2004年 · 第84卷第04期

本期发表了<盐酸雷洛昔芬对绝经后骨质疏松妇女骨密度、骨代谢生化指标和血脂的影响>一文.这是一篇在骨质疏松防治领域中有重要意义的文章。

本期发表了<广东省社区人群肠易激综合征的流行病学研究>一文,提示对肠易激综合征的研究,在国内日益受到人们的广泛重视。

目的 探讨广东省社区人群肠易激综合征(IBS)的患病率及危险因素.方法用整群、分层、随机抽样的方法在广东省内对广州市、惠州市及惠阳县马安镇(代表农村)三地的常住人口中18～80岁的居民进行面访式问卷调查作为初查,了解按Manning标准加以补充(含便秘症状)及罗马Ⅱ(Rome Ⅱ)标准的IBS的患病率和危险因素.结果 (1) 共调查4178人,其中男1907人,女2271人,平均年龄(43±14)岁,应答率为98%;(2)广东省有症状符合Rome Ⅱ标准的IBS的标化患病率为5.67%,符合Manning标准的IBS的标化患病率为11.50%,患病率无城乡和年龄差别,男女患病率之比分别为1∶ 1.25(按RomeⅡ标准)和1∶ 1.34(按Manning标准);(3) 经单因素和多因素回归分析,服非甾体类抗炎药(NSAID)(OR=3.83)、食物过敏史(OR=2.68)、心理障碍性疾病(OR=2.18)、生活事件(OR=1.89)、肠炎或痢疾史(OR=1.63)及消极应对方式(OR=1.28)等为最可能的危险因素.结论 IBS是广东省的常见病,应引起重视;食物过敏史等为最可能的危险因素,值得进一步研究。

目的 研究急性脑梗死患者初级体感皮质中枢脑磁图(MEG)的变化特征.方法对17例急性脑梗死患者于发病后3～4周进行体感诱发磁场(SEF)检测;同时检测18名健康志愿者(作为正常对照).电刺激部位为腕部正中神经处,电流脉冲宽度0.3 ms,刺激间隔0.5 s.将SEF发生源位置通过影像融合技术标注于超薄磁共振(MRI)上.SEF波峰由等价电流偶极子(ECD)评估. 结果所有受检者SEF的最基本波形为M20, 其ECD位于两侧初级体感皮质"手区"附近.患者组多个SEF参数均存在异常,即:(1)健康对照组两侧M20 ECD空间位置差值为(8±4)mm;患者组为 (11±3)mm,患者组不对称性增大(P<0.01);(2)健康对照组M20潜伏期为(20.7±1.1)ms;患者组健侧半球潜伏期为(21.8±1.2)ms,患侧半球潜伏期为(23.6±1.9)ms,与正常相比均明显延迟(P<0.01);(3)患者组患侧ECD强度为(17±10)nAm,健侧ECD强度为(26±10)nAm,患侧ECD强度减小(P<0.01). 结论 MEG可灵敏地检测出急性脑梗死患者体感皮质中枢功能损伤,并能够客观地评价该病体感皮层中枢的功能状态。

目的 观察颅内动脉瘤夹闭术病人采用异氟醚控制性降压前、后体循环及载瘤动脉血流动力学变化,研究异氟醚控制性降压对脑血管痉挛的影响.方法选择颅内动脉瘤夹闭术病人30例,美国麻醉师协会(ASA)Ⅰ～Ⅱ级,随机分为两组:异氟醚降压组(15例)和异氟醚非降压组 (15例).非降压组术中吸入1 肺泡气最低有效浓度(MAC)异氟醚维持麻醉.降压组行异氟醚控制性降压,平均动脉压下降幅度30%～40%,夹闭动脉瘤后降低异氟醚吸入浓度,终止降压.分别于降压前、降压后30 min、动脉瘤夹闭后即刻、停止降压后30 min(非降压组于相应时间)测定循环指标变化;于切皮前、动脉瘤夹闭后即刻、2 h、4 h取脑脊液测定S100B蛋白含量;于动脉瘤暴露后夹闭前后测定载瘤动脉近心端及远心端主要分支血管的血流速度;并于术后1周随访病人,记录有无术后神经系统并发症.结果 (1)异氟醚降压后30 min,平均动脉压由诱导前的95 mm Hg±12 mm Hg (1 mm Hg=0.133 kPa)降至59 mm Hg±5 mm Hg,停止降压后30 min血压回升至75 mm Hg± 8 mm Hg.降压后外周血管阻力及心肌收缩速度下降,但心率及心输出量均无明显变化.(2)降压组在动脉瘤夹闭后 4 h脑脊液中S100B浓度明显升高(F=17.495, P=0.000),显著高于未降压组(t=2.854,P<0.01).(3)降压组夹闭后载瘤动脉远端血管血流速度增加30%以上者有8例,其中3例病人术后发生了严重的神经系统并发症;未降压组夹闭后血流速度增加30%以上者仅有3例, 2例病人术后发生神经系统并发症.结论在颅内动脉瘤夹闭术中应用异氟醚控制性降压可能加重了脑血管痉挛,不利于病人围麻醉期脑功能的保护。

