2007年 · 第36卷第03期

尽管肿瘤诊断技术已取得巨大进步,治疗方法日益增多,但大多数恶性肿瘤的预后依然很不理想.原因之一就是目前对肿瘤发生机制和生物学特性的认识尚存在不足.因此,积极开展肿瘤分子病理学研究,尤其是肿瘤前沿领域研究,对于恶性肿瘤的诊断和治疗具有重要意义.

癫痫是由脑神经元异常过度放电引起的、以反复发作神经系统功能异常为特征的慢性脑部疾患.国内最新的流行病学调查显示,我国癫痫的患病率约为7‰,患者总数在900万人以上.约有75%的患者使用抗癫痫药物治疗可以控制或减少癫痫发作,但仍有约25%的患者使用多种抗癫痫药物仍难以控制其发作,这样的患者被称作难治性癫痫.

目的 研究癫痫相关局灶性皮质发育不良(FCD)的临床病理学特征.方法 对38例2005年在北京宣武医院接受致痫灶外科手术切除治疗并临床病理诊断为FCD患者的临床资料、神经影像学以及病理学资料进行回顾性分析.结果 38例患者的平均发病年龄为9.2岁,平均病程为11.9年,发作形式以复杂部分性发作为主.神经影像学检查有21例可见海马硬化、灰质异常信号等改变.组织学具体分型为:FCD Ⅰ A型3例,FCDⅠ B型20例,FCDⅡA型5例以及FCDⅡB型5例,另有5例被诊断为轻微皮质发育不良(mild MCD).从部位来看,FCDⅡ型病变多见于颞叶以外的脑叶(8/10),尤以额叶多见(5/8).具有双重病理改变的5例均为FCD Ⅰ B型.在免疫组织化学染色,巨大神经元、未成熟神经元、形态异常神经元及白质内异位神经元均可由NeuN清晰的标记出来.少数气球细胞呈nestin阳性表达.结论 FCD是难治性癫痫的常见病理组织学所见,其中又以FCD Ⅰ B型最为多见,并且可伴有海马硬化.FCD Ⅰ型和Ⅱ型有着不同的临床病理学以及细胞病理学形特征。

目的 研究不同分化程度的神经母细胞瘤(NB)中E-cadherin、β-catenin蛋白的表达情况,初步探讨E-cadherin、β-catenin异常表达的分子生物学机制及其与临床病理参数的关系.方法 免疫组织化学EnVision法检测黏附分子E-cadherin、β-catenin在90例石蜡包埋组织中的表达;对7例NB的新鲜样本和24例NB石蜡包埋组织采用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测E-cadherin基因启动子CpG岛甲基化状态;运用PCR扩增和测序方法,检测7例NB组织中β-catenin基因第3外显子的突变情况,采用SPSS统计分析软件进行相关性分析.结果 分化良好组织类型NB β-catenin的阳性表达率(47/70,67.1%)显著高于分化不良组织类型(8/20,40.0%);E-cadherin、β-catenin在NB中普遍呈异常表达;有淋巴结转移组中E-cadherin和β-catenin的阳性表达率较无淋巴结转移组显著下降;检测31例NB E-cadherin基因启动子的部分区域均为未甲基化状态;对β-catenin第3外显子PCR扩增产物进行DNA测序,7例NB中1例发生基因重排和点突变,2例发生点突变,其中2例在同一位点(27184)发生T→A的突变.结论 NB中黏附分子E-cadherin高异常表达率与实验中检测的启动子区域甲基化无关,是否与该启动子未检测区域CpG岛甲基化有关,还需进一步实验证实;β-catenin的高异常表达率可能与β-catenin基因第3外显子的突变有关。

