2007年 · 第87卷第10期

"生物界从构成分子到有机整体,一切都遵循力学的法则(规律)",当代生物力学之父冯元帧教授在他的生物力学著作中这样写道.冯教授从20世纪50年代开始研究生物力学,由于他在生物力学界的杰出贡献,特别是在心血管生物力学中的重大发现被誉为当代生物力学之父,是当今惟一获得美国三院院士(科学院、工程学院及医学院)和中国科学院院士的科学家[1]。

随着饮食结构、疾病谱的变化以及精神心理和社会因素对疾病的影响,慢性便秘(chronic constipation,CC)的发病率逐渐增加.我国成年人群便秘患病率为3%～17%[1-2]。

近年来乳腺癌的术前化疗,即新辅助化疗(neoadjuvant chemotherapy,NCT)已成为乳腺癌治疗的热点[1-2 ].20世纪70年代意大利米兰肿瘤研究所首先用于治疗不可手术的局部晚期乳腺癌(locally advanced breast cancer,LABC),获得了比较理想的疗效,一些不可切除的经化疗后变为可切除。

目的 评价联合药物治疗对巨结肠严重便秘患者的疗效,为非手术治疗提供参考.方法 对2005年2月至2006年4月中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院内科就诊的10例巨结肠严重便秘患者进行回顾性研究,其中男女分别为4和6例,就诊平均年龄38岁,平均病程10年.手术或常规内科治疗无效,钡灌肠证实巨结肠.5例患者就诊时存在结肠肠梗阻.短期治疗予以马来酸替加色罗6 mg 2/d、聚乙二醇4000 10～20 g 2/d和中药六味安消5粒3/d联合;维持治疗继续予以上述药物联合,病情缓解后减量.如存在直肠内粪便嵌塞,则予以洗肠或灌肠.观察排便次数、大便性状、排便困难程度、腹部伴随症状(腹痛、腹胀及呕吐)、肠梗阻并发症及副作用.结果 10例患者中,先天性巨结肠术后1例;先天性肛门直肠畸形术后1例;继发于慢性便秘3例;继发于糖尿病神经病变1例;慢性假性结肠梗阻4例.1～2周的短期联合药物治疗疗效明显,排便次数、大便性状、排便困难程度及腹部伴随症状均明显改善,肠梗阻完全缓解.10例患者随诊1～7个月,病情平稳,未出现肠梗阻并发症.7例患者复查腹部平片示病变结肠管腔扩张程度明显改善,5例肠梗阻患者液气平面均消失.2例患者出现轻度腹泻,药物减量后消失.结论 马来酸替加色罗、聚乙二醇4000和六味安消联合治疗伴有严重便秘的巨结肠患者,短期内可有效缓解症状,控制肠梗阻并发症,有效防止复发和延缓手术。

目的 研究八肽胆囊收缩素(CCK-8)对大鼠胃窦平滑肌细胞(SMC)胞内钙释放和胞外钙内流的作用及对其具体相关机制的探讨.方法 (1)多导生理记录仪记录大鼠离体胃窦肌条在不同条件下的收缩活动;(2)免疫印迹法和免疫沉淀法检测胃窦SMC的三型1,4,5-三磷酸肌醇受体(Ins P3R3)及其磷酸化水平;(3)Fura-2/AM标记胃窦SMC,观察CCK-8S对胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的影响;(4)全细胞膜片钳检测胃窦SMC的L-型电压门控钙通道电流(ICa-L)的变化情况.结果 (1)CCK-8S作用下胃窦肌条收缩幅值和频率改变明显[增长率分别为(62±13)%和(58±17)%,均P＜0.01],可被CCK-A受体拮抗剂和钙泵抑制剂所阻断;(2)蛋白激酶C(PKC)上调InsP3R3磷酸化水平,抑制CCK-8S介导的内钙释放;(3)CCK-8S引起的[Ca2+]i显著升高[从(69±7)mol/L升至(472±36)nmol/L,P＜0.01]分别可被CCK-A受体或胞内钙泵抑制剂和PKC激动剂所阻断;去除外钙或给予L-型钙通道阻滞剂时CCK-8S仍可引起[Ca2+]i升高;(4)CCK-8S显著增强胃窦SMC的ICa-L[从(-56±7)pA升至(-89±6)pA,P＜0.01],可分别被ICa-L阻滞剂、胞内钙泵抑制剂和钙依赖性氯通道阻滞剂所阻断.结论 CCK-8S引起的大鼠胃窦SMC的[Ca2+]i升高依赖于PKC介导的InsP3R3磷酸化作用调节下的细胞内钙离子释放.胞内钙释放可激活ICl-Ca,引起细胞膜去极化而活化Ica-L引起胞外钙内流,最终引起SMC收缩效应。