目的 探讨脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase, syk)基因启动子甲基化与乳腺癌发生、发展过程的关系.方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测了40例乳腺癌组织、癌旁组织及15例乳腺纤维瘤组织中syk mRNA的表达,同时用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测syk基因启动子甲基化情况.结果 40例癌旁组织、乳腺纤维瘤组织均检测到syk基因的表达,乳腺癌组织有9例检测到syk基因的表达,syk基因在乳腺癌组织中表达率显著降低(P<0.05).癌旁组织及乳腺纤维瘤组织未发现有syk基因启动子的甲基化,40例乳腺癌组织中有17例检测到syk基因启动子的甲基化,癌组织syk基因启动子甲基化率显著增高(P<0.05).有淋巴结转移的18例乳腺癌组织中,有14例syk基因启动子甲基化,有淋巴结转移的syk基因启动子甲基化显著高于无淋巴结转移组(P<0.05).结论 syk基因启动子甲基化是导致syk基因失活的原因之一,syk基因启动子的甲基化可能与乳腺癌的发生、转移相关。

目的 检测中国家族性乳腺癌中BRCA1和BRCA2的胚系突变位点.方法对象为来自汉族的14个乳腺癌家系中的15例乳腺癌患者、散发性乳腺癌患者76例和正常对照100名,知情同意后取其外周静脉血,提取基因组DNA,用15例家族性乳腺癌患者和2份pool DNA(每份pool DNA含50名正常对照者的等量DNA)作为样本,对BRCA1基因外显子4、8、11、18、19、20和部分内含子区域,BRCA2基因外显子1～14、外显子17～24和外显子27及部分内含子区域进行序列测定.用DNA Star软件进行序列比较分析,筛查基因突变位点及多态性位点,对有意义的突变位点在正常对照和散发性乳腺癌患者中进行基因分型.结果在BRCA1的外显子11上发现6个单核苷酸多态性(SNP)位点,2个不改变氨基酸编码,4个改变氨基酸编码.其中2个为致病性位点:一个致病位点为G 1235 A(Trp 372 stop),导致蛋白质合成终止,该位点仅在1例29岁的家族性乳腺癌患者中发现;另一致病位点C 1196 T(Pro 359 Leu)也只在1例37岁的家族性乳腺癌患者中发现,该位点在正常对照和散发性乳腺癌患者中进行基因分型后均为野生型,并在相关的文献和乳腺癌信息中心网站的突变数据库中均未检索到,为一新的中国家族性乳腺癌特有的致病位点.在BRCA2 的外显子3、10及11中发现8个SNP位点,5个不改变氨基酸编码,3个改变氨基酸的编码,其中2个位点A 1093 C(Asn 289 His)和A 3199 G(Asn 991 Asp)在2个pool DNA样本中均为野生型.结论在BRCA1上发现两个致病的SNP,可能与早发型乳腺癌有关,其中一个可能是中国家族性乳腺癌特有的新的突变位点。

