2002年 · 第18卷第05期

目的探讨体内外不同环境条件对大鼠胚胎神经干细胞分化的影响.方法孕龄16天的大鼠胚胎神经干细胞体外扩增后移植至大鼠脑内尾状核出血部位;同时体外将其与新生大鼠Schwann细胞共培养,应用免疫组织化学和免疫荧光方法分别检测神经细胞、星形胶质细胞及少突胶质细胞特异性标志蛋白tubulin-β、MAP2,GFAP和GalC的表达.结果移植到脑内的BrdU阳性细胞环绕脑出血区域分布,大部分细胞GFAP阳性,少部分细胞tubulin-β或GalC阳性;而与Schwann细胞共培养后,神经干细胞大部分呈tubulin-β和MAP2免疫荧光阳性,少部分呈GFAP或GalC免疫荧光阳性.结论脑内尾状核出血环境诱导神经干细胞主要分化成神经胶质细胞;而体外与Schwann细胞共培养主要诱导其分化成神经细胞.

目的探讨体内外不同环境条件对大鼠胚胎神经干细胞分化的影响.方法孕龄16天的大鼠胚胎神经干细胞体外扩增后移植至大鼠脑内尾状核出血部位;同时体外将其与新生大鼠Schwann细胞共培养,应用免疫组织化学和免疫荧光方法分别检测神经细胞、星形胶质细胞及少突胶质细胞特异性标志蛋白tubulin-β、MAP2,GFAP和GalC的表达.结果移植到脑内的BrdU阳性细胞环绕脑出血区域分布,大部分细胞GFAP阳性,少部分细胞tubulin-β或GalC阳性;而与Schwann细胞共培养后,神经干细胞大部分呈tubulin-β和MAP2免疫荧光阳性,少部分呈GFAP或GalC免疫荧光阳性.结论脑内尾状核出血环境诱导神经干细胞主要分化成神经胶质细胞;而体外与Schwann细胞共培养主要诱导其分化成神经细胞.

目的探讨大鼠雪旺氏细胞对人胚胎神经干细胞生长和分化的作用.方法实验分为三组:组一:干细胞生长于培养雪旺氏细胞1天后的培养液中;组二:干细胞与雪旺氏细胞共培养;组三:干细胞生长于DMEM/F12培养液中.观察干细胞的形态学变化和免疫荧光的表达.结果组一的神经球分化生长,绝大多数细胞tubulin-β阳性,少数为GalC或GFAP阳性;组二中,在雪旺氏细胞生长密集和稀少的地方,干细胞分别表现为不分化和明显分化两种状态;组三的神经干细胞无法正常生长.结论大鼠雪旺氏细胞分泌物支持人胚胎神经干细胞的生长并诱导其分化.

目的神经干细胞具有自我更新及多向分化潜能的特性,本文将人类神经干细胞移植到大鼠颅脑损伤的模型中,观察是否有治疗效果.方法人类神经干细胞取自3～4月胎儿海马,体重为300～370 g的大鼠制成脑损伤模型.伤后24小时将神经干细胞用立体定向注射法注入双侧顶叶皮层,伤后1周动物运动神经功能评分后,处死取脑,行病理及免疫组化染色.结果伤后1周接受干细胞移植的治疗组与损伤组相比呈现出明显的运动功能改善,一部分移植到顶叶的干细胞呈Tubulin(+)、GFAP(+),表明它们分化成为神经元或胶质细胞.另外我们观察到治疗组伤区皮层的正常神经元增多,且坏死及凋亡的神经元减少.结论神经干细胞是细胞移植治疗颅脑损伤的一种良好的细胞来源.

