2008年 · 第37卷第07期

病理学技术是病理学的重要组成部分,是病理学赖以生存和发展的重要基础. 　　一、病理学的发展离不开技术的进步

病理技术工作是病理科(系)日常工作的重要组成部分,足病理诊断和科研的前提和基础.病理技术人员的工作和素质直接关系到病理科(系)日常诊断和科研丁作的开展。

2008全国病理学技术进展和应用研讨会是由中华病理学杂志编辑委员会和中华医学会病理学分会主办的第三次全国性的病理技术会议。

近20年来,儿童和青少年的恶性肿瘤发病率明显增高.据统计,恶性肿瘤死亡人数列意外死亡之后届儿童总死亡人数的第2位[1].众所周知,儿童和青少年恶性肿瘤以胚胎性肿瘤或间叶组织发生的肿瘤如各种母细胞瘤(神经母细胞瘤、肾母细胞瘤、淋巴母细胞瘤等)或横纹肌肉瘤等肉瘤多见,而由上皮组织发生的、成人多见的癌,儿童却少见。

目的 研究传染性单核细胞增多症(IM)的临床特征、病理特点、免疫表型和EB病毒原位感染特征,以提高对IM的认识和诊断水平.方法 采用HE染色以及免疫组织化学、原位杂交技术,结合临床资料分析,对15例IM进行了临床病理、免疫表型和EB病毒感染的研究.结果 (1)IM多见于儿童和青年人(中位年龄18岁),起病急,常有发热(12例),伴浅表淋巴结肿大,多数在短期内痊愈.(2)病变以T区增生为主,斑驳状改变常见,细胞混杂,种类多样,可见B细胞分化谱(活化淋巴样母细胞、免疫母细胞、浆样细胞、浆细胞),包膜不厚,间质不多.(3)病变中以CD3阳性的小T淋巴细胞为主,部分活化的淋巴样母细胞和免疫母细胞表达CD20和CD30,信号强弱不等,散在分布.(4)所有病例都有EB病毒编码的小RNA(EBER)阳性细胞,数量多少不一(10～100个/HPF),大中小淋巴细胞均可阳性,主要分布在T区,也见于套区、初级滤泡和生发中心内.结论 进一步确认了IM是EB病毒引起的一种急性自限性淋巴组织增生性疾病.IM在临床、病理、免疫表型和EB病毒感染方面都具有特点,只有综合考虑这4方面的信息才能减少错误,做出更准确的诊断。

目的 研究胸腺肿瘤组织学分型与预后多因素的相关性.方法 回顾性研究108例胸腺肿瘤患者的临床病理资料,按2004年WHO胸腺肿瘤分型标准重新对肿瘤分型,根据临床和随访结果,对其预后与Masaoka临床分期、胸腺肿瘤的组织学分型、肿瘤完整切除与否、患者年龄、性别、肿瘤大小及是否伴有重症肌无力多因素进行相关性研究.结果 组织学分型:A型7例(6.5%),AB型19例(17.6%),B1型23例(21.3%),B2型19例(17.6%),B3型27例(25.0%),C型13例(12.0%).临床分期:Ⅰ期36例(33.3%),Ⅱ期34例(31.5%),Ⅲ期27例(25.0%),Ⅳa期11例(10.2%).临床分期与组织学分型存在显著相关性(P=0.000).A型、AB型、B1型、B2型、B3型胸腺瘤的5年生存率分别为100%、100%、93%、83%、43%;10年生存率分别为100%、100%、81%、70%、33%.C型胸腺瘤中位生存时间62.5个月.B2、B3型胸腺瘤患者的预后介于C型胸腺瘤和A、AB、B1型胸腺瘤之间(P=0.000).临床Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期胸腺肿瘤切除术后5年生存率分别为100%、77%、54%;10年生存率分别为100%、70%、27%.Ⅳa期患者中位生存时间14.0个月.在多因素统计分析中,Masaoka临床分期足胸腺瘤患者最重要的独立预后指标(P=0.000).胸腺肿瘤组织学分型和肿瘤完整切除与否是影响预后的重要决定因素.结论 Masaoka临床分期是影响胸腺瘤患者生存的最重要的预后参数,WHO组织学分型和肿瘤是否完整切除是影响胸腺瘤患者术后生存的决定因素.WHO组织学分型能反映胸腺瘤各亚型的临床生物学行为,A、AB和B1型胸腺瘤为潜在恶性的肿瘤,而B2和B3型胸腺瘤为中度恶性肿瘤,C型胸腺瘤预后差,属于高度恶性肿瘤。

