体检健康妇女58名。采用分支DNA（bDNA）技术检测血清cf-DNA含量，采用化学发光法检测血清中鳞状细胞癌抗原（SCC）、铁蛋白（FER）、糖类抗原125（CA125）、糖类抗原19-9（CA19-9）的含量。统计学分析采用Mann-Whitney U检验、Kruskal Wallis检验及Spearman相关检验。结果宫颈癌患者、CINⅢ患者和健康对照者血清cf-DNA含量分别为1373.17（976.13~2337.08）、225.15（106.89~313.59）、188.80（111.30~314.15）ng/ml，宫颈癌患者血清cf-DNA含量显著高于CINⅢ患者及健康对照者（Z=-6.312，-7.351，P均<0.001），而CINⅢ组和正常对照组之间差异无统计学意义（Z=-0.438，P=0.661）。其中，Ⅱ~Ⅲ期患者的血清cf-DNA水平2490.26（1407.86~4326.12）ng/ml明显高于Ⅰ期1267.54（633.01~1586.43）ng/ml（Z=-3.394，P=0.001）。宫颈癌患者血清cf-DNA含量在不同分化程度、病理类型分组间无统计学差异。血清cf-DNA浓度与SCC（r=-0.160，P=0.324）、FER（r=0.032，P=0.842）、CA125（r=0.077，P=0.638）、CA19-9（r=0.135，P=0.406）没有相关性。使用ROC曲线分析血清cf-DNA浓度对宫颈癌患者的诊断效能，其曲线下面积（0.938）高于传统指标血清SCC（0.772）、FER（0.721）、CA125（0.615）、CA19-9（0.601）。结论血清cf-DNA水平有助于宫颈癌的早期辅助诊断及预后判断。血清cf-DNA对宫颈癌的辅助诊断价值要优于传统肿瘤标志物SCC、FER、CA125、CA19-9。（中华检验医学杂志,2013,36:992-996）

目的分析血清Pentraxin-3（PTX-3）在肺癌诊断及疗效评估中的价值。方法多中心验证试验。选择2011至2013年820例肺癌患者、462例肺良性疾病患者及522名健康对照者，来自多个独立的研究中心，分为实验组和验证组。ELISA或电化学发光法检测血清PTX-3、癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白片段19（CYFRA21-1）及神经特异性烯醇化酶（NSE）水平。ROC曲线确定PTX-3最佳cut-off值，评估血清标记物诊断肺癌及早期肺癌的临床价值。对61例行肺癌切除术的患者，检测术后3 d、7 d、14 d血清PTX-3水平，并进行随访研究。结果实验组和验证组肺癌患者血清PTX-3水平分别为9.21（6.13~12.80）和10.4（5.54~13.11）g/L，明显高于肺良性疾病组的5.28（3.42~8.53）、6.52（3.84~7.89）g/L和健康对照组的2.18（0.54~5.44）、2.44（0.67~5.87）g/L，差异有统计学意义（实验组Z=8.161、14.118，P均<0.05；验证组Z=9.832、17.595，P均<0.05）。ROC曲线分析显示，PTX-3诊断肺癌的最佳cut-off值为8.03 g/L，实验组和验证组患者血清PTX-3诊断肺癌的敏感度和特异度分别为76.1%、75.2%和71.3%、89.2%；PTX-3诊断肺癌的ROC曲线下面积（AUC）分别为0.836、0.824;实验组和验证组患者血清PTX-3的AUC均明显高于CEA和CYFRA21-1。在早期肺癌的诊断中，PTX-3在实验组和验证组的敏感度和特异度分别为79.1%、62.2%和71.3%、69.6%，AUC分别为0.764、0.744。PTX-3诊断早期肺癌的AUC高于CEA和CYFRA21-1。PTX-3和NSE诊断小细胞肺癌的AUC差异无统计学意义，PTX-3的敏感度高于NSE。61例行肺癌切除术的患者术后3 d的PTX-3水平为（7.85±3.91）g/L，和术前的11.12（9.12~12.59）g/L相比，差异有统计学意义（Z=4.32，P<0.01），术后14 d的PTX-3水平为（5.12±2.54）g/L，和术后7 d的（7.13±3.42）g/L相比，差异有统计学意义（t=2.143，P=0.023）。血清PTX-3和CRP在肺癌组、肺良性疾病组及健康对照组均有相关性（r=0.364、0.592、0.512，P值均<0.05）。结论血清PTX-3在肺癌及早期肺癌诊断中有较高的敏感度和特异度，肺癌切除术后PTX-3水平明显下降，可以作为肺癌新的肿瘤标记物，辅助肺癌诊断及预后判断。（中华检验医学杂志,2013,36:997-1001）

由于全身应用糖皮质激素后可以导致外周血中性粒细胞增高，这时如何判断感染就有一定的困难。降钙素原是目前备受关注的生物标记物，可作为重症细菌感染的早期诊断依据。降钙素原水平不受糖皮质激素的影响，可用于糖皮质激素应用时感染的判断。（中华检验医学杂志,2013,36:1052-1054）