2010年 · 第39卷第08期

耳鼻咽喉是头颈部和身体重要的器官,无论在解剖学还是在组织改变方面都具有一定的特点.在解剖学上,各器官空间相对狭小,器官密集程度高,相互间毗邻关系密切,并与颅底、口腔及头颈部其他重要器官相连;在组织学上,耳鼻咽喉含有全身几乎各种类型的组织和细胞,如各种被覆上皮组织、腺上皮组织、各种结缔组织、骨与软骨组织、淋巴组织及神经组织等;在疾病发生上,耳鼻咽喉和身体其他部位一样可以发生各种疾病和病变,包括先天性疾病、感染性疾病、瘤样病变等非肿瘤性疾病和良恶性肿瘤,病变十分丰富.尤其是鼻腔和鼻窦,病变常与周围器官之间相互沟通或相互影响,形成鼻-眼眶-颅的沟通性病变,有些还是某种全身性疾病的好发部位或源头性疾病。

目的 探讨恶性肿瘤合并头颈部真菌感染的临床与病理特点.方法回顾分析21例恶性肿瘤合并头颈部真菌感染患者的临床和病理资料;用HE染色、过碘酸-雪夫(PAS)染色和环六亚甲基四胺银(GMS)染色显示组织病变特点及真菌的形态特征,用黏蛋白5B(MUC5B)抗体免疫组织化学EnVision法染色标记真菌;13例组织标本进行了真菌培养.结果患者发病年龄12～72岁(中位年龄48岁),男性17例,女性4例.病理学检查证实合并侵袭性真菌性鼻窦炎(IFS)有8例(38.1%),其中波及眶内者6例(28.6%),侵入颅内1例;原发疾病为白血病(7例)及鼻咽癌(1例);病原真菌为接合菌(5例)和曲霉菌(3例),均有化疗或放疗及使用抗生素的病史.其余13例真菌感染发生于鼻腔鼻窦、咽喉及腭部原发肿瘤的坏死组织内,病原真菌主要为曲霉菌(6例)和念珠菌(4例),7例有放疗等治疗史.真菌培养结果9例阳性(9/13).随访病例14例,死亡6例.结论 恶性肿瘤可合并头颈部真菌感染,以IFS最为多见,好发于白血病化疗后,易累及眼眶,预后较差;病原真菌的类别在IFS以接合菌和曲霉菌多见;病理学检查仍然是尽快确定诊断及初步鉴别常见接合菌和曲霉菌类别的一个重要手段。

目的 探讨中国南方地区原发性眼附属器黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤(简称MALT淋巴瘤)分子遗传学异常的发生情况.方法应用间期荧光原位杂交(FISH)方法,检测57例来自中国南方部分地区眼附属器MALT淋巴瘤病例组织中t(11;18)(q21;q21)/API2-MALT1、t(1;14)(p22;q32)/IgH-bcl-10、t(14;18)(q32;q21)/IgH-MALT1以及涉及bcl-6和FOXP1基因的染色体易位等分子遗传学异常.结果 57例眼附属器MALT淋巴瘤标本中,有9例携带染色体易位,总的发生率为15.8%.其中4例(7.0%)为t(11;18)(q21;q21)/API2-MALT1,1例(1.8%)为t(14;18)(q32;q21)/IgH-MALT1,1例(1.8%)为涉及bcl-6基因的染色体易位,3例(5.3%)为涉及IgH但未知与其易位伙伴基因的染色体易位.另外,伴有3个bcl-6基因或3个MALT1基因拷贝的分别有17例(29.8%)和21例(36.8%),同时伴有3个bcl-6基因和3个MALT1基因拷贝的有12例(21.1%).结论中国南方地区眼附属器MALT淋巴瘤中,存在MALT淋巴瘤特异性相关染色体易位t(11;18)(q21;q21)/API2-MALT1和t(14;18)(q32;q21)/IgH-MALT1,与中国北方地区和北美的报道有明显差异,进一步证实眼附属器MALT淋巴瘤的染色体易位存在地域性差异.MALT1基因3拷贝和bcl-6基因3拷贝现象是中国南方地区眼附属器MALT淋巴瘤中最常见的分子遗传学异常,提示其可能与MALT淋巴瘤的发病机制有关。

