2009年 · 第32卷第04期

高效抗逆转录病毒治疗(HAART)是目前治疗AIDs行之有效的方法.但是,作为遏制MIDS的一项公共卫生策略,涉及到政府行为.自2003年以来我国政府积极响应联合国的号召,做出了政府的承诺,制定了"四免一关怀"的政策,全面开展全国性的HAART治疗工作.HIV及相关的检测技术是HAART治疗推广和应用的重要技术保障,包括HIV感染者和AIDS病例的确诊、治疗的准入、药物疗效和毒副反应的观察、药物的置换、HIV耐药的发现和变化,均以HIV检测技术为基础,当然也包括了有关研究.本期刊载的6篇有关HAART治疗及其相应检测技术的研究,有力地证明我国HIV检测技术在为国家免费MDS治疗中发挥的作用,也在服务中对发现的问题加强研究,又促使HIV检测技术本身的不断开拓与创新,为进一步完善HAART治疗的发展,提供了科学依据。

高效抗逆转录病毒疗法(highly active antiretroviral therapy,HAART)被认为是现今治疗HIV/AIDS最行之有效的办法,从根本上改变了人类HIV感染的临床进程.在多药联合应用过程中,个体间药代动力学差异等诸多因素影响药物在体内的作用发挥.为了提高药物的治疗效果,使得药物在有效浓度水平发挥效能,保证疗效的前提下毒副作用最低,临床开展药物浓度监测,帮助个体化剂量,优化治疗。

目的 了解广州地区2007年细菌耐药性监测协作组所属15所医院临床分离株的耐药情况,明确广州地区的耐药特点.方法 采用纸片扩散法(KB法)和美国临床和实验室标准协会(CLSI)2008年的判断标准对18 500株临床分离株作药敏试验.结果 18 500株细菌中革兰阳性菌占31.6%,革兰阴性菌占68.4%,其中非发酵菌占革兰阴性菌45.7%.耐甲氧西林会葡菌(MBSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为55.9%和75.9%.按照2008年CLSI标准,所有肺炎链球菌都对青霉素敏感.在大肠埃希菌和克雷伯菌属中产ESBLs菌的检出率分别为43.8%和39.8%,对大肠埃希菌和克雷伯菌属ESBL产生菌的耐药率最低的药物分别是美罗培南、亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西彬他唑巴坦,耐药率为0-14.1%.铜绿假单胞菌对头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦和美罗培南的耐药率最低,分别为20.4%、24.4%和25.4%,但3者敏感率相比,由高到低分别为:哌拉西林/他唑巴坦(75.4%)、美罗培南(72.4%)和头孢哌酮/舒巴坦(63.2%).不动杆菌属对头孢哌酮/舒巴坦和美罗堵南的耐药率分别为2.6%和5.1%.出现少数铜绿假单胞菌(5.5%)和鲍曼不动杆菌(1.5%)的泛耐药株.痰标本来源的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对大多抗菌药物的耐药性都高于血液标本来源菌.结论 非发酵菌分离率上升,细菌耐药性持续增加,出现泛耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌.加强地区性细菌耐药性监测,对于正确合理选用抗菌药和控制细菌耐药性产生十分重要。

目的 探讨尿液上皮细胞(EC)中人巨细胞病毒(HCMV)DNA载量预测婴儿活动性HCMV感染的应用价值.方法 分别收集82例HCMV潜伏感染组和84例活动性感染组婴儿外周血和尿液标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCB)和化学发光免疫分析检测血浆HCMV DNA载量和HCMV IgM/IgG抗体;间接免疫荧光法检测外周血多形核白细胞(PMNLs)中HCMV pp65抗原;UF-100尿沉渣全自动分析仪和FQ-PCR分别做尿液EC计数和HCMV DNA载量检测,并计算尿液EC中HCMV DNA载量.同时,用受试者工作特征曲线(ROC)评价尿液上皮细胞中HCMV DNA载量在婴儿HCMV激活感染诊断中的敏感度和特异度.结果 166例HCMV感染婴儿尿液上皮细胞中HCMV DNA阳性检出率最高,为94.58%(157/166),病毒载量范围为5.67×102-1.31×107拷贝/103EC;不同时段尿液EC中HCMV DNA载量差异无统计学意义(F=0.19,P>0.05);活动性感染组尿液EC中HCMV DNA载量[5.13±0.99(拷贝/103EC,lg)]显著高于潜伏感染组[3.92±0.82(拷贝/103EC,lg),t=8.52,P<0.01];根据ROC曲线,当cut-off值为4.55时,尿液EC中HCMV DNA载量对活动性感染诊断的敏感度和特异度分别为71.4%和75.2%;活动性感染患儿更昔洛韦治疗后尿液EC中HCMV DNA载量显著低于治疗前(t=5.44,P<0.01).结论 尿液EC中HCMV DNA载量用于预测婴儿HCMV活动性感染是一种简便、有效的方法,并能用于治疗监测。