传染性非典型肺炎(世界卫生组织称之为severe acute respiratory syndrome, SARS)是由SARS病毒[1]引起的急性传染性呼吸系统疾病.研究表明,SARS患者外周血CD4+T细胞和CD8+T细胞数量显著减少[2].自然杀伤细胞(NK细胞)在机体抗病毒感染过程中起重要免疫保护作用.我们采用流式细胞术对不同病程SARS临床诊断患者外周血NK细胞和CD158b+NK细胞数量进行了检测,并以肺炎支原体感染患者和健康人群作为对照,探讨SARS病毒感染后,患者体内NK 细胞是否受到损伤。

在传染性非典型肺炎(严重急性呼吸综合征,SARS)患者肺组织中,可以观察到肺泡壁的增厚、上皮细胞脱落;Ⅱ型上皮细胞增生及凋亡,肺泡腔内有急性渗出性、漏出性炎症等肺泡组织的损伤病理改变.为探讨SARS时肺组织损伤的机理,本研究采用了免疫组织化学法,对肺组织中热休克蛋白GP96及其相关的其他细胞因子的表达及分布进行了检测,并对它们的相关性进行了探讨。

系统性红斑狼疮(SLE)是一种常见的自身免疫性疾病,常累及多系统、多器官,血清出现多种自身抗体,并伴有明显的免疫功能紊乱.由于SLE的确切病因与发病机制迄今不详,给SLE临床早期诊断和治疗造成很大困难[1,2]。

目的 探讨丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1 (MKP-1)在缺氧胃癌细胞系SGC7901中的表达及对缺氧诱导因子-1(HIF-1)的影响. 方法采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) 和Western 印迹检测MKP-1在常氧及缺氧状态下胃癌细胞系SGC7901中的表达;借助DNA重组技术构建MKP-1基因的正义真核表达载体;利用脂质体将正义真核表达载体和空载体转入SGC7901细胞;双荧光素酶报告基因 (Dual Luciferase Reporter, DLR) 检测系统检测荧光素酶活性并采用ELISA法检测SGC7901细胞培养上清血管内皮生长因子(VEGF)的变化. 结果 (1) 半定量 RT-PCR 和Western 印迹结果提示,MKP-1在胃癌细胞系SGC7901中表达,缺氧时其表达上调; (2) 分别将MKP-1正义真核表达载体和pcDNA3.1空载体瞬时转入SGC7901细胞; 转染48 h后,缺氧12 h磷酸化HIF-1α在正义真核表达载体转染细胞(SGC7901-MKP-1)中的表达低于空载体转染细胞(SGC7901-空载体)和未转染细胞(SGC7901).(3) 报告基因试验显示常氧情况下3、6和12 h 荧光素酶活性在SGC7901细胞、SGC7901-空载体细胞和 SGC7901-MKP-1细胞中差异无显著意义(P>0.05);缺氧情况下,SGC7901-MKP-1细胞中荧光素酶活性在3、6和12 h 均明显低于SGC7901细胞和SGC7901-空载体(P<0.01).(4) SGC7901细胞在缺氧3、6、12、24 h VEGF的分泌量高于常氧情况下同一时间点VEGF的分泌量(P<0.05或P<0.01);而在缺氧同一时间点SGC7901-MKP-1细胞VEGF的分泌量低于SGC7901及SGC7901-空载体细胞(P<0.01). 结论胃癌细胞系SGC7901缺氧时MKP-1表达上调, MKP-1可抑制HIF-1转录活性并下调其下游基因VEGF的表达.

目的 研究组蛋白乙酰化对Colo-320和SW1116人结肠癌细胞系p21WAF1和p16INK4A基因表达的影响.方法培养人结肠癌细胞系SW1116和Colo-320,分别以去甲基化制剂5-氮脱氧胞苷(5-aza-dC)和/或组蛋白脱乙酰化酶(HDAC)抑制剂曲古抑菌素(TSA)及丁酸钠(NaBu)干预细胞.运用流式细胞术检测细胞周期变化;以定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法研究控制细胞周期的基因p21WAF1和p16INK4A的表达;染色质免疫沉淀技术分析基因相关染色质乙酰化组蛋白的水平.结果 TSA或NaBu使人结肠癌细胞阻滞于G1期,而5-aza-dC并不能改变细胞周期.正常情况下,SW1116和Colo-320细胞中均有较弱的p16INK4A表达;两种结肠癌细胞系p21WAF1表达缺如.5-aza-dC干预后,p16INK4A表达增强,相反p21WAF1仍无明显表达.当该两个细胞系经TSA或NaBu处理后,p21WAF1转录水平明显上调,并诱导p21WAF1基因相关染色质乙酰化组蛋白H3和H4的积聚.结论两种人结肠癌细胞系中,HDAC抑制剂通过选择性增加p21WAF1基因相关染色质乙酰化水平,上调p21WAF1基因的转录,并相应地导致结肠癌细胞生长停滞;而p16INK4A基因表达主要受甲基化调节。

