2008年 · 第88卷第24期

男性生殖健康是指男性生殖系统发育及其功能状态在生理、心理和社会等方面的健康状态,这是近年来国际社会日益关注和倡导的理念,而这一切赖于男性生殖医学的发展,尤其是基础研究领域的进展,生殖医学基础性研究是合理治疗男科疾病的前提和保障。

过去的50多年,随着对造血干细胞特性、移植免疫及人类白细胞抗原(human leucocyte antigen,HLA)配型等基础研究的不断深入,以及新的免疫抑制剂、抗感染药物的出现和综合治疗能力的提高,造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)从最初的一项作为终末期患者的挽救措施,逐步发展成为一个完整的治疗体系。

目的 建立用无精子症患者精液进行Y染色体微缺失检查的简便方法,并用于检测我国无精子症患者Y染色体微缺失的发生情况和位点.方法 无精子症患者241例,取精液标本(其中51例有血液标本),45例正常精液标本作为对照,快速裂解提取DNA,用4组多重PCR检测分布于AZFa、AZFb、AZFc区共15个序列标签位点(STS)的缺失.PCR产物测序证实无精子症患者精液为模板扩增的准确性,琼脂糖凝胶电泳观察精液标本和相应血液标本PCR产物的一致性.结果 所有多重PCR反应均成功进行,产物测序证实为目的 片段.正常精液未检测到Y染色体微缺失,而无精子症患者共检测到26例(10.8%)Y染色体微缺失,均有欧洲男科学会(EAA)和欧洲分子遗传学质量控制体系(EMQN)推荐STS位点的缺失:AZFa区、AZFb区各2例(各占7.7%),3例(11.5%)位于AZFb+AZFc区,19例(73.1%)位于AZFc区.血液标本检测结果与精液标本检测结果完全一致.结论 用无精子症患者精液进行Y染色体微缺失检查是可行、可靠的.初步表明EAA/EMQN推荐STS位点适合我国无精子症患者Y染色体微缺失检查。

目的 研究兔糖尿病模型勃起功能障碍(ED)发生过程中,阴茎海绵体神经型一氧化氮合酶(nNOS)表达的变化,探讨糖尿病性ED的分子机制.方法 采用四氧嘧啶注射方法建立兔糖尿病性ED模型(n=14),以正常兔为对照组(n=14),比较给药后15、30和45 d,两组电刺激盆神经前后海绵体内压(ICP)和系统动脉压(SAP)的变化.采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学和蛋白质印迹方法,检测给药后15、30和45 d兔阴茎海绵体组织中nNOS的表达水平.结果 四氧嘧啶注射后1周,70%(35/50)兔血糖浓度高于10 mmol/L.给药后15～45 d,共40%(14/35)糖尿病模型兔成为糖尿病ED模型,各时间段电刺激盆神经前后ICP差值均低于对照组(均P＜0.01),而电刺激前后SAP差值各组间差异无统计学意义(均P＞0.05).RT-PCR分析结果显示,给药后15、30和45 d,兔阴茎海绵体nNOS mRNA(0.670±0.030,0.451±0.012和0.206 ±0.023),均显著低于对照组(0.817±0.010,0.814±0.020和0.802±0.007,均P＜0.05),且呈时间依赖性下降(P＜0.05).免疫组织化学和蛋白质印迹结果显示,给药后15、30和45 d,糖尿病性ED兔阴茎海绵体nNOS蛋白(0.713±0.014、0.424±0.O07和0.337±0.009)也均显著低于对照组(0.797±0.015、0.706±0.020和0.750±0.022,均P＜0.05),并且随糖尿病进程发展而逐渐降低(均P＜0.05),与RT-PCR分析结果一致.结论 阴茎海绵体nNOS的表达量下降可能是导致糖尿病性ED的发病机制之一。