目的 探讨胰腺囊性肿瘤的临床病理特征及免疫组织化学特点,以期提高对胰腺囊性肿瘤的认识.方法 复习复旦大学附属中山医院1999-2005年间手术切除的92例胰腺囊性肿瘤的临床病理资料和影像资料,根据2002年WHO胰腺肿瘤分类标准将其分类.并采用免疫组织化学EnVision法,借助一组抗体进行鉴别诊断.结果 在92例囊性肿瘤中,发病年龄16～80岁,男33例,女59例.其中,浆液性肿瘤18例,黏液性肿瘤14例,导管内乳头状黏液性肿瘤36例,实性假乳头状肿瘤18例,导管腺癌囊性变4例,胰腺内分泌肿瘤囊性变2例.免疫组织化学检测无特异性标记物可以完全区分各类型,常有交叉和重叠.浆液性囊腺瘤表达MUC-1,黏液性囊性肿瘤表达MUC-5AC为主,实性假乳头状肿瘤表达α-抗胰蛋白酶、α-抗胰糜蛋白酶、波形蛋白及孕激素受体,导管内乳头状黏液性腺瘤表达MUC-2,囊性恶性肿瘤主要表达MUC-1.结论 胰腺各类囊性肿瘤在临床症状、影像学表现、组织形态及免疫表型上均有一定特征,但均无特异性,需结合起来综合判断,才能做出正确诊断,以指导临床治疗和预后判断。

目的 探讨伴横纹肌样特征的肾细胞癌(RCC)的临床病理特征.方法 对1995-2005年南京军区南京总医院常规外检档案352例RCC中的10例伴横纹肌样特征的RCC进行了光镜、免疫表型检测和超微结构观察,并结合临床病理特征进行分析.结果 10例伴横纹肌样特征的RCC患者年龄33～69岁(平均年龄52岁),男9例,女1例.5例肿瘤侵犯肾包膜,2例伴淋巴结转移,1例伴肺转移.组织学观察,10例伴横纹肌样特征的RCC中透明细胞型9例,乳头型1例,均可见不同程度的具横纹肌样特征的瘤细胞区域.横纹肌样特征的瘤细胞排列成梁索状、腺泡样、器官样或团片状,瘤细胞散在分布,细胞间无黏附或黏附性差,呈类圆形或多角形,核泡状、偏位,核仁突出,胞质内见红染均质包涵体样物,瘤组织常伴明显坏死.免疫组织化学观察,具横纹肌样特征的瘤细胞CD10、CK(AE1/AE3)、上皮细胞膜抗原(EMA)、波形蛋白均阳性表达,CK7、CK20、结蛋白、肌细胞生成素、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、肌肉特异性肌动蛋白(MSA)均阴性表达,神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S-100蛋白灶性阳性表达.横纹肌样瘤细胞区Ki-67阳性表达较周围经典型瘤细胞区增高,两者比较差异有统计学意义(P＜0.05).随访8例,2例于术后6个月及29个月死亡,6例存活.结论 伴横纹肌样特征的RCC主要见于透明细胞型,应与胞质嗜酸的肾细胞肿瘤和肾恶性横纹肌样瘤等相鉴别.RCC中伴横纹肌样特征的瘤细胞较周围经典型瘤细胞Ki-67表达明显增高,可能与此类肿瘤临床生物学行为更具侵袭性有关。

目的 探讨膜性肾病合并IgA肾病的临床病理特点.方法 回顾性研究北京大学第一医院肾内科和北京大学肾脏病研究所1998年1月-2006年4月间的肾活检病例9572例,对11例膜性肾病合并IgA肾病的临床病理特点进行分析,结合免疫电镜标记方法,对其病理诊断及发病机制进行探讨.结果 11例患者以中年为发病高峰,平均年龄39.9岁,女性多于男性(男∶女为1∶2.9),临床表现为蛋白尿,其中7例(63.6%)出现肾病综合征水平的蛋白尿,7例(63.6%)合并镜下血尿,肾功能均正常,除外了肝炎病毒感染、系统性红斑狼疮等继发性疾病.光镜下可见肾小球基底膜空泡变性和增厚,系膜细胞和基质轻度增生,2例可见少数肾小球伴有新月体形成.免疫荧光检查见IgG和C3颗粒样沿肾小球毛细血管壁沉积;IgA团块状在肾小球系膜区沉积.电镜检查可见肾小球上皮细胞下多数块状电子致密物沉积,系膜区可见团块状电子致密物沉积.免疫电镜标记结果显示,IgG定位于肾小球上皮细胞下的电子致密物,IgA定位于肾小球系膜区的电子致密物.结论 膜性肾病合并IgA肾病兼具有膜性肾病和IgA肾病的临床病理特点,其发生过程可能为各自独立发生的两种疾病的叠加所致。

