2008年 · 第43卷第05期

目的 探讨光谱核型分析(SKY)技术在标记染色体诊断中的应用价值.方法 选取临床工作中未能确诊的6个标记染色体病例(包括外周血标本4例和羊水、脐血产前诊断标本各1例),其中4例是为诊断目的 ,2例是为产前诊断目的 .按SKY技术操作常规进行制片杂交,通过相应的计算机软件分析结果.应用荧光原位杂交(FISH)对SKY技术分析结果行进一步鉴定;并应用C显带技术对染色体的异染色质成分进行辅助诊断.结果 6个标记染色体病例均成功地进行了SKY技术分析,并明确了标记染色体的来源;除病例4外,其他5个病例的FISH鉴定结果均与SKY技术分析结果相符.在明确诊断的2例产前诊断病例中,1例属家族遗传性的标记染色体病例,因而继续妊娠,至足月顺产一女婴,产后随访至今,女婴生长发育未见异常;而另1例属新发生的标记染色体病例,因而于孕25周时终止妊娠.结论 SKY技术可以快速、直观和准确地诊断不明来源的标记染色体。

目的 探讨脂氧素对子痫前期患者巨噬细胞增殖和分泌功能的影响.方法 对温州医学院附属第一医院产科2007年3-7月收治的24例子痫前期孕妇(子痫前期组)和24例正常孕妇(正常妊娠组)的腹腔巨噬细胞进行体外培养.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定不同浓度脂氧素(0、10、100 nmol/L)作用两组孕妇腹腔巨噬细胞48 h后,上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平.用细胞生长抑制实验法检测两组不同浓度脂氧素(0、10、100 nmol/L)作用24 h后的巨噬细胞增殖抑制率.结果 (1)TNF-α水平:子痫前期组0、10、100 nmol/L浓度的脂氧素作用下,TNF-α水平分别为(1867.5±47.3)、(1836.9±4.5)、(1800.5±2.7)ng/L.正常妊娠组0、10、100 nmol/L浓度的脂氧素作用下,TNF-α水平分别为(791.3±62.2)、(789.4±2.3)、(781.5±1.9)ng/L.子痫前期组TNF-α水平显著高于正常妊娠组,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).脂氧素对子痫前期组TNF-α水平的影响呈剂量依赖性抑制(P＜0.05),而其对正常妊娠组TNF-α水平变化无明显影响(P＞0.05).(2)增殖抑制率:子痫前期组0、10、100 nmol/L浓度的脂氧素作用下,增殖抑制率分别为(14.8±6.3)%、(32.9±3.6)%、(36.7±3.8)%.正常妊娠组0、10、100 nmol/L浓度的脂氧素作用下,增殖抑制率分别为(16.8±6.9)%、(16.7±5.4)%、(15.9±2.1)%.子痫前期组增殖抑制率比正常妊娠组明显升高,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),脂氧素呈剂量依赖性抑制子痫前期组孕妇腹腔巨噬细胞的增殖抑制率(P＜0.05),而对正常妊娠组的增殖抑制率则无明显影响(P＞0.05).结论 脂氧素呈剂量依赖性地抑制子痫前期患者的巨噬细胞增殖和TNF-α分泌。