目的 探讨淋巴管内淋巴细胞聚集的性质,总结其诊断与鉴别诊断要点.方法结合临床资料,对4例淋巴管内淋巴细胞聚集标本进行形态学观察及采用免疫组织化学EliVision两步法染色,并进行随访.结果 4例发生的部位分别是扁桃体2例、咽弓部1例,阑尾1例.病程为1周至3个月,随访3～84个月均未见复发.除阑尾外其他部位的大体形态均呈息肉状.组织学以膨胀、充满小淋巴细胞的淋巴管为主要特点,淋巴管周围伴有明显纤维化;免疫表型为淋巴管内聚集的细胞以T细胞为主.结论淋巴管内淋巴细胞聚集是一种良性淋巴组织病变,慢性炎性改变、纤维化可能导致局部淋巴管受压、淋巴细胞潴留;组织形态类似于脉管内淋巴瘤,呈现单一的T细胞免疫表型,但细胞异型性不明显,且表现为孤立性病变,无明显恶性临床表现.这些特征有助于鉴别诊断。

目的 探讨滤泡树突细胞肉瘤(FDC肉瘤)的临床病理特征及其鉴别诊断.方法 对10例FDC肉瘤行HE染色、免疫组织化学EnVision法染色,对其中5例进行原位杂交,并对7例进行了随访.结果 10例患者中男5例,女5例,平均年龄42岁.发生于结内的6例,主要位于颈部和腹膜后淋巴结;发生于结外的4例,分别位于扁桃体、盆腔、胰尾部和脾脏.镜下观察瘤细胞呈旋涡状、席纹状或片块状排列.肿瘤细胞呈合体状、胖梭形或上皮样,胞质红染,边界不清,细胞核圆形或卵圆形,空泡状,核仁清楚,核分裂象多少不等.偶见核内假包涵体及多核瘤巨细胞.小淋巴细胞或中性粒细胞夹杂于瘤细胞间或围绕血管周围.瘤细胞CD21、CD23、CD35及D2-40呈弥漫或灶状阳性,少数病例瘤细胞上皮细胞膜抗原、CD68、S-100蛋白阳性,白细胞共同抗原、CD20、CD3、CD1a、HMB45、细胞角蛋白均阴性.EBER原位杂交,1例炎性假瘤样FDC肉瘤阳性,另外4例经典型FDC肉瘤为阴性.随访7例,随访2～39个月(平均14个月).2例伴有副肿瘤性天疱疮的患者分别于确诊半年和7个月后死于肺部感染,其余5例经手术切除或辅以放疗和化疗后,无复发和转移.结论 FDC肉瘤是一种少见类型的低至中度恶性肿瘤.CD21、CD35及D2-40的应用有助于其正确的诊断和鉴别诊断.多数病例局部手术切除或辅以放疗和化疗,预后较好,伴有副肿瘤性天疱疮的患者预后差。

目的 观察浆细胞肿瘤的病理形态学特点,探讨其组织结构和细胞形态的类型及其鉴别诊断.方法应用HE、免疫组织化学(EliVision法),对46例浆细胞肿瘤的组织形态学及免疫表型进行研究.结果 46例浆细胞肿瘤中,有40例组织结构以弥漫分布为主,3例呈巢状结构而似神经内分泌肿瘤,3例出现硬化的纤维性背景.淀粉样物质沉积、钙化骨化及"血湖"样结构在部分病例中有可能会非常突出而掩盖了肿瘤性浆细胞的特点.细胞形态上,30例由较成熟和欠成熟的浆样细胞组成而较易辨认.6例由类似免疫母细胞的浆母细胞组成.4例肿瘤细胞较小,似小淋巴细胞.2例瘤细胞胞质透亮似透明细胞或印戒细胞.另各有1例分别由异型性明显的间变型细胞、组织细胞样细胞及梭形细胞构成.最后1例细胞形态多样,可出现分叶核、单核及多核型细胞.免疫表型上93.1%(27/29)的病例表达CD79a而仅有5.1%(2/39)的病例表达CD20,87.1%(27/31)的病例表达CD38和83.3%(25/30)表达CD138,96.8%(30/31)的病例表达MUM-1.38例呈免疫球蛋白轻链限制性表达,其中表达λ链27例,表达κ链11例.结论浆细胞肿瘤除了常见的组织形态外,还可出现不典型或少见的组织结构和细胞形态,诊断时应注意与其他类型淋巴瘤如小淋巴细胞淋巴瘤及间变性大细胞淋巴瘤、低分化癌、透明细胞或印戒细胞癌、间叶性肉瘤等进行鉴别,免疫组织化学是必不可少的。

