2007年 · 第36卷第11期

肝脏不仅在人体生命活动中具有重要而复杂的功能,也是原发性肿瘤和继发性肿瘤好发的器官,其中原发性肝癌占肝脏全部肿瘤的85%以上,包括原发性肝细胞癌(HCC)和肝内胆管细胞癌(ICC)二大组织学类型.在世界范围内原发性肝癌发病率位居恶性肿瘤的第五位,我国则位居男性第三位.全球每年约有60万人死于肝癌,其中我国占56%,约有34万人因肝癌死亡,为恶性肿瘤的第二死因.随着生物医学技术和理论的发展,肝脏肿瘤特别在肝癌病理学研究方面也取得了长足的进步,然而突破性进展还不多.

活体肝移植是伴随日益突出的供体器官短缺而发展起来的一种肝脏移植手术方式.美国器官移植学会肝移植注册网等待肝移植的患者有近18 000名,而每年能够获得的尸肝数量只有4500例.欧洲肝移植注册网每年大约有1100例患者可以得到尸肝移植,有300例以上患者在等待供肝中死亡.

目的 探讨肝移植病例中重型肝炎肝衰竭的病理组织学变化与其肝脏干细胞活化状态的关系.方法 收集肝移植病例中重型肝炎肝衰竭33例,以相应供肝组织作为正常对照,以免疫组织化学EnVision法检测肝组织中c-kit、Ki-67、HBsAg及HBcAg表达情况,并选择10例c-kit明显阳性病例进行了甲苯胺蓝组织化学染色做为对比染色,分析肝衰竭病例肝脏病理组织学、病毒抗原表达、有无人工肝治疗史,c-kit阳性肝脏干细胞活化数量.结果 33例中男性25例,女性8例,年龄分布为21～64岁.符合急性肝衰竭6例,其中2例与乙型肝炎病毒感染有关,3例为药物中毒所致,1例为急性妊娠脂肪肝;亚急性肝衰竭5例,均为乙型肝炎病毒感染所致;慢性急性发作性肝衰竭22例,均为乙型肝炎病毒感染所致.肝移植手术前有人工肝治疗史13例.肝脏活化的干细胞被c-kit单克隆抗体所标记,但不能被甲苯胺蓝染料染色.正常供肝内无或偶见c-kit阳性细胞;急性肝衰竭组c-kit阳性细胞为3.50±2.66(0～8)个/mm2;亚急性肝衰竭组为11.47±8.85(3～30)个/mm2;慢性急性发作性重型肝炎组为15.50±10.95(5～45)个/mm2,各组之间c-kit阳性细胞数差异有统计学意义.有无人工肝治疗史对c-kit阳性细胞计数无明显影响.供体肝脏组织Ki-67染色阴性,而肝衰竭病例在汇管区或旁汇管区可以检测到数量不等的Ki-67阳性细胞,但并不与c-kit阳性前体细胞呈平行关系.结论 急性肝衰竭时肝细胞大片坏死但内源性干细胞活化不足是预后差的原因之一.而病程迁延较长的亚急性或慢性肝衰竭,肝脏干细胞活化水平逐渐升高,提示积极治疗肝衰竭使其设法渡过急性期,可以不同程度调动肝脏自身再生重建机制。

目的 探讨套细胞淋巴瘤(MCL)的临床病理特征及预后因素.方法 对102例经形态学及免疫表型检测确定的MCL进行分析,组织病理制片和链霉素抗生物素蛋白过氧化物酶法或EnVision法染色,并进行了随访.结果 102例患者中位年龄59岁(30～79岁),男女之比约2.92:1.淋巴结是最常受累的部位(98/98,100%),结外常受累的部位:骨髓(29/45,64.4%)、脾脏(36/57,63.2%)、咽淋巴环(15/48,31.3%)、外周血(15/51,29.4%)、肝脏(12/53,22.6%)及胃肠道(15/102,14.7%);87.7%(71/81)初次就诊时处于临床Ⅲ～Ⅳ期,45.5%(25/55)患者有B症状;48.7%(19/39)患者血清乳酸脱氢酶升高.除7例(6.9%)因组织取材小无法区分病变模式外,余95例中12例(11.76%)为套区增生型,41例(40.2%)结节型,42例(41.2%)弥漫型.75.5%(77)经典型,24.5%(25例)瘤细胞呈母细胞样变型.102例均表达B细胞标记而不表达T细胞标记,96例(94.1%)肿瘤细胞表达细胞周期蛋白D1,70例(71.4%)CD5弱阳性.68例获得随访,中位生存时间10个月(0～89个月).套区增生型+结节型、经典型的核分裂象≤15/10 HPF,增殖指数≤15%;骨髓无受累,提示患者预后好,而其他临床病理因素对患者生存未见影响.结论 国内MCL患者病征与国外患者基本一致,其病变模式、细胞变型、核分裂象、增殖指数、骨髓是否受累及受累程度与预后有关。

