2008年 · 第31卷第12期

在历届总编辑、编委、编辑的努力下,在全国广大医学检验工作者及其他专业人士的大力扶持下,<中华检验医学杂志>迎来了自己创刊30周年的生日.本刊不但已成为广大检验医学工作者展示才华发表论文的园地,也已成为医学领域各专业人士的良师益友.我们向对本刊成长做出贡献的各界人士和广大读者致以亲切的问候和衷心的感谢,对杂志取得的优异成绩表示热烈的祝贺。

近年来,大量研究揭示了核酸的多种生物学功能形式,这些具有不同特性的核酸称之为功能性核酸(functional nucleic acids,FNAs),如天然存在的核酶[1]、反义RNA[2]和核糖开关[3];以及运用selex(systemic evolution of ligands by exponential enrichment)技术人工合成的适体[4-5]和变构核酸酶等。

荧光原位杂交(FISH)是近年发展起来的一种分子生物学、细胞遗传学及免疫学技术相结合的全新技术,其在基础生物学领域和临床研究中得到广泛应用.FISH作为一种非放射原性杂交法,它利用特殊的荧光素标记DNA探针,与DNA进行杂交,经免疫荧光显色,可检测细胞内DNA或RNA的存在与否,这既可显示染色体中期分裂相,又能显示未培养的间期核。

金秋十月,<中华检验医学杂志>迎来了30岁的而立之年.她伴随着中国检验界几代人的成长,见证了中国检验医学的发展历程.为纪念<中华检验医学杂志>创刊30周年,<中华检验医学杂志>编辑部于2008年10月20日下午在北京天伦王朝饭店举办了30周年庆.庆典活动现场,花团锦簇,宾朋云集,来自全国各地的任编委、审稿专家、中华医学会各部室及企业办朋友近300人出席了活动。

目的 研究白细胞VCS参数在血液细菌感染中的临床应用.方法 采用Coulter LH 750血细胞分析仪检测120例血液细菌感染患者、69例非感染性发热患者、67名健康对照者的中性粒细胞和淋巴细胞的VCS参数,包括中性粒细胞平均体积(MNV)、中性粒细胞体积分布宽度(NDW)、中性粒细胞平均传导率(MNC)、中性粒细胞平均散射值(MNS);淋巴细胞平均体积(MLV)、淋巴细胞体积分布宽度(LDW)、淋巴细胞平均传导率(MLC)、淋巴细胞平均散射值(MLS).将血液细菌感染组根据白细胞总数分为WBC≤10×109/L组和＞10×109/L组;根据中性粒细胞比例分为≥85%组和＜85%组;根据细菌染色分为革兰阳性细菌感染组和革兰阴性细菌感染组.结果 血液细菌感染组的MNV、NDW、MNS、MLV、LDW、MLC、MLS分别为156 ±15、23.31±3.72、137±7、87±12、17.50±3.38、110±5、69±12;非感染性发热组分别为151±8、21.33 ±2.62、132±10、91±4、15.78±1.96、117±4、62±6;健康对照组分别为145±5、18.43±0.93、143±4、84±2、13.30 ±0.76、108±1、62±2;上述各指标在3组间差异均有统计学意义(F值分别为19.295、26.272、32.767、6.226、31.016、23.739、12.662,P＜0.05或＜0.01).WBC≤10×109/L组MNV和NDW分别为152±16、22.19±3.45,WBC＞10×109/L组分别为159±12、25.29±3.43,与健康对照组比较,3组间差异有统计学意义(F值分别为21.575、40.856,P＜0.01).中性粒细胞百分率≥85%组的MNV、NDW分别为159±12、24.88 ±3.74,中性粒细胞百分率＜85%组分别为151±16、21.68±2.29,与健康对照组比较,3组间差异有统计学意义(F值分别为23.76、43.22,P＜0.01).革兰阴性细菌感染组的MNV和NDW分别为157±15、24.25±3.39,革兰阳性细菌感染组分别为153 ±14、21.51±3.78,与健康对照组3组间比较,差异有统计学意义(F值分别为18.74、37.47,P＜0.01).在血液细菌感染诊断中,当NDW的临界值(cut-off值)取20.50时,敏感度为76.7%,特异度为98.3%.结论 VCS参数能反映血液细菌感染时白细胞的形态学变化,其中NDW参数能更加灵敏、特异地反映血液细菌感染。