目的 研究小肠电刺激对人小肠传输功能的影响.方法 健康正常人12名,经胃镜于十二指肠内植入带有环状电极的鼻胃管,经胃管注入混合有99Tcm的不吸收的电解质平衡液,检测给予真性或假性小肠电刺激后核素到达回盲部时间,同时对受检者在实验中发生的消化不良症状严重程度进行评分.结果 (1)真性小肠电刺激时核素到达回盲部时间为(28±10)min,显著低于假性小肠电刺激组[(39±17)min,P＜0.05].(2)给予真性刺激前后志愿者自觉症状评分间差异无统计学意义(中位数为1.0 vs 1.5,P＞0.05),真性刺激与假性刺激(自觉症状评分中位数为0.5)间差异也无统计学意义(P＞0.05).结论 小肠电刺激可加速人体小肠传输,且不引起消化不良症状,可能成为治疗小肠动力障碍性疾病的新方法。

目的 确立我国城市中小学生正常排便次数及功能性肠病患病率.方法 采用多级整群随机抽样方法,对我国6个省及两个直辖市中51 956名中小学生进行流行病学问卷调查.结果 ①88.05%±0.28%的学生排便次数在每天1～2次或者每2天1次之间,女生的排便次数明显少于男生,两者比较差异有统计学意义(P＜0.01);②城市中小学生中肠易激综合征(IBS)、功能性便秘及腹泻的患病率分别为20.19%(10 490)、25.92%(13 467)及8.77%(4557).结论 ①城市中小学生的正常排便次数在每天1～2次或者每2天1次之间;②IBS、功能性便秘及腹泻是城市中小学生的常见病及多发病。

目的 采用超顺磁性氧化铁(SPIO)作为磁共振示踪细胞的标记物,为血管内皮祖细胞移植防治血管内皮损伤性疾病提供实验依据.方法 分离、鉴定并培养新西兰大白兔外周血血管内皮祖细胞(EPCs),制备Fe2O3-多聚左旋赖氨酸(PLL)并体外标记EPCs.用2.5 F球囊扩张兔右侧颈动脉,制作血管内膜损伤模型,进行EPCs局部移植.A组5只,移植Fe2O3-PLL标记的EPCs,B组5只,移植荧光标记的EPCs,C组5只为空白对照,局部注射生理盐水.细胞移植后7 d,所有实验兔行MR颈动脉扫描,并取受损伤血管做病理组织学检查,并与MR信号变化进行对比分析.结果 EPCs的Fe2O3-PLL标记率＞95%,A组标记细胞移植后7 d,MR扫描T2WI显示损伤血管壁明显低信号区,而B组和C组无明显异常信号改变;病理学检测显示A组损伤血管内膜有普鲁氏蓝染色阳性细胞黏附,B组损伤血管内皮有强荧光表达,C组损伤血管内皮无表达.结论 利用1.5 TMR仪进行活体成像技术,可示踪并检测磁粒子标记血管内皮祖细胞在损伤血管内皮的归巢、黏附及分布,为血管内皮祖细胞移植防治血管内皮损伤性疾病提供了实验依据。

