2008年 · 第37卷第12期

免疫组织化学(IHC)在近十余年来已在国内广泛开展,几乎所有的病理科在日常工作中都需做几项甚至几十项IHC来辅助病理诊断。

2008年中华医学会病理学分会学术年会6月在沈阳召开,作为全国病理界一年一度的盛会,聚集了500多位来自全国各地的代表。

中国是具有13亿人口的多民族大国,有着世界上最为丰富的病理组织资源.长期以来由于各种因素的影响,组织样本特别是各种肿瘤组织样本在做出病理诊断后,基本上均作为废弃物处理了,而没有作为一种珍贵的资源有效地保存并加以充分利用。

肿瘤的形成过程就是恶性的单克隆细胞通过选择达到稳定及增长的过程,在形态学上也会显现出异常的增生.在这一过程中,遗传学上的单克隆选择与形态学上的不典型增生的关系,在不同肿瘤中是有差异的。

中华医学会病理学分会2008年学术年会于2008年6月20日至23日在辽宁省沈阳市召开。

病理学榆查在临床医学中的重要性是毋庸置疑的,并且在肿瘤(尤其恶性肿瘤)的治疗和预后判断上起重要作用。

目的 分析眼附属器淋巴组织增生性病变的临床病理特点,探讨其分子遗传学特征及其意义.方法 收集1995-2007年37例眼附属器淋巴组织增生性病变石蜡组织标本(其中5例为反应性增生性病变,32例为淋巴瘤),依据2001年WHO肿瘤分类标准对32例淋巴瘤标本重新诊断分类.采用IgH、MALT1、bcl-6、c-Mye、bcl-2、CCND1、bcl-10、FOXP1双色分离重排探针、IgH/bcl-2双色融合易位探针和18号染色体着丝粒探针,利用间期荧光原位杂交(FISH)的方法 检测眼附属器淋巴组织增生性病变的分子遗传学特点.结果 32例淋巴瘤均为非霍奇金B细胞淋巴瘤.其中,黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤(MALT)淋巴瘤28例(87.5%),滤泡性淋巴瘤2例,弥漫性大B细胞淋巴瘤2例.60.7%(17/28)的眼附属器MALT淋巴瘤携带分子遗传学异常.其中,IgH基因断裂1例,但未找到与其发生相互易位的伙伴基因;基因3拷贝者16例,其中MALT1基因、bcl-6基因和c-Myc基因3拷贝的发生率分别为25%(7/28)、43%(12/28)和7%(2/28).16例基因3拷贝病例中,两种基因3拷贝合并存在者5例,其中bcl-6基因合并MALT1基因3拷贝者4例,bcl-6基因合并c-Myc基因3拷贝者1例.进一步研究显示,MALT1基因3拷贝者均存在18号染色体三体.2例滤泡性淋巴瘤都携带t(14;18)(q32;q21)/IgH-bcl-2.2例弥漫性大B细胞淋巴瘤均存在遗传学异常,1例表现为bcl-6基因3拷贝合并18号染色体三体,另1例表现为bcl-6基因3拷贝合并IgH和c-Myc基因双断裂.5例反应性淋巴组织增牛性标本均未见分子遗传学异常.结论 MALT淋巴瘤是眼附属器最常见的淋巴瘤类型;间期FISH有助于淋巴组织增生性病变的良恶性鉴别及淋巴瘤的分类;MALTI基因3拷贝者由18号染色体三体所致;18号染色体三体和bcl-6基因3拷贝(可能为3号染色体三体所致)是眼附属器MALT淋巴瘤常见的分子遗传学异常。