目的 探讨精索静脉曲张(VC)对大鼠附睾功能的影响及其机制.方法 45只大鼠,随机分为3组.建立VC模型49 d后,取其左侧附睾,检测肉毒碱、唾液酸含量和低氧诱导因子(HIF)1α的表达.结果 蛋白质印迹和免疫组织化学法检测的实验组附睾HIF-1α的表达(0.96±0.65,91.67%)显著高于对照组(0.11±0.08,16.67%)和假手术组(0.07±0.05,21.43%)(均P＜0.05);实验组附睾唾液酸(6.3±2.3)、肉毒碱(1.1±0.3)含量显著低于对照组(24.7±4.4,2.8±0.6)和假手术组(26.1±4.4,3.2±0.6)(均P＜O.05);实验组附睾唾液酸、肉毒碱含量与其HIF-1α的表达呈显著负相关(r=-0.649,P=0.017;r=-0.666,P=0.013).结论 VC可引起附睾功能降低和附睾组织的低氧,且附睾功能降低的程度与附睾低氧程度有关。

目的 研究鼠巨细胞病毒(MCMV)感染对小鼠精子凋亡的影响,探讨MCMV感染诱导小鼠精子凋亡的线粒体调控机制.方法 建立小鼠睾丸MCMV急性感染模型(n=15),以正常小鼠作为对照(n=15),采用流式细胞术(FCM)与激光扫描共聚焦显微术(LCSM)对不同感染时段的小鼠附睾尾部成熟精子进行凋亡与线粒体膜电位的检测,同时应用电镜观察不同感染时段的精子线粒体超微结构的改变.结果 MCMV感染第2天起精子凋亡率开始升高,第4天达最高值(39.3±1.0)%,随后逐渐下降(F=362.822,P＜0.05).而感染第1天的精子线粒体膜电位增加至74.0±1.4,第2天开始下降至63.0±2.2,第4天降至最低40.2±2.3,随后缓慢回升(F=32.257,P＜0.05).MCMV感染可引起精子线粒体超微结构的损伤,以感染第2～6天为重.结论 生殖器官MCMV急性感染可诱导附睾尾部成熟精子的凋亡;精子线粒体主动参与并调控了精子的凋亡过程。

目的 研究早期局部一氧化氮(NO)抑制在大鼠单侧睾丸扭转后对侧睾丸生精功能迟发性损伤中的防护作用.方法 将56只健康雄性SD大鼠,随机分为假手术组、安慰剂组、N-一甲基-L-精氨酸(L-NMMA)组和环孢素组,每组14只.建立左侧睾丸扭转模型,并做相应的药物处理.各组大鼠分别于术后1、8周时各处死7只,即刻采集未扭转侧睾丸标本,测定睾丸组织中丙二醛水平和NO/一氧化氮合酶(NOS)含量,同时组织病理学观察以及MHC肽-四聚体复合物流式细胞仪分析.结果 术后1周时L-NMMA组丙二醛值为(181±22)nmol/g、NO含量为(112±18)μmol/g、NOS含量为(9.3±1.6)U/mg、MHC肽-四聚体复合物比例为0.36±0.09,与安慰剂组比[分别为(276±31)nmol/g、(195±22)μmol/g、(13.5±2.2)U/mg、0.58±0.10],差异均有统计学意义(均P＜0.05);L-NMMA组对侧睾丸组织早期和晚期病理损伤较安慰剂组轻.结论 抑制早期局部NO的产生,对早期对侧睾丸生精功能有一定的防护作用。