目的 探讨Notch1和Notch2在人脑星形细胞瘤及髓母细胞瘤中的表达及其在肿瘤形成和发展中的作用.方法 应用组织芯片和免疫组织化学SP法染色以及Western blot技术检测正常脑组织、不同级别大脑星形细胞瘤、小脑髓母细胞瘤中Notch1和Notch2蛋白的表达情况.结果 正常脑组织中Notch1和Notch2蛋白呈阴性表达;Notch1在Ⅳ级星形细胞瘤中阳性比为15/15,Ⅲ级中阳性比为14/15,Ⅱ级中阳性比为10/15,Ⅰ级中阳性比为9/15,总阳性率为80.0%(48/60),阳性部位均为胞质.Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级星形细胞瘤中表达阳性比及表达强度随肿瘤级别增高而增高.在髓母细胞瘤中阳性比为2/10,且表达水平较低.Notch2在Ⅳ级星形细胞瘤中无表达(0/15),Ⅲ级表达阳性比为1/15,Ⅱ级中阳性比为2/15,Ⅰ级中阳性比为3/15,总阳性率为10%(6/60),表达率及表达强度都很低.在髓母细胞瘤中阳性比为9/10.Notch1在各级别胶质瘤中表达强度的差异均有统计学意义(x2=18.495,P<0.05).Spearman等级相关检验证实肿瘤病理分级与Notch1表达强度之间呈正相关(r=0.859,P<0.05).在星形细胞瘤中,Notch1和Notch2表达的总阳性率差异有统计学意义(x2=56.807,P<0.05),在髓母细胞瘤中,Notch1和Notch2的表达差别有统计学意义(x2=13.778,P<0.05).结论 Notch1和Notch2在星形细胞瘤及髓母细胞瘤中表达不同,并呈现相反的趋势,可能与两者在脑发育过程中的作用不同有关。

目的 探讨出核因子CRM1、p27 10位丝氨酸(Ser10)磷酸化及p27蛋白在胶质瘤中的表达、相互关系及意义.方法 免疫组织化学SP法检测70例胶质瘤和10例非肿瘤对照脑组织标本中CRM1、p27Ser10磷酸化形式及p27蛋白的表达,Western blot检测6例新鲜胶质瘤标本中相应蛋白的表达.结果 CRM1及p27Ser10磷酸化形式在对照脑组织中表达不明显,在低级别胶质瘤中表达较少,在高级别胶质瘤中表达较多,两两比较差异均有统计学意义(P<0.01).p27在对照脑组织中表达明显,其表达水平随肿瘤级别增高而降低,差异有统计学意义(P<0.01).Western blot结果显示CRM1、p27Ser10磷酸化形式在胶质瘤中的表达水平与肿瘤细胞的恶性程度相关.相关分析显示:胶质瘤中CRM1蛋白表达与p27蛋白表达呈负相关(r=0.727,P<0.01),与p27Ser10磷酸化形式呈正相关(rs=0.954,P<0.01),与增殖指标Ki-67表达呈正相关(rs=0.799,P<0.01);p27Ser10磷酸化形式与p27蛋白表达呈负相关(rs=-0.744,P<0.01),与Ki-67表达呈正相关(rs=0.785,P<0.01).结论 在胶质瘤中高表达的CRM1可能通过识别并结合高表达的p27Ser10磷酸化形式,促进p27的出核降解,使p27表达降低,失去对细胞周期的调控,从而促进胶质瘤的恶性进展和增殖。