目的 探讨拉米夫定干预孕期乙型肝炎病毒(HBV)DNA载量变化对HBV母婴垂直传播的影响.方法 40例HBV DNA阳性孕妇采用双盲对照法分为观察组(20例)及对照组(20例),孕28周起至产后1周,观察组每日1次口服拉米夫定(片剂)100 mg,对照组则口服与拉米夫定相同形状的食物片剂(安慰剂)1粒.分别于孕28周和40周时检测两组孕妇血清HBV DNA定量.新生儿出生后按乙型肝炎免疫程序接种重组酵母乙型肝炎疫苗,追踪随访婴儿12个月并检测其血清HBV DNA和HBsAg、HBeAg、抗-HBs定量.结果 (1)孕28周时血清HBV DNA载量:观察组为(3.6±2.5)copy/ml,对照组为(2.9±2.0)copy/ml.两组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).(2)孕40周时血清HBV DNA载量:观察组为(1.8±1.1)copy/ml,对照组为(3.6±1.8)copy/ml.两组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).观察组孕28周与40周(即用药前后)比较,差异有统计学意义(P＜0.01);对照组孕28周与40周比较,差异无统计学意义(P＞0.05).(3)两组孕妇共分娩41例新生儿,其中观察组20例,对照组21例.随访婴儿12个月结束时,有2例失访(5%,2/41).39例婴儿中感染HBV 4例(10%,4/39),其中观察组2例(10%,2/20),对照组2例(11%,2/19)(P＞0.05).(4)4例感染HBV婴儿的母亲在孕28、40周时,血清HBV DNA定量分别为(3.1±3.4)、(3.1±3.2)copy/ml,未感染HBV婴儿的母亲在孕28、40周时分别为(3.4±2.2)、(2.6±1.5)copy/ml.(5)观察组抗-HBs平均为(594±416)U/L,对照组平均为(458±398)U/L,两组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 在孕期给予拉米夫定进行干预,孕妇血清HBV DNA载量可明显下降,但拉米夫定并没有降低乙型肝炎感染例数。

目的 探讨多个超声指标用于产前诊断胎儿肺发育不良的临床价值.方法 应用彩色多普勒超声诊断仪,检查271例正常胎儿,建立5个超声指标(肺面积、肺面积与胎儿质量比、胸围与腹围比、肺面积与胸廓面积比、肺面积与头围比)的正常值范围,以低于正常范围二倍标准差为肺发育不良胎儿判断标准.通过对30例肺发育不良高危胎儿的研究,并与尸体解剖及追踪结果对照,比较各超声指标的临床价值.结果 肺面积及肺面积与头围比随孕周增加而增加,肺面积与胎儿质量比随孕周增加而减少,胸围与腹围比、肺面积与胸廓面积比随孕周增加变化较小.肺面积、肺面积与胎儿质量比、胸围与腹围比、肺面积与胸廓面积比、肺面积与头围比用于产前诊断胎儿肺发育不良的准确率分别为83%、97%、50%、70%、87%.肺面积与胎儿质量比诊断准确率最高,灵敏度为95%(20/21),特异度为9/9,阳性预测值为100%(20/20).结论 肺面积与胎儿质量比能较好地预测致死性肺发育不良,具有临床实用性。

目的 探讨子宫内膜异位症(内异症)患者腹腔液中正常T淋巴细胞表达和分泌调节活化因子(RANTES)分泌水平的变化及其对单核巨噬细胞趋化的影响.方法 建立内异症异位病灶主要细胞--子宫内膜基质细胞(ESC)、腹膜间皮细胞(HPMC)及单核巨噬细胞系U937不同组合的直接接触(E-H-U、E-H、E-U、H-U)及间接接触共培养体系(U/E-H、H/E-U、E/H-U),然后收集共培养上清液,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测RANTES分泌水平的变化.利用趋化实验观察ESC、HPMC及ESC-HPMC共培养对单核巨噬细胞的趋化作用.结果 ESC、HPMC、U937单独培养时,RANTES的分泌水平分别为(5.0±0.5)、(4.0±0.3)、(254±40)ng/L;与单独培养比较,共培养明显促进RANTES的分泌,其中E-H-U培养为(2250±96) ng/L,E-U培养为(243±192) ng/L,H-U培养为(1251±73) ng/L,E-H培养为(50±40) ng/L,3种细胞直接共培养较两种细胞直接共培养时,RANTES分泌水平明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01);间接共培养时,RANTES的分泌水平分别为(1519±96) ng/L(E/H-U培养)、(912±93) ng/L(U/E-H培养)、(1201±93)ng/L(H/E-U培养).ESC、HPMC及ESC-HPMC共培养可促进单核巨噬细胞的趋化,迁移细胞数分别为(6.0±0.3)、(6.2±0.3)、(10.0±0.3)×103个.结论 内异症病灶主要细胞间存在着复杂的相互作用机制,并可促进趋化因子RANTES的分泌,从而促进腹腔内单核巨噬细胞的趋化和募集。