目的 研究能通过叶酸受体介导靶向叶酸受体阳性肿瘤细胞实现MR肿瘤靶向成像的对比剂叶酸-PL-Gd-DTPA,探讨该试剂MR靶向诊断裸鼠人肺癌模型可行性.方法 (1)在碱性条件下聚赖氨酸(poly-L-Lysine,PL)经二乙三胺五酸(DTPA)修饰后,得到大分子载体PL-DTPA,装载Gd3+制成大分子对比剂PL-Gd-DTPA,在适宜的反应条件下,连接上叶酸得到肿瘤靶向对比剂叶酸-PL-Gd-DTPA.(2)采用高效液相色谱法(HPLC)测定大分子纯度,高频电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-AES)测定Gd3+含量,使用细胞叶酸受体竞争结合法证明试剂活性.(3)用人肺腺癌裸鼠模型进行MR成像研究,将动物分成两组,进行MR平扫后,分别经鼠尾静脉注射叶酸-PL-Gd-DTPA、Gd-DTPA试剂后0.5、3、6、14、24、38、48、62和72 h行MR扫描,测定各时间点瘤体和肌肉信号强度.结果 (1)制备出高纯度叶酸-PL-Gd-DTPA,该多聚体具备与叶酸受体高亲和力结合特性,每分子对比剂载带56个Gd3+离子.(2)在肿瘤模型活体MR成像中,瘤体各扫描时间点信号值差异有统计学意义(F=7.82,P=0.0052),平均强化率125.4%.(3)实验组瘤体各时间点信号值差异有统计学意义,强化峰值出现在24～48 h时间点,对照组瘤体各扫描时间点信号值差异亦有统计学意义,强化峰值出现在0.5 h时间点.实验组肌肉各扫描时间点信号值差异无统计学意义(F=1.86,P=0.0579).结论 叶酸-PL-Gd-DTPA能与叶酸受体高亲和力结合,在活体内能靶向叶酸受体阳性细胞的肿瘤,实现MR靶向诊断。

目的 探讨Meek微型皮片移植技术(M法)在创面中的应用.方法 用M法在9例烧伤和1例坏死性筋膜炎所致创面中的应用.M法植皮面积2%～28%,其中1例23%TBSA和5%腹壁供皮区,平均面积8.6%,4例切(削)痂后即刻用该法进行植皮;4例在切(削)痂后第4～16天用M法进行植皮;2例在伤后第35～45天形成的肉芽创面用M法进行植皮;M法中应用1:4扩展纱布42张,1:6扩展纱布40张,1:9扩展纱布26张.在应用M法同时,在同一个体进行人工邮票皮片移植5例,微粒皮移植4例,网状皮(1:1)移植1例.结果 应用M法的病例手术时间为9～60 min;8例皮片100%成活,1例80%、1例50%成活,平均93%;其他植皮方法手术时间是30～240 min,成活率为100%的2例、90%～98%的4例、80%的3例、50%的1例,平均86%.结论 Meek植皮术适用于体表任何形式的创面(骨外露创面除外),尤其是大面积烧伤病员;创面皮片上皮化时间短;皮片的的扩展率,根据创面大小,选择不同比例的扩展纱布,因此皮片用量少;手术时间缩短;工作人员劳动强度降低。

