2008年 · 第37卷第08期

胃癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一.我国是胃癌高发国家,死于胃癌的人数居于各种恶性肿瘤的前列.近20年来胃癌流行病学研究最重要的进展是发现其与幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, HP)感染的相关性.HP是人类最常见的一种慢性致病菌,主要寄居于人的胃黏膜.在世界范围内约有一半人口感染HP.我国人群HP感染率接近世界水平,平均为50%～60%.胃癌高发地区,如山东临朐、牟平、辽宁庄河、甘肃兰州、福建长乐等人群感染率为70%左右,胃癌低发地区,如北京延庆、广东广州等的感染率为50%左右.近年感染率有下降趋势。

结外发生的淋巴瘤绝大多数是非霍奇金B细胞性淋巴瘤,其中胃肠道是最常见的部位且大多数是黏膜相关淋巴组织淋巴瘤(mucosa associated lymphoid tissue lymphoma, MALT淋巴瘤)[1]。

浙江省免疫组织化学(IHC)的质量控制评价方案是2004年由浙江省临床病理质量控制中心(简称省中心)提出并建立的,其目的不仅在于评价IHC染色质量,同时也促进实验室发展和改进IHC技术.对该方案系统共进行了两次质量评价,即2005年浙江省三级医院IHC专项质量评价和2006年浙江省二级甲等医院IHC专项质量评价.参加单位125家,质量评价活动历时两年,基本涵盖了全省大中型医院及基层二级医院,因此两次评审结果基本能够反映出浙江省目前病理科IHC的技术水平.作为IHC技术质量控制工作的尝试,具有一定的特征和代表性,并为我省探索建立一套比较完善的质量控制方法和程序,提供了较高的参考价值。

1999-2004年期间,本人以国家教委公派的访问学者及博士生身份在日本高知大学医学部(前称高知医科大学,创建于1976年,设医学院和护理学院,于2004年并入高知大学并改称为高知大学医学部,两者分别坐落在不同的城市,其中高知大学医学部坐落于日本南部四国的高知县南国市)第一病理教研室留学5年.2000年,在本人攻读博士期间有幸被选为文部省(相当于我国的教育部)备案的医学部做教学助理.做教学助理是日本文部省的一项奖学及助学制度,对象为文部省所属国立大学的在校硕士或博士生,包括日本本国和留日学生,由教授和教研室推荐,学校综合考察确定。

目的 探讨胰岛素样生长因子结合蛋白-相关蛋白1(IGFBP-rP1)在结直肠癌中的表达改变并分析其与该基因5′CpG岛甲基化改变的关系.方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测46例结直肠癌组织和配对的正常黏膜中IGFBP-rP1基因的表达水平及5′CpG岛的甲基化状况,并通过T-A克隆、测序加以验证.不表达IGFBP-rP1基因的结肠癌细胞株LoVo和SW620经去甲基化药物5-氮-2′-脱氧胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,5-aza-dC)处理后,分别用RT-PCR和MSP检测IGFBP-rP1表达改变和甲基化状况.结果 mRNA水平上,IGFBP-rP1在结直肠癌组织中的表达水平高于配对的正常黏膜(P<0.01).在46例结直肠癌组织中,28例(60.9%)可检测到IGFBP-rP1基因5′CpG岛发生甲基化,而在配对的正常黏膜中,37例(80.4%)可检测到,二者差异有统计学意义(P<0.05).IGFBP-rP1基因的表达和甲基化水平之间存在负相关(P<0.05).5-aza-dC处理后,两株细胞均出现IGFBP-rP1基因的再表达,MSP法检测证实基因发生了去甲基化.结论 IGFBP-rP1基因的表达水平与5′CpG岛甲基化水平之间存在负相关.DNA甲基化是结直肠癌中IGFBP-rP1表达调控的一种机制.IGFBP-rP1低甲基化引起的基因表达上调可能与结直肠癌的发生发展有关。