目的 研究乙肝病毒X蛋白(HBx)上调的基因着丝粒蛋白A(centromere protein A,CENP-A)在原发性肝细胞癌(HCC)及癌旁组织的表达差异,并初步探讨其意义.方法 应用RT-PCR和即时定量PCR(real-time quantitative PCR)方法,检测20例HCC及配对癌旁肝组织中CENP-A基因mRNA的表达水平,应用免疫组织化学方法检测80例HCC和癌旁肝组织中CENP-A蛋白、p53蛋白的表达情况.结果 CENP-A mRNA在癌及癌旁组织中的相对表达水平分别为(0.64±0.18)和(0.09±0.09),二者差异有统计学意义(t=12.78,P＜0.01).免疫组织化学结果显示:CENP-A在HCC组织中的总阳性率为71.25%(57/80),高于配对癌旁组织的总阳性率43.75%(35/80)(x2=12.38,P＜0.01).p53在癌组织中的总阳性率为75%(60/80),高于配对癌旁组织中的总阳性率16.25%(13/80)(x2=55.65,P＜0.01),p53与CENP-A在癌组织中的表达一致性达88.75%(71/80),呈正相关(r=0.57,P＜0.01).结论 CENP-A在肝癌组织中的过表达与细胞恶性增殖相关,且这种过表达是由转录水平引起的,其机制可能与p53基因的转录调节有关。

目的 从人恶性胶质瘤细胞系U87中分离、培养和鉴定胶质瘤干细胞,观测其CXCR4表达情况及其活化后促血管生成因子分泌的变化.方法 通过流式细胞术检测U87细胞中CD133阳性细胞的比例.使用CD133免疫磁珠分离试剂盒通过磁性细胞分选系统分离胶质瘤干细胞.采用间接免疫荧光标记、激光共聚焦扫描显微术观测胶质瘤干细胞中神经巢蛋白(nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、趋化因子受体CXCR4的表达;以CXCR4配体刺激通过钙流试验检测受体功能,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养上清中血管内皮生长因子(VEGF)和白细胞介素-8(IL-8)的含量.建立裸鼠皮下移植瘤模型,观察胶质瘤干细胞成瘤情况及瘤体内VEGF表达情况.结果 U87细胞系中CD133阳性细胞的比例为0.5%,这些细胞具有干细胞增殖和生长特性;它们表达CXCR4,用其相应配体激活后导致胞内钙流增加、分泌VEGF和IL-8增多.与CD133阴性细胞相比,CD133阳性细胞在体外分泌VEGF、IL-8多,在体内成瘤率高,形成的移植瘤生长迅速,表达更多VEGF.结论 人恶性胶质细胞瘤细胞系U87中含有极少量胶质瘤干细胞,表达功能性CXCR4、分泌更多促血管生成因子,提示这些干细胞也直接参与胶质瘤血管生成。

目的 探讨β-淀粉样蛋白(Aβ)和胆固醇与阿尔茨海默病(AD)病理学进程和神经型尼古丁受体的关系.方法 Wistar大鼠经侧脑室注射Aβ1-42(1 mg/ml,5μl/只)来建立类似AD动物模型,并饲以5%胆固醇饮食.采用银染、免疫组织化学、水迷宫、Western blot和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方法检测实验动物脑组织形态学、学习记忆能力、神经型尼古丁受体亚单位表达水平等方面的改变.结果 Aβ侧脑室注射引起大鼠脑组织中Aβ沉积;高胆固醇饮食造成大鼠明显高胆固醇血症(血胆固醇浓度较对照组增高21%～24%);Aβ侧脑室注射引起大鼠学习记忆力降低,导致尼古丁受体α3、α4和α7亚单位蛋白水平降低(较对照组分别降低46%、39%及51%),并引起α7亚单位mRNA表达水平升高41%～73%;高胆固醇饮食能够明显增强Aβ引起的脑组织中Aβ沉积和星形胶质细胞增多、学习记忆能力降低及尼古丁受体表达改变.结论 Aβ能明显引起大鼠大脑病理学改变,降低大鼠学习记忆能力和影响神经型尼古丁受体的表达;高胆固醇饮食可增强Aβ的神经毒性作用及对尼古丁受体的影响。