目的 研究猴自体许旺细胞(SC)从内侧前脑束区(MFB)到尾状核的桥移植对偏侧帕金森病模型猴产生的功能效应及结构效应.方法将3只偏侧帕金森病模型猴(恒河猴)自体SC悬液在立体定向下进行从MFB到尾状核的桥移植,另3只模型猴注射生理盐水作为对照.术后进行行为学评估,应用单光子发射计算机体层摄影术(SPECT)检测多巴胺代谢的变化,4个月后进行细胞学检查.结果自体SC桥移植后,猴行为学表现明显好转.在SPECT检查中,猴脑内移植侧的基底节区多巴胺代谢明显增加,放射性计数从术前的61%增加到术后的79%.SC可在猴脑内存活并迁移,并使其周围的多巴胺能神经纤维明显增加,每只猴针道周围酪氨酸羟化酶(TH)阳性的星形胶质细胞数量超过5000个.移植组猴针道周围TH表达也明显增高,为对照组的243%.结论自体SC桥移植对帕金森病猴有明确的治疗作用。

目的 研究人肺腺癌吉西他滨耐药细胞系A549-Gem的耐药机制.方法免疫组织化学法检测人肺腺癌吉西他滨耐药细胞系的P-糖蛋白的表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测多药耐药基因(mdr1)以及脱氧胞苷激酶(dCK)mRNA的转录,并采用基因芯片检测了A549和A549-Gem的基因表达谱.结果 A549-Gem中P-糖蛋白(P-gp)呈弱阳性表达,A549未见表达.A549-Gem细胞中出现mdr1的mRNA转录增加,却未检测到dCK mRNA的产物.基因芯片检测A549和A549-Gem基因表达谱,结果表明,18.8%的基因出现差异表达,包括癌基因和抑癌基因、细胞周期相关基因、热休克蛋白基因、细胞凋亡相关基因、DNA转录因子(如锌指蛋白等)、DNA修复和重组基因、信号传导基因、蛋白翻译基因以及大量的代谢相关基因.结论肺腺癌细胞对吉西他滨的耐药既与dCK缺乏相关,也有mdr1/P-gp高表达的参与.在肺腺癌细胞对吉西他滨产生耐药的过程中,发生了多种基因表达的变化,提示耐药的产生是多因素参与的复杂生化过程。

目的 钙激活Cl-通道(CLCA)家族中小鼠mCLCA3与人hCLCA1是异种同源蛋白,两者表达于气道上皮杯状细胞.拟探讨hCLCA1 DNA疫苗对哮喘小鼠气道黏液高分泌状况的影响.方法构建重组真核表达质粒pSecTag2B/hCLCA1,将其作为疫苗肌注法接种给BALB/c小鼠(隔2周1次,共4次).当酶联免疫吸附法(ELISA)证实血清中有能结合mCLCA3胞外肽段(ED)的抗体产生时,卵蛋白致敏法制备接种小鼠的哮喘模型.引喘5 d后,PAS特染黏蛋白法观察气道杯状细胞数量及分泌功能,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测黏蛋白MUC5AC mRNA水平的变化.设接种pSecTag2B/mCLCA3、空载体pSecTag2B和生理盐水为对照组.结果 ELISA证实疫苗接种3次后的小鼠血清抗体,能有效结合mCLCA3的3个ED.其中抗体与N-端和C-端ED的结合滴度大于与中间ED的结合滴度.与同样被诱发哮喘的对照组相比,疫苗接种组小鼠气道的杯状细胞数量和黏液分泌量明显减少,MUC5AC mRNA转录水平下降. 结论 hCLCA1 DNA疫苗能诱导小鼠产生结合自身mCLCA3胞外肽段的抗体,并因此有效减轻了哮喘气道黏液高分泌。

