2005年 · 第85卷第43期

乳腺癌是妇女常见的恶性肿瘤,在欧美国家的发病率占女性恶性肿瘤的首位, 我国虽然属乳腺癌相对低发地区,但发病率正逐年上升, 在某些大城市已升至女性恶性肿瘤的首位.尽管乳腺癌发病率仍在上升,但死亡率已开始下降.原因一方面是发现更多的早期病例, 另一方面得益于治疗手段的进步.乳腺癌的治疗手段包括手术治疗、放射治疗、化学治疗、内分泌治疗和生物治疗.乳腺癌治疗的新理念是科学和人文的结合,治疗趋势包括微创手术、立体放疗和靶向药物治疗.

由于工作原因,笔者有机会参与许多论文的撰写、修改和评审工作,深感部分论文的总体设计框架存在缺陷.常见问题是,文章写得很大,涉及面很宽,但都是"蜻蜓点水"式地写一点,内容粗浅,看后不知作者要说明什么问题,也不清楚作者的结论从何而来,论文的质量不高.因此,笔者提出论文撰写和评审应遵从"一篇论文讲清楚一个问题"的原则.以下是笔者对这一原则的简要阐述,希望各方面专家参与讨论.

目的 明确多重耐药肺炎克雷伯菌质粒介导的AmpC酶基因及周围序列的结构特征,阐明质粒介导AmpC酶传播机制.方法抽提接合菌的质粒,用限制性内切酶HindIII消化,酶切DNA片段的黏末端用Taq酶补平并在末端加单个的脱氧腺苷(A),与pGEM-T Easy载体进行T-A克隆.在含氨苄西林和头孢西丁的平板上筛选重组菌,抽提重组质粒,酶切分析,克隆片段用步移法测序.对重组菌进行药敏试验和等电点分析.结果克隆筛选到含5.2 kb插入片段的重组质粒pT948,插入片段测序发现其含有一个ampC (blaDHA-1)基因和一个ampR调节基因.在blaDHA-1结构基因的侧翼发现一个插入序列IS26及Ⅰ类整合子的qacE△1和sulI基因.重组菌表达等电点为7.7,药敏试验显示对头孢西丁耐药,对头孢他啶的耐药性能被头孢西丁诱导.结论克隆到质粒介导的AmpC酶为DHA-1型,其相邻的插入序列IS26参与DHA-1的转移。

目的 研究细胞毒T细胞(CTL)、自然杀伤细胞(NK细胞)介导的针对自身血小板的细胞毒作用及其机制.方法 (1)将血小板(靶细胞)与自身CD 8+细胞或NK细胞(效应细胞)共同孵育后,流式细胞仪检测膜联蛋白 V标记阳性血小板的比例.(2)流式细胞术检测特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者组与正常对照组CD 8+细胞膜表面分子CD 95配体(FasL)、肿瘤坏死因子(TNFα)和肿瘤坏死因子相关性凋亡诱导配体(TRAIL)的表达.(3)逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测ITP患者组与正常对照组CD 8+细胞颗粒酶B和穿孔素mRNA的表达.结果 (1)血小板单独孵育后,膜联蛋白 V标记阳性率在ITP患者组(3.1%±0.9%)和正常对照组(3.2%±1.1%)间差异无统计学意义(P>0.05);(2)血小板与CD 8+细胞共同孵育后,ITP患者组血小板的膜联蛋白 V标记阳性率(7.6%±2.8%)明显高于正常对照组(3.6%±0.9%,P<0.01);(3)血小板与NK细胞共同孵育后,ITP患者组血小板的膜联蛋白 V标记阳性率(3.5%±1.1%)与正常对照组(3.6%±1.0%)差异无统计学意义(P>0.05);(4)ITP患者组CD 8+细胞膜表面分子FasL、TNFα表达(17.5%±4.4%、11.9%±4.9%)均高于正常对照组(8.9%±1.5%、6.4%±2.1%,均P<0.05);ITP患者组CD 8+细胞膜表面分子TRAIL表达(16%±4%)与正常对照组(14%±3%)间差异无统计学意义(P>0.05);(5)ITP患者组CD 8+细胞颗粒酶B、穿孔素mRNA的表达(2.20%±0.15%、2.47%±0.39%)均高于正常对照组(1.63%±0.22%、1.80%±0.31%,均P<0.05).结论CTL参与了对ITP患者自身血小板的杀伤作用;NK细胞对自身血小板无明显的杀伤作用.凋亡机制和胞质颗粒依赖机制是CTL杀伤血小板的具体途径。