目的 探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及其受体CXCR4在非霍奇金淋巴瘤(NHL)中的表达及其与NHL肿瘤浸润的关系.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测淋巴结和骨髓基质细胞中SDF-1α的表达,采用流式细胞术检测淋巴结和骨髓中淋巴瘤细胞CXCR4受体的表达,并采用Transwell微孔隔离室实验检测淋巴瘤细胞在体外向重组人SDF-1α(rhSDF-1α)的趋化反应.结果 侵犯骨髓的NHL患者骨髓淋巴瘤细胞和未侵犯骨髓的NHL患者骨髓单个核细胞表面CXCR4受体的表达均明显高于正常骨髓(84.10±12.12,72.76±8.73和33.20±7.73,P＜0.01),而NHL患者来源于淋巴结的淋巴瘤细胞CXCR4的表达亦显著高于反应性增生淋巴结炎患者(101.04±21.89 vs 34.81±9.90,P＜0.01).此外,被淋巴瘤侵犯的骨髓基质细胞高表达SDF-1α,而未被淋巴瘤侵犯的骨髓及正常骨髓基质细胞表达SDF-1α低下,二者比较差异有统计学意义(P＜0.01);且NHL患者淋巴结基质细胞SDF-1α的表达高于反应性增生淋巴结炎患者(P＜0.01).趋化实验发现三种不同来源的NHL患者淋巴结和骨髓的单个核细胞均能向rhSDF-1α发生趋化反应,且抗CXCR4单抗可明显抑制上述细胞的迁移.结论 SDF-1/CXCR4生物学轴是介导NHL肿瘤侵袭的重要机制,CXCR4在淋巴瘤细胞表面以及SDF-1在淋巴瘤转移部位的同时高表达与NHL瘤细胞的转移和浸润密切相关。

目的 探讨CD40-E1SNP(-1C/T)和CD40-E4SNP基因多态性与中国汉族人群急性冠状动脉综合征(ACS)的易感相关性.方法 采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)和DNA测序技术,检测160例经冠状动脉造影确诊的ACS患者和92例冠状动脉造影阴性人群CD40-E1SNP(-1C/T)、CD40-E4SNP基因型和等位基因频率,分析两组人群CD40基因型和等位基因频率差异,并用Logistic回归模型分析CD40基因多态性和高血压、糖尿病对ACS的影响.结果 CD40-1位点C等位基因频率在ACS组与对照组分别为0.606和0.489,T等位基因频率分别为0.394和0.511,两组差异有统计学意义(P＜0.05);ACS患者CC基因型频率(0.281)明显高于对照组(0.130),差异有统计学意义(P＜0.01);C等位基因显著增加ACS的患病风险(OR=1.608,95%可信区间:1.12～2.32,P=0.011);调整年龄、性别、体重指数后,Logistic回归分析CD40基因及其与高血压、糖尿病对ACS的危害作用,单独C等位基因型OR值为1.608(95%可信区间:1.12～2.32,P＜0.05),C等位基因-有高血压OR值为5.71(95%可信区间:1.12～29.08,P＜0.05),C等位基因-无糖尿病OR值为1.44(95%可信区间:1.12～5.13,P＜0.01),C等位基因-有糖尿病OR值为2.35(95%可信区间:1.47～4.82,P＜0.01).未检测到CD40-E4SNP基因多态性.结论 CD40-1C/T基因多态性与ACS有相关性,C等位基因携带者合并高血压、糖尿病显著增加患ACS的危险性,而汉族人群可能不存在CD40-E4SNP基因多态性。

目的 观察经冠状动脉自体骨髓单个核细胞(BMMC)移植治疗缺血性心脏病的长期效果及安全性.方法 76例缺血性心脏病病人.其中BMMC移植者52例,包括急性心肌梗死(AMI)26例,慢性缺血性心力衰竭(CIHF)26例,对照24例(AMI 10例,CIHF 14例).对照组:常规治疗(药物及介入治疗);移植组:在常规治疗基础上加经冠状动脉自体BMMC移植.细胞移植方法:于髂后上嵴抽取骨髓,梯度密度法分离获得BMMC,将细胞悬液调为2×106/ml浓度,超选择性经梗死相关冠状动脉气囊充盈下高压注入BMMC,重复注入6～8次,或经冠状动脉选择性移植,气囊未充盈下高压注入移植细胞.随访观察临床及实验室指标,二维超声心动图,正电子发射体层心肌显象.结果 52例完成2年随访.AMI病人BMMC移植后1年左室射血分数(LVEF)比术前增加了5.8%(53.9%±2.9%vs59.7%±1.5%,P＜0.05),2年增加了3.8%(57.7%±1.7%,P＞0.05),对照组LVEF减低,但差异无统计学意义.左室舒张末容量(LVEDV)、左室收缩末容量(LVESV)无显著改善.移植组2年心肌代谢缺损区与3个月比较无变化;BMMC移植组与术前相比差异有统计学意义(P＜0.05).CIHF病人BMMC移植后1年、2年LVEF与术前比较分别增加了8.8%、9.2%(P＜0.01),LVESV下降20.4%、27.8%(均P＜0.05),2年心肌代谢缺损区与3个月比较无变化;对照组心功能明显恶化.Holter检测未发现新的心律失常.结论 BMMC治疗可明显改善CIHF病人的心功能.而对AMI病人并无左室收缩功能改善的长期效果,仅限制了心室重塑。