目的 建立一种基于DNA扩增和测序分型(PCR sequencing-based typing,PCR-SBT)的人类血小板抗原HPA-1～HPA-16w的基因分型方法.方法 从免疫多态性数据库中下载HPA-1～HPA-16w的全套HPA核酸序列,以Primer Premier 5.0软件设计引物,特异性扩增包含HPA-1a/lb到HPA-16aw/16bw多态性的核酸片段.通过调整引物序列和PCR条件获得单一的特异性扩增产物.PCR产物纯化后直接进行DNA序列分析并确定HPA基因型.通过对2份标准样本的HPA分型验证PCR-SBT方法的准确性;并利用PCR-SBT法对2008年度国际输血协会(ISBT)第14届国际血小板免疫学工作组提供的16份比对样本(包括6个含有基因突变的干扰样本)进行HPA基因分型.结果 设计11对引物扩增和测序16个HPA系统.2份标准样本的HPA基因型分别为HPA:1aa/2aa/3ab/4aa/5ab/6aa/7aa/8aa/9aa/10aa/11aa/12aa/13aa/14aa/15aa/16aa和HPA:1aa/2aa/3aa/4aa/5aa/6aa/7aa/8aa/9aa/10aa/11aa/12aa/13aa/14aa/15as/16an.16份ISBT考核样本的256个HPA基因型结果清晰,其中HPA-1～HPA-6w、HPA-9w和HPA-15共8个系统的128个基因型结果与ISBT参考结果完全一致.结论 建立了HPA-1～HPA-16w的PCR-SBT分型方法,结合高通量的DNA序列分析仪,具有简单、快速和准确的优点,适合于临床HPA全套基因分型,具有良好的应用前景。

目的 分析在中国人群中发现的中间型β地中海贫血家系的分子生物学特征.方法 表型检测采用标准的血液学分析技术测量RBC参数,采用高效液相色谱方法检测Hb组分.采用反向斑点杂交技术诊断β地中海贫血基因突变,利用跨越断裂点PCR技术(gap-PCR)扩增断裂点基因序列并进行测序分析.结果 先证者Hb浓度为86 g/L,属中间型地中海贫血表型.先证者父亲呈典型的小细胞低色素改变,平均红细胞容积(MCV)为63.7 fl,平均红细胞血红蛋白量(MCH)为20.4 pg,均降低;血红蛋白A2(HbA2)增加,属地中海贫血杂合子表型.而先证者母亲、外祖母和妹妹的MCV及MCH均正常,但胎儿血红蛋白(HbF)较高,HbF分别为28.3%、21.1%及33.7%,属于胎儿血红蛋白持存综合征(HPFH)杂合子表型.进一步的基因分析表明,先证者为β441-42/HPFH-6基因型的中间型地中海贫血患儿,其父母基因型分别为β41-42/βN和HPFH-6杂合子.其外祖母和妹妹均为HPFH-6杂合子.结论 发现1例β41-42/HPFH-6中间型地中海贫血病例,可为产前诊断提供可借鉴的临床经验。