目的 探讨精子染色质扩散(sperm chromatin dispersion,SCD)试验及吖啶橙染色(AO)试验检测精子DNA完整性的应用价值.方法 对32名已生育的成年男性健康对照者和27例特发性少精子症(idiopathic oligozoospermia,IO)患者同时进行SCD试验和AO试验,对检测结果 进行分析.在SCD试验中,DNA完整性正常精子的DNA扩散形成大晕环或中晕环,而受损伤产生DNA碎片的精子不形成或形成很小的晕环.用AO试验检测,正常精子DNA为双链,染成绿色,不成熟或损伤精子DNA为单链.染成红色、橙色或黄色.结果 SCD试验检测10患者的大晕环、中晕环、小晕环和无晕环精子百分率分别为(49.9±13.8)%、(11.5±5.4)%、(11.9±6.1)%和(26.7±10.0)%,健康对照组分别为(73.2±6.2)%、(14.7±6.3)%、(6.8±2.9)%及(5.3±2.2)%,2组比较,差异有统计学意义(t=8.576,P＜0.O1;t=2.083,P＜0.05;t=4.284,P＜0.01;t=11.823,P＜0.01);IO患者的DNA损伤精子的百分率为(38.6±12.1)%,健康对照组为(12.1±5.2)%,2组比较差异有统计学意义(t=11.995,P＜0.01).AO试验检测IO患者的单链DNA精子百分率为(45.5±13.8)%,健康对照组为(39.8±13.3)%,差异无统计学意义(t=1.626,P＞0.05).结论 精子DNA完整性异常可导致男性不育.SCD试验是一种有效的精子DNA完整性检测方法 。

目的 探讨蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型22(the protein tyrosine phosphatage nonreceptor 22,PTPN22)基因1123G＞C(rs2488457)单核苷酸多态性(SNP)与类风湿关节炎(RA)的关系.方法 采用实时荧光定量PCR对200例RA患者,100例其他风湿病患者,200名健康体检者PTPN22基因进行分型.用SPSS 11.0软件进行统计学分析和行×列表X2检验.结果 RA组PTPN22 CC基因型频率(0.120)与其他风湿病组(0.020)及健康对照组(0.015)比较差异有统计学意义(X2 值分别为18.708和24.337,P均＜0.01),而其他风湿病组与健康对照组比较,差异无统计学意义(X2值为1.066,P＞0.05);RA组C等位基因频率(0.360)明显高于其他风湿病组(0.190)及健康对照组(0.215),且差异有统计学意义(P＜.005).结论 PTPN22基因可能是RA的易感基因和RA等自身免疫病治疗的靶基因之一。

目的 探讨新疆少数民族苯丙酮尿症(PKU)患者的基因突变特征,为有针对性的防治策略提供科学依据.方法 采用单链构象多态性分析技术和PCR产物直接测序方法 ,检测12例少数民族PKU患者的苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因突变.结果 从12例维吾尔族、回族和哈萨克族PKU患者(24个PAH等位基因)中,检出13种基因突变,包括错义突变8种、无义突变1种、剪切位点突变3种,其中突变频率最高的是EX6-96A＞G和P281L,EX6-96A＞G常见于国内和亚洲地区,P281L多见于欧洲各地.突变频率较高的R243Q、R111X、R176X和F161S 4种突变中,其中R243Q是我国北方地区居首位的突变,R111X处于第3位.而R176X和F161S在世界范围内都极为少见,尤其F161S是具有中国特色的基因突变,是第2次在中国人中发现.结论 新疆少数民族中的PAH突变基因不仅与亚洲黄种人和欧洲及拉美人种表现出密切的联系,而且也存在着明显的差异,形成了自身独立的遗传规律和特点,是我国一个十分特殊的PAH突变基因分布区域。