目的探讨人类神经干细胞的体外培养条件及其传代的方法.方法采用机械方法从胎脑中分离神经细胞,应用N2培养基进行培养,bFGF和EGF刺激细胞扩增;传统方法和对神经球切割的方法进行传代培养;应用免疫组织化学染色对培养的细胞及其分化的细胞进行鉴定.结果从胎脑当中成功培养出人类的神经干细胞,培养条件下呈悬浮状态生长,形成神经球,绝大多数的细胞表达波形蛋白和Musashil两种神经干细胞的标志物;这种细胞可分化为神经元和星型胶质细胞,早期的培养有少量的少突胶质细胞;在这种培养条件下,神经干细胞生长速度较慢,而采用切割神经球的方法保持了细胞间的联系,神经干细胞可获得较大的扩增速度.结论在体外的培养条件下,可从胎脑组织中培养出神经干细胞,它可做为中枢神经系统疾病移植治疗的潜在细胞来源.

目的探讨神经干细胞(NSCs)转染酪氨酸羟化酶(TH)基因后的分化.方法从胚胎16天Wistar大鼠室管膜前下周围区分离、增殖、鉴定NSCs;将TH基因和缺陷性逆转录病毒载体N2A构建成真核表达质粒,以电穿孔将其转入PA317包装细胞内;收集PA317包装产生的逆转录病毒颗粒,感染体外培养的NSCs,经G418筛选,获得成功转染TH基因的NSCs克隆;分别以0.4ng/ml bFGF和5%胎牛血清诱导转染及未转染TH基因的NSCs分化,比较TH基因转染及不同诱导方式对NSCs分化的影响,同时在分化细胞内检测TH的表达.结果以0.4ng/ml bFGF诱导可使95%以上的NSCs分化为神经元,而5%FBS诱导则大多分化为神经胶质细胞,无论是否转染TH基因,神经元及神经胶质细胞的分化比例不发生改变;TH基因转染后能在神经干细胞的子代细胞内高效、稳定表达.结论 TH基因转染不影响NSCs的分化潜能,TH能在神经干细胞的子代细胞中有效表达;0.4ng/ml bFGF诱导可以促使NSCs分化为神经元.

目的研究神经干细胞移植治疗缺氧缺血性脑损伤的可行性.方法取孕龄为12～16天的母鼠,从胎脑中分离神经细胞,进行培养、鉴定.用出生7天的SD大鼠的新生鼠制作缺氧缺血性脑损伤的动物模型,7天后接受神经干细胞移植(移植组, n=16只),同时设置对照组,只注射磷酸缓冲液(对照组,n=8只).8～10周后,作Y迷宫实验检测大鼠的学习能力和记忆能力.取脑组织作免疫组织化学检查.结果从大鼠胎脑中成功培养出神经干细胞,培养条件下呈悬浮状态生长,形成神经球,绝大多数的细胞表达神经干细胞的标志物神经巢蛋白(nestin).接受神经干细胞移植组大鼠的学习能力、记忆能力和对照组相比,有明显提高,差异具有显著性(P＜0.05).接受神经干细胞移植大鼠脑组织中可见存活的移植细胞,并和宿主脑组织融合在一起.结论在体外培养条件下,可从胎脑组织中培养出神经干细胞,移植到缺氧缺血性脑损伤大鼠脑内后,细胞与宿主的脑组织融合在一起,动物的学习、记忆能力有改善.移植神经干细胞是治疗缺氧缺血性脑损伤的有效方法之一.

目的研究液压冲击性脑损伤后成年大鼠神经前体细胞的增殖及迁移.方法制作液压冲击性脑损伤模型,免疫组织化学方法动态检测巢蛋白(Nestin)和5溴脱氧尿苷(BrdU)的表达.BrdU标记方法确定增殖的神经前体细胞;Nestin的表达用于确定神经前体细胞.结果同正常对照组相比较,伤侧皮层、海马及室下区的Nestin阳性细胞数于伤后1d明显增多,7d达高峰,30d消失;BrdU阳性细胞数于伤后3d达高峰,而7d以后逐渐减少.室下区BrdU阳性细胞及Nestin阳性细胞经胼胝体向对侧迁移.结论液压冲击性脑损伤可激发成年大鼠神经前体细胞增殖及迁移.

