2004年 · 第84卷第09期

结肠癌是临床最常见的恶性肿瘤之一.2003年美国结肠癌新发病例数和死亡病例数均居美国癌症发病数和死亡数的第3位,居40～79岁男性死亡率的第2位,结肠癌的5年生存率为62%[1].结肠癌是加拿大第2位癌症死亡原因,结肠癌治疗的费用高达520亿加元[2].在我国,结肠癌是第4位最常见的癌症和致死因素,且其发生率呈上升趋势.国内结直肠癌较为多见,青年人结肠癌较多见.另外,由于结肠癌早期没有特异性症状,临床诊断时已多属进展期,造成的损失可能更严重.为进一步提高结肠癌的诊治水平,对结肠癌的基础研究不容忽视。

近5年来干细胞之所以再次成为人们关注的焦点和热点,其一是因为人胚胎性干细胞系(embryonic stem and germ cells,ESCs 和EGCs )终于在1998年分别从人胚胎细胞及生殖嵴细胞中被分离、克隆培养成功,证明它们在体外仍保持未分化状态、具有无限的增殖能力及可分化为三胚层各种细胞类型的广泛潜能[1,2]。

疼痛是常见的临床症状,肌肉骨骼是最常见的疼痛部位.引起肌肉骨骼疼痛的原因很多,包括生理(如老龄)和病理原因.1904年,William Gowers在英国医学杂志发表文章时首次使用了"纤维炎"一词来描述部分患者的腰痛,同年病理学家Ralph Stockman也描述了肌肉疼痛患者的肌束间质中有炎性病灶.Smythe和Moldofsky在20世纪70年代报道了具有"纤维炎"的患者可以有一些特定的压痛部位并可以伴有睡眠障碍。

丙型肝炎是一种主要经血液传播的疾病,丙型肝炎病毒(HCV)慢性感染可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化,部分患者可发展为肝硬化甚至肝细胞(HCC),对患者的健康和生命危害极大,已成为严重的社会和公共卫生问题。

目的 探讨7例以i(20q-)异常为特征的髓系疾病的临床和分子细胞遗传学特征.方法采用骨髓细胞直接法和/或短期培养法按常规制备染色体,采用R显带技术进行核型分析,以20q亚端粒探针和20q12单一序列DNA探针进行双色荧光原位杂交(D-FISH)检测.结果 7例患者中骨髓增生异常综合征(MDS)6例,急性髓细胞白血病(AML)1例.3例现尚存活,其余4例均已死亡,他们的生存期分别为6个月(例1), 7个月(例2),17 d(例4),28 d(例5).染色体核型分析揭示7例均丢失1个正常20号染色体而代之以1或2个比20号染色体还小的中着丝粒等臂染色体,其中6例经FISH检查证实它是伴有20q12中间缺失的20q等臂染色体ider(20)(q10)del(20)(q11 q13), 即i(20q-).结论 i(20q-)核型是一种新的少见的再现性染色体异常,它可能和髓系疾病及不良预后有特别的联系。

目的 建立简易的RHD合子型直接测定方法.方法根据RHD基因序列和RHD基因缺失的原理设计两对引物,分别特异性针对RHD基因第一外显子和融合Rh盒子,再引入一对内对照引物,建立新的双管复式PCR方法;并用于检测152份已知RHD基因序列和基因型的DNA样本、以及359份已知Rh表型样本的RHD合子型.检测结果与使用近期报道的限制性片段长度多态性(RFLP)技术的鉴定结果相比较.结果 152份已知RHD基因序列和基因型的DNA样本包括92份Rh阴性、28份D放散型、3例部分D表型、5例弱D型及24例Rh阳性样品,全部样品的RHD合子型PCR检测结果均与已知的基因型相符合,可直接判断RHD(+)/RHD(+)、RHD(+)/RHD(-)和RHD(-)/RHD(-)三种合子型;359份已知Rh表型的样本,包括12例孕妇配偶、18名家系成员、48例Rh阴性及281例Rh阳性捐血者,PCR检测结果,除一例外,均与RFLP结果一致.该个例PCR检测为RHD(+)/RHD(-)杂合型,而RFLP结果为RHD(-)/RH1D(-)纯合型,由于个例为Rh阳性表型,肯定存在至少一条RHD基因,所以显然RFLP检测下游Rh盒子出现假阴性.结论双管PCR技术鉴定RHD合子型,简便、快速,具有较高的准确率,可常规用于临床或血库实验室。