目的 应用动态血糖监测系统(CGMS)评估短期胰岛素泵(CSII)快速控制2型糖尿病病人高血糖状态时低血糖的发生特点及其影响因素.方法 61例住院的2型糖尿病病人,男35例,女26例,年龄(60±15)岁,病程8(0.5～12)年,糖化血红蛋白(11.1±1.6)%,糖化血清蛋白(32±6)%,人院后予胰岛素泵治疗同时进行CGMS监测;分析胰岛素泵治疗第3、4天CGMS监测的24 h平均血糖水平(MBG)及其标准差(SDBG)以及低血糖事件的发生情况,根据低血糖事件分为低血糖组和无低血糖组.结果 (1)胰岛素泵治疗期间每日胰岛素总量为(0.8±0.2)U·kg-1·d-1,餐前大剂量与基础量比例为(1.30±0.36):1.(2)CGMS监测显示胰岛素泵治疗初期有18例病人共发生31次低血糖事件,其中20次发生于夜间.CGMS的低血糖检出率较指端血糖监测(SMBG)显著增多(P＜0.01).(3)两组间空腹C肽、血总胆固醇和胰岛素泵基础量差异有统计学意义(P＜0.05).低血糖组的MBG低于无低血糖组[(7.88±1.24)mmol/L vs(8.92±1.83)mmol/L,P＜0.05],而SDBG和胰岛素泵基础率高于无低血糖组[(2.95±0.73)mmol/L vs(2.37±0.99)mmol/L;(0.37±0.09)U·kg-1·d-1 vs (0.33±0.08)U·kg-1·d-1,均P＜0.05].多元回归分析显示SDBG及胰岛素泵基础量与低血糖的发生呈独立正相关.结论 (1)动态血糖监测显示胰岛素泵强化治疗2型糖尿病初期约1/3病人可发生低血糖.(2)除了血糖控制水平及胰岛素泵基础量外,血糖波动过大与低血糖的发生也密切相关。

目的 研究结肠癌组织与对应正常结肠组织微小RNA(miRNA)的表达特征及其在结肠癌诊断中的意义.方法 取天津市肿瘤医院2004至2007年手术切除的15例晚期结肠癌组织标本及其癌旁正常组织标本.通过定量PCR(qRT-PCR)法检测6例结肠癌及其癌旁正常结肠组织的手术标本中200种miRNA的表达情况,应用问题分析(PAM)法对其他9例结肠癌组织及其癌旁正常结肠组织进行定性判断(癌和非癌).结果 6例结肠癌及其癌旁正常结肠组织中存在132种miRNA,其中47种miRNA在结肠癌发生过程中表达量显著下降(＜0.66).应用PAM法对9对结肠癌组织/远端正常结肠组织进行定性判断的结果与病理切片诊断结果基本一致(吻合度准确率11/12).结论 miRNA与结肠癌的发生发展有密切的联系,有可能成为一个有效的肿瘤标志物以进行结肠癌的早期预测和诊断。

目的 介绍软性膀胱镜下输尿管逆行置管的方法,并评估其可行性及安全性.方法 对拟行逆行肾盂输尿管造影患者112例,按性别随机分为2组,每组56例,其中男31例、女25例;分别行软性膀胱镜和硬性膀胱镜下逆行输尿管置管.比较2组的置管时间、VAS疼痛评分、置管成功率、置管后增加的肉眼血尿人数、置管后发热发生率.结果 软镜下置管55例(98%,55/56)获成功,硬性膀胱镜下53例(95%,53/56)置管成功.2组男性患者间及女性患者间对比,置管时间、成功率差异均无统计学意义(均P＞0.05).2组男性患者间及女性患者间VAS疼痛评分,软性膀胱镜组患者疼痛较硬镜组轻;而同组间女性患者疼痛较男性轻(P＜0.05).置管后增加血尿病例软性膀胱镜组为5例;硬性膀胱镜组14例,差异有统计学意义(P＜0.05).置管后软性膀胱镜组4例出现体温升高(＞37.5℃),硬性膀胱镜组6例,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 软性膀胱镜下逆行输尿管置管成功率高,痛苦小,操作安全。

目的 了解进入观察等待、药物治疗和手术治疗3种治疗方案的良性前列腺增生患者的主要客观指标的具体数据,分析其对治疗方案选择的影响.方法 按照试验规定的纳入和排除标准,选择初诊的良性前列腺增生患者329例,按目前泌尿外科的实际诊疗状况,将患者列入观察等待(61例)、药物治疗(179例)和手术治疗(89例)3种治疗方案组,对入组患者的前列腺体积、血清前列腺特异性抗原(PSA)、最大尿流率、平均尿流率,排尿量、残余尿指数等进行观察.结果 观察等待、药物治疗和手术治疗3种治疗方案组患者的前列腺体积(ml)均数为33.0、40.1、65.5;最大尿流率(ml/s)均数为17.1、12.4、9.1;平均尿流率(ml/s)均数为9.9、7.3、4.2;排尿量(ml)均数为332、247、188.以上指标组间差异具有统计学意义.血清前列腺特异性抗原(ng/ml)均数为1.53、1.99、5.44;残余尿量(ml)均数为21、45、208.这2种指标手术治疗组与其他2组间差异具有统计学意义,而在药物治疗和观察等待组间差异无统计学意义.结论 前列腺体积、血清前列腺特异性抗原(PSA)、最大尿流率、平均尿流率、排尿量、残余尿是良性前列腺增生症患者选择治疗方案的重要影响因素。