目的 调查武汉大学人民医院分离的肠杆菌科细菌中质粒介导喹诺酮类耐药基因qnrA、qnrB、qnrS基因的现状、基因型以及qnr基因阳性菌株所携带的广谱B内酰胺酶基因型.方法PCR法对179株肠杆菌科细菌(129株大肠埃希菌、37株肺炎克雷伯菌和13株阴沟肠杆菌)进行qnrA、qnrB、qneS基因检测.KB纸片法检测对15种抗菌药的体外抗菌活性.琼脂平皿二倍稀释法检测阳性菌株对环丙沙星的MIC值.质粒接合试验分析qnrA、qnrB、qnrS基因的水平转移能力.对qnr阳性株,检测Ⅰ类整合酶基因及SHV-1、TEM-1、CTX-M、OXA-Ⅰ、OXA-Ⅱ、OXA-Ⅲ、DHA、EBC型β内酰胺酶基因.结果179株肠杆菌科细菌中,共检测出含qnr基因阳性菌株25株(13.97%),包括6株(3.35%)含有qnrA基因,9株(5.02%)含有qnrB基因,10株(5.59%)含有qnrS基因.阳性株菌均对亚胺培南敏感且对多种抗生素耐药,其中2株qnrA阳性菌株和4株qnrB阳性菌株对喹诺酮类药物敏感.2株qnrA阳性菌株和4株qnrB及qnrS阳性菌株质粒接合成功.23株qnr阳性株Ⅰ类整合酶基因阳性,1株qnrB及qnrS阳性菌株Ⅰ类整合酶基因阴性,14株菌携带TEM-1型广谱β内酰胺酶基因、6株菌携带OXA-Ⅲ型广谱β内酰胺酶基因、7株菌携带EBC型AmpC酶.结论湖北地区肠杆菌科细菌中存在qnrA、qnrB、qnrS基因的流行,qnr阳性菌株呈多重耐药,且喹诺酮类敏感菌株中有qnr基因的存在.qnr阳性菌株可携带多种广谱p内酰胺酶基因。

目的 评价从外周血中检测结核分枝杆菌(MTB)及其L型(MTB-L)的临床应用价值.方法 用溶血离心滴片法IK抗酸染色(IK染色)及溶血离心培养法(培养法)检测结核病组(156例)、肺癌组(147例)和非结核病/非肺癌对照组(42例)外周血中的MTB及其L型,用TaqMan-PCR技术分别检测上述各组标本的单个核细胞、全血及血浆中的MTB DNA.结果 IK染色结核病组、肺癌组和非结核病/非肺癌对照组的MTB阳性率分别为1.3%(2/156)、0.7%(1/147)和0(0/42),培养法分别为0.6%(1/156)、0(0/147)和0(0/42).IK染色MTB-L阳性率分别为41.0%(64/156)、32.7%(48/147)和7.2%(3/42),培养法分别为25.6%(40/156)、39.5%(58/147)和0(0/42).结核病组、肺癌组的MTB与MTB-L检测结果 差异均有统计学意义(X2值分别为73.87、44.35、57.41、76.68,均P＜0.01).培养出98株L型菌中,人型81株,牛型17株,返祖为原菌型者44株.结核病组单个核细胞、全血TaqMan-PCR阳性率分别为77.6%(121/156)和68.6%(107/156),均高于血浆的阳性率的20.5%(32/156,X2值分别为112.96、82.18,均P＜0.05),肺癌组单个核细胞、全血阳性率分别为59.2%(87/147)和48.3%(52/147),均高于血浆阳性率的12.2%(18/147,X2值分别为70.53、21.68,P均＜0.05).两组各血液成分(除外血浆)的检测结果 与对照组比较差异均有统计学意义(X2值分别为37.50、48.30、44.37、11.31,P均＜0.01).结论 结核病、肺癌患者外周血中存在MTB-L播散;溶血离心培养法检测外周血中MTB-L简便易行;TaqMan-PCR技术检测单个核细胞和全血标本中MTB DNA的阳性率高于血浆的阳性率。

