2005年 · 第34卷第07期

目的 了解Ⅲ型胶原肾小球病的形态学改变,并对Ⅲ型胶原可能的细胞来源进行初步探讨.方法对3例肾活检组织进行光镜、免疫荧光、电镜和Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的免疫组织化学染色(SP法)观察.结果 2例患者临床表现为肾病综合征,其中1例伴高血压,第3例表现为肾功能不全和肾性高血压.3例均无肾病家族史.光镜检查可见肾小球基膜内和系膜区弥漫性过碘酸-希夫反应阳性物质沉积,系膜细胞无明显增生.电镜检查在基膜内疏松层和系膜区可见大量胶原纤维沉积,系膜细胞胞膜下平行排列的束状微丝明显增加.免疫组织化学显示这些胶原纤维为Ⅲ型胶原,Ⅰ型和Ⅳ型胶原阴性,同时系膜区多数系膜细胞α-SMA阳性.结论Ⅲ型胶原肾小球病光镜、电镜及免疫组织化学上都有其特殊的病理改变.肾小球内激活的系膜细胞可能是Ⅲ型胶原的来源。

目的 探讨胰腺黏液性非囊性腺癌的病理形态学特征和相关蛋白表达状态与生物学行为的关系.方法对249例胰腺外分泌癌中6例符合黏液性非囊性腺癌病例进行形态学观察,应用免疫组织化学EnVision法检测了p21ras、p21WAF1、p16、p33ING1、p53、ATM、MDM2、增殖细胞核抗原(PCNA)和细胞周期蛋白(Cy)D1、D3、A、B和E的表达,AB-PAS染色观察细胞内外黏液分布,同时对6例进行生存期随访.结果 6例全部位于胰头部位,4例有十二指肠浸润, 2例肝转移, 2例局部淋巴结转移,1例周围神经浸润, 具有相似的组织学特征.免疫组织化学染色阳性为p21ras 5例,p21WAF1 3例,p16 1例,p33ING1 4例,p53 2例,ATM 3例,MDM2 3例,PCNA6例,CyA 3例,CyD1 3例,CyD3 4例,CyB 4例,CyE 6例.AB-PAS染色见细胞内、外黏液分布.随访结果2例死亡(分别为术后14、20个月),3例存活(分别为28、49、87个月),1例失访.结论胰腺黏液性非囊性腺癌具有一些独特的病理形态学特征和生物学行为,肿瘤细胞存在多种肿瘤相关蛋白的改变和细胞周期蛋白的过表达,显示较差的生物学行为和较强的侵袭能力,但预后可能比普通导管腺癌好。

目的 检测巨噬细胞炎症蛋白1-α(MIP-1α)、解整合素样-金属蛋白酶(ADAM)8、12和CD68在颌骨巨细胞病变和长骨骨巨细胞瘤中的表达,探讨其在这两种巨细胞病变中的多核巨细胞发生中的作用.方法采用免疫组织化学SP法检测24例颌骨中心性巨细胞病变,24例长骨骨巨细胞瘤石蜡组织中的MIP-1α、ADAM8、ADAM12和CD68蛋白的表达.结果 MIP-1α在24例颌骨中心性巨细胞病变和24例长骨骨巨细胞瘤中的血管、类骨质和新骨形成区中强表达,而在多核巨细胞和圆形单核细胞中为阴性;ADAM8、ADAM12和CD68在颌骨中心性巨细胞肉芽肿和长骨骨巨细胞瘤中几乎所有多核巨细胞和部分圆形单核基质细胞均为阳性.结论颌骨中心性巨细胞病变和长骨骨巨细胞瘤中的多核巨细胞可能由CD68+的圆形单核基质细胞融合而成,这些圆形单核细胞可能是由骨微环境中的趋化因子,募集外周血中循环的单核细胞到病变局部分化而成的具有破骨细胞前体细胞性质的细胞,继而在某些融合蛋白作用下发生融合,成熟为多核破骨样巨细胞。

