2006年 · 第86卷第22期

迄今为止,直肠癌的治疗仍是以手术为主的综合治疗,在诸多根治术式中,全直肠系膜切除术(Totol mesorcectal excision,TME)和扩大根治术被广泛应用,但同时也存在较大争议,我们分析了二者的异同及存在的问题,与同道共同探讨。

目的 应用与多囊肾病基因1(PKD1)和多囊肾病基因2(PKD2)紧密连锁的微卫星DNA进行家系连锁分析,研究中国上海市汉族该病的遗传异质性,并比较1型和2型常染色体显性多囊肾病(ADPKD)患者临床表现的差异.方法根据知情同意的原则,收集43个诊断明确的汉族ADPKD家系,利用聚合酶链反应扩增与PKD1和PKD2紧密连锁的微卫星DNA,对PCR扩增产物进行基因扫描分型和连锁分析,确定患病家系与PKD1或PKD2连锁.收集家系中所有患者(包括死亡个体)的病史,现有症状和超声检查结果,对两型患者的临床表现进行统计学比较.结果在进入研究的43个家系中,36个家系与PKD1连锁,占全部家系的84%,7个家系与PKD2连锁,占16%.1型和2型ADPKD患者的诊断平均年龄为36.8岁和46.3 岁,高血压的发生率和诊断平均年龄分别为62%、54%和37.4岁、49.1岁,终末期肾病(ESRD)的发生年龄为51.2岁和64.7岁.结论在上海市汉族中,约84%的ADPKD患者由PKD1突变所致,约16%的患者由PKD2突变所致.两型患者临床并发症发生率无明显差别.但1型患者与2型患者比较,其ADPKD诊断年龄、高血压诊断年龄和终末期肾病发生的平均年龄分别提早9.5年、11.7年和13.5年,这提示1型患者的预后较差。

目的 观察不同类型HBV感染患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞(Treg)的频率和临床指标的相关性.方法采集72例慢性乙型肝炎患者(CHB)、16例急性乙型肝炎患者(AHB)、32例健康人的外周血,流式细胞仪分析Treg频率及Treg细胞表面和细胞内分子表达.所有病例及对照均经酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb,实时荧光定量RT-PCR检测血清HBV DNA载量,同时进行肝功能检测.结果 CD4+CD25high Treg表面高表达CD45RO,低表达CD45RA,细胞内高表达CTLA-4.比较Treg占CD4+ T 细胞频率,慢性乙型肝炎组(3.9% ± 1.4%)与正常对照(3.5% ± 0.7%)比较差异无统计学意义(P》0.05),但是明显高于急性乙型肝炎组(3.1% ± 0.9%)(P《0.05),急性乙型肝炎组与正常对照比较差异无统计学意义(P》0.05).慢性乙型肝炎组Treg频率在高病毒载量组(HBV DNA》107拷贝/ml,4.5% ± 1.9%)明显高于低病毒载量组(HBV DNA《107拷贝/ml,3.4% ± 0.6%)和正常对照组,并与病毒载量成正相关(r＝0.32, P《 0.01).8例随访急性乙型肝炎患者Treg频率在恢复期(6.0% ± 1.7%)明显高于急性期(3.0% ± 0.6%),配对t检验P 《 0.001.结论 CD4+CD25high Treg在慢性乙型肝炎患者高病毒载量组明显升高,这提示Treg可能通过抑制细胞免疫反应影响病毒清除;Treg在急性肝炎早期较低,随后增高,可能与Treg在急性肝炎的不同发病阶段中所起的作用有关。

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、HIF-2α、血管内皮生长因子(VEGF)和微血管密度(MVD)在肾透明细胞癌中的表达情况,分析四者的关系及意义.方法应用免疫组化方法分析107例肾透明细胞癌中HIF-1α、HIF-2α、VEGF和MVD的表达情况.结果本组HIF-2α的阳性染色率(80.5%)明显高于HIF-1α(69.2%)(P《0.01).HIF-1α和HIF-2α阳性组中VEGF的阳性率(90.5%和89.8%)明显高于它们阴性组的VEGF阳性率(51.5%和26.3%),P《0.01.HIF-2α和VEGF的表达与MVD存在正相关关系,(Spearman相关系数分别为0.500和0.513),P《0.01.但肿瘤的病理分级和分期与HIF-1α、2α的表达无相关性,P》0.05.结论 HIF-2α在肾透明细胞癌中的表达比HIF-1α更广泛,两者与VEGF的表达正相关.HIF-2α对VEGF的正向调控和促血管生成作用都明显强于HIF-1α.未发现两者的表达与肿瘤病理分级和分期的相关性。