目的 检测胃癌组织中富含半胱氨酸肝素结合蛋白61(Cyr61)和核因子-κB(NF-κB)的表达及其与临床病理特征及预后的关系.方法 应用逆转录聚合酶链反应技术验证和检测53例胃癌组织与11例非肿瘤胃黏膜中Cyr61基因的表达,并用免疫组织化学方法 (SP法)检测99例胃癌组织与25例非肿瘤胃黏膜中cyr61与NF-κB蛋白的表达情况.结果 胃癌原发灶和转移灶中Cyr61mRNA的阳性表达率分别为84.6%(22/26)、88.9%(24/27),明显高于非肿瘤胃黏膜组5/11(P值均＜0.05).非肿瘤胃黏膜、原发癌与转移癌组的基因表达量(2-△Ct)分别为(2.76±5.50)×10-5、(14.61±20.64)×10-5、(18.46±26.38)×10-5.胃癌原发灶、转移灶Cyr61 mRNA均高于非肿瘤胃黏膜(P值均＜0.05),转移灶与原发灶比较,差异无统计学意义(P＞0.05).99例胃癌中Cyr61及NF-κB蛋白的高表达率分别为56.6%(56/99)和55.6%(55/99),其表达水平与肿瘤浸润深度、脉管侵犯、淋巴结转移、远处转移及TNM分期呈正相关(P值均＜0.05),NF-κB还与肿瘤大小呈正相关(P＜0.05);Cyr61蛋白的表达水平与NF-κB呈正相关(P＜0.05);Cyr61与NF-κB蛋白高表达的病例平均生存时间和5年生存率明显低于低表达的病例(P值均＜0.05).结论 Cyr61和NF-κB阳性表达与胃癌的侵袭、转移密切相关,检测Cyr61和NF-κB的表达可作为判断胃癌生物学行为的重要参考指标。

目的 探讨RNA干扰(RNAi)对宫颈癌细胞系HeLa细胞E6AP基因表达及细胞增殖和凋亡的影响.方法 实验分为3组:空白对照组(未经转染的HeLa细胞)、转染阴性对照的小干扰RNA(siRNA)组及转染特异性E6AP siRNA组.采用半定量RT-PCR技术、Western blot方法 检测E6AP mRNA、蛋白表达水平,用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法检测细胞增殖状况,用流式细胞术检测细胞凋亡.结果 转染E6AP siRNA 24、48、72 h后,E6AP siRNA组E6AP mRNA表达水平与对照siRNA组比较下降33%、72%、70%.Western blot结果 显示,在转染48及72 h,E6AP蛋白表达下降38%、59%.MTT法检测显示,转染HeLa细胞24、48、72、96 h后细胞生长速度明显降低,E6AP siRNA组与空白对照组(F=101.38,P＜0.05)、对照siRNA组(F=38.64,P＜0.05)比较,差异均有统计学意义.E6AP siRNA作用24、48、72 h后E6AP siRNA组凋亡率明显高于对照siRNA组(F=41.48,P＜0.05)和空白对照组(F=86.36,P＜0.05),差异有统计学意义.结论 体外合成的siRNA能有效封闭宫颈癌细胞中E6AP基因的表达,抑制细胞增殖,促进细胞的凋亡,为宫颈癌的基因治疗提供理论依据。

目的 探讨抑制乙酰肝素酶表达对人肺腺癌细胞A549增殖、侵袭和凋亡的影响.方法 构建靶向人乙酰肝素酶基因短发夹状双链RNA(shRNA)真核表达质粒(pshRNA-Hpa),用脂质体将其转入A549细胞,建立稳定转染细胞株系,经逆转录.PCR和Western blot法检测转染效率后,分别用四甲基偶氮唑蓝(MTT)、Transwell侵袭实验和流式细胞术(AnnexinV-FITC/PI双染法)检测其对A549细胞增殖、侵袭和凋亡的影响.采用Western blot法检测转染后磷酸化蛋白激酶B(PKB/Akt-Ser473)的表达.结果 转染pshRNA-Hpa的A549细胞乙酰肝素酶mRNA及蛋白表达明显低于未处理A549细胞,抑制率分别为54.09%和48.26%,细胞增殖速度减缓,侵袭能力降低,流式细胞术显示早期细胞凋亡率达(12.53±0.34)%,较空白对照组、空载体转染细胞组和阴性对照组明显增加(P＜0.01).同阴性对照质粒相比,转染pshRNA-Hpa的A549细胞Akt-Ser473的磷酸化水平降低52.15%.结论 靶向乙酰肝素酶重组shRNA质粒pshRNA-Hpa能有效抑制A549细胞乙酰肝素酶的表达,并可能通过下调磷酸化蛋白激酶B途径抑制细胞的增殖侵袭、促进细胞的凋亡。