目的 探讨异位错构瘤性胸腺瘤的临床病理学特征、免疫学表型和组织发生.方法对2例异位错构瘤性胸腺瘤进行临床病理学分析,采用免疫组织化学LSAB法行AE1/AE3、细胞角蛋白(CK)5、CK7、CK8、CK20、上皮膜抗原(EMA)、波形蛋白、CD5、CD10、α-平滑肌肌动蛋白(SMA)、calponin、结蛋白、CD34、S-100蛋白、CD57、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、甲状腺转录因子(TTF)-1和CD99标记.结果两例均发生于男性,年龄分别为20岁和40岁,因发现胸骨柄上缘肿块6个月和左锁骨上肿块2个多月就诊.肿块呈球形和卵圆形,边界清楚,最大直径分别为5 cm和3 cm,切面呈灰白色,质地柔软.组织学上,肿瘤由梭形细胞、上皮细胞和成熟的脂肪细胞3种成分混合组成.梭形细胞成分在2例中分别占到85%和70%,形态上类似纤维母细胞,多呈束状、编织状或席纹状排列.上皮细胞成分在两例中均占10%左右,形态上以非角化性鳞状上皮为主,可呈实性的小岛屿状、类似造釉细胞瘤的条索状和扩张的囊肿样排列,部分区域显示腺样分化,可见腺管形成.上皮细胞和梭形细胞在形态上有移行.成熟的脂肪组织呈不规则性分布,在两例肿瘤中所占的比例分别为<5%和20%.免疫组织化学标记显示,上皮细胞表达AE1/AE3、CK5、CK7、CK8和EMA,梭形细胞除CK外还表达波形蛋白、CD10和CD34,并部分表达α-SMA和calponin .两种细胞成分均不表达CK20、CD5、TTF-1、结蛋白、S-100蛋白、CD57、GFAP和CD99.结论异位错构瘤性胸腺瘤是一种好发于中青年男性锁骨上和胸锁关节附近软组织内的良性肿瘤,是一种由上皮和肌上皮组成的混合性肿瘤,可能起自于His颈窦,采用鳃原基混合瘤来命名或许更为合适。

目的 探讨Bcl-XL反义寡核苷酸转染后,对食管癌细胞增殖及裸鼠体内人食管癌移植瘤生长的影响.方法采用阳离子脂质体介导的反义寡核苷酸转染、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western蛋白印迹杂交、四甲基偶氮唑盐光吸收法(MTT法)、流式细胞术及凋亡的原位末端标记(TUNEL)检测等方法观察了Bcl-XL反义寡核苷酸转染对食管癌细胞增殖、凋亡的影响及裸鼠体内人食管癌移植瘤生长的影响.结果 MTT法检测显示,Bcl-XL 反义寡核苷酸可显著抑制食管癌细胞的增殖(P<0.05);对Bcl-XL mRNA表达抑制率为57.3%,可显著下调Bcl-XL的蛋白表达;应用流式细胞术和TUNEL检测技术,反义寡核苷酸组的凋亡率分别为(31.1±5.8)%和35.0%,与相关对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).反义寡核苷酸组裸鼠体内人食管癌移植瘤的生长受到显著抑制(P<0.05).Bcl-XL mRNA及蛋白表达亦受到明显抑制,并且移植瘤组织中凋亡细胞明显增加.结论 Bcl-XL 反义寡核苷酸可有效抑制食管癌细胞增殖及裸鼠体内人食管癌移植瘤的生长.通过反义寡核苷酸下调Bcl-XL的表达,达到治疗食管癌的目的,为食管癌的基因治疗提供实验依据。

目的 研究TGF-β/Smad信号对人胚胎性横纹肌肉瘤细胞系RD生长和凋亡的调控作用.方法采用小分子RNA干扰(RNAi)技术,以阳离子脂质体为载体,将生物合成的发夹状短链RNA(shRNA)转染RD细胞,封闭Smad4的表达以阻碍内源性TGF-β/Smad信号的转导;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检验shRNA干扰Smad4表达的效果;采用免疫荧光化学,通过激光共聚焦显微镜检测Smad4封闭前后RD细胞中Smad2/3表达位置的变化;应用四甲基偶氮唑盐(MTT)和3H-thymidine摄入实验检测阻碍内源性TGF-β/Smad信号转导和以外源性TGF-β1刺激这2种条件下RD细胞的生长状况;采用流式细胞术和荧光化学染色检测上述2种条件下RD细胞的凋亡情况.结果 RNAi技术可有效封闭RD细胞中Smad4 mRNA和蛋白的表达;Smad4的封闭导致Smad2/3由胞质入核明显减少;内源性TGF-β/Smad信号转导受阻不但抑制RD细胞生长,并且诱导凋亡;外源性、较高浓度的TGF-β1可抑制RD细胞生长,但不诱导凋亡.结论 TGF-β/Smad信号在一定的浓度范围内精细调控RD细胞的生长和凋亡。