目的 了解上海社区糖尿病及糖调节受损(IGR)人群周围血管病变(PVD)的患病率及其主要危险因素.方法对2000-2001年间上海市曹杨社区代谢综合征流行病学调查获得的糖尿病及IGR患者(717例)进行5年后的随访,将其中完成随访并具有完整数据者427例纳入本次分析,其中男性210例,女性217例,年龄21～104岁(67.3岁±14.0岁).PVD采用Nicolet Versalab SE双向多普勒血流探测仪检测踝/肱动脉压比值(A/BI)进行诊断,同时采用爱丁堡跛行问卷调查间歇性跛行.对与PVD有关的各影响因素进行Logistic回归分析.结果曹杨社区高血糖人群PVD患病率为12.2%,其中在糖尿病人群中为15.1%,在IGR人群中为7.7%.在ABI≤0.9患者中仅13.5%出现间歇性跛行症状.Logistic回归分析发现,年龄、性别、糖尿病病程及总胆固醇是糖尿病周围血管病变的独立危险因素.结论上海社区高血糖人群中PVD患病率较高,不仅发生于糖尿病阶段,而且在糖尿病前期即已出现.大多数PVD患者无临床症状,因此在糖尿病门诊常规进行多普勒ABI检测有助于PVD的早期诊断、早期干预。

目的 构建沉默DNMT1基因的重组体pshRNA-DNMT1,研究其体内外对胃癌AGS细胞增殖凋亡的影响.方法设计短发夹RNA(shRNA)的寡核苷酸片断,克隆到载体pTZU6+1中,构建重组体pshRNA-DNMT1,转染胃癌细胞株AGS,用Western 印迹检测DNMT1蛋白质水平变化,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法评估mRNA水平,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)动态监测活细胞数,电镜和原位末端标记技术(TUNEL)观察其体外的促凋亡作用.构建裸鼠胃癌模型,经pshRNA-DNMT1处理后观察瘤体大小,绘制生长曲线;用苏木素伊红(HE)染色法、电镜和TUNEL检测细胞凋亡,用增殖细胞核抗原(PCNA)法评价细胞的增殖能力.结果成功构建重组质粒pshRNA-DNMT1后,进行序列分析得到确证.pshRNA-DNMT1转染AGS细胞后24 h出现DNMT1蛋白质表达量减少,抑制率为28.24%,48 h为68.54%,72 h为81.47%,重组质粒pshRNA-DNMT1对胃癌AGS细胞中DNMT1基因的转录有着明显抑制作用,转染后24 h抑制率为21.63%,48 h为52.97%,72 h为72.06%.转染后24、48和72 h细胞数存活率为PBS组的79.49%、51.63%和39.16%.pshRNA-DNMT1能抑制肿瘤生长,呈一定的时间和剂量依赖性.结论重组质粒pshRNA-DNMT1能特异有效地抑制胃癌细胞株AGS内DNMT1基因的表达.在胃癌细胞株AGS的体内外实验中均能抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。

目的 探讨肾小管上皮细胞是否合成α1 抗胰蛋白酶(AAT)以及脂多糖(LPS)对肾小管上皮细胞合成AAT的影响.方法分别用间接免疫荧光和逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测人肾小管上皮细胞系(HKC)AAT mRNA及蛋白表达,并对PCR产物进行DNA测序鉴定.用不同浓度LPS 刺激HKC,根据LPS浓度实验分为0、0.5、1、2 μg/ml 4组,用实时荧光定量PCR和Western印迹法分别检测LPS刺激后HKC AAT mRNA及蛋白质表达的变化.结果间接免疫荧光显示HKC AAT阳性,分布于胞质中;RT-PCR检测发现HKC表达AAT mRNA;PCR产物经DNA测序与GeneBank中AAT mRNA序列完全一致.与未刺激组比较,实时荧光定量PCR显示2.0 μg/ml LPS刺激HKC 4 h,AAT mRNA表达明显上调(荧光强度比值为3.43±0.88 vs1.22±0.20;P《0.01),Western 印迹法显示2.0 μg/ml LPS刺激HKC 8 h,AAT蛋白质表达明显增高(条带密度比值为0.88± 0.12 vs 0.59 ±0.05;P《0.01).而0.5 μg/ml和1.0 μg/ml LPS对HKC的AAT mRNA和蛋白质表达均无显著刺激作用.结论 HKC能合成AAT, LPS可上调人肾近曲小管上皮细胞的AAT mRNA和蛋白质表达。