目的 通过人雄激素受体基因位点克隆性分析技术对胃癌及其癌前病变进行克隆性分析,探讨胃癌发生发展过程中单克隆发生率的变化趋势及与Ki-67表达之间的关系及其意义.方法 肠型胃癌根治标本24例,胃镜活检标本150例.采用激光显微切割技术准确获取病变腺上皮细胞,基因组DNA经甲基化敏感的Hpa Ⅱ限制性内切酶消化后,PCR扩增人雄激素受体基因,采用基因扫描技术对PCR产物进行分析.应用免疫组织化学EnVision二步法检测Ki-67在以上病变组织中的表达,并探讨其与克隆性分析结果的相关性.结果 单克隆发生率在胃黏膜肠上皮化生(15.63%,5/32)、低级别上皮内瘤变(22.22%,10/45)、高级别上皮内瘤变(69.44%,25/36)及肠型胃癌(100.0%,20/20)中逐渐增加,除胃黏膜肠上皮化生和低级别上皮内瘤变之间的差异没有统计学意义(P=0.47),其他各组之间差异均有统计学意义(P<0.01).Ki-67的阳性表达率随着病变的发展而不断升高.低级别上皮内瘤变组织中单克隆病例的Ki-67的阳性表达率显著高于多克隆病例(P<0.01),且克隆性与Ki-67的阳性表达率之间存在显著相关性(P<0.01).结论 单克隆的发生率及Ki-67的阳性表达率在胃癌发生发展过程中逐渐增加.且单克隆病变的发生与Ki-67的表达存在一定的相关性,两者的联合可用于胃癌的早期诊断及易感性的预测。

目的 检测霍奇金淋巴瘤(HL)亚型Richter综合征免疫球蛋白重链可变区(IgVH)基因重排、突变、克隆相关性等基因特征及其与预后的关系,初步探讨其可能涉及的分子机制.方法 用基因扫描分析HL亚型Richter综合征及慢性B淋巴细胞性白血病(B-CLL)伴CD30阳性R-S细胞样细胞病例IgVH基因的克隆性重排,测序分析IgVH基因的突变状态及其分子特征;用激光显微切割结合半套式PCR扩增R-S细胞和R-S细胞样细胞的IgVH基因,比较两种肿瘤成分的克隆相关性;用免疫组织化学LAB-SA法检测两种肿瘤中zeta相关蛋白70(ZAP70)、p53、干扰素调节因子4(IRF-4)及EB病毒潜伏膜蛋白-1(LMP1)等因子表达的不同.结果 (1)6例向HL转化及6例向R-S细胞样细胞转化的B-CLL患者中,携带突变型IgVH基因的患者各占5例;(2)4例IgVH基因克隆相关性分析中,与相应B-CLL克隆不相关的2例R-S细胞和1例R-S细胞样细胞表达LMP1.而1例与B-CLL来自相同克隆的R-S细胞样细胞不表达LMP1;(3)HL亚型Richter综合征中B-CLL肿瘤细胞常使用的IgVH基因是VH3和VH4家族,6例中各有2例使用VH4-34和VH3-48基因.结论 (1)转化的HL和R-S细胞样细胞主要与生发中心或生发中心后的B-CLL有关,提示不同类型的Richter综合征可能涉及的发病机制不同;(2)HL与R-S细胞样细胞既可以是B-CLL克隆相关病例,也可以是克隆不相关的病例.而后者可能与B-CLL患者免疫抑制后继发EB病毒感染有关;(3)IgVH基因在HL亚型Richter综合征B-CLL中的偏向性使用,提示抗原在转化中的作用。