目的 总结鼻腔鼻窦畸胎癌肉瘤(SNTCS)的临床病理特征、诊断和鉴别诊断要点以及嗅神经母细胞瘤(ONB)的临床病理特点,探讨SNTCS与ONB的关系及其组织来源.方法 对7例SNTCS和34例ONB的临床病理情况及免疫表型进行了观察,并对照观察了1例未成熟型恶性畸胎瘤及1例妊娠8周胚胎组织的形态学及免疫表型特点.结果 SNTCS男6例,女1例,平均年龄46岁.7例中3例为复发病例.组织病理学特征:肿痛由多种组织成分构成,这些成分源自3个胚层,是畸胎瘤样成分和癌肉瘤的混合,畸胎瘤样成分包括外胚层幼稚的鳞状细胞巢,内胚层的腺体和管状结构、纤毛柱状上皮,中胚层的纤维细胞、软骨、骨样基质、横纹肌及平滑肌组织;癌成分主要包括腺癌、鳞状细胞癌成分,肉瘤成分主要为横纹肌肉瘤、平滑肌肉瘤和纤维肉瘤成分,另外可见ONB成分、类癌及原始间叶组织.免疫组织化学染色:上皮及向上皮分化的组织表达广谱细胞角蛋白(CKpan)及上皮细胞膜抗原(EMA);ONB成分不同程度地表达突触素(Syn)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、CD99、神经丝蛋白(NF)及嗜铬粒素A(CgA),S-100蛋白神经丝束阳性.真菊形团表达CKpan及EMA;梭形细胞成分表达波形蛋白、平滑肌肌动蛋白(SMA)、结蛋白、肌球蛋白、肌红蛋白.原始间叶组织表达波形蛋白.黏液样物质和糖原颗粒PAS阳性.7例肿瘤细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)均为阴性.ONB 34例,男18例,女16例,平均年龄42.8岁.形态学特征是:分叶状上皮团巢,血管襻网隔,小圆小梭形细胞,异向分化的腺样、鳞状上皮样细胞及横纹肌母细胞,菊形团,神经丝束,深染的细胞核,少、粉染或透明的胞质.免疫组织化学染色:NSE及CgA在小细胞100%表达,但在不同病例表达程度不同,S-100蛋白在神经丝处100%表达,CKpan在鳞状及腺样分化的细胞100%表达,肌红蛋白表达于横纹肌母细胞分化的细胞.未成熟型恶性畸胎瘤内可见原始神经组织,有神经管结构及大片的神经胶质细胞(GFAP阳性).未发现幼稚的非角化透明鳞状细胞巢.1例胚胎组织鼻腔、口腔可见衬覆非角化透明鳞状细胞.结论 SNTCS是罕见的高度恶性肿瘤,多数ONB为低级别的恶性肿瘤.SNTCS成分复杂,形态多样,取材不充分可能导致误诊.未发现SNTCS为生殖细胞来源肿瘤的证据,将SNTCS命名为鼻腔鼻窦畸胎样癌肉瘤可能更好,其组织发生可能为嗅/鼻腔鼻窦黏膜中的原始全能细胞,与ONB的关系有待于进一步的研究和证实。

目的 对甲状腺乳头状癌(PTC)的蛋白质组进行研究,并与正常组织对比,寻找其中差异显著的蛋白.方法 应用蛋白质组学技术,提取10例PTC与周围正常甲状腺组织(NT)的蛋白质样品进行双向电泳分离及对比,应用Image Master软件对电泳图谱进行分析;将选出的差异性蛋白质点进行质谱鉴定和数据库查询.结果 得到了PTC及NT的双向电泳图谱;通过软件分析、对比,从中初步选取4个差异蛋白质点进行质谱鉴定,确认为4种相应的蛋白质:其中脂皮质蛋白(annexinⅠ)、peroxiredoxin Ⅰ、线粒体顺乌头酸酶(mitochondrial aconitase)在PTC中表达上升,碳酸酐酶Ⅰ(carbonic anhydrase Ⅰ)在PTC中表达下降.结论 蛋白质组学为PTC的研究提供了新的发展方向,在寻找肿瘤的特异性蛋白标记物、进一步探究肿瘤的发病机制以及寻找治疗肿瘤的分子靶点等方面发挥作用。

目的 探讨浸润性乳腺癌中基质金属蛋白酶(MMP)-13蛋白在肿瘤细胞和间质细胞中的表达及其与肿瘤临床病理、生物学指标以及预后的相关性.方法 采用组织芯片免疫组织化学染色sP法检测263例浸润性乳腺癌组织中MMP-13、ER、PR、HER2、MMP-2、MMP-9、基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1、TIMP-2蛋白的表达及表达间的相关性.结果 MMP-13在肿瘤细胞及间质纤维母细胞中均表达,肿瘤细胞中MMP-13过表达与淋巴结受累和高组织学分级相关(均P<0.01),且与HER2表达(P=0.015)和肿瘤细胞TIMP-1蛋白表达相关(P<0.01).MMP-13过表达与患者总生存期缩短相关,分层分析显示MMP-13的过表达分别与淋巴结阳性患者总生存期和HER2阳性和阴性表达状态下的患者总生存期有关.间质纤维母细胞表达MMP-13尽管与肿瘤细胞表达者有相关性,且与淋巴结状态和HER2表达也相关,但评估预后的价值较弱.经单因素分析,肿瘤直径、组织学分级、淋巴结和PR、HER2表达状态及肿瘤表达的TIMP-1和MMP-13均是有意义的预后指标;但多因素分析显示仅肿瘤直径、组织学分级、淋巴结状态、HER2表达、肿瘤中TIMP-1和MMP-13表达是独立预后因素.结论 MMP-13蛋白与浸润性乳腺癌的侵袭和转移相关,有可能作为预后不良的指标。

