2006年 · 第35卷第08期

自1926年Bailey和Cushing提出基于组织发生概念的系统的胶质瘤组织形态分类以来,脑肿瘤分类几经更迭,至最近的WHO分类(2000年)[1],其基本构架仍以组织形态学为主.长期实践证明,脑肿瘤的组织病理学分类和分级十分有效,不要求特殊技术条件,多数具有较好的重复性,是临床病理工作的重要支柱.但是,亦有一部分脑肿瘤类型或分级的形态学诊断标准不易确立,或难以避免主观因素影响[2].从治疗学角度看,一些脑肿瘤虽然组织形态相似而对治疗反应不一.因此,人们希望分子水平的检测可以有助于更为客观地进行脑肿瘤分类和分级.日益发展的针对特定基因改变的靶向治疗,亦需要更准确地了解脑肿瘤分子改变,或从分子变化的角度进行分子分类,以便于决定治疗方案和估计预后[2]。

目的 探讨多形性黄色瘤型星形细胞瘤(PXA)的临床病理特征、诊断及鉴别诊断、治疗及预后.方法 对南京军区南京总医院1980-2004年间6287例中枢神经系统肿瘤中的15例PXA(0.2%),以及2例会诊病例,进行临床病理学观察,免疫组织化学SP法检测8种抗体的表达:胶质纤维酸性蛋白、波形蛋白、S-100、上皮细胞膜抗原、突触素、神经微丝、CD68及CD34,获得其中10例的随访资料.结果 患者年龄12～55岁,平均30.8岁,男6例,女11例.主要症状为癫痫发作、头痛、头晕等.肿瘤发生于幕上者16例,占94.1%,其中发生于颞叶者7例,占41.2%.肿瘤大小2～7 cm,平均4.3 cm,9例有囊性变.除2例会诊病例外,全切除12例,次全切除3例.随访10例,生存8例,生存时间10个月～13年7个月,平均生存6年,生存10年以上者2例.组织学特征为:单核或多核巨怪瘤细胞、梭形细胞和泡沫样瘤细胞混合而成,肿瘤中有丰富的网状纤维及淋巴细胞浸润,缺乏坏死,核分裂象无或少.胶质纤维酸性蛋白、波形蛋白及S-100蛋白免疫组织化学染色均呈弥散阳性表达,CD34阳性率为77%.1例伴有间变特征的PXA,有较多核分裂象(≥5个/10 HPF).2例有脑实质及血管周围间隙的浸润.1例影像学检查提示肿瘤复发及脑膜播散.结论 PXA属WHOⅡ级肿瘤,肿瘤全切除及组织学为典型性PXA者预后较好,少数PXA可复发及间变.瘤细胞巨大、怪异,容易误诊为WHOⅣ级的巨细胞胶质母细胞瘤,两者的鉴别要点在于PXA部分可见泡沫样瘤细胞,核分裂象无或少,缺乏坏死.瘤细胞CD34的阳性表达有助于PXA的诊断。

目的 探讨中枢神经系统非典型畸胎样/横纹肌样瘤的临床病理特征、诊断及鉴别诊断.方法 对2例非典型畸胎样/横纹肌样瘤应用光镜行HE、网状纤维染色及免疫组织化学染色观察,并结合文献复习.结果 非典型畸胎样/横纹肌样瘤具有特征性的横纹肌样细胞,伴有不同程度的原始神经外胚叶、上皮和间质分化.肿瘤组织富于网状纤维,免疫组织化学标记示波形蛋白、CD99、上皮细胞膜抗原、细胞角蛋白、胶质纤维酸性蛋白、S-100蛋白、神经微丝蛋白、结蛋白、平滑肌肌动蛋白阳性,突触素、肌调节蛋白、胎盘碱性磷酸酶和HMB45阴性.结论 非典型畸胎样/横纹肌样瘤是中枢神经系统一种罕见的高度恶性肿瘤,好发于儿童,偶见于成人,呈异源性组织学和免疫组织化学表型.其诊断需与脑内其他多形性肿瘤鉴别。