目的 分析黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤(MALT淋巴瘤)中转化与未转化肿瘤细胞间的克隆联系.方法 选具有大细胞转化的、可用于激光显微切割的MALT淋巴瘤6例为研究对象,采用EliVisionTM方法检测bcl-10等蛋白表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测API2-MALT1融合基因,激光显微切割进行目的细胞群分离,PCR检测免疫球蛋白重链(IgH)基因重排并对产物进行测序分析.结果 伴有转化的6例中1例胞质和胞核同时表达bcl-10蛋白,2例检测出API2-MALT1融合基因.同一例不同肿瘤细胞群分别显示同样的基因重排序列.例2和例5在N区和D区有两个核苷酸位点的碱基不同.结论 伴有转化的6例MALT淋巴瘤转化和未转化肿瘤细胞群均分别来自同一个肿瘤克隆。

目的 探讨假增生型前列腺癌(PHPA)的临床病理特征及其发生率和生物学行为.方法 复查上海交通大学附属第六人民医院2005年1月1日-2006年12月31日860例直肠B超引导下前列腺穿刺活检和46例前列腺癌根治手术切片,对疑有PHPA组织作34βE12(或CK5/6)、p63和AMACR单项免疫组织化学标记(EnVision法)和34βE12/p63/AMACR鸡尾酒抗体双重免疫组织化学标记,将在1个组织块中PHPA占该组织块中癌总量的面积百分比＞60%的病例归入本组,并作病理学分析.结果 PHPA在穿刺活检和前列腺癌根治标本中的发生率分别为7.0%和15.2%.66.7%的PHPA与普通型前列腺癌直接移行,76.7%在其他组织块中有普通型癌.PHPA占穿刺活检中癌总量的比例为5%～100%,占根治标本中癌总量的比例为1%～30%.PHPA以大中腺泡增生为主,癌细胞分化较好,排列有极性,腔内常有残存淀粉样小体,低倍镜下类似良性前列腺增生.但腺泡排列紧密,腔内有嗜酸性结晶体和颗粒状无定形物质,核增大,有大核仁,免疫标记AMACR阳性,基底细胞标记阴性,在20项提示恶性的形态学指标中10项出现几率≥66.7%.PHPA虽然分化较好,但66.7%的PHPA有间质浸润,6.7%有神经浸润,3.3%有腺外浸润,3.3%发生骨转移,肿瘤分布部位周围带多于移行带.结论 PHPA的实际发生率不低,绝大多数与普通型癌并存,由于形态学类似良性,肿瘤细胞量又不占多数,因此在诊断中容易被忽视,PHPA高分化前列腺癌不同,应属于Gleason3级的中分化腺癌。

目的 探讨血清抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)及肾小球内有无免疫球蛋白(Ig)沉积在显微镜型多血管炎(MPA)肾活检病例中的病理诊断价值及其临床病理意义.方法 34例MPA均为该系2000年1月至2007年3月7年间的就诊患者,其临床资料比较完整,后经肾穿刺活检而确诊者,分别对其血清ANCA阳性和阴性及肾小球内有无Ig沉积的临床病理特点进行比较.结果 34例MPA患者,约1/5～1/2病例伴有各种肾外症状;经血清ANCA检测,阳性者26例(76.5%);阴性者8例(23.5%);其尿蛋白多呈轻～中度,呈肾病综合征者仅3例;肾功能减退者32例.经病理检查显示,24例为新月体性肾炎,8例为局灶节段性肾炎,其他类型者仅2例;伴肾血管坏死或内膜炎症7例,内膜增厚24例;伴间质炎性细胞浸润29例,其中21例伴有中性粒细胞浸润.经临床与病理比较分析,发现ANCA阳性组的新月体形成率显著高于ANCA阴性组(P＜0.05);在26例ANCA阳性组病例中,肾小球Ig沉积者的尿蛋白定量显著高于无Ig沉积组(P＜0.05),其中1例合并IgA肾病.结论 对MPA的诊断有赖于对患者血清ANCA的检测和肾活检组织的病理学检查;ANCA是促进肾小球新月体形成的一个重要因素;Ig在肾小球内的沉积对患者蛋白尿的加重起促进作用。