目的 探讨流式微球阵列分析术(cytometric bead array,CBA)检测胃癌患者血清中趋化因子含量及其临床意义,为胃癌免疫治疗提供依据.方法 收集45例胃癌患者、30例良性胃病患者和40名健康对照者血清,采用CBA测定3组血清中趋化因子[白细胞介素8(IL-8)、调节活化蛋白(RANTES)、γ干扰素诱导的单核因子(MIG)、巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、干扰素-γ诱生蛋白(IP-10)]含量,并用BD公司CBA分析软件进行数据分析.结果 健康对照组血清趋化因子水平分别为IP-10(176.4±20.7)μg/L,MCP-1(111.3±17.2)μg/L,MIG(503.9±47.2)μg/L,IL-8(472.4±116.7)μg/L,良性胃病组为IP-10(207.9±31.7)μg/L,MCP-1(121.2±23.6)μg/L,MIG(514.5±63.0)μg/L,IL-8(480.2±134.8)μg/L,胃癌组为IP-10(266.6±24.7)μg/L,MCP-1(100.4,70.8～193.5)μg/L,MIG(1614.0±275.4)μg/L,IL-8(500.0±164.8)μg/L.3组血清IP-10、MIG水平差异具有统计学意义(IP-10:F=3.52,P<0.05,MIG:F=9.27,P<0.01).其中,胃癌组与健康对照组比较,血清IP-10含量差异有统计学意义(t=2.58,P<0.05);胃癌组与健康对照及良性胃病组比较,血清MIG含量差异均有统计学意义(分别t=3.29,P<0.01,t=2.84,P<0.01).结论 CBA检测血清趋化因子是一种简便、精确的新方法.胃癌患者血清趋化因子IP-10、MIG水平升高,可能与其发病、转移等过程有关,这些指标的检测将为采用趋化因子的抑制或拮抗作用治疗胃癌提供重要手段。

肿瘤早期发现和早期诊断是肿瘤防治的关键,肿瘤标志的研究与应用对肿瘤诊断及指导临床治疗有重要价值[1].细胞角蛋白(CK)-2G2是一种新型肿瘤标志,其为CK-19的全长片段.我们检测分析肺癌和肺结核患者及健康人血清中CK-2G2含量,以评价CK-2G2在肺癌早期诊断和辅助诊断中的临床应用价值。

脲原体是引起泌尿生殖系感染性疾病的重要病原之一,包括2个生物群,14个血清型,其中血清型1、3、6、14属于生物Ⅰ群,其余10个血清型属于生物Ⅱ群.后来,Femández Molina等[1]对脲原体进行基因分析,又把其分为2个基因群Ureaplasma parvum(微小脲原体,Up)和Ureaplasma urealyticlun(解脲脲原体,Uu),分别与生物á和Ⅱ群完全吻合。

酵母菌(尤其是念珠菌)是引起医院内血流感染的常见病原菌,因其对抗真菌药物的耐药性而致治疗失败已多有报道[1].日益增多的非白念珠菌和曲霉菌引起的系统真菌感染,使得临床经验治疗变得复杂而困难[2].传统的抗真菌药物由于副作用大或抗菌谱窄,在使用中受到限制,新型抗真菌新药如卡泊芬净、伏立康唑在抗真菌治疗中发挥重要作用。

早在2002年,WHO推荐临床检测使用血浆,而不是传统上的血清[1-3].目前仪器自动化吸样检测几乎涉及所有项目,血清检测常因纤维蛋白堵塞仪器导致的检测不准确或仪器故障而成为检验操作的常见问题[4-6];而血清凝固需要的时间成为影响着检测结果正确性和报告单延迟发送的关键因素[7].更重要的是,凝血激活对RBC、WBC、PLT的损伤而导致的细胞内物质的释放,从而影响检测结果。

缺乏早期诊断和转移监测的特异性指标是食管癌术后复发和转移的高死亡率的关键原因,因此临床上迫切需要寻找取材方便、微创且可实时追踪监测的外周血肿瘤标志.2006年Kim等[1]通过基因启动子区药物处理和芯片表达分析等研究发现,神经氨酸酶受体家族成员--N-甲基-D-天冬氨酸受体2B(NMDAR2B)在食管癌癌组织及其癌细胞系中具有很高的异常甲基化率;启动子甲基化是该基因失活的主要原因,且与肿瘤细胞凋亡抑制相关.为此,我们对食管癌癌组织,特别是外周血NMDAR2B的异常甲基化情况进行了检测分析.以探讨其作为食管癌复发和预后监测指标的临床应用价值。