目的 探讨阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)患者脑组织和高表达β淀粉样蛋白前质蛋白(APP)转基因小鼠脑组织中α7尼古丁受体亚型的改变,以及β淀粉样蛋白(Aβ)对体外培养的星形胶质细胞和神经细胞中α7尼古丁受体亚型蛋白表达的影响.方法 选取尸解后AD患者脑组织和高表达APP转基因小鼠脑组织,用免疫组织化学方法(ABC法)检测人脑组织中胶质细胞和神经细胞α7尼古丁受体的表达,用Western blot方法测定小鼠脑组织中α7尼古丁受体蛋白含量;体外培养星形胶质细胞和神经细胞,用不同浓度的Aβ25-35进行处理,然后用Western blot方法测定细胞中α7尼古丁受体蛋白水平.结果 AD患者脑组织中星形胶质细胞数量增多,并密集于老年斑周围;AD患者脑组织表达α7尼古丁受体的星形胶质细胞增多,而表达α7尼古丁受体的神经元减少;高表达APP转基因小鼠脑组织中α7尼古丁受体蛋白水平升高49%;用不同浓度的Aβ25-35处理培养细胞后,星形胶质细胞中α7尼古丁受体蛋白水平增高(达38%),而神经细胞中α7尼古丁受体蛋白水平减少可达32%.结论 神经元α7尼古丁受体减少可能与AD患者智力障碍的发生有关,而过多Aβ刺激星形胶质细胞后所引起的胶质细胞α7尼古丁受体表达增多则可能是一种神经保护性代偿方式。

目的 探讨抑癌基因PTEN在人原发性肝癌组织中的突变及其对肝癌细胞增殖和凋亡的调控作用.方法 (1)聚合酶链反应(PCR)-单链构象多态性(SSCP)法和序列分析法检测42例人原发性肝癌组织中抑癌基因PTEN第5、8外显子的突变.(2)脂质体介导的基因转染法将野生型PTEN基因、突变型PTEN基因的真核表达载体pEGFP-wt-PTEN、pEGFP-PTEN;G129R分别转染不表达内源性PTEN蛋白的人肝癌细胞系HHCC,G418筛选稳定表达PTEN蛋白的克隆,MTT比色实验分析测定细胞的增殖能力.以未转染基因的HHCC细胞和转染空载体pEGFP-C1的HHCC细胞为对照.(3)TNF-α诱导上述细胞凋亡,流式细胞仪测定凋亡细胞比例;Western印迹法检测细胞内磷酸化Akt(Ser473)的表达.结果 (1)在4例肝癌组织中检测出PTEN基因第5外显子的异常突变条带(9.5%,4/42).(2)转染野生型PTEN基因的HHCC细胞生长明显抑制,而转染突变型PTEN基因的HHCC细胞的增殖能力与对照组比较差异无统计学意义.(3)TNF-α诱导分别转染野生型、突变型PTEN基因、空载体的HHCC细胞和未转染基因的HHCC细胞凋亡,细胞凋亡率分别为13.8%、8.1%、4.6%、3.3%,与转染空载体的HHCC细胞比较,转染野生型PTEN基因的HHCC细胞凋亡率增高(P＜0.05);而转染突变型PTEN基因的HHCC细胞凋亡率差异无统计学意义(P＞0.05).Western印迹检测显示未经基因转染的HHCC细胞内源性Akt水平较低;HHCC细胞经TNF-α作用,其内源性Akt水平增高;转染野生型PTEN基因,可降低TNF-α诱导的肝癌细胞内信号分子Akt(Ser473)的磷酸化水平.结论 (1)首次发现原发性人肝癌组织中抑癌基因PTEN发生突变;(2)野生型PTEN基因可抑制肝癌细胞增殖,而突变型PTEN基因丧失对肝癌细胞增殖的调控作用;(3)野生型PTEN基因可降低TNF-α诱导的肝癌细胞内重要的信号分子Akt(Ser473)的磷酸化水平,即野生型PTEN基因通过抑制TNF-α诱导的肝癌细胞Akt磷酸化(活化)而抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。