目的 分析多房囊性肾细胞癌病例的临床资料.方法 1998年1月至2002年12月,北京大学第一医院泌尿外科共收治482例肾癌患者,其中多房囊性肾细胞癌22例,总结临床资料进行分析.结果多房囊性肾癌占同期肾癌病例的4.56%,男女比例是2.67∶ 1,与同期非多房囊性肾癌患者比较(男∶女为2.09∶ 1),其性别构成差异无显著意义(P>0.05),但其平均年龄(46.6岁)低于后者(57.83岁),P<0.01.其中pT1N0M0期肿瘤6例,pT2N0M0期肿瘤15例,pT3bN0M0期肿瘤1例;G1级肿瘤5例,G2级肿瘤17例.结论多房囊性肾细胞癌是肾癌的一种特殊类型,诊断主要依据影像学检查,术前鉴别非常困难.对诊断不清的病例,尤其对于Bosniak分类在三级或以上者,行术中冰冻病理检查或采用保留肾组织的手术治疗,可使患者受益。

近年来发现,在体液中可以检测到肿瘤细胞核DNA[1,2],但由于数量较少,以及正常DNA的稀释作用,检出率较低.线粒体DNA(mitochondria DNA,mtDNA)区别于核DNA的特点有两个:其一,它缺乏损伤修复机制,可能会先于核DNA而受到环境因素的影响并持续存在;其二,mtDNA数量多,复制率高,可能更易于检测.为此我们应用单链构象多态性分析(SSCP)法检测了膀胱癌患者血浆和尿液中mtDNA调控区的HV1区(mtDNA 16024-16383)突变,并与核基因p53检测进行对照.现将结果报道如下。

羊水过少是妊娠晚期较常见的并发症,占妊娠的3.9%[1],轻者胎儿生长受限,重者引起胎儿肺发育不良、骨骼畸形,甚至死亡.发病原因不清楚,早期发生者多与畸形有关,中晚期发生者多与胎盘功能不良有关[2].该病的治疗无突破性进展[3],有报道行羊膜腔内灌注人工羊水,以求缓解,但这非根本性治疗,且容易发生并发症如感染等[4].我们在研究肝素治疗妊娠期肝内胆汁淤积症时[5],意外地发现合并羊水过少者,在血生化指标迅速恢复正常的同时, 羊水在较短时间内迅速增加.我们用肝素治疗31例单纯羊水过少患者,有显著疗效,报道如下。

子宫畸形种类繁多,确诊困难.由于子宫畸形的多样性,以及青春期少女检查手段的局限性,单一妇科检查和/或辅助超声扫描都难以确定子宫畸形的类型,因而导致盲目剖腹探查或误诊误治[1].我们采用宫腔镜结合超声扫描对子宫畸形的16例患者进行了检查,现将结果报道如下。

三叉神经-颈反射(TCR)又称三叉神经-胸锁乳突肌反射,是刺激一侧三叉神经眶下支后,于双侧轻度收缩的胸锁乳突肌上记录到的一个短潜伏期反射,包括一个双向的正/负波,它与一个短时限的运动单位抑制相对应.现将偏头痛患者的三叉神经-颈反射特点报道如下。