目的 探讨鼻咽癌细胞中上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)启动子甲基化对基因表达的影响,以及经去甲基化药物5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-dC)作用后肿瘤细胞增殖与侵袭能力的变化.方法采用逆转录(RT)-PCR、Western blot与免疫组织化学(polymer法)检测经5-Aza-dC处理前后HNE1和CNE2细胞中E-cadherin的表达水平,以甲基化特异性PCR(MSP)分析启动子甲基化状态,以四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法与侵袭实验测定细胞增殖与侵袭能力的变化.结果 HNE1和CNE2细胞中E-cadherin表达水平减弱,其启动子区域存在部分甲基化现象;经5-Aza-dC作用后可显著上调鼻咽癌细胞E-cadherin的表达水平,降低基因启动子甲基化程度,同时显著抑制肿瘤细胞的增殖能力与侵袭能力.经20 μmol/L 5-Aza-dC作用后,HNE1与CNE2细胞的增殖能力与未处理组相比分别降低27.6%和34.3%,P＜0.05;HNE1与CNE2细胞经5-Aza-dC药物处理后,通过滤膜迁移进至侵袭小室下腔的数量与未处理组相比分别减少37.2%和29.7%,P＜0.05.结论基因启动子区域高甲基化状态是导致E-cadherin表达水平下调的机制之一,应用去甲基化药物可恢复E-cadherin表达并抑制肿瘤细胞的恶性生物学特征。

目的 观察鼻咽癌细胞潜伏膜蛋白1(LMP1)表达对β-catenin的转录活性及蛋白表达的影响,探讨LMP1与Wnt/β-catenin信号通路在鼻咽癌发生发展中的作用.方法应用免疫组织化学EnVision法检测75例鼻咽癌组织中LMP1和β-catenin的表达.构建pHA2-LMP1重组质粒,应用细胞免疫荧光、双荧光素酶报告分析、Western blot方法研究LMP1在鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2中对β-catenin转录活性及表达的影响.结果 (1)鼻咽癌组织中β-catenin的异常表达率为50.7%(38/75),LMP1的阳性表达率为50.7%(38/75).鼻咽癌组织中β-catenin异常表达与LMP1表达存在正相关(相关系数为x2=7.048,P=0.008).(2)LMP1表达明显提高鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2中β-catenin的核表达,且β-catenin的核表达在低分化鼻咽癌细胞株CNE2明显高于高分化鼻咽癌细胞株CNE1.(3)LMP1可明显上调CNE1和CNE2中β-catenin的转录活性,且呈时间依赖性.另外,β-catenin的转录活性在低分化鼻咽癌细胞株CNE2高于高分化鼻咽癌细胞株CNE1.(4)LMP1对鼻咽癌细胞株β3-catenin的总蛋白表达水平无明显影响.结论 EB病毒编码的LMP1可能通过β-catenin信号通路参与鼻咽癌的发生发展。

目的 通过基因工程抗体技术构建和表达抗β-淀粉样多肽(Aβ)人-鼠嵌合抗体,减低鼠源单克隆抗体在临床应用中引起的人体免疫排斥反应.方法从分泌抗Aβ1-42鼠单克隆抗体杂交瘤细胞株中提取总RNA,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增鼠源性抗体全长基因,并通过Blast对其序列进行分析;利用重组PCR技术拼接重轻链可变区及人IgG1的恒定区基因,并对重链Fc段进行定点突变以降低排斥反应;分别构建人-鼠嵌合基因重轻链表达载体,用脂质体法将其同时导入COS-7细胞中表达,并利用ELISA和免疫组织化学(SP法)对分泌的抗体功能和性质进行初步鉴定.结果 Blast比对分析结果显示克隆的基因序列符合小鼠抗体基因序列,将可变区基因与人IgG1的恒定区基因拼接以及Fc定点突变后,成功构建了嵌合抗体的真核表达载体,并实现真核表达;ELISA和免疫组织化学方法证实了所分泌抗体的人源性和与Aβ的结合特异性.结论成功地构建和表达了抗阿尔茨海默病Aβ人-鼠嵌合抗体,为其在阿尔茨海默病的临床诊治中应用和进一步改造奠定了基础。