目的 评价江苏省启东肝癌高发现场30年肝癌发病率的长期趋势.方法采用启东1973至2002年肿瘤登记报告资料,计算肝癌粗发病率、世界人口调整率(WASR)、35～64岁截缩调整率、0～74岁累积发病率、变化百分比(PC)及年度变化百分比(APC),并作时期、年龄和队列发病率比较分析.结果启东肝癌30年平均粗发病率为59.28/10万,其中男为91.65/10万,女为27.64/10万,男女发病率性别比例为3.32: 1.WASR为58.71/10万,其中男为93.32/10万,女为26.46/10万.35～64岁肝癌截缩调整率为143.61/10万,0～74岁累积发病率为6.07%.粗发病率的PC为+30.90%,APC为+1.58%;调整率的PC为+12.33%,APC为+0.41%.资料显示后15年肝癌总体发病率上升,但35岁以下年龄组发病率有显著的下降.时期趋势分析也显示35岁以下各年龄组发病率均已下降;出生队列分析则显示1963年以后出生队列发病率的下降趋势.结论启东肝癌高发现场30年粗发病率总体呈上升趋势,可能与中老年人口的增加有关;但现场多年的防治工作,已对青年人的肝癌发病率产生影响,并出现下降趋势。

目的 制备抗广州管圆线虫成虫可溶性抗原单克隆抗体,用于广州管圆线虫循环抗原(CAg)的检测.方法广州管圆线虫成虫可溶性抗原免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫印迹试验对所获得的细胞克隆进行筛选和鉴定,双抗体(单抗3F1和4H2)夹心ELISA法检测实验感染广州管圆线虫大鼠、小鼠和广州管圆线虫病人血清中的CAg.结果获得了3株稳定分泌抗广州管圆线虫成虫可溶性抗原单抗的杂交瘤细胞株,经鉴定2株为IgG1(3F1、4H2),1株为IgM(2A2),杂交瘤细胞培养上清效价分别为1: 25 600、1: 25 600和1: 12 800,诱生腹水ELISA效价分别为1: 80 000、1: 80 000和1: 40 000.3株单抗均识别广州管圆线虫成虫相对分子量约为15 000的蛋白.实验感染广州管圆线虫大鼠、小鼠血清CAg检出率分别为84.2%(48/57)和87.2%(41/47),广州管圆线虫病人血清CAg检出率为86.4%(19/22),与日本血吸虫、囊虫、肺吸虫、旋毛虫病人血清无交叉反应.实验感染小鼠血清CAg第2周即呈阳性反应,第4周A450值达到高峰.结论建立了敏感性高、特异性强的3F1、4H2双抗体夹心ELISA检测广州管圆线虫循环抗原法,可用于广州管圆线虫病的临床诊断、疗效考核和流行病学调查。

目的 评价肝脏活检在异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)后肝功能损害患者中的诊断及治疗意义.方法病例选自北京大学人民医院血液病研究所1999年2月至2004年1月所做的10例Allo-HSCT并接受肝脏活检的患者,男5例,女5例.年龄15～56岁(中位34.5岁).其中白血病8例,骨髓异常增生综合征1例,重症再生障碍性贫血1例.移植方式包括非血缘骨髓移植1例,同胞全相合Allo-HSCT 6例,单倍体移植1例,脐带血移植2例.预处理方案,采用全身照射加环磷酰胺2例,非全身照射方案8例.移植物抗宿主病全部采用环胞菌素A加短程甲氨蝶呤加霉酚酸酯方案.移植前供受者常规接受肝功能及乙肝、丙肝病毒检测.10例患者均接受经皮肝穿刺活检,得到肝组织标本分别经苏木素-伊红和Masson染色在光学显微镜下观察及免疫组织化学检测.结果10例患者Allo-HSCT后出现肝功能损害的时间为2～5个月,中位3.8个月.移植前7例患者HBV、HCV检测阳性,移植后仍阳性.移植前后3例患者HBV、HCV检测全部阴性,临床诊断为移植物抗宿主病(GVHD)肝损害.10例患者在出现肝功能损害时,9例伴有不同程度慢性GVHD(cGVHD)其他表现.10例患者均根据临床诊断采用初始治疗后,肝功能改善不好.分别于Allo-HSCT后4～12个月(中位5.5个月)行肝脏活检.病理结果3例肝炎病毒阴性者为cGVHD肝损害,其余7例为肝炎病毒感染合并cGVHD肝损害.3例单纯诊断为cGVHD肝损害患者,经调整抗GVHD药物后,肝功能恢复;其余7例患者采用抗病毒及调整免疫抑制剂等综合治疗,结果2例肝功能恢复并存活.5例死亡,其中2例在治疗中肝功能改善不好,因合并肺部感染死亡,3例因肝功能衰竭,肝昏迷死亡.结论Allo-HSCT后,对于临床诊断肝脏GVHD肝损害而治疗效果不好的患者,肝脏活检可起到鉴别诊断和指导进一步治疗的作用.肝炎病毒感染与GVHD肝损害合并存在者预后差.肝活检对指导治疗具有一定局限性,还需结合临床及病理制订治疗方案。