目的 研究间质细胞衍生因子1(SDF-1)及其受体CXCR4在浸润性乳腺癌中的表达,并分析其与浸润性乳腺癌相关临床病理指标及淋巴结转移之间的关系.方法 采用免疫组织化学LSAB方法检测SDF-1/CXCR4在120例浸润性乳腺癌中的表达情况;采用地高辛标记的寡核苷酸探针进行原位杂交以检测趋化因子SDF-1在肿瘤环境中表达的部位及来源.结果 (1)SDF-1主要表达于肿瘤细胞的胞质和胞膜;SDF-1的胞质表达在淋巴结阳性组高于阴性组(P=0.033),且其表达程度与淋巴结受累数目、病理学分期、组织学分级、肿瘤大小及ER表达等指标呈正相关(P<0.05);(2)罕见SDF-1 mRNA表达的脉管内皮却可见SDF-1蛋白的表达,其表达程度与肿瘤胞质SDF-1着色正相关(P<0.01);且淋巴管内皮SDF-1的着色与淋巴结转移程度为正相关(P=0.005);血管内皮SDF-1的着色与肿瘤环境中的淋巴细胞浸润正相关(P<0.01),且同时伴有较多淋巴细胞浸润及SDF-1血管内皮着色阳性的病例,其淋巴结的转移程度分别高于仅有上述条件之一或二者均不具备的各组病例(P<0.05);(3)CXCR4也主要表达于肿瘤细胞的胞质和胞核;CXCR4的胞质表达在淋巴结阳性组高于阴性组(P<0.05),且其表达程度与淋巴结受累数目、病理学分期、组织学分级、肿瘤大小及HER2表达等呈正相关(P=0.005),而胞核的表达仅与PR的表达情况呈正相关(P<0.01);(4)瘤细胞质CXCR4与SDF-1的表达呈正相关(P=0.001).结论 浸润性乳腺癌肿瘤细胞SDF-1和CXCR4的表达与多项临床病理指标,尤其是淋巴结转移率及转移程度有关,可作为预测乳腺癌淋巴结转移及预后的免疫病理学指标,同时应注意肿瘤微环境中SDF-1的多个来源及定位的不同意义。

目的 探讨横纹肌肉瘤(RMS)基因组DNA的变化特征.方法 在一步法RT-PCR检测所有标本PAX3/PAX7-FKHR mRNA融合基因表达情况的基础上,应用比较基因组杂交技术分析25例原发性RMS患者,其中腺泡状横纹肌肉瘤(ARMS)10例,胚胎性横纹肌肉瘤(ERMS)12例,多形性横纹肌肉瘤(PRMS)3例.根据融合基因表达情况、组织学分型、临床分期、组织学分级、性别和年龄进行分组比较.同时收集RMS细胞株A204(腺泡型)、RD(胚胎型)作为对照.结果 25例RMSCGH分析结果显示:(1)RMS中发生DNA拷贝数扩增最常见的部位是2p和12q,其他依次为6p、9q、10q、1p、2q、6q、8q、15q和18q(30%),发生DNA拷贝数丢失最常见的部位是3p、11P和6p(30%).(2)ARMS扩增最常见的染色体臂是12q、2p、6、2q、4q、10q和15q(30%),缺失最常见的染色体臂是3p、6p、1q、5q(30%);ERMS扩增最常见的染色体臂是7p、9q、2p、18q和1 p、8q(30%),缺失最常见的染色体臂是11p.基因组变化在不同的组织学分类中差异无统计学意义(P0.05).(3)伴有融合基因组扩增最常见的染色体臂是12q、2、6、10q、4q和15q(30%),缺失最常见的染色体臂是3 p、6p、5q(30%);不伴有融合基因组扩增最常见的染色体臂是2p、9q、18q(30%),基因组缺失最常见的染色体臂是11p和14q(30%).12q扩增在这两组间的差异有统计学意义(P<0.05),并多见于伴有融合基因的RMS.(4)在临床分期分组中,9q扩增在Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期间差异有统计学意义(P<0.05),且多见于Ⅱ期患者.结论 (1)2p、12q、6p、9q、10q、lp、2q、6q、8q、15q、18q扩增及3p、11p、6p缺失可能与RMS发病相关;(2)12q扩增可能与融合基因相关;(3)9q扩增可能与RMS发病早期有关。