目的 探讨高选择性的蛋白酶抑制药MG132诱导的K562细胞凋亡及其对转录核因子κB(NF-κB)活性和抗凋亡蛋白生存素(Survivin)表达的影响.方法 采用细胞形态学观察和流式细胞术检测细胞凋亡,免疫细胞化学和Western印迹分析NF-KB的活性和Survivin的表达.结果 不同浓度的MG132作用24 h后可诱导K562细胞凋亡,呈剂量依赖效应.NF-κB和Survivin在K562细胞中异常高表达,MG132作用后均明显下调.2、4、6、8 μmol/L MG132作用于K562细胞24 h后,NF-κB活性分别下调至作用前的75.0%±3.7%、59.9%±5.3%、45.4%±5.7%和25.0%±4.2%,而Survivin蛋白表达分别下调至作用前的90.9%±10.1%、66.7%±5.2%、45.4%±5.7%和30.3%±6.6%,NF-κB活性降低的同时Survivin蛋白的表达也下调,两者密切相关(Pearson相关系数0.989,P＜0.01).结论 MG132可有效地抑制NF-κB的活性,诱导K562细胞发生凋亡,同时抗凋亡蛋白Survivin的表达也随之下调。

目的 研究蛋白酶体抑制剂MG132诱导HL-60细胞表达共刺激分子CD80、CD86及其对混合淋巴细胞反应的作用.方法 流式细胞仪检测MG132诱导HL-60细胞表达共刺激分子CD80、CD86及细胞活力;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析CD80和CD86 mRNA表达情况;75Gy照射MG132诱导的HL-60细胞后,用CCK-8检测提高共刺激分子表达后,HL-60细胞对健康人单个核细胞的增殖作用.结果 MG132上调HL-60细胞表达CD86,高浓度的MG132对HL-60细胞有直接杀灭作用,MG132诱导HL-60细胞表达共刺激分子CD86后,对健康人单个核细胞起增殖作用.结论 MG132诱导HL-60细胞表达共刺激分子CD86,促进对健康人单个核细胞的增殖作用。

目的 将人类超极化激活环核苷酸门控钾通道亚型2(hHCN2)和亚型4(hHCN4)的基因表达于HEK293细胞系上,观察其表达的通道的电生理特点.方法 包含目的 基因hHCN2或hHCN4的cNDA亚克隆到腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,穿梭载体和病毒骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌重组,病毒经过包装和扩增后分别转染HEK293细胞.利用全细胞膜片钳技术,记录分别转染了hHCN2和hHCN4的HEK293细胞上的超极化激活钾电流(If).结果 转染hHCN2和hHCN4的HEK293细胞上产生超极化激活的内向电流.两种通道的半数最大激活电压分别为-114.8 mV±3.3 mV和-125.9 mV±2.9 mV,反向曲线斜率分别为11.1 mV±1.2 mV和13.7 mV±1.3 mV.两者的激活动力学明显不同,刺激电压为-110 mV时,通道的激活时间常数分别为0.99 s±0.21 s和8.47 s±2.85 s.两种通道对钠离子和钾离子的相对通透性分别为0.40和0.34.两种电流均可被2mmol/L的氯化铯(CsCl)阻断.结论 目的 基因hHCN2和hHCN4在HEK293细胞上成功表达,形成的两种通道具有明显不同的激活动力学。