目的 探讨PTEN缺失是否影响小鼠成纤维细胞Cu/Zn超氧化物歧化酶(SOD)的表达水平及其意义.方法 采用Western blot验证及检测对照永生化小鼠胚胎成纤维细胞系PTEN+/+及PTEN缺失细胞系PTEN-/-内PTEN、磷酸化Akt、Cu/Zn SOD表达水平;Northern btot检测细胞内Cu/Zn SOD表达水平;单细胞碱性电泳检测细胞DNA损伤程度;荧光探针标记检测细胞内超氧阴离子水平;MTT法检测H2O2对细胞增殖状况的影响.结果 PTEN缺失细胞系PqEN-/-中,Cu/Zn SOD表达下调,Akt激酶磷酸化水平上调,细胞内超氧阴离子水平明显增高,空白组及H2O2处理后DNA损伤程度均较PTEN+/+细胞重,H2O2对其细胞增殖的抑制作用减弱.结论 PTEN缺失细胞内Cu/Zn SOD表达下调,并由此引起了细胞内活性氧持续高水平和氧化损伤累积以及活性氧对细胞增殖的抑制作用减弱。

先天性二叶型主动脉瓣是人体较为常见的先天性心血管畸形,人群中的发生率为1%～2%,常可导致主动脉瓣狭窄(AS)和(或)主动脉瓣关闭不全(AI),合并感染性心内膜炎,而且主动脉扩张、主动脉瘤形成和主动脉夹层的发生率较高[1-2]。

数据显示,我国城市地区结直肠癌的发病率居恶性肿瘤的第4位,而在北京和上海等大城市,其发病率已上升至第2～3位,已经接近西方发达国家结直肠癌的发病率。

我们根据澳大利亚墨尔本皇家儿童医院在心脏病方面的工作经验和澳大利亚全国儿童心肌病研究项目的成果,向国内同行做如下介绍以供参考。

胰腺癌发病隐匿,仅20%左右的患者有手术机会,5年生存率不足5%,且发病率呈逐年上升趋势.寻找并确定可用于早期诊断的遗传学标记,是有效治疗胰腺癌的重要前提之一。

患者女,72岁.腹部胀痛不适伴间断性排气、排便停止近3个月,于2006年1月3日入院.腹部体检:左上腹轻压痛,脐上及左侧腹部可触及一个包块,边界不清,轻压痛,可推动;肠鸣音活跃。

患者女,39岁.因阴道血性分泌物增多及同房后阴道出血6个多月于2007年8月来本院行宫颈液基脱落细胞学(TCT)检查。

患者男,30岁.于2006年12月26日起无明显诱因出现头痛,为枕部持续性膨胀痛,伴恶心、呕吐,左眼视物模糊,左上肢无力及左下肢麻木,无意识障碍。

患者女,27岁.因左侧腰痛1年余,经B超检查发现左侧肾脏肿块10 d于2007年6月入院.病史:患者于5年前怀孕时发现高血压,当时最高血压180/150 him Hg(1 mm HS=0.133 kPa),伴头晕,之后口服卡托普利,血压控制尚可。

患者女,54岁.因腰部酸胀1年,查体发现盆腔包块1个月于2007年10月入院.患者1991年因"子宫肌瘤+子宫内膜异位症"行子宫全切术.近1年感腰部酸胀,未就诊,近2个月加重,1个月前当地医院B超提示盆腔包块后来本院检查。

质量管理是科室管理永恒的主题.但是如何进行质量管理,每一个人,具体到病理科技术人员在质量管理中的作用是什么?可能会有不同的理解和体会.要回答这些问题,首先要对质量的定义达成共识。

为了提高我国神经病理诊断水平，指导临床治疗，加强各地区之间的联系和交流，由中华神经病学分会神经病理学组、中华医学会南京病理分会和南京军区南京总医院联合举办的全国中枢神经系统临床病理诊断学习班暨第六届全国神经病理读片交流会于2008年3月20-23日在南京军区南京总医院举行。