目的 评价盐酸/硫酸氨基葡萄糖治疗膝骨关节炎的疗效和安全性.方法采用多中心、随机、阳性药平行对照临床研究方法,将142例膝骨关节炎患者随机分为2组,试验组和对照组各为71例,分别给予盐酸氨基葡萄糖480 mg/次和硫酸氨基葡萄糖500 mg/次,每天口服药物3次,共治疗4周,停药后继续观察2周.采用Lequesne指数作为疗效评分标准,观察服药前后的膝关节症状变化包括休息痛、运动痛、压痛、肿胀、晨僵和行走能力的改善程度,纪录不良反应及实验室生化指标等.结果治疗4周后,试验组和对照组的Lequesne指数总评分与基础值相比分别下降至3.4±1.9(P<0.05)和3.4±1.8(P<0.05),症状改善率分别为91.4%(64/70)和90.0%(63/70),两组间差异无统计学意义(P>0.05);停药两周后,两组皆维持原有的治疗效果,症状改善率分别为92.4%(61/66)和91.2%(62/68),组间差异无统计学意义(P>0.05);试验组和对照组的不良反应发生率分别为4.2%(3/71)和7.0%(5/71),主要表现为轻中度胃部不适和便秘.结论盐酸氨基葡萄糖治疗骨关节炎的疗效和安全性与硫酸氨基葡萄糖相似,是一种治疗骨关节炎的安全、有效的药物。

目的 分析吸烟对下肢外周动脉疾病(PAD)的影响.方法测定北京及上海地区28所医院住院的3379例男性患者(年龄40～98岁)的踝臂指数,踝臂指数≤0.9诊断为PAD.分为吸烟组2253例,非吸烟组1126例.并采用问卷调查表进行资料收集和统计学处理.结果吸烟组踝臂指数(1.00±0.24)显著低于非吸烟组(1.03±0.22,P＜0.05).吸烟组2253例,PAD患病人数562例,患病率为24.94%,非吸烟组1126例,PAD患病人数232例,患病率为20.60%,年龄调整后相对危险度(ORMH)为1.480 (95% CI:1.237～1.770),吸烟等级与患PAD危险存在剂量反应关系.结论吸烟是患PAD的重要危险因素,随吸烟量的增加,患PAD的危险也增加。

目的 研究脂肪组织磷酸烯丙醇羧激酶(PEPCK)与高脂饲养大鼠的胰岛素抵抗的关系及罗格列酮对其的影响.方法将8周龄雄性SD大鼠,分为两组:短期组(8周,33只)和长期组(28周,30只).每组各包括正常饲养组(正常组,11只、10只),高脂组(11只、10只)和罗格列酮组(11只、10只).饲养至实验终点时取空腹血测血游离脂肪酸(FFA)和甘油三酯.采用正常血糖高胰岛素钳方法及组织对3H-2-脱氧葡萄糖(2-DG)的摄取能力测定各组的胰岛素敏感性,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法分析脂肪PEPCK mRNA表达的变化.结果与正常组比较,长期高脂饲养使甘油三酯增加32%(P<0.05).短期高脂饲养组葡萄糖输注速率(GIR)下降51% (P<0.01);长期高脂饲养组肝脏、肌肉和脂肪组织2-DG摄取率分别下降了42%、36%和48% (P<0.01),短期及长期高脂饲养组脂肪组织PEPCK mRNA含量没有改变.与高脂组比较,罗格列酮干预短期组和长期组的FFA分别低125%和49% (P<0.05);甘油三酯分别下降54.0%和23% (P<0.01);短期干预组GIR增加了150% (P<0.01);而长期干预组肝脏、肌肉和脂肪组织2-DG摄取率分别高39%、66%和66% (均P<0.01);同时短期及长期罗格列酮干预使大鼠脂肪组织PEPCK mRNA含量分别增加165%和43%(P<0.05).结论噻唑烷二酮类药物通过诱导脂肪组织PEPCK表达,增加脂肪酸再酯化,降低循环FFA,可能与改善胰岛素敏感性有关。