严重急性呼吸综合征(SARS)是一种严重的急性自限性传染性疾病,主要通过呼吸道传播,具有传染性强、病程发展快、致死率较高等特点[1]。

目的 观察靶向融合防龋DNA疫苗pGJA-P在大鼠肌肉组织中的原位表达.检测靶向融合防龋DNA疫苗pGJA-P经股四头肌注射途径免疫大鼠后体内抗体水平和防龋效果,并与融合防龋DNA疫苗pGLUA-P进行比较.在小鼠体内长期观察抗体动态变化.方法质粒pGJA-P经股四头肌注射途径免疫大鼠,免疫组织化学方法检测重组蛋白的原位表达.质粒pGJA-P和pGLUA-P经股四头肌注射途径免疫定菌鼠, ELISA法检测血清IgG和唾液IgA抗体水平,Keyes记分法评估定菌鼠磨牙患龋情况.质粒pGJA-P和pGLUA-P经股四头肌注射途径免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测血清IgG和唾液IgA动态变化.结果大鼠股四头肌组织检测到表达的重组蛋白.大鼠pGJA-P免疫组血清抗PAc IgG水平(1:200 000)和抗GTF IgG水平(1:58 000)均显著高于pGLUA-P免疫组(1:23 000和1:11 000) (均P<0.01).大鼠pGJA-P免疫组唾液抗PAc IgA水平(1:8)和抗GTF IgA水平(1:6)均显著高于pGLUA-P免疫组(1:2和1:2)(均P<0.01).pGLUA-P免疫组未能引起有效的唾液IgA反应.pGJA-P免疫组龋齿记分显著低于pGLUA-P免疫组和空白组(P<0.01).小鼠pGJA-P免疫组有效血清IgG、唾液IgA和pGLUA-P免疫组有效血清IgG均持续至本实验结束,pGJA-P免疫组血清IgG和唾液IgA水平均显著高于pGLUA-P免疫组(P<0.01).结论 pGJA-P在动物体内能够正确地表达.pGJA-P经股四头肌注射途径能有效地诱导黏膜和系统体液免疫反应,有效地预防龋病。

目的 探讨生长抑素受体2(SSTR2)基因转染抑制体内胰腺肿瘤生长的效果及其机制.方法利用lipofectAMINE将人类SSTR2全长 cDNA转染导入胰腺癌细胞株PC-3中,G418筛选出阳性克隆;免疫组织化学SABC法和RT-PCR检测生长抑素受体2的稳定表达.分别将表达生长抑素受体2的PC-3细胞 (实验组) 和空载体对照组及阴性对照组的PC-3细胞异种移植到无胸腺小鼠体内.TUNEL法测定这些细胞形成的胰腺肿瘤细胞凋亡指数(AI);免疫组织化学SP法测定凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达,以及肿瘤微血管密度(MVD).另外,比较3组裸鼠之间胰腺肿瘤的大小和重量.结果实验组胰腺肿瘤细胞AI(3.39%±0.84%)显著高于空载体对照组(0.69%±0.08%)和阴性对照组(0.68%±0.09%)(P<0.05).与空载体对照组和阴性对照组相比,实验组Bcl-2蛋白表达显著降低,Bax蛋白的表达则显著升高(P<0.05);实验组MVD(6.3±1.7)显著低于空载体对照组(12.6±1.7)和阴性对照组(13.5±1.9)(P<0.05).另外,实验组胰腺肿瘤的大小和重量也显著低于空载体对照组和阴性对照组(P<0.05).空载体对照组与阴性对照组之间未观测到任何有差异的指标(P>0.05).结论大多数人胰腺癌细胞中缺失SSTR2基因,生长抑素受体2在胰腺癌细胞中的再表达能诱导肿瘤凋亡,抑制肿瘤新生血管形成,最终明显抑制胰腺肿瘤的生长,而凋亡可能通过Bcl-2蛋白的下调及Bax蛋白的上调来调节。