目的 研究神经肽Y(NPY)及其受体NPY-Y1、Y2在盆腔器官脱垂(POP)患者主韧带和宫骶韧带上的分布、表达及意义.方法 选择POP患者16例,按盆腔器官脱垂定量(POP-Q)分度法分度,其中POP-Q分度法为Ⅰ、Ⅱ度者6例为A组,Ⅲ、Ⅳ度者10例为B组.选择无POP的卵巢非功能性肿瘤患者8例作为对照组.标本取自主韧带、宫骶韧带,经甲醛固定、石蜡包埋后切片,采用免疫组化法检测NPY的分布;采用RT-PCR技术检测NPY-Y1和Y2 mRNA的表达.结果 (1)NPY在主韧带、宫骶韧带上均有分布.与对照组比较,NPY在POP患者的主韧带和宫骶韧带上的分布有减少的趋势,但3组间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);NPY在各组患者自身主韧带和宫骶韧带上的分布情况比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).(2)NPY-Y1和Y2 mRNA在主韧带、宫骶韧带中均有表达,并检测到NPY-Y1中97 bp的剪切变异体存在.(3)NPY-Y1 mRNA在主韧带上的表达,A组(3.9±1.0)与B组(6.0±1.5)之间,以及B组与对照组(3.4±0.9)之间比较,差异均有统计学意义(P=0.019,P=0.004);A组与对照组之间比较,差异无统计学意义(P=0.082).NPY-Y1 mRNA在宫骶韧带上的表达,A组(6.0±1.1)与B组(6.3±0.7)之间,以及A组与对照组(4.8±0.7)之间分别比较,差异均无统计学意义(P=0.151,P=0.690);B组与对照之间比较,差异有统计学意义(P=0.016).(4)NPY-Y2 mRNA在主韧带和宫骶韧带上的表达,A组(分别为0.56±0.21、0.67±0.13)、B组(分别为0.85±0.43、0.69±0.21)、对照组(分别为0.49±0.34、0.61±0.15)3组之间分别比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).(5)NPY-Y1、Y2 mRNA在各组患者自身主韧带与宫骶韧带上的表达比较,差异均无统计学意义(P=0.084,P=0.470).结论 NPY及其受体在子宫主韧带及宫骶韧带上均有表达;NPY-Y1在主韧带及宫骶韧带上的表达水平显著升高,可能与局部血流减少、主要支持组织结构改变相关。

目的 探讨自然流产胚胎组织中人类纺锤体有丝分裂俘获缺陷(hsMAD)2基因的表达,以及hsMAD2基因表达降低与染色体数目异常的相关性.方法 采集2006年3月至2007年3月重庆医科大学附属第一、第二医院妇产科自然流产患者的胚胎组织标本33份,其中流产1次者23份,流产2次及以上者10份;同时采集人工流产患者的胚胎组织标本35份.采用FQ-PCR和蛋白印迹法检测自然流产和人工流产胚胎组织中hsMAD2基因的mRNA和蛋白表达水平;原代培养人工流产胚胎组织并经染色体分析筛选出5例具有正常核型的胚胎细胞,构建hsMAD2基因的短发夹RNA(shRNA)表达载体,转染筛选出来的胚胎细胞以抑制其内源性hsMAD2基因的表达,将细胞分为实验1组(转染重组干扰质粒pshRNA-hsMAD2-1)、实验2组(转染pshRNA-hsMAD2-2)、实验3组(转染pshRNA-hsMAD2-3)、对照1组(未做任何处理)、对照2组(转染pTZU6+1干扰质粒空载体)、无关对照组(转染pshRNA-N1).用蛋白印迹法和定量PCR技术评价shRNA的干扰效果,四甲基偶氮唑蓝比色法测定胚胎细胞增殖抑制率,流式细胞技术检测胚胎细胞周期的分布,并计算染色体数目的 变化.结果 (1)自然流产1次者、自然流产2次及以上者、人工流产者的胚胎组织中hsMAD2基因mRNA的表达量分别为0.00879±0.00035、0.00901±0.00033、0.00941±0.00026,3者分别比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);hsMAD2蛋白的表达量分别为0.2791±0.0311、0.0431±0.0020、0.5790±0.0331,3者分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).(2)shRNA的重组质粒表达载体能明显抑制胚胎细胞中hsMAD2基因的表达,转染有效干扰质粒后,实验1组胚胎细胞的增殖抑制率为54%,分别与对照1组(4%)、对照2组(3%)比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);G2/M期细胞比例实验1组为17.9%,与对照1组(8.2%)、对照2组(8.0%)比较均明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);实验1组染色体异常率平均值为30.0%,与对照1组(4.8%)比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 hsMAD2基因的表达下调可能是导致患者染色体数目异常、胚胎发育异常乃至自然流产发生的重要原因之一。