目的 研究广州地区人巨细胞病毒(HCMV)临床病毒株特有基因UL148的结构,分析其结构多态性与HCMV先天性感染致病的关系;研究UL148的表达情况,探讨其产物可能的功能及在致病机制中的可能作用.方法 采集广州地区新生儿HCMV感染患者尿液标本进行病毒分离培养,从分离的病毒株中提取病毒DNA,扩增鉴定UL148基因片段;TA克隆,基因测序;抽提病毒总RNA,用RT-PCR方法鉴定UL148基因mRNA表达情况.结果 成功分离到HCMV低传代临床株,获得UL148基因全序列.RT-PCR产物检测582 bp大小的特异性条带,证实了UL148基因mRNA的表达.结论 广州地区临床低传代HCMV分离病毒株存在UL148基因结构,证实UL148开放阅读框是具有mRNA水平表达的基因结构。

目的 调查我国西部省份青海、云南、贵州和广西50岁及以上人群年龄相关性白内障(ARC)患病率.方法 采用整群抽样方法,抽取青海平安、云南楚雄、贵州六盘水、广西崇左地区年龄≥50岁的农业人口共5562人进行横断面调查.视力低于0.7同时存在任何类型晶状体混浊且波及瞳孔区者诊断为ARC;将晶状体混浊分为核型、皮质型及后囊下型,3种或其中任意2种同时存在判定为混合型;根据LOCSⅡ对晶状体混浊程度分级.结果 青海、云南、贵州和广西4个人群的ARC总患病率分别是41.8%、48.2%、18.8%和39.4%;随着年龄的增加,ARC患病率明显升高.青海平安、贵州六盘水晶状体混浊以皮质型最多见,云南楚雄、广西崇左以核型最多见;4个地区均以后囊下型所占比例最低.4个地区ARC患者中4种不同类型晶状体混浊的程度均呈现分级由低到高而比例由高到低的变化趋势;晶状体混浊4级的比例以青海平安最高,为17.49%;广西崇左最低,为10.00%.结论 我国西部地区50岁及以上农村人口的ARC总体患病率较高,各地区之间存在明显的差异,防盲治盲工作应对西部ARC患病率高的地区有侧重。

目的 利用RNA干扰技术阻断livin基因的表达,观察其联合表阿霉素对乳腺癌细胞ZR-75-30凋亡的作用.方法 体外化学合成靶向livin的小分子干扰RNA(siRNA),在脂质体(lipofectamineTM2000)的介导下转染人乳腺癌细胞ZR-75-30.荧光共聚焦显微镜下观察转染效率,半定量RT-PCR和蛋白质印迹法检测转染前后ZR-75-30细胞livin基因表达的变化,流式细胞术检测转染靶向livin的iRNA联合表阿霉素作用的ZR-75-30细胞的凋亡率.结果 靶向livin的siRNA可以有效特异地抑制ZR-75-30细胞livin基因的表达,在mRNA水平上其表达抑制率约为53.66%;在蛋白质水平其表达抑制率约为58.32%,转染靶向livin的siRNA 36h后,靶向livin的siRNA联合表阿霉素可以诱导(15.18±0.05)%的细胞凋亡.结论 靶向livin的siRNA能有效、特异地阻断livin基因的表达,阻断livin基因表达联合表阿霉素可促进ZR-75-30细胞的凋亡。