目的 探讨载脂蛋白E和低密度脂蛋白受体双基因缺失(apoE-/-/LDLR-/-)小鼠肝脏脂代谢相关基因表达特征与动脉粥样硬化早期病变的关系及发生机制.方法 应用RT-PCR技术检测apoE-/-/LDLR-/-与野生型小鼠肝脏脂代谢相关基因表达差异,并进行血生化指标检测及主动脉形态学观察.结果 所检测的11个脂代谢相关基因中,apoE-/-/LDLR-/-小鼠与野生型小鼠相比,载脂蛋白B100和脂肪酸转运体(FAT/CD36)的mRNA水平从14天龄至3月龄均升高.载脂蛋白AⅣ、载脂蛋白AⅤmRNA水平分别于14天龄和3月龄时明显降低.载脂蛋白A Ⅰ、载脂蛋白F、过氧化物增殖物激活型受体α、肝X受体α、血管生成素样蛋白3、酰基辅酶A氧化酶1及肉碱棕榈酰转移酶Ⅰ mRNA表达水平无明显差异.血清总胆固醇、总甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇水平分别高于同龄野生型小鼠约7、2和30倍.随年龄增长apoE-/-/LDLR-/-小鼠主动脉内膜出现典型的动脉粥样硬化早期病变.结论 上述脂代谢相关基因表达变化表明它们在动脉粥样硬化发生发展过程中起重要作用。

目的 探求卵圆细胞向成熟肝细胞分化的演变规律,并对其分化调控的分子机制作初步探讨.方法 联合应用肝细胞生长因子和表皮生长因子体外培养大鼠肝脏卵圆细胞OC3,运用电镜、免疫细胞化学、半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)等技术,检测OC3在分化过程中形态及相关分子标记物的改变,并运用蛋白芯片技术观察细胞蛋白表达谱的变化.结果 诱导10周后,卵圆细胞胞质变丰富,细胞器增多,表达谷胱甘肽-S-转移酶(GST-P)和丙酮酸激酶(M2-PK)减弱,而表达白蛋白(ALB)、CK18增强,同时诱导后期的细胞较之诱导前主要出现了8种表达差异蛋白.结论 在肝细胞生长因子与表皮生长因子的共同作用下,体外培养的卵圆细胞可逐步分化为成熟肝细胞.8种主要的结构蛋白或功能蛋白可能参与了对该过程的调控。

目的 模拟乳腺癌患者术后体内有少量肿瘤细胞存在,但长期无症状,也无特殊体征的特点而建立小鼠乳腺癌休眠模型并确定休眠细胞的存在.方法 采用500个小鼠乳腺癌Ca761-03细胞肌肉接种于30只615小鼠,以小鼠2个月(相当人5年)不成瘤为休眠标准,按休眠观察组、休眠验证组和复发验证组三组(各10只小鼠)连续观察肿瘤休眠发生情况.肿瘤细胞休眠的确认方法为,采用给予连续外伤刺激,接种部位取材,组织固定和HE染色观察肿瘤再生成情况.结果 500个小鼠乳腺癌Ca761-03细胞肌肉接种于小鼠2个月后,有30%小鼠成瘤,70%处于休眠状态.休眠肿瘤给予连续外伤刺激5个月后,有90%小鼠成瘤.显示乳腺癌肿瘤细胞可以在小鼠体内长期保持休眠状态,在外伤刺激的作用下,休眠的肿瘤细胞可以再次增殖,成为肿瘤复发的根源.结论 成功建立了小鼠乳腺癌休眠模型,并用外伤刺激休眠细胞增殖的方法确定了休眠肿瘤细胞在体内的存在.这一动物模型填补了实体瘤休眠动物模型缺乏的空白。

目的 研究成纤维细胞与结肠癌细胞相互作用对二者表达细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)的影响,初步探讨肿瘤-基质相互作用在结肠癌侵袭转移中的作用.方法 结肠癌SW480细胞与HELF成纤维细胞以RPMI 1640培养液分别共培养0、12、24、48 h,通过RT-PCR和免疫细胞化学方法检测SW480和HELF细胞中EMMPRIN的表达.结果 共培养组SW480细胞EMMPRIN mRNA和蛋白的表达均明显升高,HELF细胞本来不表达EMMPRIN,与SW480细胞共培养12、24、48 h后检测到EMMPRIN表达,且随时间延长而表达增加.结论 成纤维细胞与结肠癌细胞相互作用上调SW480细胞EMMPRIN的表达,并诱导HELF细胞表达EMMPRIN,有可能在结肠癌侵袭转移中发挥重要作用。

例1男,45岁.因肠镜检查发现结肠腺瘤和多发性息肉行部分结肠切除.例2女,53岁.肠镜检查见结肠上孤立的一枚长息肉,长2 cm,直径0.2 cm,完全套切送活检.

患者女,39岁.因抽搐昏迷5 d,伴近10年癫痫病史,于2006年5月5日入院.CT示:右侧颞顶叶占位,大小2.0 cm×1.5 cm×1.0 cm,内见斑片状高密度影,周围呈低密度水肿区,右侧脑室受压变形.