目的 探讨缺氧条件下,转基因细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达变化以及单纯疱疹病毒1-胸苷激酶(HSV1-TK)/丙氧鸟苷(GCV)系统对转基因细胞的特异杀伤作用.方法 以缺氧诱导因子-1/缺氧反应元件(HIF-1/HRE)基因调节系统为载体,采用DNA重组技术构建由HRE启动子驱动的含人反义VEGF165cDNA全长和HSV1-TK基因的真核表达质粒,将其稳定转染人骨肉瘤细胞系MG63.应用PCR和RT-PCR方法检测TK基因的整合及转录;用MTY法和混合共培养实验分别检测转基因细胞在缺氧或不缺氧条件下对GCV的敏感性以及HSV1-TK/GCV系统的"旁观者效应";ELISA法检测细胞在缺氧条件下VEGF表达变化;流式细胞仪检测细胞周期改变及电镜观察细胞超微结构变化.结果 成功构建了由HRE启动子驱动的含反义VEGF165 cDNA全长和潮霉素磷酸转移酶-单纯疱疹病毒胸腺嘧啶激酶(HyTK)基因的真核表达质粒pBI-HRE-AsVEGF165-HyTK;得到转基因细胞系MG63TV;检测到MG63TV细胞内TK基因的DNA和mRNA.缺氧条件下,转基因细胞存活率与GCV浓度呈现剂量依赖性,对GCV的敏感性提高了100倍;HSV1-TK/GCV系统旁观者效应明显增强;肿瘤细胞VEGF分泌下降50%.缺氧和GCV共同作用使转基因细胞DNA合成抑制,细胞周期阻滞于G0～G1期,细胞发生凋亡和坏死.结论 利用肿瘤缺氧,HRE启动子能够实现反义VEGF165对体外培养的肿瘤细胞VEGF表达的靶向性抑制作用,并能增强HSV1-TK/GCV系统对肿瘤细胞的特异性杀伤作用和旁观者效应.该双基因共表达载体系统为实践联合抗血管生成和自杀基因治疗骨肉瘤提供了实验依据。

"第四届全国临床神经病理读片交流学术会议"于2006年11月4-5日在天津市环湖医院召开.此次会议由中华医学会神经病学分会神经病理学组和天津市神经科学学会共同主办,由天津市环湖医院和天津医科大学总医院承办.

细胞周期蛋白依赖性激酶CDC2属于ser/thr蛋白激酶家族,在细胞周期G2至M期起关卡作用,无论是细胞进入还是走出增殖周期都与它的表达有关.文献报道,CDC2过度表达可使细胞周期进程紊乱,导致许多组织形成肿瘤.我们应用组织芯片和免疫组织化学技术检测了CDC2在人脑胶质瘤组织及其相关起源细胞中的表达,以探讨CDC2的表达与胶质瘤发生、发展的关系.

p57Kip2是细胞周期抑制因子和肿瘤抑制基因,定位于染色体11p15.5.其所编码产物是一种广泛的细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)的抑制蛋白.p57Kip2显示极强的父本基因组烙印,在母本等位基因中为优势,即该基因的表达是由母系来源的基因开放所致.我们利用免疫组织化学法检测p57Kip2蛋白在由组织学所诊断的完全性葡萄胎、部分性葡萄胎及流产伴绒毛水肿中的表达情况,试图探讨p57Kip2基因在完全性、部分性葡萄胎和流产伴绒毛水肿鉴别诊断中的临床意义.

目前,同种异体肾移植仍然是治疗终末肾功能衰竭的主要方法之一,近年由于新一代免疫抑制剂的广泛应用,同种异体肾移植排异反应的临床表现越来越不典型[1],因此移植肾穿刺活检已成为诊断及鉴别诊断引起移植肾功能减退的重要手段.我们对60例肾移植术后,功能异常的移植肾进行穿刺病理活检,现报道如下.

随着对肿瘤干细胞(tumor stem cells)理论的深入认识和分离、培养肿瘤干细胞实验技术的不断进步,胶质瘤内肿瘤干细胞的存在已经有较多的证据和研究.这方面的研究不仅有助于深化人们对胶质瘤发生、复发和侵袭机制的认识,更重要的是可能改变以往胶质瘤的治疗策略,影响十分深远.新近,有学者将来自胶质瘤的肿瘤干细胞或具有干细胞特性的胶质瘤细胞称为"胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSC)"[1],较好地反映了这类细胞的特性.