目的 探讨体外大量扩增卵圆细胞并保持其干细胞生物学特征的细胞培养方法.方法用RPMI 1640加上15%的胎牛血清和终浓度为20μg/L表皮生长因子(EGF)培养卵圆细胞株OC3,每隔5代收细胞并用逆转录聚合酶链反应、免疫细胞化学、酶细胞化学等方法检测OV-6、c-kit、γ-谷氨酰转肽酶、胎盘型谷胱甘肽硫转移酶、M2型丙酮酸激酶、L型丙酮酸激酶和白蛋白等分子标志物.结果卵圆细胞株OC3在体外大量扩增,不同程度表达OV-6、c-kit、γ-谷氨酰转肽酶、胎盘型谷胱甘肽硫转移酶、M2型丙酮酸激酶等幼稚肝细胞的生物标记,而不表达L型丙酮酸激酶和白蛋白这类成熟肝细胞的分子标记.结论用RPMI 1640加上15%的胎牛血清和终浓度为20μg/L的鼠源性EGF,在体外能大量扩增卵圆细胞株OC3,至第79代仍有很高的增殖活性,同时仍保留肝内干细胞的生物学特征。

传统细胞学涂片诊断方法有微创、简便、迅速的优点,但其对于淋巴造血组织肿瘤的诊断有一定的缺陷,不仅易误诊为其他恶性肿瘤,而且还难以进一步分型.在临床难以实施骨髓或淋巴结活检的情况下,应用细胞块技术及免疫组织化学检测能弥补这一不足,不仅可以明确肿瘤来源,还可进一步分型,细胞学诊断对于以浆膜腔积液及淋巴结肿大为首发症状的病例尤为重要.我们收集了由细胞学首先诊断为淋巴造血组织肿瘤的病例进行分析,探讨细胞块技术在淋巴造血组织肿瘤诊断及鉴别诊断中的意义。

干细胞再生为心肌组织的研究及心肌梗死的修复带来了新的曙光.近期的研究表明,在成年人和哺乳动物心脏内,均存在原始的、未分化的干细胞,该细胞c-kit阳性,被命名为心脏干细胞(cardiac stem cells)[1-3].心脏干细胞在体内外被证实可分化为心肌细胞、内皮细胞和平滑肌细胞,并重构心肌组织,改善心功能.但在成年人和哺乳动物的心脏组织中,心脏干细胞数量较少,分离较为困难.本课题组经过几年来的探索,已经形成了一套较为稳定的分离方法,可用于相关领域的研究[4-5 ]。

患者男,51岁.因声音嘶哑、吞咽困难4个月于2009年5月入院.CT平扫见舌根部会厌软骨左侧软组织占位,考虑囊肿性或良性病变.五官科检查见舌根部会厌处一肿块,宽度约2 cm,基底不可见,表面光滑,质地中等.动态喉镜检查见舌根部类圆形肿块,质地较实,喉钳可将肿块与会厌分离,有蒂,基底位于舌根.遂在全麻下肿块切除,术中见肿块位于舌根,直径约3.5 cm,质地中等偏硬,呈息肉状,有蒂,将肿瘤于蒂部切除(图1)。