目的 探讨针对血管内皮生长因子(VEGF)、端粒酶逆转录酶(TERT)、Bcl-xl的3个短发夹状双链RNA(shRNA)的串联表达质粒对人喉鳞癌裸鼠移植瘤生长抑制作用及其机制.方法 构建串联表达3个shRNA的质粒pEGFP-shVEGF-shTERT-shBcl-xl.建立人喉鳞癌Hep-2细胞系荷瘤裸鼠模型.将该质粒转染入荷瘤裸鼠瘤体内,观察肿瘤生长情况.荧光定量即时PCR检测三种目的 基因的mRNA在肿瘤组织中的表达情况,Western blot法检测三种蛋白的表达,原位末端标记法(TUNEL法)检测肿瘤细胞凋亡,免疫组织化学sP法检测肿瘤组织微血管密度.结果 与治疗前比较,质粒pEGFP-shVEGF-shTERT-shBcl-xl注射裸鼠皮下移植瘤后,肿瘤生长明显受抑制,治疗后14 d抑瘤率达91.2%.三个目的 基因的mRNA及蛋白表达水平比治疗前均有显著下降.移植瘤组织内检测到大量凋亡细胞,凋亡指数为(60.34±5.32)%.治疗组微血管密度明显低于生理盐水对照组及阴性质粒处理组.结论 pEGFP-shVEGF-shTERT-shBcl-xl能高效特异性地同时抑制3个靶基因在人喉鳞癌Hep-2细胞中的表达,增强基因沉默的多样性,并显著的抑制移植瘤的生长,提示未来应用多基因共沉默治疗喉鳞癌可能具有广阔的前景。

缺氧是肿瘤生长演进过程中微环境改变的普遍现象,缺氧诱导因子1(HIF-1)是1992年由Wang和Semenza[1]在低氧的肝细胞痛细胞株Hep3B细胞的核提取物中发现的一种蛋白。

前列腺癌的新发病数较过去20年明显增高,主要归因于前列腺特异性抗原(PSA)在无症状男性中的普查和经超声活检而早期诊断[1]。

随着乳腺癌治疗方案的不断改进和发展,临床医师对乳腺癌病理诊断报告的内容和标准有了更多和更高的要求。

1.病例简介:患者女,33岁.因经最增多,阴道不规则流血于2007年12月在外院行B超检查发现官腔内占位,随后在官腔镜下行肿块活检术,送检切片为官腔内活检组织。

19世纪80年代以来,癌症研究从利用细胞株和动物向利用人类肿瘤组织转化,而且越来越先进、敏感的生物技术等基础研究成果向临床应用转化,就需要高质量和数量众多的人类组织包括肿瘤组织、癌旁组织、正常组织和血液等等[1]。

患者女,35岁.于2008年1月28日体检时发现脾门区肿物,门诊以脾脏肿瘤收入院.患者既往体健,无贫血、腹痛、腹泻、发热、恶心呕吐等不适.专科检查:左侧肋弓下可触及一类球形包块,大小约10 cm×10 cm,活动度可,无压痛。

患者女,34岁,右足腹侧、外侧缘至小腿多发性结节伴疼痛27年,于2007年12月6日来山东省烟台市毓璜顶医院就诊。

患者女,36岁.因便血1个半月于2007年12月10日入院.体检:患者一般情况良好,下唇见10数枚点状黑斑,肠鸣音3～5次/min.结肠镜发现直肠至升结肠内多发性息肉样新生物,最大径为0.5～3.0 cm,于最大息肉处活检,病理示绒毛状管状腺瘤。

患者男,75岁.15年前发现右前胸壁肿块,近1年余迅速增大,伴疼痛,于2008年3月10日入院。

患者男,44岁.4个月前体检时腹部B超发现肝右叶低回声占位,大小约2.5 cm×2.0 cm.无肝区疼痛、腹胀、腹泻,无恶心、呕吐,无返酸、嗳气,无皮肤黄染及瘙痒,无大小便染色加深及大便颜色变浅。

患者女,53岁.因乏力,体重减轻伴多饮多尿、视物模糊入院.体检:神清,全身未扪及淋巴结,GCS15分,双侧巴氏征阴性。

随着临床医学专业发展日趋细化和亚专科的大量出现,成立临床专科病理组织并开展学术活动已显得十分必要。

随着我国各地区医院医疗技术操作规范细则的实施,在临床病理工作中,会诊的病例日益增多,这种状况在综合性大医院病理科更为常见。

2008年2月29日，中华医学会与万方数据股份有限公司在京签署独家期刊数据库合作协议。