目的 探讨食管鳞状细胞癌中转化生长因子β1(TGFβ1)与上皮间质转化的关系以及阻断TGFβ1通路对食管鳞状细胞癌上皮间质转化的影响.方法 将化学合成的TGFβ1反义寡核苷酸(TGFβ1-ASODN)转染食管鳞状细胞癌细胞株EC9706,采用RT-PCR、免疫细胞化学及流式细胞术检测阻断前后对TGFβ1活性的影响以及对上皮性标志物E-cadherin及间质性标志物波形蛋白表达的影响;观察TGFβ1-ASODN转染前后细胞形态学的变化;采用细胞划痕试验检测TGFβ1-ASODN转染前后细胞迁移能力的变化.结果 转染TGFβ1-ASODN可有效的抑制EC9706细胞中TGFβ1的活性,其mRNA(0.25±0.07)及蛋白(35.07%±1.42%)的表达均明显低于转染前mRNA(0.43±0.09)及蛋白(43.57%±1.77%)的水平(χ2=13.847及χ2=84.120,均P<0.05);并提高E-cadherin的表达,抑制波形蛋白的表达.转染后E-cadherin mRNA(0.38±0.09)及蛋白(17.13%±1.45%)的表达明显高于转染前mRNA(0.22±0.06)及蛋白(12.53%±1.31%)的水平(χ2=0.160及χ2=40.008,均P<0.05);波形蛋白mRNA(0.73±0.07)及蛋白(14.15%±1.46%)的表达低于转染前mRNA(0.89±0.09)及蛋白(17.97%±1.42%)水平(χ2=0.160及χ2=21.103,均P<0.05).TGFβ1-ASODN转染可明显抑制细胞的运动能力,转染后细胞迁移距离(0.45±0.05)比转染前(0.81±0.11)明显缩小(χ2=16.854,P<0.05).结论 TGFβ1可能参与了食管鳞状细胞癌的上皮间质转化,TGFβ1-ASODN可导致食管鳞状细胞癌细胞上皮性标志物E-cadherin表达上调、间质性标志物波形蛋白表达下调、形态发生改变以及细胞移动能力降低,阻断TGFβ1信号可抑制食管鳞状细胞癌细胞的上皮间质转化。

肿瘤的发生发展是多阶段和多基因参与的极为复杂的过程,p53基因是迄今发现与人类肿瘤相关性最高的基因[1]。

化疗是胃癌最常用的治疗方式.5-氟尿嘧啶(5-FU)、铂类、紫杉类药物及其组合是目前公认最有效的治疗药物,但其有效率均<50%.提高胃癌化疗疗效、减少盲目化疗是临床迫切需要解决的问题。

骨质疏松症是以低骨量及骨组织微结构退变为特征的一种全身性骨骼疾病,伴有骨脆性增加.绝经后骨质疏松症为多因素引起的代谢性骨病,雌激素缺乏是主要原因.我们通过建立绝经后骨质疏松模型,观察去势大鼠中不同时期胫骨雌激素受体(ER)α、转化生长因子(TGF)β1原位杂交情况,来探讨它们在去势后骨质疏松发病机制中的作用,对于临床防治骨质疏松提供参考。

胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumors, GIST)是胃肠道最常见的间叶源性肿瘤,通常c-kit(CD117)免疫表型阳性,对传统的化学治疗和放射治疗不敏感.该类肿瘤一般具有c-kit基因(75%～85%)或PDGFRA基因(5%～10%)的突变[1-2].这两个基因编码两个功能相似的酪氨酸激酶蛋白受体,其突变造成配体非依赖性的c-kit或PDGFRA受体二聚化,导致信号通路不需诱导持续激活,在GIST发病过程中发挥关键作用[3-4].c-kit或PDGFRA基因在GIST中的突变有一定的热点区域和规律,并且与GIST的临床病理学特征及预后存在非随机的联系。

微小RNA(mircoRNA,miRNA)是22个核苷酸左右的非编码RNA.自从Lee等[1]于1993年在秀丽线虫(C.elegans)体内发现了第一种呈时间特异性表达的miRNA以来,关于miRNA研究的新成果不断涌现.miRNA在生物个体发育、细胞增殖、分化、凋亡、脂类代谢、激素分泌及肿瘤发生等多种生理和病理过程中发挥着重要作用[2-4].目前,miRNA已成为肿瘤病理学研究领域中最受关注的生物大分子之一.由于胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,我们就miRNA与胃癌关系的研究进展综述如下。