目的了解烧伤血清对内皮细胞核因子-κB (NF-κB)异二聚体p50/p65核移位,以及核抑制因子κB(IκB)α降解的影响,进一步探讨烧伤血清对内皮细胞的活化作用.方法采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV-304,分别用正常人血清、烧伤患者血清、烧伤患者血清+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)刺激内皮细胞,并以正常培养的内皮细胞为对照.应用激光共聚焦显微镜观察刺激30、60、120、480 min后内皮细胞p50/p65核移位情况,采用Western印迹法检测刺激30、60、90、120 min后内皮细胞IκBα蛋白降解的情况. 结果与对照组比较,烧伤血清刺激内皮细胞30 min后,p50、p65即发生核移位,30～60 min达高峰,2 h后恢复至刺激前状态;而烧伤血清刺激30 min后,IκBα发生降解(P<0.01),刺激45～60 min后最为明显,2 h后表达逐渐恢复.PDTC能有效抑制烧伤血清作用30、60 min后,p50、p65的核移位和IκBα降解. 结论烧伤血清可导致内皮细胞NF-κB p50、p65发生核移位,并使IκBα降解,进而活化NF-κB,诱导内皮细胞分泌细胞因子.PDTC对这一系列变化可能有抑制作用.

目的了解烧伤血清对内皮细胞核因子-κB (NF-κB)异二聚体p50/p65核移位,以及核抑制因子κB(IκB)α降解的影响,进一步探讨烧伤血清对内皮细胞的活化作用.方法采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV-304,分别用正常人血清、烧伤患者血清、烧伤患者血清+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)刺激内皮细胞,并以正常培养的内皮细胞为对照.应用激光共聚焦显微镜观察刺激30、60、120、480 min后内皮细胞p50/p65核移位情况,采用Western印迹法检测刺激30、60、90、120 min后内皮细胞IκBα蛋白降解的情况. 结果与对照组比较,烧伤血清刺激内皮细胞30 min后,p50、p65即发生核移位,30～60 min达高峰,2 h后恢复至刺激前状态;而烧伤血清刺激30 min后,IκBα发生降解(P<0.01),刺激45～60 min后最为明显,2 h后表达逐渐恢复.PDTC能有效抑制烧伤血清作用30、60 min后,p50、p65的核移位和IκBα降解. 结论烧伤血清可导致内皮细胞NF-κB p50、p65发生核移位,并使IκBα降解,进而活化NF-κB,诱导内皮细胞分泌细胞因子.PDTC对这一系列变化可能有抑制作用.

目的了解烧伤血清对内皮细胞核因子-κB (NF-κB)异二聚体p50/p65核移位,以及核抑制因子κB(IκB)α降解的影响,进一步探讨烧伤血清对内皮细胞的活化作用.方法采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV-304,分别用正常人血清、烧伤患者血清、烧伤患者血清+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)刺激内皮细胞,并以正常培养的内皮细胞为对照.应用激光共聚焦显微镜观察刺激30、60、120、480 min后内皮细胞p50/p65核移位情况,采用Western印迹法检测刺激30、60、90、120 min后内皮细胞IκBα蛋白降解的情况. 结果与对照组比较,烧伤血清刺激内皮细胞30 min后,p50、p65即发生核移位,30～60 min达高峰,2 h后恢复至刺激前状态;而烧伤血清刺激30 min后,IκBα发生降解(P<0.01),刺激45～60 min后最为明显,2 h后表达逐渐恢复.PDTC能有效抑制烧伤血清作用30、60 min后,p50、p65的核移位和IκBα降解. 结论烧伤血清可导致内皮细胞NF-κB p50、p65发生核移位,并使IκBα降解,进而活化NF-κB,诱导内皮细胞分泌细胞因子.PDTC对这一系列变化可能有抑制作用.