目的 探讨转化生长因子(TGF)-β1过表达对Smad4纯合性缺失的胰腺癌细胞生长的影响.方法将含TGF-β1的真核表达载体转染到人胰腺癌细胞BxPC3中,通过流式细胞仪、生长曲线以及细胞迁移试验观察其对BxPC3生物学行为的影响.用Western印迹法检测TGF-β1对BxPC3细胞中p21WAF/CLIP1表达的影响.结果转染TGF-β1基因的BxPC3细胞的形态发生明显改变,其生长速度自第4天开始较转染空载体pcDNA3的阴性对照组减慢.发现BxPC3细胞组S期细胞(27.53±0.02)%与pcDNA3组(26.32±0.01)%的比例均高于TGF-β1组(17.01±0.03)%,P<0.01,表明TGF-β1阻止细胞进入S期.细胞迁移试验表明转染的细胞运动能力明显增加.Western印迹法检测表明p21WAF/CLIP1的表达也相应增高.结论 TGF-β1的Smad4非依赖性途径通过增强p21WAF/CLIP1的表达使细胞阻滞于G0-G1期,从而抑制细胞生长,并且该通路能诱导上皮细胞向间叶细胞转变。

目的 观察醛糖还原酶(AR)基因转染对体外培养大鼠肾脏系膜细胞(MsC)增殖的影响,并对其机制进行初步探讨.方法脂质体转染法将AR基因转入大鼠MsC,蛋白印迹鉴定转染效率. 四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期与凋亡,对比正常MsC和AR转染MsC的生长速度及AR抑制剂(ARI)Sorbinil和Zopolrestat对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)和小牛血清(NBS)促MsC增殖作用的影响.蛋白印迹检测PDGF-BB作用后AR和c-Jun表达的变化,EMSA检测转录因子AP-1的活性.结果 (1) 转染MsC AR表达较正常MsC明显增高;(2) AR转染MsC较正常MsC生长速度快(P<0.01);(3) ARI可部分抑制PDGF-BB对正常MsC、AR转染MsC 以及NBS对AR转染MsC的促增殖作用(P<0.01,P<0.05),而对NBS促正常MsC的增殖无显著影响;(4) PDGF-BB刺激MsC后可上调AR和c-Jun蛋白的表达,ARI可减弱c-Jun的这种表达增高;(5) PDGF-BB可活化转录因子AP-1,而ARI可削弱此作用.结论 AR可能参与了MsC在病理情况下的过度增殖过程,其作用机制与AP-1活化有一定关系。

目的 用含有编码人乳头状瘤病毒(HPV)16L1和HPV16L1病毒样颗粒(VLP)蛋白联合免疫小鼠,与用HPV16L1重组表达质粒比较,观察VLP蛋白免疫对免疫小鼠产生抗体的增强作用,以及抗体的体外中和作用,寻找研制HPV16感染的预防性疫苗的有效途径.方法将C57BL/6小鼠,随机分为4组:Ⅰ组:pcDNA-L1(100 μl/鼠), Ⅱ组:pcDNA-L1(70 μl /鼠)+HPV16L1 VLP,Ⅲ组:pcDNA3.1(100 μl/鼠)空质粒,Ⅳ组:PBS缓冲液.质粒免疫3次,间隔3周.ELISA法检测其血清抗体,红细胞凝集实验和HPV16病毒样颗粒结合抑制实验体外检测抗体的中和活性.结果pcDNA-L1+ HPV16L1 VLP较pcDNA-L1免疫组,3次免疫后的抗体水平均增高,尤其以第2次和第3次免疫后的抗体水平增加更显著.pcDNA-L1+ HPV16L1 VLP联合免疫组血清的抑制活性高于pcDNA-L1免疫组,且HeLa细胞结合抑制实验染色呈阴性.结论 HPV16L1 VLP联合免疫可以增加目的抗原的中和抗体产生,可能是HPV16有效预防性疫苗研制的更有希望的策略。

单核细胞迁入动脉内皮下间隙是动脉粥样硬化(AS)发生的早期事件[1].巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)对单核细胞有趋化作用.高同型半胱氨酸血症是AS的一个独立危险因子[2].我们观察同型半胱氨酸(HCY)是否诱导培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达MIP-1α,探讨HCY在AS形成中的作用。