目的 建立应用流式细胞术检测人/山羊嵌合体中人源细胞的方法.方法 通过宫内移植的方法将标记有绿色荧光蛋白(GFP)的人造血于/祖细胞(MIG细胞)移植入胎山羊腹腔内,从而获得人/山羊嵌合体模型(MIG羊).采集MIG羊的外周血,以数十种鼠抗人的抗体标记,筛选出对人源细胞特异性强而与山羊细胞无或仅有微弱交叉反应的抗体,列人流式细胞仪常规检测的首选抗体,继而在非移植山羊的外周血中加入不同比例(25%、50%、75%和100%)的人脐血细胞,用CD+34表面抗体标记来观察人脐血细胞和人CD+34细胞的分布,以决定"门"的区域和大小;取MIG羊的肝脏,应用流式细胞术检测灌流后肝实质细胞中GFP细胞的比例及DNA含量.结果 筛选出CD7、CD15、CD38、CD45CD20CD34CD14和血型糖蛋白A(GPA)等8种单抗作为检测嵌合体中人源细胞的首选抗体;确定了进行流式细胞分析时"门"的大小和区域;MIG羊肝实质细胞中,GFP+细胞的比例为29.1%(29 100/100 000);DNA含量测定结果显示MIG羊肝组织分选获得的GFP+细胞主要呈现2个峰,其位置与人的双峰位置相对应.结论 流式细胞术是研究干细胞在体内分化、归巢和生物学特征的快速、简便、有效的方法;表面抗体以及"门"的选择对于准确检测人/山羊嵌合体中人源细胞至关重要。

目的 探讨多种细胞因子包括转化生长因子β(TGF-β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素2(IL-2)对CD+4T淋巴细胞的分化调节作用.方法 将人外周血T淋巴细胞、鼠脾脏T淋巴细胞在不同的刺激条件下进行体外培养,采用流式细胞仪分析活化T淋巴细胞中CD+4IL-17+T辅助17细胞(Th17细胞)、C+4IL-17+T淋巴细胞、CD+4CD+25FOXP+3T调节性细胞(Treg细胞)的表达情况.结果 鼠脾脏T淋巴细胞培养液中有TGF-β存在时可促进Treg细胞、rh17细胞和CD+8;IL-17+T淋巴细胞分化,表达水平分别为(7.8±2.2)%、(12.6±3.1)%、(10.1±2.6)%.无细胞因子培养的同类细胞为实验对照组,表达水平分别为(4.8±0.6)%、(1.7±0.5)%、(1.0±0.4)%,差异均有统计学意义(q=4.09、8.80、9.61,P<0.05或P<0.01).TGF-β与IL-6细胞因子共同存在时可促进Th17和CD+8IL-17+T淋巴细胞分化,表达水平分别为(17.8±5.3)%、(15.0±4.2)%,而分化受抑制的Treg细胞的表达水平为(4.I±1.2)%,与TGF-β组同类细胞表达水平比较差异均有统计学意义(q=5.03、5.17、5.04,P均<0.01).在TGF-β刺激的T淋巴细胞中加入IL-2细胞因子可使Th17细胞、CD+8;IL-17+T淋巴细胞表达减少,同时伴有Treg细胞表达量的增加;在加入抗IL-2后结果相反,即Th17细胞、CD+8IL-17+T淋巴细胞表达水平增加,Treg细胞表达水平减少.人外周血T淋巴细胞上Th17、CD+8IL-17+、Treg细胞表达水平变化趋势与鼠脾脏淋巴细胞相似.结论 不同细胞因子对于调控Th17细胞和Treg细胞之间的平衡起着十分重要的作用。

目的 研究耐哑胺培南(IMP)铜绿假单胞菌(Pa)外膜孔蛋白oprD基因突变方式和突变意义.方法 对来自临床样本的34株耐IMP的Pa用PCR方法直接扩增oprD基因,扩增产物纯化后进行DNA双向序列分析,测得序列在www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST中的BLASTn(序列号:X63152.1 Pseudomonas aeruginosa PA01)和BLASTx(序列号:NF249649.1 Pseudomonas aeruginosa PA01)进行DNA序列和氨基酸序列分析,并与标准菌株ATCC27853和2株临床分离IMP敏感Pa比较,分析突变类型和可能影响的oprD外膜蛋白功能域.结果 oprD基因突变率高达92.3%(12/13),突变方式多样(包括点突变、缺失突变、插入突变),导致外膜蛋白oprD L2、L3茎环结构上103、115、127、154、158、170、185、186、189位氨基酸改变和(或)移码突变.发现新的碱基变异位点(1 079、1114、1196、1206、1288、1300、1301 bp)和新的氨基酸突变位点(115、127、154、158、185、189位氨基酸).以上突变在标准菌株ATCC27853和2株临床IMP敏感的Pa中均未检测到.结论 oprD基因发生广泛有意突变,导致L2、L3茎环结构氨基酸改变和(或)移码突变,可能影响oprD与IMP结合,导致本组Pa对IMP耐药。