目的了解烧伤血清对内皮细胞核因子-κB (NF-κB)异二聚体p50/p65核移位,以及核抑制因子κB(IκB)α降解的影响,进一步探讨烧伤血清对内皮细胞的活化作用.方法采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV-304,分别用正常人血清、烧伤患者血清、烧伤患者血清+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)刺激内皮细胞,并以正常培养的内皮细胞为对照.应用激光共聚焦显微镜观察刺激30、60、120、480 min后内皮细胞p50/p65核移位情况,采用Western印迹法检测刺激30、60、90、120 min后内皮细胞IκBα蛋白降解的情况. 结果与对照组比较,烧伤血清刺激内皮细胞30 min后,p50、p65即发生核移位,30～60 min达高峰,2 h后恢复至刺激前状态;而烧伤血清刺激30 min后,IκBα发生降解(P<0.01),刺激45～60 min后最为明显,2 h后表达逐渐恢复.PDTC能有效抑制烧伤血清作用30、60 min后,p50、p65的核移位和IκBα降解. 结论烧伤血清可导致内皮细胞NF-κB p50、p65发生核移位,并使IκBα降解,进而活化NF-κB,诱导内皮细胞分泌细胞因子.PDTC对这一系列变化可能有抑制作用.

目的了解烧伤血清对内皮细胞核因子-κB (NF-κB)异二聚体p50/p65核移位,以及核抑制因子κB(IκB)α降解的影响,进一步探讨烧伤血清对内皮细胞的活化作用.方法采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV-304,分别用正常人血清、烧伤患者血清、烧伤患者血清+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)刺激内皮细胞,并以正常培养的内皮细胞为对照.应用激光共聚焦显微镜观察刺激30、60、120、480 min后内皮细胞p50/p65核移位情况,采用Western印迹法检测刺激30、60、90、120 min后内皮细胞IκBα蛋白降解的情况. 结果与对照组比较,烧伤血清刺激内皮细胞30 min后,p50、p65即发生核移位,30～60 min达高峰,2 h后恢复至刺激前状态;而烧伤血清刺激30 min后,IκBα发生降解(P<0.01),刺激45～60 min后最为明显,2 h后表达逐渐恢复.PDTC能有效抑制烧伤血清作用30、60 min后,p50、p65的核移位和IκBα降解. 结论烧伤血清可导致内皮细胞NF-κB p50、p65发生核移位,并使IκBα降解,进而活化NF-κB,诱导内皮细胞分泌细胞因子.PDTC对这一系列变化可能有抑制作用.

目的了解烧伤血清对内皮细胞核因子-κB (NF-κB)异二聚体p50/p65核移位,以及核抑制因子κB(IκB)α降解的影响,进一步探讨烧伤血清对内皮细胞的活化作用.方法采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV-304,分别用正常人血清、烧伤患者血清、烧伤患者血清+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)刺激内皮细胞,并以正常培养的内皮细胞为对照.应用激光共聚焦显微镜观察刺激30、60、120、480 min后内皮细胞p50/p65核移位情况,采用Western印迹法检测刺激30、60、90、120 min后内皮细胞IκBα蛋白降解的情况. 结果与对照组比较,烧伤血清刺激内皮细胞30 min后,p50、p65即发生核移位,30～60 min达高峰,2 h后恢复至刺激前状态;而烧伤血清刺激30 min后,IκBα发生降解(P<0.01),刺激45～60 min后最为明显,2 h后表达逐渐恢复.PDTC能有效抑制烧伤血清作用30、60 min后,p50、p65的核移位和IκBα降解. 结论烧伤血清可导致内皮细胞NF-κB p50、p65发生核移位,并使IκBα降解,进而活化NF-κB,诱导内皮细胞分泌细胞因子.PDTC对这一系列变化可能有抑制作用.