目的 探讨急性心肌缺血时交感神经刺激对缝隙连接蛋白43(Cx43)及对室性心律失常的影响.方法 结扎大鼠冠状动脉前降支制备急性心肌缺血模型后分组,心肌缺血组(25只,MI)、缺血+交感神经刺激组(25只,MI-SNS)、交感神经刺激预处理+缺血组(25只,pSNS-MI)和假手术组(20只,SO).心电图监测室性心律失常的发生.蛋白质印迹法检测缺血心肌Cx43的磷酸化蛋白及总量表达.RT-PCR分析Cx43 mRNA的表达.免疫荧光观察Cx43表达分布情况.结果 MI-SNS组室速/室颤发生率(80.0%)较MI组(52.0%)明显增加(P＜0.05),而pSNS-MI组室速/室颤发生率(20.0%)显著降低(P＜0.05).冠脉结扎30 min后,与MI组相比(46.7%±6.3%),pSNS-MI组(71.2%±7.0%)和MI-SNS组(73.4%±6.7%)磷酸化Cx43的比例均明显增加(均P＜0.05).MI组(1.29±0.14)和pSNS-MI组(1.25±0.13)蛋白总量均与SO组(1.30±0.10)无明显区别(均P＞0.05),但MI-SNS组(0.73±0.12)蛋白总量较SO组明显减少(P＜0.05).结论 交感神经刺激能够促进缺血性室性心律失常的发生,这可能与其促进了Cx43的降解有关;交感神经刺激预处理能够抑制缺血性室性心律失常的发生,其机制可能与交感神经刺激预处理阻止了Cx43的脱磷酸化有关。

目的 研究绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对视网膜神经节细胞(RGC-5)氧化应激损伤的防护作用.方法 利用外源性活性氧(H2O2)造成RGC-5细胞的氧化应激损伤,同时应用EGCG进行保护.通过末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿嘧啶核苷三磷酸缺口末端标记(TUNEL)验证RGC-5细胞的死亡方式,2',7'-二氢乙啡啶(OHE)染色实验检测细胞内活性氧簇(ROS)生成情况,蛋白质印迹法定量分析细胞核酶(PARP-1)的激活,噻唑蓝(MTT)法分析比较EGCG、维生素E水溶性衍生物(Trolox)和PARP-1抑制剂NU1025对RGC-5细胞的保护作用.结果 H2O2以浓度和时间依赖的方式降低RGC-5细胞活性,500μmol/L H2O2在24 h可以导致RGC-5细胞活性下降50%.H2O2可以导致RGC-5细胞凋亡,并显著增加细胞内ROS的生成,上调细胞核酶PARP-1的表达;而预先给予EGCG可以明显减少RGC-5细胞凋亡和细胞内ROS生成.MTT实验显示EGCG可以使氧化应激损伤中RGC-5细胞活性恢复到87%,而Trolox和NU1025可以分别提高细胞活性到62%和71%.结论 EGCG能够有效地防护氧化应激对视网膜神经节细胞的损伤,是一种极具开发潜力的神经保护性药物。

目的 研究雌激素缺乏对牙周炎大鼠牙槽骨中骨保护素(OPG)表达的影响,探讨雌激素调节牙槽骨改建的机制.方法 采用切除双侧卵巢及牙周结扎的方法建立雌激素缺乏的大鼠牙周炎动物模型,观察大鼠牙周组织病理改变,应用免疫组织化学技术观察OPG在牙槽骨的表达,比较卵巢切除(OVX,n=18)、假手术(Sham,n=17)及雌二醇治疗(OVX+E2,n=18)3组大鼠牙槽骨OPG表达吸光度(A)值的差异.结果 各组大鼠组织学观察均显示牙槽骨骨小梁稀疏,牙槽骨表面可见破骨细胞及骨吸收陷窝,OVX组更为显著.Sham组、OVX组及OVX+E2组的牙槽骨OPG阳性表达A值分别为38 799±6228、27 854±5246和37 146±6394,OVX组吸光度低于Sham组和OVX+E2组(均P＜0.05),而Sham组和OVX+E2组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 雌激素缺乏降低牙槽骨中骨保护素的表达,促进实验性牙周炎大鼠牙槽骨的吸收。

病历摘要 　　患者女,66岁,于2007年8月18日入院.患者有乙型肝炎病史10年余;1年前因皮肤巩膜黄染伴乏力和下肢轻度水肿,肝功能和B超提示肝硬化性改变,诊断为"肝硬化",予以保肝支持和对症治疗后症状好转;1周前出现腹胀、双下肢水肿,并逐渐加重,无发热、呕血、黑便和消瘦等症状。