Ko等[1]对7例鼻型NK/T细胞淋巴瘤进行了比较基因组杂交和杂合性缺失分析,发现在染色体2q、3q、5q、10q、13q、17q和21q等处有DNA拷贝数增加;而在1p、17p、6q、12q和13q有基因缺失.Oka等[2]对NK/T细胞淋巴瘤细胞系NK-YS作了初步的基因芯片检测,发现蛋白酪氨酸蛋白磷酸酶SHP-1基因表达下调.本研究旨在初步筛选和观察部分肿瘤相关基因差异性表达的情况。

关于多器官功能障碍综合征(MODS)的发病机制,一般认为免疫系统的调节和制约是重要因素[1].树突状细胞是近年被认识到的一种极其重要的免疫辅助细胞,在启动免疫应答反应与调控细胞免疫功能方面具有关键作用[2,3].以往我们[4]经研究认识到树突状细胞参与了MODS免疫系统损伤的启动机制,是引发免疫功能紊乱和免疫抑制的重要始动因素.在此基础上,拟研究脾脏树突状细胞在MODS病程中的病变特点与意义。

Mahogany一词首先被用作描写Agouti小鼠基因变异所引起的毛发颜色的改变现象[1].定位克隆Mahogany小鼠的变异基因,发现它们是一个由1428个氨基酸组成的富含胱氨酸的Ⅰ型跨膜蛋白[2,3],具有较大的细胞外微区、跨膜微区和较小的细胞内微区,小鼠、果蝇和蠕虫的吸引素结构非常相似(图1).细胞外微区具有轴突诱导和细胞黏附分子的特征;目前我们还不了解细胞内微区的具体功能.Duke-Cohan等[4]在人体血浆内发现和Mahogany细胞外微区相似的分泌性糖蛋白,在体外能"attract"激活的T淋巴细胞向单核细胞运动,因而称为吸引素(attractin,Atrn)。

随着肿瘤和心血管疾病发病率的攀升,人们对内皮系统给予了极大的关注,逐步揭示了内皮系统所具有的许多生命所必需的调节和效应功能.不同组织的内皮系统从结构到分子表型都具有不均一性,尤其是代谢能力强和功能差异大的器官之间,比如脑、肺、肝、肾等,即使在同一组织中内皮细胞也有很大的异质性.这为我们提出的问题是,内皮细胞的组织特异性是如何表现的?内皮细胞是否仍具有可塑性?其生物学意义是什么?及其与疾病的关系等等.最近,Oh等[1]以差减蛋白质组学方法研究脑、心、肺、肝、肾等多种组织的内皮细胞膜,发现了正常肺内皮细胞特异性分子氨基肽酶P及实体瘤内皮细胞特异性分子annexin A1,并应用前者作为正常肺组织的影像诊断分子鉴别诊断肺部肿瘤,而以后者为靶标成功地实施了免疫靶向放射治疗.这提醒我们对内皮系统的生物学认识必须要有全新的概念。

许多国家防癌普查结果证实,用巴氏涂片作为宫颈癌的筛查方法可使宫颈癌死亡率明显下降[1].然而,由于受取材方法、涂片制作、染色技巧、阅片水平等因素影响,导致巴氏细胞学方法假阴性率达15%～40%[2].巴氏方法与其他常规细胞病理学诊断方法一样,对宫颈癌前病变的发展趋向无法进行预测评估[3].但近十年来有许多新的宫颈癌筛查和诊断方法不断地产生和发展,如阴道镜、组织学荧光分光镜、HPV-DNA检测[4]以及细胞DNA定量分析方法等[5].本文着重介绍DNA倍体分析系统在宫颈癌早期诊断及对癌前病变的发展趋向评估中的作用。

在传统痰涂片的制作中,往往由于痰液中含有大量的黏液,而造成涂片厚薄不均匀,细胞量的多少不易控制.近年推广的液基薄片克服了传统制片的不足.特别是在妇科宫颈细胞学的检测上,明确提高了癌前病变的检出率.液基薄片还被广泛地应用在其他领域,包括痰液、尿液、胸腹水、脑脊液、支气管灌洗液以及各种细针穿刺样本的制作.为比较其制片是否优于传统涂片,并更有利于病变的诊断,我们采用传统涂片和液基薄片两种方法处理样本,以分析二者在肺癌检出率及诊断准确率上是否存在差异,以及出现差异的可能原因。