目的 以多导睡眠仪(PSG)作对照,探讨动态心电图推导的呼吸曲线(EDR)初筛睡眠呼吸暂停低通气综合征(SAHS)的可行性.方法 2004年2月-2004年11月对80例就诊于睡眠中心的患者进行整夜(大于7 h)多导睡眠仪(PSG)监测,同时同步进行动态心电图检查.双方在互相不沟通的情况下分别计算睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI),并做出睡眠呼吸暂停低通气综合征阳性与阴性的诊断,以PSG结果作为金标准评价应用动态心电图EDR技术初筛SAHS的可行性.结果应用软件进行自动分析,分别设定软件灵敏度为75%、87.5%、100%,当灵敏度为75%时,EDR检出SAHS的敏感性26.7%、特异性80%、阳性预测值80%、阴性预测值26.7%、诊断符合率40%;灵敏度为87.5%时,敏感性55%、特异性45%、阳性预测值75%、阴性预测值25%、诊断符合率52.5%;灵敏度为100%时,敏感性88.3%、特异性35%、阳性预测值84.1%、阴性预测值50%、诊断符合率75%.结论应用动态心电图的EDR技术,采用软件自动分析可以对SAHS患者进行初筛,其中采用灵敏度为100%时自动分析的敏感性及符合率较高。

目的 探讨采用显微外科技术行胆道重建以降低活体肝移植(LDLT)术后胆道并发症发病率的可行性.方法对我院自2001年1月-2005年12月施行的32例LDLT患者(8例儿童,24例成人)进行分析,32个供肝移植物(其中右半肝24个,左半肝6个,左外叶2个)断面共有43个肝管开口,因此,共行43个肝管开口的胆道重建,胆道重建采用了显微外科技术,其中胆管对端吻合21个吻合口及22个肝管空肠吻合中的13个吻合口采用了手术放大镜下吻合,另外9个肝管空肠吻合口采用了手术显微镜下吻合.结果术后2例受体发生了胆道并发症,1例系在手术放大镜下行肝管空肠吻合,术后第3天出现吻合口漏,行再次开腹引流后痊愈,另1例于术后3个月发生轻度胆管对端吻合口狭窄,经保守治疗痊愈.结论在活体肝移植中采用显微外科技术行胆道重建,特别是对非常细的肝管(直径≤2 mm)行肝管空肠吻合时采用手术显微镜下吻合,有助于降低LDLT术后胆道并发症的发病率。

目的 检测分析单核苷酸多态(SNP)位点在圆锥动脉干畸形患者和正常人群中的分布情况,以及与所构成单倍型与圆锥动脉干畸形的相关性.方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法分析130例圆锥动脉干畸形患者及200名正常人3个SNP位点基因型;应用列联表法统计分析患者组和对照组各SNP位点基因型及等位基因频率;应用PHASE软件构建单倍型并统计分析患者组及对照组单倍型频率是否存在差异.结果 G2963A位点等位基因频率及基因型频率在患者组和对照组中的分布差异显著,患者组G等位基因频率明显高于对照组(χ2=8.14, P《0.005);单倍型分析可见4种单倍型在患者组和对照组中的分布频率差异有统计学意义 (χ2=22.39 P《0.005):G2857/G2963/A6571和G2857/G2963/T6571为人群中常见单倍型.患者组中G2857/G2963/A6571、C2857/A2963/T6571两种单倍型频率较对照组高.结论 TBX1基因编码区的SNP位点G2963A与圆锥动脉干畸形有明显的相关性,具有G等位基因的人发生圆锥动脉干畸形的危险性相对增高;3个SNP位点所构成的单倍型有一定意义,可能与圆锥动脉干畸形易感基因相连锁。