目的 探讨小干扰RNA(siRNA)调节导致的△Np73抑制对结肠癌细胞SW620 5-氟尿嘧啶(5-FU)药物敏感性的影响,为结肠癌治疗提供新途径.方法 将△Np73 siRNA转染人SW620结肠癌细胞,观察其对结肠癌细胞△Np73表达的影响.并与5-FU联合使用,四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测细胞活力,流式细胞技术检测细胞凋亡.分别将转染△Np73 siRNA和阴性对照siRNA的SW620细胞注射裸鼠成瘤,瘤中注射5-FU观察体内肿瘤的生长情况.结果 △Np73 siRNA可显著抑制SW620结肠癌细胞△Np73的表达,但本身均不能抑制SW620结肠癌细胞的生长.同时应用△Np73 siRNA和5-FU共同处理的SW620细胞的凋亡率达到42.9%,显著高于单纯5-FU处理组(18.9%)和单纯△Np73处理组(8.8%).在转染△Np73 siRNA的成瘤小鼠的瘤中注射5-FU,能明显抑制癌细胞体外生长(t=15.32,P<0.05).结论 △Np73 siRNA可通过抑制△Np73的表达,从而增强对化疗药物的敏感性。

衰老是发生在分子、细胞及整个机体的多因素协同引起的生命弱化过程.可靠易测的衰老生物学指标的确立,对衰老机制的研究、衰老相关疾病的诊断及亚健康状态的评估、延缓衰老药物的筛选等至关重要.自1995年Chen等[1]提出氧化DNA损伤导致复制性衰老以来,众多研究提示,DNA损伤修复能力可能具有细胞衰老标志物的潜在条件[2]。

武汉大学人民医院的汤冬玲博士等对湖北地区2型糖尿病患者和糖耐量正常的健康人群mtDNA的12S rRNA、tRNA Leu、tRNA Glu、ND1和D-loop区的基因突变情况进行筛查,发现了3394(T→C)、14693(A→G)突变与T2DM的易感性有一定关联,16189(T→C)变异与湖北地区汉族人T2DM胰岛素抵抗相关.2型糖尿病是一组多因素导致的代谢紊乱综合征,患病率逐年上升。

目的 建立一种寡核苷酸微阵列检测幽门螺杆菌23S rRNA基因A2142G、A2143G及C2182T点突变的方法.方法 根据23S rRNA基因A2142G、A2143G及C2182T突变位点设计相应探针,样本经不对称PCR扩增后,其产物与芯片杂交.非荧光标记引物扩增PCR产物克隆至T载体,测序验证芯片结果,并结合临床最低抑菌浓度实验判断该方法的正确性.结果 寡核苷酸微阵列技术与测序检测幽门螺杆菌23S rRNA基因多态性结果完全一致.经培养及鉴定幽门螺杆菌阳性的54份标本,杂交结果显示A2142位点均为野生型(54/54);A2143G突变率为11.11%(6/54),尚未发现A2143C和A2143T的突变;C2182T突变率为12.96%(7/54),尚未发现C2182A和C2182G的突变,其余均为野生型,上述结果与菌株体外试验MIC结果完全一致.结论 建立一种寡核苷酸微阵列技术检测幽门螺杆菌克拉霉素耐药的23S rRNA基因多态性的方法,可以高通量并直接检测胃黏膜而不需进行细菌培养,推动个体化治疗方案的实施。

16SrDNA鉴定在纯培养后微生物分类中广泛应用.但纯培养后再基因测序鉴定的方法,无法克服传统培养时间长与受培养条件限制的缺陷[1-3].从标本直接鉴定病原菌基因仅需12 h,不受培养条件影响.但此项技术在实际临床应用却很少,存在的最大技术难点在于临床标本中含有人类蛋白质、白细胞、组织细胞、多糖等干扰因素。