缝隙连接(gap junction)是细胞间直接相互作用的主要方式,机体通过缝隙连接细胞通讯维持动态平衡,缝隙连接细胞通讯的异常或缺失是肿瘤形成的一个重要原因.肿瘤组织中同、异种缝隙连接的异常导致肿瘤细胞增殖失控、分化异常.以下对正常组织中缝隙连接的基本结构、功能及缝隙连接细胞通讯的调控,肿瘤组织中缝隙连接的功能及其异常机制,缝隙连接细胞通讯在细胞生长中的作用,以及缝隙连接对肿瘤发生发展的影响加以介绍.

宫颈鳞状细胞癌癌前病变的分类系统包括异型增生/原位癌和宫颈上皮内肿瘤(CIN)系统,近年CIN在分CIN Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3个级别的基础上又增加了意义不能确定的基底细胞异常(BAUS)和CIN(无法定级别)等范畴.随着宫颈细胞学TBS系统的推广,在有的国家出现了以两级别的鳞状上皮内病变(SIL)取代CIN分级的趋势.赞成使用两级分类系统的学者认为,严格区分CIN和湿疣有时比较困难,这些病变均为人乳头状瘤病毒(HPV)感染所致,其病变构成了一个谱系,应将它们包括在一个以形态学分类为主的系统中,尤其是在活检中使用两级别分类法,可使组织病理学与细胞学诊断保持一致,有利于临床医师处理.

甲醛分子式为CHCHO,主要作为一种防腐剂、杀菌剂在很多领域中使用.病理科所用的4%甲醛固定液给环境造成了污染,对人体健康造成危害.(1)甲醛是毒性化学物品,长期接触可以引起许多疾病,损害轻者可以引起眼、鼻、口腔咽部的刺激感,出现流泪,打喷嚏、咳嗽、呕吐等反应,也可出现口腔黏膜及呼吸道黏膜的增生、纤维化[1]、化生[2].临床表现为鼻炎、咽炎、气管炎、支气管炎.严重者引起恶性肿瘤[3].

在同一张组织切片上探讨两种或两种以上的组织成分或抗原成分的相互关系时,可以采用双重染色方法.网状纤维是构成组织的网状支架,广泛分布于实质性脏器中,其中最丰富的区域是肝、脾、淋巴组织、骨髓、基底膜和血管等处.网状纤维染色方法是一种组织化学方法,利用此方法可以显示和判定病变组织支架的破坏情况及纤维组织的增生情况[1].

患者男,73岁.因进食时突发意识不清伴四肢抽搐,小便失禁1 h于2003年2月28日急诊入院.既往有结核性胸膜炎,入院前20d因头痛、头晕、口齿不清在外院就诊,头部MRI诊断为多发性脑梗塞,住院治疗症状缓解出院,发病前数日因持续性低热曾送当地医院复查.

患者男,31岁.因右腰痛伴小便带血1年余于2005年8月8日入院.入院前行放射治疗1个月.体检:右肾区扣击痛,右肋缘下可触及肿大肾体,质硬.B超检查:膀胱充盈差,壁光滑,右肾上极探及9.5 cm×6.9 cm实性不均质回声团块,左肾未见异常,右肾实性占位。

患者男,17岁.右膝疼痛1年,近一周加重于2005年12月就诊.患者自发病以来无发热、消瘦.体检:右侧胫骨中上段前外侧隆起,局部皮温略高,轻压痛.右侧胫、腓骨正侧位X线示:软组织影像,胫、腓骨受累(图1).MRI示:右侧小腿中上段胫腓骨干之间一不规则形略长T1长T2软组织信号影,病灶边界模糊,侵犯胫骨,部分骨髓受累.

免疫组织化学带来了诊断病理学革命性的进步，该技术已成为现代诊断病理学中必不可少的辅助手段之一。肿瘤靶基因治疗的应用，需要病理提供准确、可靠的结果作为治疗依据。但日常工作中仍存在一定的问题，如没有针对性地滥用抗体、免疫组织化学结果的错误判读导致错误的诊断、缺乏实验室的标准化和免疫组织化学技术的质量控制等。为提高病理医师及病理技术员的工作水平，广东省人民医院病理科将于2007年6月9-13日举行免疫组织化学在肿瘤诊断中的应用和实验室标准化学习班，