目的 探讨乳腺癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)-(A、C、D)mRNA表达在乳腺癌发生发展中的作用及其与预后的关系.方法 用TaqMan real-time逆转录聚合酶链反应检测61例乳腺癌和29例乳腺良性病变中VEGF-(A、C、D)mRNA的表达,分析其表达与乳腺癌临床病理参数及生存状况间的关系.结果 (1)乳腺癌中VEGF-(A、C)mRNA表达量(2.79±1.31、3.33±0.88)高于良性乳腺病变(1.59±1.35、2.76±0.55),差异有统计学意义(P=0.000,P=0.002).乳腺癌中VEGF-D mRNA表达阳性率(73.77%)高于良性乳腺组织(51.72%,P=0.038),但表达量二者间无差异,P=0.683.(2)单因素和多因素分析均显示VEGF-D与VEGF-C mRNA比值在淋巴结转移阳性组低于阴性组,且与淋巴结转移有关(P单=0.046,P多=0.062).(3)乳腺癌VEGF-(A、C)mRNA高表达患者无病生存率分别低于低表达组(P=0.030,P=0.044).结论 VEGF-(A、C、D)mRNA表达异常可能与乳腺癌发生发展有关.VEGF-D与VEGF-C mRNA表达比值改变可能与乳腺癌淋巴结转移有关,VEGF-(A、C)是乳腺癌预后重要的影响因子。

目的 探讨整合素β1和纤连蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)对人胶质瘤浸润性的影响和作用机制.方法 以U251人胶质母细胞瘤(U251MG)细胞为研究对象,通过细胞黏附实验、迁移实验和体外侵袭实验,检测整合素β1及LN、FN对人恶性胶质瘤细胞黏附、迁移和转移能力的影响.通过荧光染色结合激光扫描共聚焦显微镜观察和扫描电镜方法,观察细胞微丝数量、分布和细胞表面伪足情况,比较整合素β1及FN、LN对微丝骨架的影响.结果 (1)FN对U251MG细胞黏附能力无明显影响,但抗整合素β1抗体可减少U251MG细胞的黏附数量(P＜0.01);LN增加U251MG细胞黏附能力(P＜0.01),抗整合素β1抗体对此作用影响较小.(2)抗整合素β1抗体减弱U251MG细胞在FN的运动、迁移能力(P＜0.05).(3)U251MG细胞内可见清晰的微丝结构,FN、LN使细胞内纤维型肌动蛋白(F-actin)形成束状纤维,粗壮而密集;抗整合素β1抗体处理的细胞内,难以见到清晰的细胞微丝骨架,并常见大量絮团状的F-actin.(4)扫描电镜观察显示,FN、LN使细胞表面的伪足数量明显增加,而抗整合素β1抗体使细胞伪足数量明显减少,甚至消失.(5)FN和抗整合素β1抗体对U251MG细胞的体外侵袭能力无明显影响;LN可促进U251MG细胞的体外侵袭能力,抗整合素β1抗体可抑制这种作用(P＜0.01).结论 (1)U251MG细胞通过整合素β1和FN相互作用,改变细胞微丝骨架、伪足结构和数量而促进U251MG细胞的运动、迁移能力.(2)整合素β1参与了LN介导的U251MG细胞体外侵袭作用。