例1男,15个月.主因发热2 d,于2009年6月24日入住某县医院.体检:体温38.1 ℃,神志清,双肺呼吸音粗.诊断:发热原因待查,上呼吸道感染.予抗感染等治疗.6月26日查体见神志清,精神稍差,咽部充血,未见疱疹,双肺可闻及少许哮鸣音.血常规示:白细胞(WBC)16×109/L,中性粒细胞0.78,淋巴细胞0.17.胸部X线检查示:支气管炎.11时20分患儿出现呕吐,为胃内容物,呈非喷射状,量不多,同时出现面色苍白,口周发绀,出汗,四肢发凉,血压61/42mmHg(1 mm Hg=0.133 kPa),双侧瞳孔等大正圆,直径3 mm,对光反射迟钝,立即给予吸氧,11时30分患儿出现双眼凝视,下肢皮肤发麻,末端发凉,血压下降,经抢救无效死亡.6月26日提取咽拭子及大便检测肠道埃可病毒71型(EV71)阳性。

患者女,76岁.因"无明显诱因腹部隐痛伴胃纳减退及少量黑便半年,加重1周"于2009年7月22日入院.体检未见特殊.实验室检查:血红蛋白106 g/L,血沉42 mm/1 h,余均为阴性.胃镜示胃角、窦至幽门前区广泛溃疡,活检时组织质硬、易出血,活检病理诊断为中分化腺癌.行胃癌根治术,术中见肿块位于胃角至十二指肠球部,最大径约9cm,表面黏膜广泛糜烂及溃疡。

例1男,6个月.发现左下颌骨肿块1个月,生长快,于2009年7月14日入院.患儿母亲最初发现时花生米大小,就诊时肿块最大径约4 cm.各项实验室检查基本正常.X线示:左下颌骨牙槽突溶骨性破坏.行肿瘤完整切除+下颌骨肿瘤刮除术.例2男,40岁.发现腭部无痛性肿块2年余,自觉近期逐渐增大于2008年6月26日入院.体检:硬腭部中心区见小肿块,略隆起于黏膜面,大小1 cm×1 cm,质中,无压痛.各项实验室检查均正常.X线示无骨质破坏.完整摘除肿块。

患者男,33岁.左上臂内侧、腋下包块2个月余,伴发热50 d于2009年10月7日收入北京友谊医院感染科.患者2个月前无明显诱因出现左侧上臂内侧及腋下包块,于当地医院针吸细胞涂片示"(左侧上臂内侧)大量淋巴细胞,增生活跃;(腋下)大量炎细胞,以淋巴细胞为主".15 d后出现发热,体温最高达39.0 ℃,恶心、呕吐、腹痛、腹泻,先后就诊于当地医院,实验室检查:白细胞和中性粒细胞不高,衣原体阳性,支原体、结核抗体、结核菌素试验(PPD)、痰培养均阴性,抗感染治疗仍间断发热,体温多波动于37.3～39.0℃之间,最高40.0 ℃,且体温升高后明显胸闷、憋气,伴全身酸痛、乏力,无盗汗,血常规单核细胞百分比偏高.患者既往体健。

我国南方地区,特别是珠江三角洲地区,是鼻咽癌的高发区.近十多年来,由于分子病理学的发展,病理医师对鼻咽癌组织病理学的认识和诊断水平有了相应的提高.作者从事鼻咽癌组织病理学诊断研究工作多年,愿将组织病理学诊断中的点滴体会在此与同行分享。

自从1923年Jackson首次将慢性咽炎和喉角化症定义为癌前病变(precancerous lesions)以来'[1],癌前病变的命名与分类经历了很多变化.它是指一类在致癌因素影响下,有可能演变为鳞状细胞癌的上皮病变.病变的上皮表现出多种多样的组织结构和细胞变化.在2005出版的WHO关于头颈部肿瘤的分类[2]中,喉的癌前病变被称为异型增生(dysplasia),但在该分类项下也同时描述了有人使用的鳞状上皮内瘤变(squmamous intraepithelial neoplasia,SIN)、Ljubljana的鳞状上皮内病变(squmamous intraepithelial lesion,SIL)及喉上皮内瘤变(laryngeal intraepithelial neoplasia,LIN).本文重点对目前喉癌前病变的分类、诊断及其临床病理学研究现状作一综述。