目的 探讨子宫内膜癌卵巢转移的危险因素及手术中保留卵巢的可行性.方法 回顾性分析1997年1月至2006年12月在江西省妇幼保健院首治为手术治疗的638例子宫内膜癌患者的临床病理资料.结果 36例(5.6%,36/638)患者发生卵巢转移.单因素分析显示,子宫内膜癌卵巢转移的相关因素为病理类型、病理分级、子宫肌层浸润、腹水或腹腔冲洗液细胞学检查阳性、盆腔淋巴结转移、宫旁浸润、腹主动脉旁淋巴结转移、子宫浆膜浸润(P均＜0.05),而年龄、脉管浸润、宫颈浸润与卵巢转移无明显相关性(P均＞0.05).多因素分析显示,子宫内膜癌卵巢转移的独立危险因素按危险强度排列为:盆腔淋巴结转移、腹水或腹腔冲洗液细胞学检查阳性、病理分级.结论 子宫内膜样腺癌、细胞高分化、无盆腔淋巴结转移、无腹主动脉旁淋巴结转移、元肌层浸润、腹水或腹腔冲洗液细胞学检查阴性、年轻的患者可考虑手术中保留卵巢。

目的 探讨2-脱氧葡萄糖(2DG)诱导葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达上调对宫内窘迫胎鼠的脑神经元凋亡及内质网一线粒体联合作用的影响.方法 (1)建立胎鼠宫内窘迫模型后随机分为正常组(10只)、缺血缺氧再灌注组(40只,再灌注3 h、6 h、12 h、24 h)及治疗组(40只,宫内窘迫模型制备成功后即刻腹腔注射2DG 100 mg/kg体重,再灌注3 h、6 h、12 h、24 h).(2)采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸标记(TUNEL)法检测胎鼠脑神经元凋亡情况及2DG对其的影响;蛋白印迹(western blot)法检测GRP78、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)9、12及细胞色素C蛋白的表达水平,观察其与胎鼠脑神经元凋亡的关系及2DG对其的影响.结果 (1)正常组胎鼠阳性细胞数为(4.3±1.8)个/mm2;GRP78、caspase-9、-12、细胞色素C蛋白表达水平分别为0.012±0.003、0.004±0.003、0.006±0.002、0.012±0.005.(2)缺血再灌注组胎鼠再灌注3 h、6 h、12 h、24 h的阳性细胞数分别为(43.6±11.4)、(64.4±9.3)、(74.2±12.1)及(97.3±8.9)个/mm2,与正常组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);GRP78蛋白表达水平分别为0.092±0.008、0.078±0.006、0.054±0.009、0.038±0.007,细胞色素C蛋白表达水平分别为0.040±0.006、0.076±0.009、0.108±0.005、0.089±0.008,caspase-9蛋白表达水平分别为0.042±0.003、0.086±0.007、0.142±0.006、0.112±0.009,caspase-12蛋白表达水平分别为0.076±0.006、0.113±0.010、0.125±0.005、0.057±0.008,均明显高于正常组(P＜0.05).(3)治疗组再灌注3 h、6 h、12 h、24 h的阳性细胞数分别为(19.4±10.6)、(26.4±12.3)、(39.3±13.3)及(49.3±13.6)个/mm2,与缺血再灌注组各时间点比较虽明显减少,但仍高于正常组(P＜0.05);GRP78蛋白表达水平分别为0.158±0.012、0.175±0.005、0.125±0.013、0.079±0.004,与缺血再灌注组各时间点及正常组比较,均明显升高(P＜0.05);细胞色素C蛋白表达水平分别为0.026±0.002、0.042±0.008、0.062±0.007、0.045±0.004,caspase-9蛋白表达水平分别为0.033±0.002、0.063±0.005、0.092±0.005、0.068±0.008,caspase-12蛋白表达水平分别为0.061±0.004、0.068±0.009、0.072±0.007、0.054±0.005,与缺血再灌注组各时间点比较虽然均明显减少,但仍高于正常组(P＜0.05).结论 内质网和线粒体共同参与了宫内窘迫胎鼠脑神经元凋亡进程.2DG通过诱导GRP78表达的上调对抗了内质网应激导致的细胞损害,对宫内窘迫胎鼠脑神经元具有良好的保护作用。