目的了解烧伤血清对内皮细胞核因子-κB (NF-κB)异二聚体p50/p65核移位,以及核抑制因子κB(IκB)α降解的影响,进一步探讨烧伤血清对内皮细胞的活化作用.方法采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV-304,分别用正常人血清、烧伤患者血清、烧伤患者血清+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)刺激内皮细胞,并以正常培养的内皮细胞为对照.应用激光共聚焦显微镜观察刺激30、60、120、480 min后内皮细胞p50/p65核移位情况,采用Western印迹法检测刺激30、60、90、120 min后内皮细胞IκBα蛋白降解的情况. 结果与对照组比较,烧伤血清刺激内皮细胞30 min后,p50、p65即发生核移位,30～60 min达高峰,2 h后恢复至刺激前状态;而烧伤血清刺激30 min后,IκBα发生降解(P<0.01),刺激45～60 min后最为明显,2 h后表达逐渐恢复.PDTC能有效抑制烧伤血清作用30、60 min后,p50、p65的核移位和IκBα降解. 结论烧伤血清可导致内皮细胞NF-κB p50、p65发生核移位,并使IκBα降解,进而活化NF-κB,诱导内皮细胞分泌细胞因子.PDTC对这一系列变化可能有抑制作用.

目的了解烧伤血清对内皮细胞核因子-κB (NF-κB)异二聚体p50/p65核移位,以及核抑制因子κB(IκB)α降解的影响,进一步探讨烧伤血清对内皮细胞的活化作用.方法采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV-304,分别用正常人血清、烧伤患者血清、烧伤患者血清+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)刺激内皮细胞,并以正常培养的内皮细胞为对照.应用激光共聚焦显微镜观察刺激30、60、120、480 min后内皮细胞p50/p65核移位情况,采用Western印迹法检测刺激30、60、90、120 min后内皮细胞IκBα蛋白降解的情况. 结果与对照组比较,烧伤血清刺激内皮细胞30 min后,p50、p65即发生核移位,30～60 min达高峰,2 h后恢复至刺激前状态;而烧伤血清刺激30 min后,IκBα发生降解(P<0.01),刺激45～60 min后最为明显,2 h后表达逐渐恢复.PDTC能有效抑制烧伤血清作用30、60 min后,p50、p65的核移位和IκBα降解. 结论烧伤血清可导致内皮细胞NF-κB p50、p65发生核移位,并使IκBα降解,进而活化NF-κB,诱导内皮细胞分泌细胞因子.PDTC对这一系列变化可能有抑制作用.

目的探索应用骨髓基质细胞治疗缺血性脑梗塞的途径,效果,机理.方法从健康人肋骨取原代骨髓基质细胞后扩增.线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血模型(n=56),2小时后再灌注.24小时后治疗组(n=28)尾静脉注射3×106骨髓基质细胞,对照组(n=28)尾静脉注射1ml生理盐水.分别采用神经损伤评分(NSS)检测大鼠神经系统功能,ELISA检测BDNF、NGF,流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫组化方法检测脑内骨髓基质细胞或骨髓基质细胞来源的细胞.结果在7,14,21,28天治疗组的NSS较对照组明显低(P＜0.05),治疗组的BDNF和NGF较对照组明显高(P＜0.05),治疗组的凋亡细胞较对照组明显减少(P＜0.05).在缺血侧半球可以发现骨髓基质细胞,并且一部分骨髓基质细胞表达了神经细胞表面标志物.结论静脉移植骨髓基质细胞治疗缺血性脑梗塞是一种简单有效的方法.骨髓基质细胞移植后缺血脑组织中生长因子的增加对神经功能的恢复起到了重要作用.

目的探讨选择性胫神经分支部分切断术治疗踝部痉挛状态的治疗效果.方法回顾分析2000年3月至2002年3月显微手术治疗的141例病人219只踝部痉挛状态病例,全部采用选择性胫神经分支部分切断术.结果全部病人平均随访12.6个月.全部病人术后立即感踝部痉挛状态缓解,随访期间缓解率为97%.术后2周内步态功能改善满意.术后发生小腿、足部感觉障碍16例,随访期间均见好转.无1例发生肌无力.结论选择性胫神经分支部分切断术是治疗踝部痉挛状态安全有效的显微外科手术方法.