鼻咽癌好发于我国南方,是一种相对独特的肿瘤.研究显示,不同地区鼻咽癌的遗传和发病机制各不相同.要研究和探讨鼻咽癌的发病及遗传机制、筛选其早期诊断或预后相关的标志物、探寻其个体化治疗方案等,必须有充足的、合格的组织样本及其完整的临床资料;同时保护我国现存的、有限的疾病资源是每一个医务工作者的责任和义务[1-2].为此,我们收集并建立了规范化、标准化的鼻咽癌组织标本库及其信息管理系统。

Hodgkin病中Reed-Stemberg细胞的描述者为美国病理学家,其全名为Dorothy Mabal Reed Mendenhall.1874年9月22日生于美国俄亥俄州Columus市的一个名门望族.她的祖辈是17世纪30年代从英国到美国新英格兰的移民.她以自己家庭的名望而骄傲。

多数造血系统恶性肿瘤主要依据其免疫表型进行细胞谱系分类,但是一些淋巴瘤和白血病病例所表达的膜表面或胞质标志物可能与其细胞谱系不一致,因而导致诊断困难以及影响治疗方案的选择.未成熟恶性淋巴瘤如急性B或T淋巴母细胞性白血病/淋巴瘤(B或T-ALL)的谱系鉴定主要依据流式细胞检测分析结果.然而,一些病例由于标本量不足而不能采用流式细胞检测,因此其诊断和谱系鉴定需要免疫组织化学评价.关于在石蜡包埋组织中应用免疫组织化学方法进行B或T-ALL谱系鉴定的研究尚未广泛进行。

有关照片图的要求：（1）提供的照片必须是原始图像，要清晰，对比度好，彩色图像的色彩正常。数码图片需用高分辨率的数码冲印照片（至少为4×3英寸或以上），不要用打印照片（用热升华打印的照片除外）。（2）数码照片的图像分辨率为300dpi或以上，总像素要在300万像素或以上，图像文件最好用tif格式。

根据国家科学技术部1988年颁布的《实验动物管理条例》和卫生部1998年颁布的《医学实验动物管理实施细则》，中华病理学杂志对论文中有关实验动物的描述，要求写清楚以下事项：（1）品种、品系及亚系的确切名称；（2）遗传背景或其来源；（3）微生物检测状况；（4）性别、年龄、体重；（5）质量等级及合格证书编号；（6）饲养环境和实验环境；

经卫生部继续教育委员会批准，第十五期“血液病骨髓活检塑料包埋及其应用新进展”学习班（2010年国家级继续医学教育项目；项目编号：2009-03－04-017），定于2010年10月15日至18日，在上海交通大学附属第六人民医院举办。本次学习班以骨髓增生异常综合征（MDS）基础与临床进展专题为主。主要授课教师：上海交通大学医学院浦权；

为增强病理技术的创新和应用，促进免疫组织化学技术应用的标准化，以提高我国病理工作的应用质量和水平，2010年迈新·病理基金计划项目申请工作将于即日启动。

为加强学术交流，增进相互了解，推动我国细胞病理学学术水平的进一步提高，由中华医学会病理学分会细胞病理学组主办、四川省病理学会承办的2010年全国细胞病理学学习研讨班定于2010年10月15—18日在四川省成都市召开。与会代表可获得国家级I类继续教育学分。

随着病理新技术和新方法的广泛应用使疾病的病理诊断和分类更准确，为临床治疗和预后判断提供更确切的依据。呼吸系统疾病一直是日常病理诊断工作的常见病和多发病，也是研究的热点课题。为交流经验、提高病理诊断水平，特别是呼吸系统疾病的诊断和鉴别诊断的水平，由中华医学会《中华病理学杂志》编委会和中华医学会病理学分会主办的第十二届全国诊断病理暨呼吸系统疾病学术研讨会拟定于2011年6月在内蒙古呼和浩特市召开。

为更全面及时地学习和掌握头颈部、软组织、细胞学及乳腺和卵巢等疾病病理诊断的新知识、新进展，提高对此领域疑难病、特殊性疾病的诊断与鉴别诊断能力和水平，加强学术交流，切蹉诊断经验，由《中华病理学杂志》编辑委员会、首都医科大学附属北京同仁医院、厦门大学附属中山医院及北京医学会病理专业委员会主办的“2010全国疑难病例病理学术交流会”定于2010年8月22～2713在福建省厦门市召开。