1. 病例简介:患者男,70岁,偶然发现右腋下无痛性肿物3年,逐渐增大.于1997年10月24日入院.体检:右腋下肿物10 cm×10 cm×4 cm,无触痛.质软,部分坚实,可活动.全身其余部位浅表淋巴结未扪及.肝脾肋下未及.实验室及影像学检查均未见异常.临床诊断:脂肪瘤.行肿物手术切除。

如果将病理科比做一个企业,其产品就是病理报告单,对其基本要求是准确和及时.这看起来简单,但关键是如何才能做到.因此,临床病理科最重要的职责,就是建立一整套系统的措施和方法,来保证科室人员能够做到这点,即质量保证。

患者男,45岁.主因"无明显诱因左眼视力下降半年,视力丧失",于2004年6月3日入我院.曾在当地按"视盘血管炎"给予对症治疗,无明显疗效.体检:左眼视力无光感.眼球突出度:右眼15 mm,左眼15 mm.眶距105 mm.眼球运动、眼压及眼前节检查正常.直接光反射消失,间接光反射存在.眼底检查:视盘水肿,色淡,视盘上方少许渗出,黄斑中心反射消失.标准化A/B超、CT、MRI检查显示左视神经增粗,视神经内中部可见一圆形占位病变.临床诊断:左视神经增粗原因待查,视神经内肿物?入院后全身检查未见异常.患者于全麻下行左外侧开眶术,术中见视神经增粗,包膜光滑.切开鞘膜有透明清亮液体溢出,直视下切除球后视神经约2 cm,常规骨瓣固定,缝合。

患者女,28岁.因眼睑下垂伴复视3个月入院.查体:右眼睑下垂.CT扫描示右胸腺增生,入院诊断为重症肌无力(眼型).于2004年5月9日行纵隔肿块切除术,术中见胸腺明显增生,与右侧胸膜稍粘连。

患者女,63岁.因胸闷不适半个月,体检发现左肺肿物于2004年7月18日收入院.入院检查:左肺呼吸音低,X线示左肺呈一致性密度增高影;CT示左胸腔内巨大混杂密度肿块影,边界清,左肺容积缩小,左舌叶见片状密度增高影,边界模糊.术中所见:肿瘤位于中纵隔,突向左胸腔,形状不规则,包膜完整,质韧,左肺组织受压,部分肺不张,且有部分肿瘤滋养血管来源于上、下肺叶脏层胸膜,肿瘤与肺组织无粘连,肿瘤切除后受压肺组织通气良好。

患者女,33岁,G2P1.因"剖宫产术后5个月,阴道淋漓流血1个月,发现盆腔包块3天"于2004年7月20日入院.1个月前(2004年6月18日)开始阴道少量流血,量少,黑色,持续至今.B超检查发现子宫右方囊实性包块,近2 d出现右下腹坠胀感,拟诊为盆腔包块(宫外孕?)而入院.妇科检查:外阴、阴道少许血迹,子宫后方可及直径14 cm囊实性包块,边界不清,压痛不明显。

患者男,15岁.因间断全身水肿、泡沫尿1年半,近来加重并伴肉眼血尿1个月,于2004年5月18日入住我院.入院前1年半出现全身皮疹,伴低热,患者诊为风疹,就诊时发现尿常规尿蛋白2+,潜血2+,给予青霉素治疗,1周后皮疹消退,但出现全身水肿,尿中泡沫增多,在当地医院诊为慢性肾小球肾炎,服中药治疗.此后,每于上感后水肿加重,尿常规尿蛋白波动于2+～3+,潜血2+～3+.近1年体重增加10 kg,血压升高,波动于140/90～165/105 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa).入院前1个月无明显诱因出现肉眼血尿,水肿、泡沫尿加重,无明显少尿,无尿疼、尿急、尿频,无黑便。

患者女,61岁.发现右乳肿块3 d于2004年8月7日入院.体检:右乳内下3 cm×3 cm肿块,质硬,边界欠清,活动度欠佳,与胸壁无粘连,临床诊断为右乳腺癌,行肿块切除术,术中冷冻快速诊断为"梭形细胞肿瘤,梭形细胞癌与纤维瘤难以鉴别,请等石蜡及酶标确诊".石蜡切片诊断为右乳低度恶性(纤维瘤病样)梭形细胞癌,于术后8 d行右乳改良根治,乳腺标本内未见肿瘤残留,乳头未见肿瘤累及,右腋下淋巴结未见肿瘤转移。