目的探讨MRI未见异常的库欣病的诊断和处理原则.方法回顾性分析36例MRI未见异常的库欣病的临床资料,除1例Nelson综合征外,其余35例均有典型的皮质醇增多症的表现.内分泌学检查符合库欣病31例,不典型5例.36例均行经蝶窦垂体探查术.随访时间0.5～4年,平均1.5年.结果 36例中病理为垂体ACTH腺瘤27例,垂体ACTH细胞增生4例,未见肿瘤或增生5例.结合内分泌检查及临床表现,全组治愈率为67%,缓解率为19%.结论对于MRI未见异常的库欣病,如果临床和内分泌学典型,可行经蝶窦垂体探查术;对内分泌学检查不典型而临床排除异位ACTH腺瘤的患者有手术探查的相对适应证.

目的探讨巨大型垂体腺瘤切除手术中的垂体柄保护.方法采用经纵裂蝶窦入路显微手术切除巨大型垂体腺瘤52例.结果肿瘤全切除39例(75%).垂体柄保留34例(65%).术后发生尿崩32例(62%),其中23例在术后1～2周内恢复正常,占术后尿崩总数的72%;7例在3个月内恢复;2例尿崩症状持续1年以上.结论垂体腺瘤手术中的垂体柄保留可有效降低术后尿崩症,特别是永久性尿崩症的发生,是提高手术效果的重要措施.

目的探讨微弹簧圈和α-氰基丙烯酸正丁酯(NBCA)栓塞外伤性颈动脉海绵窦瘘的适应证和方法.方法回顾14例外伤性颈动脉海绵窦瘘,包括球囊不能完全闭塞瘘口,颈动脉已经结扎,或瘘口过小球囊不能进入瘘口的病例.12例因为球囊栓塞失败的病例以微弹簧圈栓塞海绵窦瘘,2例球囊和弹簧圈不能完全闭塞瘘口的病例以NBCA栓塞.结果 12例选择弹簧圈栓塞海绵窦,8例完全闭塞瘘口,复查无复发.4例大部分闭塞并残余小的瘘口,有1例合并鼻衄,术后仍有小量鼻衄发生,由耳鼻喉科永久性填塞蝶窦防止鼻衄.2例NBCA栓塞的病例,栓塞后部分闭塞瘘口,复查瘘口缩小继而闭塞.结论在球囊栓塞失败或难度大的病例,弹簧圈和NBCA在一定程度上可以弥补球囊的不足,取得较好的临床效果.

目的研究基因转移P21WAF1/CIP1过量表达对人脑胶质瘤细胞凋亡的影响和治疗作用.方法本文构建缺陷型重组腺病毒载体:在CMV启动子控制下的人P21 cDNA(Ad-P21),其编码人P21蛋白.通过流式细胞仪、RT-PCR进行P21表达检测;应用TUNEL法、免疫组化、荧光显微镜和流式细胞仪进行相关凋亡检测、分析.结果 RT-PCR检测五株亲本胶质瘤细胞表达P21WAF1/CIP1cDNA,而流式细胞仪未检测到P21表达;Ad-P21转导的胶质瘤细胞株均过量表达P21;在体内外Ad-P21能诱导胶质细胞瘤向终末分化、凋亡或诱导炎症反应抑制肿瘤生长或消退.结论基因转移P21WAF1/CIP1为研究基因治疗恶性脑胶质瘤提供了有效的手段.

目的探讨延髓心血管调节中枢受累后心电图的改变,心电图改变的机理和治疗.方法选择经手术后病理证实的延髓闩部血管网织细胞瘤47例,分别对其术前术后心电图进行检测.结果延髓组心电图异常率、平均心率、QTc间期异常率、QTc间期均值、ST段异常、T波异常率、窦性心动过速发生率、存活病例每例心电图异常项数均与对照组有显著差异(P＜0.05). 结论延髓心血管调节中枢受累,可以使副交感神经受到抑制,交感神经系统兴奋性异常增高,产生心率增快、复极障碍为主的心电图改变,心电图异常率明显增高,使用β-受体阻滞剂等可减少恶性心律失常的出现,提高生存率.