目的 评价国产雷帕霉素-聚丙交酯乙交酯(PLGA)外周动脉洗脱支架药膜性能及其药物释放特点.方法 采用自制PLGA与雷帕霉素制成雷帕霉素-PLGA药膜,并用该药膜涂层12枚国产镍钛合金外周血管支架.用OLYMPUS体式显微镜观察支架表面药物涂层的宏观形貌,NanoScopeⅢa原子力显微镜观察和分析涂层表面的三维形貌和表面粗糙度.并对洗脱支架进行血液相容性,体外降解行为及体外药代动力学研究,数据进行了标准曲线测定,释放曲线拟合测定,并进行LPMS/PLGA涂层多支架释放曲线测定等统计学分析.结果 12枚支架药膜表面光整,层厚均一,未见皲裂、脱落、翘起现象.雷帕霉素-PLGA洗脱支架的OLYMPUS体式宏观形貌,涂层支架无缠绕、粘连,且涂层表面均匀、光滑.Nano ScopeⅢa原子力显微镜示金属支架表面略粗糙,存在机械划痕微坑.但PLGA载药涂层将基体的微坑覆盖后,表面平滑PLGA涂层表面黏附的血小板有个别变形伸出伪足,血小板部分激活,没有产生聚集;含雷帕霉素涂层表面黏附的血小板数量明显减少,没有变形和聚集,血小板处于未激活状态.在体内环境模拟系统中,PLGA在2周之内降解约20%,在2至6周降解速度逐渐加快直至完全降解.雷帕霉素-PLGA洗脱支架体外药代动力学实验结果显示,药物洗脱支架药物释放可持续50 d.在0、1、3、5、7、9 d取样测定释放量,释放曲线符合Higuchi方程:Mt/M∞(%)=3.1722*t1/2(h)-5.682(γ=0.9944,n=5).实测曲线与拟合曲线拟合很好,γ=0.9944.在30 d时仍存在较为稳定的药物释放.24 h突释量11.02%;9 d累积释放量41.23%;30 d累积释放量79.44%.结论 国产雷帕霉素-PLGA外周动脉洗脱支架药膜涂层均匀光滑,可有效控制药物释放,具有进一步临床应用价值。

前列腺癌是最常见的男性恶性肿瘤之一,在我国的发病率虽然远低于西方,但随着生活水平和诊断技术的不断提高,前列腺癌的发病率呈上升趋势[1]。

《欧洲心脏病学杂志》最新公布的数据为高血压患者预防心血管事件提供了一个新方案:12月11日从中国医师协会心血管内科医师分会组织召开的"同步解读欧洲最大高血压研究最新结果"新闻发布会上获悉,对伴有心血管风险因素(吸烟、糖尿病、血脂异常以及年龄≥55岁的男性和≥65岁的女性)的高血压患者同时使用钙拮抗剂络活喜(苯磺酸氨氯地平)和他汀类药物立普妥(阿托伐他汀),与单用络活喜相比,使致死性冠心病、非致死性心肌梗死发作的相对风险减少53%.这些来自ASCOT研究(盎格鲁-斯堪的纳维亚心脏终点研究)的新数据发表在2006年12月11日出版的《欧洲心脏病学杂志》。

随着消化内镜的普及和内镜诊治技术的提高,对于疾病诊断准确性和及时性的要求也在不断提高,于是上世纪末色素内镜(染色内镜,chromoendoscopy)技术在日本应运而生,并在一些大型医院逐渐普及。

治疗格雷夫斯病(GD)目前主张首选甲巯咪唑.粒细胞缺乏(agranulocytosis,简称粒缺)是抗甲状腺药物(ATD)治疗过程中少见但后果严重的副作用[1].关于国产甲巯咪唑(他巴唑)引起粒缺的病例时有报道,尚未见有甲巯咪唑(商品名:赛治)引起粒缺的报道,我院发现一例赛治致严重粒缺的患者,现整理如下。

《循证医学入门·临床科研方法与实例评价（第二版）》一书由中华临床流行病学学会副主任委员徐德忠教授主编，已由第四军医大学出版社正式出版发行。