目的 通过检测乳腺癌标本中胸苷酸合成酶(TS)、胸腺嘧啶脱氧核苷磷酸化酶(TP)、二氟嘧啶脱氢酶(DPD)表达情况,探讨乳腺癌的生物学行为与上述3个指标之间的相关性.方法采用免疫组织化学(ABC法)检测228例乳腺癌组织中TS、TP和DPD的表达情况.结果 TS、TP与患者的肿瘤大小、淋巴结状态、组织学分级及MVC有明显的相关性,与患者的年龄、激素受体状态(ER,PR)无关;DPD的表达与患者的年龄,肿瘤大小,淋巴结状态,激素受体状态(ER,PR)、组织学分级及MVC等诸多临床病理因素均无相关性;TS、TP表达阳性患者的10年无病生存率和总生存率明显低于表达阴性者(0、0、3.9%、0.9%和25%、25.4%、58.8%、61.8%),具有显著的统计学差异(均P《0.01);DPD表达阳性和阴性患者的10年无病生存率和总生存率为8.8%、16.2%、23.3%、39.5%,均无显著性差异(均P》0.05).多因素分析发现:组织学分级、淋巴结状态、TS和TP的表达与患者的总生存率都有十分明显的相关性,而且TS和TP的危险系数分别为0.379、0.219,均小于1,这同样说明这两者对于总生存率来说都是非常强烈的保护因素.结论 TS、TP表达水平的高低有可能是乳腺癌患者一个重要的预后指标;DPD的表达与临床病理因素、10年无病生存和总生存率之间无任何相关性。

增生性瘢痕形成的机制目前仍未揭示清楚,既往对瘢痕的研究主要集中在成纤维细胞上,而对瘢痕中的另一重要细胞组分--血管内皮细胞的研究,却一直被人忽视.目前认为,血管内皮细胞不仅与微血管内皮的完整性有关,同时还能够分泌大量的细胞因子和激素,如成纤维细胞生长因子(FGF)、转移生长因子(TGF)β1、一氧化氮(NO)、内皮素(ET)1等,参与许多器官和系统的发病。

病历摘要 　　患者女,37岁,腹痛伴腹泻2 d入院.2 d前患者无明显诱因下出现持续性腹痛,伴腹泻,每天7～8次,稀黑便.无发热寒战,无明显体重下降.拟诊"急性弥漫性腹膜炎"收住入院.2月前,患者曾因腹痛1 d在当地医院就诊,诊为"急性腹膜炎"行剖腹探查,术中发现"大网膜缺血坏死,肠管表面散在直径5～10 mm的黄白色病变",予切除部分大网膜,患者术后恢复顺利.术后病理报告,大网膜纤维脂肪组织中见暗红色血管,血管内见暗红色凝血块.患者自诉有银屑病史1年,自服中药。

异染性脑白质营养不良(metachromatic leukodystrophy,MLD)是一种影响酰基硫酸酯酶A(ARSA)表达的遗传性疾病,特征为少突胶质细胞(oligodendrocyte, OL)功能障碍、硫酸脑苷脂的聚集、髓鞘脱失和进行性神经退行性变。

无创通气与有创通气相比,具有使用方便、费用较低、减轻患者痛苦、并发症少等优点,逐渐被临床医生所认可,其临床用途也越来越广泛.已经有足够的证据表明无创正压通气(non-invasive positive pressure ventilation,NIPPV)的使用,包括持续气道正压(continuous positive airway pressure,CPAP)或者双水平正压通气模式(biLevel ventilation,BiLevel)可以减少心源性肺水肿患者继发的有创机械通气,但患者是否还有其他受益尚无循证医学的证据。

研究指出老人心血管疾病风险的增加是增龄与疾病相互作用的结果[1,2].全球老龄化社会的到来使血管衰老研究成为紧要的社会需求.血管结构、功能随增龄发生的特征性重塑称之为血管衰老,增龄引起的血管重塑可能成为心血管病治疗和预防的靶目标[3]。

谷氨酸是耳蜗传入神经递质之一[1,2],但近来研究表明,谷氨酸对中枢和外周的多种神经细胞又具有兴奋性细胞毒性作用.而研究表明镁离子对中枢神经系统的损伤具有保护作用.然而镁离子是否也同样对体外培养的螺旋神经节神经元具有保护作用呢?本实验观察谷氨酸对体外培养的耳蜗螺旋神经节细胞损伤以及镁离子对该效应的影响,同时观察了镁离子和谷氨酸对静息状态下的耳蜗螺旋神经节细胞内钙离子浓度的影响,旨在为治疗为将来感音神经性聋的治疗提供一些新的策略。

肠对缺血再灌注(intestinal ischemia-reperfusion,IIR)损伤极为敏感[1],诸多因素如急性失血、休克、严重多发性创伤等都会引起肠缺血再灌注现象.肠缺血再灌注不仅会引起肠道的损伤[2],还会引起远隔器官的损害, 严重者会导致多器官功能障碍综合征[3].阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)是川芎、当归等中药的有效成分之一,现已能人工合成。