目的 探索以液态胶原作为支架材料于体外构建组织工程化心肌组织.方法将分离并培养的新生大鼠心肌细胞与添加了基质因子的液态Ⅰ型胶原混合,在环形槽中铸成环状心肌细胞/胶原条带.构建的条带在环形槽中培养7 d后取出,在对其施加10%的静态拉伸的情况下,再培养7 d.通过光学显微镜、常规HE染色、免疫组织化学染色和透射电镜观察等对构建的组织工程化心肌组织进行评价.结果构建的工程化心肌组织在施加静态拉伸的第2天可观察到局部跳动的区域,随时间的延长跳动的区域逐渐增多,强度逐渐增大,并最终形成一致跳动.组织学和免疫组织化学染色研究结果显示,在构建的工程化心肌组织中,心肌细胞比较均匀地分布在整个条带中,且多数沿拉伸方向伸展,胞核呈长梭形,其形态类似于天然成熟心肌组织.透射电镜观察显示,条带中心肌细胞含有排列整齐的肌原纤维,并沿着细胞的长轴方向伸展,肌小节结构和Z带清晰可见.结论用液态Ⅰ型胶原可以构建类似天然心肌组织的工程化心肌组织。

目的 分析我国遗传性非息肉性结直肠癌(HNPCC)患者的临床特点,报告hMSH2和hMLH1基因突变筛查结果.方法共收集了28个家系,其中15个家系符合阿姆斯特丹Ⅰ标准,13个家系符合日本临床诊断标准.记录的数据包括患者性别,结直肠癌发生的部位,诊断年龄,是否具有同时和/或异时结直肠癌及结肠外癌,肿瘤的组织病理特点等.通过PCR及变性高效液相色谱分析(DHPLC)筛查hMSH2和hMLH1基因的突变,然后对DHPLC图形异常的样本进行测序.结果 126例患者共诊断170例次恶性肿瘤(23例患有多原发癌).98例(77.8%)的患者患有结直肠癌,且发病年龄早(平均45.9岁),右侧癌多见.共在12个家系中发现8种hMSH2或hMLH1基因序列改变,其中hMSH2基因的第3个外显子的无义突变即G204X是发现的首例我国蒙古族家系错配修复(MMR)基因突变.结论 HNPCC患者是恶性肿瘤(尤其是结直肠癌)的高发人群.DHPLC是一种非常有效的筛选hMSH2和hMLH1基因突变的方法.在我国hMLH1基因尤其是其前九个外显子的突变较hMSH2基因的突变更常见。

目的 探讨结肠癌组织中胸苷磷酸化酶(dThdPase)的表达,检定单核-巨噬细胞表达的dThdPase对抗癌药物5′-脱氧氟尿苷(5'-DFUR)的转化调控作用.方法对40例结肠癌标本进行免疫组织化学染色,分析其细胞的dThdPas表达,并测定癌组织和周围正常组织的dThdPase活性.应用ELISA法分别检测4株结肠癌细胞LS174T、Clone A、Colo320、MIP101和2株类巨噬细胞THP-1、U937的dThdPase蛋白含量.MTT法测定4株结肠癌细胞对5-Fu和5′-DFUR的半数有效浓度(IC50).把定量5′-DFUR加入培养基中同类巨噬细胞或单核细胞一起培养24 h后,取其上清液二倍稀释加入大肠癌细胞中测定IC50有无改变.并在加入定量5′-DFUR的类巨噬细胞培养液中检测5-Fu的生成.结果结肠癌组织中dThdPase活性明显高于周围正常肠组织,表达dThdPase阳性细胞主要是肿瘤相关巨噬细胞(TAM).4株结肠癌细胞中仅LS174T检出0.5单位/mg的dThdPase蛋白;而THP-1和U937则分别为18.2单位/mg和19.3单位/mg.全部大肠癌细胞对5′-DFUR的IC50均明显高于5-Fu(P<0.0001).但同THP-1、U937或单核细胞一起培养24 h后,其IC50明显下降,仅相当于原来的5.4%～41.8%(P< 0.001).从含定量5′-DFUR的THP-1、U937的培养液中分别检出40.2 μmol/L和29.5 μmol/L的5-Fu.结论结肠癌组织中主要由TAM表达dThdPase活性.在体外结肠癌细胞因缺乏dThdPase活性,对5′-DFUR缺乏敏感性,5′-DFUR在单核-巨噬细胞表达的dThdPase催化下,可转化成5-Fu并释放到培养基中发挥抗癌作用。