目的 体外、原位、体内实验观察FCU/5-氟胞嘧啶(5-FC)联合γ射线对鼻咽癌CNE-2细胞的杀伤效应,以预测其对鼻咽癌的治疗作用.方法 电穿孔法将重组质粒pcDNA3.1(-)CMVe.Egr-1.FCU转染CNE-2细胞,600μg/ml G418筛选14 d获得稳定表达FCU基因的CNE-2细胞,免疫印迹法鉴定FCU基因的表达.四甲基偶氮唑盐法(MTF)检测5-FC联合不同剂量的γ射线对FCU基因表达阳性的CNE-2细胞的杀伤效应.进行原位基因治疗:取5×106对数生长期的CNE-2细胞接种裸鼠右腋下,建立鼻咽癌裸鼠移植瘤模型,接种细胞12 d后将裸鼠随机分成7组,观察不同处理对各组移植瘤生长的抑制作用.进行体内基因治疗:取5×106对数生长期表达FCU基因的CNE-2细胞接种裸鼠右腋下致瘤,接种细胞后的第5天,将裸鼠随机分成7组,观察不同处理对各组移植瘤生长的抑制作用.结果 从转染细胞总蛋白中检测到相对分子质量42 000的预期蛋白.体外实验中,γ射线组细胞的相对存活率为15.85%～97.88%,而5-FC(100μg/ml)+γ射线组细胞的相对存活率是6.58%～50.00%,两组差异有统计学意义(P＜0.01);5-FC+γ射线(1.0Gy)组细胞的相对存活率分别是2.37%～35.87%,明显低于5-FC组细胞的相对存活率12.11%～99.51%(P＜0.01).原位基因治疗和体内基因治疗实验结果表明在5-FC或者γ射线干预下,鼻咽癌移植瘤生长不同程度受到抑制,5-FC或(和)γ射线干预组的肿瘤体积明显小于对照组或PBS干预组(P＜0.05),以5-FC联合γ射线组明显.结论 FCU/5-FC联合γ射线对鼻咽癌CNE-2细胞具有杀伤作用,其有协同治疗鼻咽癌的效应。

我们收集了8例胰腺实性假乳头状瘤(SPT),应用免疫组织化学技术,检测了多种蛋白的表达,试图寻找SPT具有诊断和鉴别诊断价值的标记物并探讨其可能的组织起源。

我们对子宫内膜癌组织中内皮素受体B(endothelin receptor B,EDNRB)基因启动子区域CpG岛的甲基化(简称启动子甲基化)状况进行检测,以分析探讨其在子宫内膜癌的发生发展中的作用。

宫颈微小浸润癌(microinvasive cervical cancer,MIC)的概念提出已经有100多年了,对于其病理诊断标准及临床治疗方法一直存在争议,但随着对其研究的广泛深入,特别是对微小浸润性鳞状细胞癌的研究,所涉及的样本量比较大,随访时间充分,得到了一些有意义的研究成果.相比较而言,对于宫颈微小浸润性腺癌的研究还不够全面,我们仅就近十几年来对于宫颈微小浸润鳞状细胞癌的研究及探讨进行概述,以供病理和临床医生参考。

副神经节瘤是发生在副神经节的肿瘤,一般分布与副神经节的分布相当.肾上腺髓质是一种特殊的副神经节,故一般将肾上腺髓质发生的肿瘤称为嗜铬细胞瘤,而发生在肾上腺外的副神经节瘤称为肾上腺外副神经节瘤.副神经节瘤可分为交感神经副神经节瘤和副交感神经副神经节瘤两大类。

Jonathan I.Epstein教授是美国John Hopkins大学泌尿和肿瘤病理学系教授,是国际上著名的泌尿病理学专家.他曾于2005年出席在北京召开的第4届国际病理学会亚太会议并作大会发言,题目是"The diagnosis of limited adenocarcinoma of the prostate on needle biopsy",深受欢迎.这是他寄来的在最近前列腺癌Gleason分级讨论会上修订后的Gleason分级系统[1]以供中国同行参考。

"第三届全国部分省市临床-神经病理读片交流学术会议"2006年3月25、26日在复旦大学附属华山医院召开."全国部分省市临床神经病理读片交流学术会议"(以下简称临床-神经病理读片会)是由中华医学会神经病学分会神经病理学组于2004年年底筹划组织的。

目前,在病理切片上标记病理号最常用的方法是将病理号打印在不干胶标签上后,再贴于病理切片上.传统的打印方法是使用老式号码机,但由于号码机使用过久、所涂油墨不均及使用方法不当等因素,会导致打印的字迹不清,如"0、8、6、9、3"等数字极易混淆,造成"张冠李戴";而手写编号不适用于工作量大的单位,由于个人笔迹不同又影响美观,近年来,我们用计算机取代老式号码机在不干胶标签上打印病理号取得了良好的效果。

1.病例简介:患者男,31岁.间断性头痛3年,不伴有恶心、头晕,休息后可缓解.近3个月来,出现记忆力下降,睡眠差,心情烦躁.1 d前突然出现剧烈头痛,言语不流利,并出现呕吐,继而出现意识不清,于2004年1月4日入院。