目的 改良新型B3型柯萨奇病毒(CVB3)DNA疫苗chitosan-pcDNA3-VP1,增强其预防CVB3性心肌炎的效果. 方法合成含融内体多肽和多聚赖氨酸的"载体多肽"HApLys16,与pcDNA3-VP1、脱乙酰壳多糖(chitosan)依次复合制备chitosan-pcDNA3-VP1-HApLys16疫苗,以含200 μg DNA剂量疫苗隔周滴鼻免疫小鼠,3周后以3×半数致死剂量(LD50)CVB3感染小鼠致病毒性心肌炎,检测感染后体重、体重/心脏重比、心肌HE染色和心脏外观评价病毒性心肌炎预防效果.结果 (1) chitosan-pcDNA3-VP1-HApLys16疫苗免疫组黏膜sIgA分泌增高.(2)病毒感染后体重显示:pcDNA3组减重4.50%,chitosan-pcDNA3-VP1组和chitosan-pcDNA3-VP1-HApLys16组分别增重1.75%和5.44%.(3)感染后体重/心脏重比值显示:chitosan-pcDNA3-VP1-HAplys16组比值最大,为193.77,病毒性心肌炎的体征最轻.(4)感染后心肌病理显示:pcDNA3组100%发生严重病毒性心肌炎;chitosan-pcDNA3-VP1组发病率16.7%,程度轻;chitosan-pcDNA3-VP1-HApLys16组不发病,心肌完全正常.(5)心脏外观显示:pcDNA3组心脏增大有疤痕状白斑;chitosan-pcDNA3-VP1组心脏基本正常;chitosan-pcDNA3-VP1-HApLys16组心脏正常,提示无病毒性心肌炎发生.结论含融内体多肽的chitosan-pcDNA3-VP1-HApLys16新型疫苗可有效增强chitosan-pcDNA3-VP1 DNA疫苗预防病毒性心肌炎的效果。

目的 确定盐酸雷洛昔芬(raloxifene HCl, RLX)对中国绝经后骨质疏松妇女骨密度、骨代谢生化指标及血脂的影响.方法采用多中心、随机、双盲、安慰剂对照的临床研究,共入组204例绝经后骨质疏松妇女,随机分为:(1)RLX组(102例):每日服用RLX 60 mg;(2)安慰剂组(102例):服用与RLX外观一样的安慰剂.两组对象均每日补充元素钙500 mg及维生素D 200 U,共治疗12个月.观察指标为:腰椎、髋部骨密度;骨代谢生化指标[血清C端交联肽(CTX) 、骨钙素(BGP)];血脂.骨密度测定采用双能X线吸收法,骨代谢生化指标测定应用一步ELISA法,血脂测定应用酶法.结果研究结束时,腰椎骨密度:RLX组平均增加3.3%±4.8%,安慰剂组增加1.0%±4.9%(P<0.001).髋部骨密度:RLX组平均增加了1.4%±4.8%,安慰剂组平均降低了0.9%±5.0%,(P<0.001).在RLX组,无一例发生新的椎体骨折,而安慰剂组有5例发生新骨折(P=0.059).在RLX组,BGP及 CTX分别降低41.7%和61.5%,而安慰剂组则分别降低10.6%和35.6%,两组比较P均<0.001.RLX组血总胆固醇(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)明显低于安慰剂组(均P<0.001).而两组的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和甘油三酯(TG)水平比较差异则无显著意义. 结论雷洛昔芬能够显著增加中国绝经后骨质疏松妇女腰椎和髋部的骨密度,显著降低骨转换率及总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇。