噪声污染已经成为当今社会不可忽视的公害之一,其中听觉损伤最为严重,主要包括暂时性阈移(temporary threshold shift,TTS)与永久性阈移(permanent threshold shift,PTS)。

患者男,26岁,因发现左上肺结核2年半,手术切除后发热、气促约20 d于2006年10月11日入院.患者于2004年2月开始出现咳嗽、盗汗,外院诊断为左肺结核,曾抗结核治疗1年。

患者男,76岁,因咳嗽、咯痰2个月余于2007年6月22日入院.患者同年4月无明显诱因出现咳嗽,咯少量白色痰,偶有痰中带血丝;5月在外院行体格检查,胸部CT示双肺弥漫性结节状阴影,大小均匀,以双上肺为著,右上肺陈旧结核;血红细胞沉降率(ESR)87 mm/1 h;结核菌素纯蛋白衍化物(PPD)试验硬节直径1.5 cm×1.2 cm,可疑小水泡;肺癌筛查未见明显异常。

患者男,72岁,因胸闷、憋喘2个月于2008年3月25日入院.患者近2个月来无明显诱因地感胸闷、活动后憋喘,无咳嗽、咯痰、咯血和胸痛,无发热和盗汗,无夜间阵发性呼吸困难。

作者署名是论文著作权归属的标志，应以严肃、认真的态度对待。中华医学杂志对论文作者署名有如下要求。1．作者的条件：同时具备以下3个条件者方可作为作者。①在研究构想和设计、数据获得、数据分析或解释中的任何一个方面做出了实质性贡献；②起草论文或对论文中的重要学术内容做出了关键性的修改；③对将要发表的论文做出了最后的认可。

1．统计研究设计：应交代统计研究设计的名称和主要做法。如调查设计（分为前瞻性、回顾性或横断面调查研究）；实验设计（应交代具体的设计类型，如自身配对设计、成组设计、交叉设计、析因设计、正交设计等）；临床试验设计（应交代属于第几期临床试验，采用了何种盲法措施等）。主要做法应围绕4个基本原则（随机、对照、重复、均衡）概要说明，尤其要交代如何控制重要非试验因素的干扰和影响。

由中国医学工程学会介入医学分会、北京协和医院、南方医科大学南方医院联合主办，浙江萧山医院协办的第三届全国妇科微创介入治疗研讨会将于2008年9月5-7日在杭州市萧山区召开。会议将邀请国内妇产科和介入放射学著名专家就介入治疗在妇产科中的应用进行专题讲座及手术表演，同时将讨论妇产科疾病介入治疗指南（草案）。现将征文有关事宜通知如下。

为了加强对妇产科围手术期并发症防治的认识，《中华妇产科杂志》编委会将于2008年10月在郑州召开“妇产科围手术期并发症的防治学术研讨会”，会议将邀请全国著名专家现场授课，介绍防治手术并发症的研究进展及经验，并以互动方式进行讨论，欢迎同道们踊跃投稿、参会。

达英-35（复方醋酸环丙孕酮片）是口服避孕药物之一，其主要成分为2mg醋酸环丙孕酮和35μg乙炔雌二醇，化学名称为复方醋酸环丙孕酮片，是目前惟一具有治疗高雄激素血症适应证的口服避孕药。达英-35有独特的多环节抗雄激素作用，可显著改善多囊卵巢综合征（PCOS）患者的多毛、痤疮等症状。

由中山大学附属第一医院和中华医学杂志编辑委员会联合主办的“2008广州乳腺癌临床诊治论坛暨中大-哈佛乳腺癌学术研讨会”定于2008年9月19-21日在广州召开。

由中国医师协会血液学分会和中华医学会感染病学分会联合举办的第三届全国深部真菌感染学术会议将于2009年3月26-30日在长沙市召开。会议将邀请国内外知名专家就真菌感染的基础和临床研究、实验室诊断与检查、院内感染控制与流行病学等方面进行最新进展的交流。