患者女,44岁.主因肢体僵硬感、乏力、脱发3年,全身瘙痒性皮疹3个月,发热伴皮疹加重1周,于2008年3月27日收入我院风湿科.患者3年前无明显诱因出现左手肿胀伴晨僵超过1 h,后该症状进行性加重,并逐渐累及肩、双肘及右手,感乏力,脱发明显,于外院就诊查抗核抗体(ANA)1:320(正常值<1:40),抗SSA及SSB抗体阳性,诊,断为"系统性红斑狼疮(SLE)",口服泼尼松30 mg/d,症状减轻,出院后每月减5 mg/d,后维持用药15～20 mg/d。

患者男,58岁.系武汉市蔡甸区侏儒镇农民,其父母已亡,有兄弟3人、姐妹2人,其祖辈迁徙情况不详.其子辈1男1女.其妻祖辈至今均居住在当地.因其同辈居住分散,只有1弟参与本调查。

Tuerk等[1-2]于1990年发明一种体外筛选新技术,即指数富集的配体系统进化技术(systematic evolution of ligandsby exponential enrichment,SELEX),分别筛选出针对噬菌体T4 DNA聚合酶和有机染料分子的特异性适体.适体(aptamer)指用SELEX技术从体外合成的随机寡核苷酸序列库中人工筛选出的与靶标有高亲和力和特异性结合的寡核苷酸序列。

近半个世纪以来,临床化学微量免疫分析技术从放射免疫分析、酶联免疫分析,到化学发光免疫分析,经历了检测方法的革新与技术的进步,带来了医学检验质量和数量的迅速提高;20世纪90年代问世的LOCI(Luminescent oxygenchanneling immunoassay,LOCI)技术以其独特检测方法,实现了均相、一步、免清洗和高通量检测,并以其高灵敏度和特异性等突出检测性能为世人所瞩目。

血流感染是指病原微生物侵入血流,并可随血行播散的感染,主要有细菌血症、真菌血症、病毒血症.血流感染是一种全身性感染疾病,严重者可引起休克、弥散性血管内凝血和多脏器功能衰竭。

目的 探讨HCV RNA对HIV和HCV合并感染者接受高效抗反转录病毒治疗(highlyactive antiretroviral therapy,HA.ART)后疗效、肝脏功能和血脂的影响.方法 招募我国河南既往有偿供血人群中接受HAART治疗的HIV/HCV合并感染者275例,每6个月随访一次,定期检测HCVRNA、HIV RNA、CD+4T淋巴细胞计数、肝脏功能指标和血脂等实验室指标,采用卡方检验、成组设计秩和检验比较HCV RNA阳性组和HCV RNA阴性组HAART治疗后HIV病毒抑制率、免疫学应答、肝损伤和血脂的差异.结果 HAART治疗6月以上患者中,HCV RNA阳性组和HCV RNA阴性组HIV完全抑制率差异无统计学意义(45.6%vs.38.5%,x2=1.150,P>0.05);HAART治疗前(286个/μ1 vs.209个/μ1,z=0.734,P=0.463)、治疗后6个月(310个/μ1 vs.362个/μ1,z=0.562,P=0.574)、12个月(378个/μl vs.289个/μ1,Z=1.091,P=0.275)、18个月(363个/μ1 vs.288个/μ1,z=1.435,P=0.151)、24个月(413个/μ1 vs.348个/μ1,z=0.939,P=0.348)CD+4;T淋巴细胞计数在HCV RNA阳性组和HCV RNA阴性组间差异无统计学意义.HCV HNA阳性组血清ALT(55.0 U/L vs 29.5 U/L,Z=6.789,P<0.01)、AST(46.0 U/L vs.33.0 U/L,Z=4.890,P<0.01)、TBIL(9.3 mmol/L vs.7.2 mmol/L,z=3.748,P<0.01)水平显著高于HCV RNA阴性组;HCV RNA阳性组HAART治疗后发生肝损伤的风险显著高于HCV RNA阴性组(调整后优势比aOR=3.8,P<0.01).HIV/HCV合并感染者HCV RNA阳性组TG水平显著低于HCV RNA阴性组(1.2 mmol/Lvs.1.4 mol/L,Z=1.936,P=0.043)、而HDL-C水平显著高于HCV RNA阴性组(1.5 mmol/L vs.1.3 mmol/L,z=2.251,P=0.024).结论 HCV RNA对HIV/HCV合并感染者HAART治疗后HIV病毒抑制率无影响,亦不影响HAART治疗后CD+4淋巴细胞的恢复;HCV RNA是HIV/HCV合并感染者HAART治疗后肝损伤的独立危险因素,但可能减轻HAART治疗引起的血脂异常。