目的 研究抑癌基因WWOX对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞生长的影响,寻求卵巢癌基因治疗的新途径.方法 将携有WWOX基因的真核表达载体体外转染卵巢癌细胞系HO8910细胞(重组质粒组),筛选稳定转染的细胞并扩增培养,以转染空载质粒(空质粒组)及未经转染(空白对照组)的HO8910细胞作为对照,用蛋白印迹法检测重组质粒组细胞中WWOX蛋白的表达情况.体外实验:分别用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、体外侵袭实验、琼脂克隆形成实验及流式细胞仪等分析WWOX基因对HO8910细胞生物学活性的影响.体内实验:将转染细胞接种于BALB/c裸鼠腹腔,观察裸鼠生存时间和肿瘤生长情况.结果 (1)重组质粒组细胞中WWOX蛋白能稳定表达,空质粒组及空白对照组细胞未检测到WWOX蛋白的表达.(2)MTT比色法检测显示,重组质粒组各时间点的细胞增殖能力较空质粒组及空白对照组明显下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).(3)重组质粒组细胞的琼脂克隆形成率(19.8%)明显低于空质粒组(54.5%)及空白对照组(56.0%),差异有统计学意义(P＜0.05).(4)流式细胞仪检测显示,重组质粒组中(72.08±0.39)%的细胞被阻滞于G0/G1期,分别与空质粒组[(41.02±1.08)%]及空白对照组[(39.31±0.67)%]比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).(5)体外侵袭实验显示,重组质粒组穿膜细胞数为(89.7±3.1)个,分别与空质粒组[(91.2±1.3)个]及空白对照组[(91.4±1.3)个]比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).(6)裸鼠体内实验表明,重组质粒组裸鼠体内的成瘤能力(包括转移灶数目、转移灶重量及移植瘤最大直径、腹水量)明显低于空质粒组及空白对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 抑癌基因WWOX可干扰卵巢癌细胞的细胞周期并抑制其生长增殖,可为卵巢癌的基因治疗提供一种新方法。

子痫前期是妊娠期特有的原因不明的多系统疾病,也是造成胎儿生长受限(FGR)的主要原因之一。

子宫内膜异位症(内异症)是育龄期妇女的常见病和多发病,病因学涉及遗传、免疫、内分泌等多种因素.内异症患者腹腔液中巨噬细胞显著增多,并产生大量的细胞因子,如白细胞介素(interleukin,IL)6等,共同参与内异症的发生、发展。

女性下泌尿道功能障碍临床表现多样,尿失禁是其主要临床表现之一.美国15-64岁妇女中,尿失禁的患病率为2%～46%[1],严重影响患者的生活质量,女性尿失禁主要分为急迫性尿失禁(urge urinary incontinence,UUI)、压力性尿失禁(stress urinary incontinence,SUI)、混合性尿失禁(max urinary incontinence,MUI)和充溢性尿失禁(overflow urinary incontinence,OUI)。