目的 观察针对乙型肝炎病毒(HBV)P区基因的RNA干扰(RNAi)表达载体pGE-HBVP在HepG2.2.15(2.2.15)细胞中抑制HBV表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)的分泌效应,以阐明HBV P区小干扰RNA(siRNA)抑制HBV复制和蛋白表达的影响.方法构建并鉴定pGE-HBVP,将此载体转染至完整HBV复制模型2.2.15细胞,用化学发光免疫检测法检测并分析转染后不同时间段细胞培养上清中HBsAg和HBeAg的含量变化,并用免疫细胞化学方法观察转染后细胞中HBsAg的表达变化.结果成功构建了5个针对HBV P区的RNAi表达载体pGE-HBVP1～pGE-HBVP5,其中pGE-HBVP1和pGE-HBVP2具有明显的HBsAg和HBeAg分泌抑制效应和表达抑制效应.抑制率最高的pGE-HBVP2在转染2.2.15细胞效率为30%～40%的基础上,转染后24、48、72和96 h培养上清中的HBsAg分泌抑制率分别为28.88%、32.28%、29.10%和18.42%,HBeAg的分泌抑制率分别为38.33%、27.50%、33.41%和12.60%.细胞免疫细胞化学结果显示,pGE-1空载体转染后2.2.15细胞的HBsAg的表达阳性率约为82%,而pGE-HBVP2转染后2.2.15细胞的HBsAg的表达阳性率约为50%,和pGE-1空载体相比阳性率显著下降.结论针对HBV P区的RNAi可以抑制HBV病毒抗原的分泌和表达。

目的 研究中国上海地区早发性乳腺癌中BRCA1/BRCA2基因的突变位点及携带情况.方法对象为来自上海地区的50例早发性乳腺癌(发病年龄≤40岁),其中13例(26%)有一级亲属患病家族史.由静脉血提取基因组DNA,对BRCA1/2基因的全部编码序列进行扩增.突变分析由变性高效液相色谱分析(DHPLC)进行预筛,之后进行DNA测序证实.结果在BRCA1基因中发现有6个致病突变位点,其中4个为新发现的位点,包括两个移码突变(3449insA, 5587-1del8)和两个拼接点突变(IVS17-1G>T, IVS21+1G>C).BRCA2基因的两个致病突变位点都很接近位于11号外显子上;其中的1个致病突变位点为移码突变(5950delCT),另一个错义突变(5911G>C)可能为新的致病突变位点.另外,共发现有12个新的SNP位点,都未引起氨基酸编码改变;其中,8个在BRCA1基因上,4个在BRCA2基因上.在早发性乳腺癌中,BRCA1基因突变频率(12%)比BRCA2基因(4%)高;BRCA1基因突变频率在有无家族史的患者中分别为30.8%和5.4%.结论新发现的4个BRCA1基因的致病突变位点和一个BRCA2基因的错义突变位点可能是中国人群早发性乳腺癌的特有突变位点;在中国人群中,BRCA1基因突变起着比BRCA2基因更大的作用;本研究为未来的临床基因检测提供了可能的筛查模式。

目的 探讨乳腺导管内癌的临床病理学特征及合理治疗方法.方法收集41例导管内癌的临床病理学资料,进行免疫组织化学染色,标记抗体为ER、PR、增殖细胞核抗原(PCNA)、P53和C-erbB-2.结果本组中微小浸润导管内癌15例,微小浸润与组织学分类(χ2=4.60,P<0.05)及肿瘤大小(χ2=9.78,P<0.05)密切相关.ER、PR、PCNA、P53和C-erbB-2的表达率分别为68.3%、65.9%、63.4%、26.8%和46.3%,与浸润性导管癌的表达率差异无统计学意义.ER、P53和C-erbB-2的表达率与组织学类型相关(χ2=11.45、11.97、4.38,P<0.05).结论 Van Nuys组织学分类符合临床治疗与预后的需要,应对导管内癌实行个体化治疗。