肾细胞癌是在临床行为、组织结构和细胞遗传学改变均不相同的一组肿瘤.肾细胞癌的细胞遗传学、分子生物学特性已有了详尽的研究,并且也发现了若干与肾细胞癌发生、发展相关联的基因,但是由于肾细胞癌遗传学改变的高度复杂性和肿瘤间差异,迄今尚无确切的肾细胞癌发生发展的模型.WHO(2004)肾脏肿瘤组织学分类中已将肿瘤类型与特定遗传学改变相联系,标志着病理界对肾脏肿瘤的认识与了解进入了更深层次[1]。

1.病例简介:患者女,59岁.因"绝经后5年,阴道出血2次"于2006年12月入院检查.B超检查提示"子宫大,官腔内不均回声,性质待查",为进一步诊治收入院。

患者男,41岁.因上腹部隐痛6个月于2007年12月10日就诊.患者曾多次在外院诊治,胃镜取黏膜活检示消化性溃疡,给予抗幽门螺杆菌、抑酸及保护胃黏膜治疗,虽有所缓解但病情反复,且近期症状加重.体检:营养中等,腹平软,剑突下偏左轻压痛,无反跳痛,未扪及明显包块.胃镜检查示十二指肠球部前壁可见一不规则深凹溃疡,约1.2 cm×2.0 cm,底部被覆黄白厚苔,质韧,周围黏膜充血肿胀(图1).胃镜诊断:十二指肠球部溃疡(A1期)。

患者女,63岁.因绝经后11年阴道不规则流血2次于2007年10月入院.阴道B超示:子宫腔内低回声团62 mm×47 mm,回声欠均匀,考虑子宫内膜癌可能.血清CA125为68.44 U/ml,CA19-9为38.74 U/ml.入院后行"全子宫+双附件+大网膜切除+双盆腔淋巴结清扫术"及4疗程TP(紫杉醇+顺铂)方案辅助化疗。

患者男,39岁.因隐睾症术前查体偶然发现右肺上叶肿物1个月,来院求治.患者无咳嗽、咳痰,但有劳累后气喘,饭后胸闷感.患者既往无肿瘤病史.CT检查显示右肺上叶占位性病变,良性肿瘤可能性大.临床诊断:右肺上叶肺癌?患者于1997年12月20日入院行手术治疗。

英国著名外科医师、病理学家James Paget和Rodulf Virchow两人被公认是“科学医学病理学”的奠基者。James Paget的著名著作有“肿瘤学讲义”（1851年）和“外科病理学讲义”（1853年）。以他的名字命名的疾病有：骨Paget病、乳头Paget病和乳外Paget病、Paget脓肿等。

2008年6月13—17日，浙江省临床病理质控中心在杭州举行了2008全国病理质控工作研讨会暨浙江省临床病理质控中心成立二十周年庆典，来自北京、上海、安徽、天津、山东、江西、福建、河北、广西、四川、广东等省市病理质控中心主任和国内著名病理学专家及浙江省病理界同仁共280余人参加了大会。浙江省卫生厅行政领导、中华医学会病理学分会主任委员陈杰等参加会议并讲话，《中华病理学杂志》、《临床与实验病理学杂志》负责人也参会调研。浙江省临床病理质控中心作为国内最早从事病理质量控制和管理工作的省级质控管理机构，

中华医学会病理学分会2008年学术年会于2008年6月20-24日在辽宁省沈阳市召开。来自海外以及包括香港特别行政区在内的全国31个省、自治区、直辖市的近600名代表参加了本次大会，共有450余篇论文进行了报告和交流。报告共分四个部分：21日上午为特邀大会发言，由美国一加拿大病理学会主席Dr．Christopher Paul Crum做主题发言，内容主要为宫颈、子宫内膜及卵巢癌前病变最新研究进展。另有4名来自美国的华人病理学家作专题发言。21日下午及22日上午主要为国内代表大会发言，内容包括病理学科研、教学、