有丝分裂激酶aurora-A是近年发现调节有丝分裂和细胞周期的丝氨酸/苏氨酸激酶家族成员之一,已被证实是一种新的癌基因[1]。

宫颈癌是严重威胁妇女健康的主要疾病之一,全世界每年大约有50万宫颈癌新发病例,死亡20万;我国每年新发病例13.15万,约占全世界宫颈癌新发病例的28.8%,居我国妇女生殖道恶性肿瘤的第1位[1]。

对于中晚期宫颈癌患者,放疗是主要的治疗方法.但如何进一步提高中晚期宫颈癌的放疗效果,是一个亟待解决的问题。

全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)作为一经典的细胞诱导分化剂,一方面可诱导某些肿瘤细胞向高分化甚至良性化方向转化,使肿瘤细胞的恶性程度降低;另一方面它几乎没有化疗药物的细胞毒作用,因而设想在临床应用中可能既有减缓肿瘤进展,又有降低骨髓抑制的优点。

人端粒酶由RNA模板(hTR)、相关蛋白(hTP)和人端粒酶逆转录酶亚基(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)组成,其中hTERT是端粒酶激活的关键限速步骤。

人工终止妊娠对妇女生殖健康所造成的潜在危害日益受到普遍关注.流产后妇女的生育能力可迅速恢复,为避免再次非意愿妊娠,落实避孕措施极为重要[1]。

患者70岁,腹胀伴尿频1个月于2004年10月15日入院.患者入院前1个月自觉腹部憋胀,饭后更加明显,伴尿频,夜尿4～5次,无尿痛、腹痛,大便无明显改变,无明显咳嗽、咯血。

患者 25岁,原发闭经,人工周期治疗6年.患者无营养缺乏、外伤、手术及青春期阵发生腹痛史。

患者56岁,2005年1月24日因绝经6年后阴道出血2个月入院.妇科检查发现子宫如孕3个月大小,双侧附件区未扪及明显包块.盆腔MRI显示宫腔内占位性病灶,双侧附件区未见明显肿块。

上世纪70年代开始应用细胞遗传学染色体核型分析技术进行产前诊断,应用这一方法诊断妊娠期胎儿染色体数目及结构异常,即对绒毛、羊水、脐带血细胞进行培养而获取染色体,经分带、染色后在光学显微镜下分析染色体数目及结构从而得出诊断,但整个过程需要细胞培养,故产前诊断所需的时间较长,从取材到诊断大约2周左右。

子宫内膜癌为女性三大恶性肿瘤之一,其发病率在世界范围内逐年升高,虽然大多数发生在绝经后妇女,但是绝经前发病者仍占20%～25%,特别是年龄＜40岁的女性占2%～15%[1-5]。

临床工作的无瘤操作是妇科肿瘤医师的基本功和医师素质的表现[1],在临床处理和常规手术中看起来极为普通的事,往往却被忽视。

激素治疗是针对女性因卵巢功能衰退、性激素分泌不足所致的健康问题而采用的临床医疗措施,应在有适应证而无禁忌证的情况下应用。

引用参考文献是反映论文的科学性及学术水平的重要依据，也是作者尊重他人研究成果的体现，并可向读者进一步提供有关信息。作者引用的参考文献应限于其亲自阅读过的、主要的、发表于正式出版物的原始文献。 现在部分作者有一种不良习惯：撰写论文、综述等时，只引用国外文献（或非中文语种的文献），似乎很流行、很时髦。诚然，在医学的许多研究领域，国内的研究水平确实有待提高，有引用国外文献的必要。但是，不引用国内相关文献，起码存在以下问题：

达英-35（复方醋酸环丙孕酮片）是口服避孕药物之一，其主要成分为2mg醋酸环丙孕酮和35μg乙炔雌二醇，化学名称为复方醋酸环丙孕酮片，是目前惟一具有治疗高雄激素血症适应证的口服避孕药。达英-35有独特的多环节抗雄激素作用，可显著改善多囊卵巢综合征（PCOS）患者的多毛、痤疮等症状。在中华医学会妇产科学分会内分泌学组制定的PCOS诊治规范中，达英-35被选定为治疗PCOS高雄激素血症的首选药物。