目的 在HIV/AIDS患者中筛查活动性结核(TB),并对TB/HIV双重感染患者的活动性rrB诊断方法进行探讨.方法 2006年8月至2007年3月调查南宁市和柳州市4家AIDS定点诊疗机构的660例HIV/AIDS患者,对CD+4T淋巴细胞计数≤350/mm3或至少有TB可疑症状之一的HIV/AIDS患者进行胸部x线平片、痰抗酸染色涂片和液体快速培养检查.结果 CD+4T淋巴细胞计数≤200个/mm3的患者占76.1%(502/660).HIV/AIDS患者合并活动性结核病的比例为22.9%(151/660),其中肺结核占74.8%(113/151),1/3的患者有肺外累及,肺外TB以淋巴TB为主,占68.1%.在痰涂片和胸部X线平片均不支持活动性TB的患者中培养阳性的占20.1%(53/264).在培养阳性的病例中38.5%(35/91)是非结核分枝杆菌感染.结论 本研究HIV/AIDS患者中合并活动性结核病的比例为22.8%.痰的快速培养在HIV/AIDS患者中诊断结核病中起至关重要的作用.HIV/MDS患者合并非结核分枝杆菌以及肺外TB比例不容忽视。

目的 研究含Bw4表位的HLA-A抗原在HIV-1感染者疾病进展中的作用.方法 应用高分辨率人类白细胞抗原(HLA)分型方法对340例HIV-1感染者进行HLA-A和HLA-B位点的等位基因分型,确定Bw4表位的携带情况,分析HLA-A和HLA-B携带Bw4表位与感染者CD4+4T淋巴细胞计数和血浆病毒载量的关系.结果 与不携带Bw4者(0Bw4)(CD+4T淋巴细胞计数:中位数294个/μ1,病毒载量:中位数6.29×104拷贝/m1)相比,1Bw4-A基因型者和2Bw4-AA基因型者的CD+4T淋巴细胞计数水平(分别为307和308个/μ1)基本相当,而病毒载量(分别为1.53×105和2.68×105拷贝/ml)有增高趋势.与不携带Bw4表位的感染者相比,仅在HLA-B抗原中含Bw4表位的HIV-1感染者的CD+4T淋巴细胞计数(417:个/μ1)显著增高(P=0.013),而病毒载量(2.10×104拷贝/ml)显著降低(P=0.007).结论 含有Bw4表位的HLA-B抗原在HIV-1感染中具有延缓疾病进展的作用,而含有Bw4表位的HLA-A抗原对HIV-1感染者未见保护性作用。

对于HIV-1感染的患者,高效抗逆转录病毒治疗(HAART)能够使血浆中病毒降低到检测不到的水平[1-2].即使是抗病毒治疗非常有效,在细胞中仍然存在HIV-1DNA。

目的 研究接受抗病毒治疗的AIDS患者非核苷类逆转录酶抑制剂(non-nucleosidereverse transcriptase inhibitor,NNRTI)类耐药基因突变分子进化特征.方法 从我国中部农村抗病毒治疗AIDS患者研究队列中选择4例服药依从性较好,治疗初期为野生型毒株,在治疗过程中逐渐产生NNRTI类耐药基因突变的患者为研究对象,对每位患者的4～5次随访血浆样本的逆转录酶(reverse transcriptase,RT)基因进行克隆测序分析,观察每个克隆的基因型耐药性特征.结果 共检测了855个克隆,得到4例患者历次克隆序列中带各种NNRTI类耐药基因突变的构成图谱:4例患者表现出不同的HIV-1 NNRTI类耐药突变途径,发现4条主要NNRTI类耐药基因突变演变途径:(1)G190A,常伴随F227L突变出现,在长期的治疗过程中还有继续累加P236V突变的趋势;(2)Y188C,多单独出现,有时与P236V等同时发生;(3)Y181C,多与V179D或K103N同时出现,不同的患者选择趋向不同;(4)K103N,多与Y181C或M230L突变联合出现.结论 总结出4例患者HIV-1 NNRTI类耐药基因突变的选择动力学特征.4例患者表现出不同的NNRTI类耐药基因突变演变途径,最先筛选出来的耐药突变往往能够成为最后的优势种。