患者男,28岁.近2年无明显诱因出现头痛,阵发性加重,伴左侧肢体间断性麻木,乏力,于2005年10月20日入院.神经系统检查示左侧半身浅感觉减退,左腱反射活跃,双病理征(+).头颅MRI检查示,左顶叶脑外占位性病变,脑膜弥漫性增厚(图1,2).血常规检查:白细胞14.7×109/L,红细胞12.5×109/L,血小板445×109/L.临床考虑为脑膜瘤,行手术切除.手术见病变位于顶叶硬脑膜内,与脑组织表面界限明显,质硬韧,灰白色,血供丰富.

患者女,55岁.因无意间扪及下腹包块伴肛门坠胀感3个月,于2007年4月16日入院.体检:心肺检查未见异常,右下腹可触及一实性包块,大小6.O cm×6.0 cm×5.0cm,质软,轻压痛,与子宫关系密切.B超示"右附件类实性包块,子宫后壁肌层多发性低回声结节."临床诊断:子宫肌瘤,卵巢肿瘤,行子宫切除术.术中见子宫后壁偏左侧多发结节,直径0.1～4.0 cm,右卵巢有一鹅蛋大小肿物.

表皮生长因子受体(EGFR)和基质金属蛋白酶(MMP)9在肿瘤的侵袭和转移发生过程中发挥着重要作用,其表达上调能导致肿瘤的侵袭和转移潜能增强.人乳头状瘤病毒16(HPV16)为喉鳞癌的主要致病因素,其主要转化活性部位在E6和E7开放读码框架.我们采用脂质体转染技术将携带有HPV16-E6/E7 DNA的真核表达质粒导入HPV阴性的Lscc-02喉鳞癌细胞系,使其在细胞中表达,研究其对Lscc-02喉鳞癌细胞系EGFR和MMP-9 mRNA及蛋白表达的影响,探讨HPV16-E6/E7基因与喉鳞癌演进及预后的关系.

溃疡分枝杆菌皮肤溃疡(Buruli溃疡)由溃疡分枝杆菌引起,是皮肤除结核病及麻风病以外抗酸染色阳性的最常见的分枝杆菌感染性疾病[1].Buruli溃疡是一种危害公共卫生健康的疾病,现我们报道在东莞市发现的10例Buruli溃疡,并结合文献对其临床病理特点进行讨论.

自身免疫性肝病是指一组以肝脏病理损害和肝脏功能异常为主要表现的自身免疫性疾病,主要包括自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis)、原发性胆汁性肝硬化(primarybiliary cirrhosis)、原发性硬化性胆管炎(primary sclerosingcholangitis)三大类.这三种疾病尽管在组织病理学方面均有各自的特点,但由于这些疾病病理表现常与其他肝脏疾病重叠,患者病变也常常表现不典型,因此往往要密切联系临床表现、血液生化及自身抗体检测结果等才能作出正确诊断.

分泌蛋白质是指在细胞内合成后,分泌到细胞外起作用的蛋白质,包括各种肽类激素、细胞因子、免疫球蛋白、补体、蛋白水解酶等.一般的分泌蛋白质在其N末端具有特征性的信号肽结构.

肝内胆管癌(intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)又称胆管细胞癌或胆管癌,在世界大部分地区是肝脏第二常见恶性肿瘤,占肝脏原发肿瘤的5%～25%,平均约10%[1-2].在组织学上最近强调两种与肝内胆管癌有关的恶性前期病变,第一是胆管内乳头状肿瘤(intraductal papillary neoplasm ofthe biliary tract,IPNB),类似于胰腺导管内乳头状肿瘤,常继发浸润性黏液性ICC;第二为显微镜下病变,即胆管上皮不典型增生,其特征为胆道上皮平坦或微乳头状生长伴有不同程度的异型直到恶性(浸润)前病变,过去称为"轻、中、度不典型增生"和"原位癌"[3-5].

培养细胞免疫化学技术作为一种跨领域的研究手段,是将免疫细胞化学技术与细胞培养技术密切结合的技术,可获得单纯从体内实验难以达到的效果.培养细胞免疫组织化学技术与组织切片的免疫组织化学技术基本原理和操作是相同的,但又有许多要特别注意的细节.

由新顺国际有限公司和美国BD公司（Becton Dickinson and Company）联合举办的“病理科实验室质量认可和实施研讨会”日前在北京和广州举办并获得圆满成功。此次研讨会是首次在国内举办的专门针对病理科实验室质量管理体系建设和规范化管理的专题研讨会。中国工程院院士刘彤华教授做为特邀嘉宾为会议致开幕词。