1.病例简介:患者女,31岁.右胫前皮下结节5年,皮肤溃疡6个月于2004年12月24日入院.体检:右胫前皮肤可见4.0 cm×3.5 cm溃疡,色黑,覆有血痂和脓性分泌物,其周围结节状突起,皮肤红肿(图1),轻压痛.右腹股沟区触及直径2 cm的皮下结节,质韧,轻压痛,余未触及肿大淋巴结。

患者男,14岁.反复发作性四肢抽搐十余年.体检:左额及左眶周皮肤呈葡萄酒红色(图1).同侧面部可见数个黑色素细胞痣样病变.神经系统检查无明显阳性体征.CT扫描提示左侧顶枕部有迂曲脑回状钙化影(图2).因顽固性癫痫,在当地医院行大脑半球局部病灶切除术.术中见左顶枕部蛛网膜下-软脑膜大片迂曲细小血管网,左顶枕叶皮层质韧,内有大量坚硬的粉状钙化灶.于2005年7月来四川大学华西医院病理科会诊。

患儿男,8个月.因右下眼睑肿物5个月于2005年5月入院.患儿3个月时,偶然发现其右下眼睑有一绿豆大肿物,逐渐长大,且生长迅速.体检:右眼眶下部可见约6 cm×6 cm巨大肿物,突出于眼外,睑外翻,眼球移位,睑裂不能睁开,皮肤表面血管扩张,左眼未见异常。

例1女,56岁.因出现后背痛1个月就诊,背痛间断发作,有时较重,无喘憋、咳嗽、咳痰,无发热.胸部X光片提示右下肺高密度结节影,直径2.5 cm,边缘较光滑,界限清楚.CT提示右下肺紧靠胸壁处直径约2.5 cm结节(图1)。

患者男,66岁.自感头晕乏力、食欲不振1周,无恶心、呕吐,偶有左腰部不适感,遂于2005年1月2日来院就诊.患者自发病以来,持续低热、寒战,遂来院就诊,行血常规检查,红细胞:2.7×1012/L;血红蛋白:74.39g/L.腹部B超示:左肾上腺区探及一实性占位,形态不规则,边界清晰,大小为6.8 cm×5.7 cm,内呈均匀低回声,提示左肾上腺实性占位,对侧肾上腺正常;CT示:左肾上腺区可见一7.5 cm×5.8 cm大小的密度影(图1),边界较清,其内呈中等不均匀强化,肝脏、胰脏及脾脏均未见异常,腹膜后未见肿大淋巴结。

患者女,50岁.因间断右侧胸痛1个月余,于1991年7月24日入院.无咳嗽、咳痰、咯血,无发热,全身皮肤及淋巴结未见异常.胸片示:右肺3cm×4 cm孤立阴影,边缘毛刺样,肺门淋巴结未见肿大,而对比半年前胸片无异常.行右肺上叶肿物切除术,术中见右肺上叶后段3.0 cm×3.0 cm×2.5 cm肿物,部分与右肺中叶及胸壁粘连,似有浸润,予以手术切除。

例1男,68岁.进行性排尿困难4个月余,于2004年12月12日入院.入院检查会阴部可触及分叶状肿块12 cm×10 cm×5 cm,质硬且固定;术中发现肿块来源于前列腺.病理检查:分叶、结节状组织11.5 cm×10.0 cm×4.0cm,部分似有包膜,部分已切开,切面鱼肉状,质嫩.显微镜下肿瘤境界清,有较厚的纤维性包膜,肿瘤由富细胞区和细胞稀疏区组成.富细胞区肿瘤细胞呈束状或成簇状的小圆形、卵圆形细胞,部分区杂乱无章(图1).瘤细胞胞质少,核染色质均匀,核仁不明显,无核分裂象,部分区肿瘤血管丰富;细胞稀疏区含多量胶原纤维。

3例患者男性2例,女性1例,平均年龄57岁,均以腰痛不适于2004-2005年就诊,均未有合并结节性硬化症及其家族史,影像学诊断1例为脂肪瘤,另2例为肾癌,均行肾切除术,随访1～19个月均无复发转移。