目的了解烧伤血清对内皮细胞核因子-κB (NF-κB)异二聚体p50/p65核移位,以及核抑制因子κB(IκB)α降解的影响,进一步探讨烧伤血清对内皮细胞的活化作用.方法采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV-304,分别用正常人血清、烧伤患者血清、烧伤患者血清+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)刺激内皮细胞,并以正常培养的内皮细胞为对照.应用激光共聚焦显微镜观察刺激30、60、120、480 min后内皮细胞p50/p65核移位情况,采用Western印迹法检测刺激30、60、90、120 min后内皮细胞IκBα蛋白降解的情况. 结果与对照组比较,烧伤血清刺激内皮细胞30 min后,p50、p65即发生核移位,30～60 min达高峰,2 h后恢复至刺激前状态;而烧伤血清刺激30 min后,IκBα发生降解(P<0.01),刺激45～60 min后最为明显,2 h后表达逐渐恢复.PDTC能有效抑制烧伤血清作用30、60 min后,p50、p65的核移位和IκBα降解. 结论烧伤血清可导致内皮细胞NF-κB p50、p65发生核移位,并使IκBα降解,进而活化NF-κB,诱导内皮细胞分泌细胞因子.PDTC对这一系列变化可能有抑制作用.

目的了解烧伤血清对内皮细胞核因子-κB (NF-κB)异二聚体p50/p65核移位,以及核抑制因子κB(IκB)α降解的影响,进一步探讨烧伤血清对内皮细胞的活化作用.方法采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV-304,分别用正常人血清、烧伤患者血清、烧伤患者血清+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)刺激内皮细胞,并以正常培养的内皮细胞为对照.应用激光共聚焦显微镜观察刺激30、60、120、480 min后内皮细胞p50/p65核移位情况,采用Western印迹法检测刺激30、60、90、120 min后内皮细胞IκBα蛋白降解的情况. 结果与对照组比较,烧伤血清刺激内皮细胞30 min后,p50、p65即发生核移位,30～60 min达高峰,2 h后恢复至刺激前状态;而烧伤血清刺激30 min后,IκBα发生降解(P<0.01),刺激45～60 min后最为明显,2 h后表达逐渐恢复.PDTC能有效抑制烧伤血清作用30、60 min后,p50、p65的核移位和IκBα降解. 结论烧伤血清可导致内皮细胞NF-κB p50、p65发生核移位,并使IκBα降解,进而活化NF-κB,诱导内皮细胞分泌细胞因子.PDTC对这一系列变化可能有抑制作用.

目的了解烧伤血清对内皮细胞核因子-κB (NF-κB)异二聚体p50/p65核移位,以及核抑制因子κB(IκB)α降解的影响,进一步探讨烧伤血清对内皮细胞的活化作用.方法采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV-304,分别用正常人血清、烧伤患者血清、烧伤患者血清+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)刺激内皮细胞,并以正常培养的内皮细胞为对照.应用激光共聚焦显微镜观察刺激30、60、120、480 min后内皮细胞p50/p65核移位情况,采用Western印迹法检测刺激30、60、90、120 min后内皮细胞IκBα蛋白降解的情况. 结果与对照组比较,烧伤血清刺激内皮细胞30 min后,p50、p65即发生核移位,30～60 min达高峰,2 h后恢复至刺激前状态;而烧伤血清刺激30 min后,IκBα发生降解(P<0.01),刺激45～60 min后最为明显,2 h后表达逐渐恢复.PDTC能有效抑制烧伤血清作用30、60 min后,p50、p65的核移位和IκBα降解. 结论烧伤血清可导致内皮细胞NF-κB p50、p65发生核移位,并使IκBα降解,进而活化NF-κB,诱导内皮细胞分泌细胞因子.PDTC对这一系列变化可能有抑制作用.

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