目的 探讨绝经后妇女护骨素(osteoprotegerin,OPG)基因启动子950T-C单核苷酸多态性与骨密度和骨代谢生化指标的相关性. 方法应用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)方法测定259名上海市绝经后女性OPG基因启动子(950T-C)基因型;应用双能X线骨密度仪(DEXA)测定股骨颈、腰椎等部位的骨密度,同时检测骨代谢生化指标.结果在绝经后妇女中发现TT、TC、CC 3种基因型,各基因型的分布频率分别为:TT 59%、TC 28%、CC 13%.将绝经后妇女分为＜65岁组(Ⅰ组)和≥65岁组(Ⅱ组)2组,发现在Ⅰ组不同基因型妇女股骨颈部位骨密度(BMD)间差异有显著意义 (P<0.05),分别为:TT (0.64±0.11)g/cm2,TC(0.67±0.11)g/cm2, CC (0.68±0.14)g/cm2.经体重指数、年龄等因素校正后,差异仍有显著意义(P<0.05).而Ⅰ组的其他指标和Ⅱ组的各项指标在不同基因型间的差异无显著意义(均P>0.05).结论 OPG 基因多态性对年龄小于65岁的绝经后妇女的股骨颈部位骨密度有明显影响,OPG基因多态性可能对女性峰值骨量的获得有影响.

病历摘要 　　患者,男性,36岁,因反复腹泻2周、畏寒发热1周于2002年8月入院.2周来,患者无明显诱因出现腹泻,每日4～5次,呈黄绿色,水样,量多,无黏液脓血,伴下腹部胀痛,便前明显,排便后缓解,未予特殊治疗.1周前起,出现发热(下午及夜间明显),最高体温40℃,伴畏寒、乏力、全身酸痛,但无寒颤、流涕、咽痛、咳痰.无血吸虫疫区生活史,无食物过敏史.

循证医学(evidenced-based medicine,EBM)是20世纪80年代在国际上迅速发展起来的一种新的临床医学模式.国际著名临床流行病学家Sackett教授将其定义为"慎重、准确和明智地应用所能获得的最好研究证据来确定病人的治疗措施",其核心思想是医疗决策应尽量以客观的临床研究结果为依据。

系统性红斑狼疮(SLE)是一种可累及多系统多器官的自身免疫性疾病.近20年来,我国SLE的诊断和治疗水平已有较大提高,但重症SLE的死亡率仍很高.2001年我科成功地救治了1例以心肾功能不全为主要表现的重症SLE患者,随访2年病情仍保持平稳.现将我们的救治体会总结如下。

患者男性,20岁,汉族.头痛、头昏伴恶心、呕吐3个月,加重3 d.予以对症处理症状无改善.起病前无头颅外伤史.出生时头围较其他婴儿明显增大.体格检查:神志清,头围61 cm,两眼视力1.2,视野粗测正常,无眼球震颤及共济失调体征,行走平稳,肌力、感觉正常.头颅CT检查示Dandy -walker 综合征,鞍区占位,脑积水(图1,2)。

本刊2004年第1期至第3期上刊登了3篇题为"定性资料统计分析错误辨析与释疑"的文章,本文还将介绍一些误用t检验和χ2检验处理定性资料的错误实例,并对错误的性质和产生的不良后果作详细地分析,同时,给出正确的分析方法和计算结果。

患者男,23岁,双上肢无力、无脉4年余,反复咯血2年,于2003年1月23日入院.患者1998年于起立时出现一过性头晕,之后逐渐出现双上肢无力,并发现双侧桡动脉搏动消失,双上肢血流图检查提示"双侧桡动脉闭塞".予雷公藤多甙20 mg/次、1次/d,治疗2个月后上肢无力好转,桡动脉搏动恢复,停药,病情稳定.2000年10月患者在安静状态下突然咯鲜血,总量约1000 ml,胸片及胸部CT提示"左肺不张",疑诊为"支气管扩张".予止血,输血后好转出院,未继续用药。

患儿男,8岁,因发热4个月,腰痛3个月,以"发热待查"于2003年3月4日入院.当时主要表现为发热,脊柱强直、髋部疼痛及活动受限.全身浅表及双侧腹股沟区淋巴结未触及肿大。

临床上常用抗凝药、抗血小板药和去纤药作为预防血栓形成(抗栓疗法)和溶解血栓(溶栓疗法)的药物.但是,若这些药物应用过量,便会造成出血并发症;若用量不足,便达不到预期效果.因此,在应用这些药物的过程中, 必须区别不同情况,选择相应指标,作为实验室监测,以指导和调整临床合理用药,使药物既能达到防止血栓形成,又不至于引起出血等并发症的目的。