目的 研究阿霉素纳米脂质体(NLADR)经不同途径给药对晚期兔乳腺癌模型的治疗效果.方法 pH梯度载药法制备NLADR,平均粒径120 nm.50只雌性新西兰兔随机分为5组,每组10只,组织块悬液注射法制备VX2乳腺移植癌模型,植瘤后第6周开始治疗.A组:对照组,不给予特殊治疗;B组:肿瘤周围皮下注射NLADR;C组:经耳缘静脉注射NLADR;D组:同时给予NLADR静脉、局部注射,药量各占1/2;E组:经耳缘静脉注射阿霉素水溶液(FADR).B、C、D、E组单次药物剂量1 mg/kg,每48 h重复给药1次,3次治疗后48 h处死动物,切除移植瘤、腋窝淋巴结及所有发现的远处转移灶,测量治疗前后移植瘤、腋窝淋巴结体积变化,病理切片观察癌灶坏死情况,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肿瘤细胞增殖细胞核抗原(PCNA),末端标记技术(TUNEL)检测癌细胞凋亡.结果静脉注射NLADR、FADR对移植瘤和肺肝转移灶均表现出明显的抑制,局部注射NLADR对腋窝、纵隔淋巴结的癌转移灶有显著疗效,静脉联合局部注射NLADR对乳腺肿瘤、淋巴结、肺肝转移灶均有显著疗效,癌细胞大量坏死或凋亡,PCNA mRNA表达降低,肿瘤及腋窝淋巴结的增长减缓.结论 NLADR静脉与局部给药相结合,对伴有局部淋巴结和远处器官转移的晚期乳腺癌有显著的治疗效果。

脑动静脉畸形(AVM)是一堆结构变异的动脉和静脉交错缠绕在一起的血管团块,动静脉之间形成一至数个瘘道而无毛细血管,血液可由动脉通过动静脉瘘直入静脉,再回流到静脉窦,这种异常的脑血管结构和脑血流改变可导致脑出血、脑盗血等而引起一系列脑功能障碍,因此必须进行积极治疗.依据AVM的不同级别,制定个体化的治疗方案,采用栓塞、放射神经外科和显微外科相结合的多种方法,连同适当的围手术期处理,多数脑AVM可获得良好的治疗效果.

患者男,23岁,因发作性抽搐5次入北京中日友好医院.患者出生后不久面部、头皮出现丘疹,无自觉症状,智力发育尚可.患者父亲口周可见丘疹.体格检查:面部双颊、唇周部散在或密集分布的褐色粟粒至米粒大小光滑小丘疹,头皮及背部散在红色斑块,压之退色.右中指甲根部红色乳头状赘生物.

泪溢是眼科的常见病,主要由于泪道阻塞引起.临床上的泪道阻塞主要发生在鼻泪道.鼻泪道阻塞分为原发性和继发性.继发性鼻泪道阻塞主要是由于外伤,手术和肿瘤压迫引起.而原发性鼻泪道阻塞(primary nasolacrimal duct obstruction,PNDO)发生的原因目前尚不明确.有研究表明,骨性泪道的狭窄可能是PNDO的病因之一[1].我们利用三维螺旋CT测量骨性泪道,希望了解骨性泪道形态,并且判断PNDO的发生和骨性泪道解剖结构之间是否存在内在联系.

近年来,血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB),已经成为临床高血压治疗指南所推荐的抗高血压治疗的常用药物之一,国产坎地沙坦酯系国内自行合成生产的ARB,可降低成本,方便患者.因此,本研究旨在以依那普利为对照,观察国产坎地沙坦在中国轻、中度原发性高血压治疗中的有效性、安全性及耐受性.

嗜铬细胞瘤(PHEO)在高血压中的患病率为0.3%～1.9%[1],其中恶性占10%左右[2],目前尚无可靠的指标来区分良、恶性PHEO,因此探求它们临床发展的不同特点,可为早期诊断、治疗及判断预后提供临床依据.本文对北京协和医院收治的良、恶性PHEO患者的临床特点进行回顾性分析,报道如下.

巨细胞病毒(CMV)感染是一种较为常见的严重感染,约见于1%的婴儿.10%先天性CMV感染的婴儿出现症状,其中近半数与临床上明显的神经系统后遗症有关.有原发感染的孕妇在怀孕期间,胎儿的感染率为40%.虽然可以在出生前诊断出先天性感染,但目前尚无出生前治疗,即对怀孕期间的原发CMV感染缺乏有效的干预.Nigro等对此进行了非常有意义的多中心研究,结果发表在9月29日的<新英格兰医学杂志>上(N Engl J Med,2005,353:1350-1362).

我国著作权法公布以来，已得到社会各界的广泛重视，作为医学科技期刊必须不折不扣地执行著作权法。为此将本刊对作者署名和志谢的有关要求重申如下。

患者女,23岁,停经17周,下腹憋胀及阴道淋漓出血18 d,于2004年6月8日入院.患者于停经40 d时,出现早孕反应,自觉胎动1周.因腹部憋胀、阴道少量出血曾在当地医院就诊2次,均考虑"宫内妊娠合并部分葡萄胎"建议住院终止妊娠,但本人未住院治疗,因下腹憋胀严重,但无阴道出血方就诊入院.