目的 探讨树突状细胞-结肠癌细胞融合在活化T细胞主要组织相容性复合体(MHC)限制性反应中的作用.方法使用50%聚乙二醇将人外周血树突状细胞与结肠癌细胞SW480融合,用其致敏T淋巴细胞,观察T细胞的活化情况.结果融合细胞与T淋巴细胞混合后,CD4+Th1细胞和CD8+Tc1细胞的活化率分别为57.45%和77.86%,而对照组无明显活化;T细胞的增殖明显高于对照组(P<0.01); T细胞分泌的IFN-γ明显高于对照组(P<0.01).结论树突状-肿瘤细胞融合策略能有效地活化抗肿瘤MHC-Ⅰ类反应和Ⅱ类反应,促进T细胞增殖。

结直肠癌和其他癌症一样,是一种以局部表现为主的全身性疾病.至今5年生存率仍徘徊在50%左右.治疗失败的常见原因是局部复发和远处转移.如何提高手术的根治性以及进行有效的术后综合治疗日益受到临床的重视.近几年来潍坊市人民医院肛肠外科对417例结直肠癌患者进行了随机对照前瞻性观察,以探索不同病期(Dukes)结直肠癌的合理优化治疗方案,取得了满意的初步临床疗效,现将结果报道如下。

病历摘要 　　患者 男,31岁,因双下肢静脉血栓形成1年余,皮肤颜色变深4月,于2002年11月26日入院.患者于2001年7月、2002年2月先后左、右下肢深静脉血栓形成,予尿激酶溶栓、华法令抗凝,但未监测国际标准化比值(INR).2002年7月26日因"胆囊结石"行胆囊切除术,手术前停用华发令8 d.术后第6天出现低热(体温37.2℃),渐出现舌尖色素沉着,阵发性胸痛,服用布洛芬后缓解.

脓毒症是感染引起的全身炎症反应症候群.脓毒症时,细菌产物和毒素过度激活天然免疫系统,免疫效能细胞(巨噬细胞和中性粒细胞)释放致炎介质(TNF-α和IL-1)和调节性细胞因子(IL-6),从而启动炎症级联反应。

患者 男,40岁,因反复左腰部疼痛12 d入院.患者无明显诱因出现左腰部剧烈疼痛,并伴有明显腹胀.当时查体血压正常,左肾区明显叩击痛,患者疑为肾结石。

一、难以直接辨析的实验设计类型 　　在生物医学实验研究中,人们常被复杂的专业问题所困扰.由于缺乏解决某些多因素实验设计的技术和能力,不能将问题的"原型"正确地转变为统计学上的"标准型",常被问题的"表面现象"所迷惑,经常作出错误的判断和分析.一旦定量资料所对应的实验设计类型属于这一类情形,就属于"难以直接辨析的实验设计类型".

由中华医学会神经病学分会、大不列颠神经科协会、香港神经病学学会联合举办，中华医学会国际部和北京大学第一医院共同承办的中英神经病学交流会议将于2004年11月15～17日在北京召开。

患者女,29岁.2002年4月、2003年4月曾经两次怀孕,均于60 d左右死胎、流产.患者本人身体发育正常,妇科检查无异常,丈夫一般体格检查正常.患者父母非近亲婚配,患者出生时,父30岁,母29岁,孕期无用药及毒物接触史,无先兆流产。

患者 男,42岁,脾大17年,面色苍白、巩膜黄染1个月入院。

传统上认为炎症与血栓形成是两个互相独立的病理过程.所谓炎症(inflammation)是指外源性和内源性损伤因子引起细胞多种损伤性病变,机体的局部和全身则发生一系列复杂的反应,以局限和消灭损伤因子,并清除和吸收坏死组织,修复损伤,属于机体的一种防御性反应。