目的 了解儿童和青少年血清硫酸脱氢表雄酮(DHEAS)随性别、年龄和青春发育变化的规律并探讨肾上腺功能发动和青春发育之间的关系.方法 分别测定318名健康儿童和青少年(男童120名,女童198名)和152例特发性中枢性性早熟(ICPP)女童血清DHEAS,按性别、年龄、青春发育分期进行统计分析.结果 6岁以下的健康儿童和ICPP女童血清DHEAS均极低下,且与性别、年龄、青春发育分期均不相关.健康儿童血清DHEAS水平在两性均与年龄和青春发育呈正相关(r分别为0.69和0.71,P均＜0.01).青春期后,男童血清DHEAS水平显著高于相同青春分期女童(P均＜0.05).同性别健康青春期青少年,相同年龄段内,血清DHEAS水平随青春发育而增高;而相同青春发育期内则不随年龄变化,如TannerⅢ期女童在8～9岁、10～11岁和12～13岁3个年龄段,血清DHEAS均数在532.0～557.8 μg/L(F=0.21,P=0.98).6岁以上ICPP女童血清DHEAS的Z分值显著高于同年龄的健康女童组(0.97us-0.1和1.39us-0.08,P均≤0.01),而与相同青春发育分期的健康女童间差异无统计学意义(-0.31～0.18us0.00,P均＞0.05).结论 血清DHEAS在6岁以后随年龄和青春发育的进展而增高,两性差别在青春发育后方显现.肾上腺功能发动和性腺功能发动间具相互联系.在青春发育后应同时结合性别、年龄和青春发育分期判断血清DHEAS。

脆性X综合征95%以上患者的致病分子机制是由于脆性X智力低下基因1(Fragile X mental retardation 1 gene,FMRI)5'端非翻译区一段不稳定的三核苷酸重复序列(CGG)异常扩增;和该基因上游启动子区域CpG岛的异常甲基化,使FMR1基因失活,而产生智力低下等系列脆性X综合征临床症状的疾病.我们用甲基化特异性PCR检测先天性智力低下患儿FMR1基因CpG岛的甲基化状况,并分析其在诊断脆性X综合征中的价值.现报告如下。

Rh血型系统在临床输血中的重要性仅次于ABO血型系统[1],Rh血型不合可引起溶血性输血反应及新生儿溶血病(HDN)[2].Lo等[2]研究证实孕妇血浆或血清中含有胎儿DNA,国外已用游离胎儿DNA开展了非创伤性产前诊断Rh基因的研究[4-7].我们曾用PCR扩增孕妇血浆中胎儿DNA,以检测胎儿RhCcEe基因[8]。

血液流变学是近20年蓬勃发展的一门新兴边缘交叉学科,造成人类死亡和致残率最多的心、脑血管病、恶性肿瘤的发生发展都与血液流变有关.某些心血管病在出现明显症状前,往往一种或数种血液黏滞因素已有改变,故临床上已将其广泛应用于对某些疾病的鉴别诊断和疗效监测。

目的 构建结核分枝杆菌Rv1884c和Rv0867c基因的原核表达质粒,获得结核分枝杆菌Rvl884c和Rv0867c基因的表达蛋白,并初步研究其促生长作用.方法 制备结核分枝杆菌基因组DNA,采用PCR技术扩增目的 基因片段;将2个片段分别克隆入克隆载体pGEx-4T-1和pUC19,再分别克隆入原核表达载体pGEX-4T-1和pPRO-EXHT,经序列测定证实正确后,再经异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达GST标记的Rv1884c融合蛋白和His标记的Rv0867c融合蛋白;用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析重组蛋白的相对分子质量大小及表达形式.结果 成功扩增出了结核分枝杆菌Rv1884c和Rv0867c基因,构建了具有正确基因序列的质粒载体pGEX-4T-1-Rv1884c和pPRO-EXHT-Rv0867c,转化人大肠杆菌DH5α中经诱导产生高水平的表达产物.经SDS分析,在相对分子质量为45 000和80 000处出现新生蛋白带,凝胶薄层扫描检测表达量分别约占菌体蛋白的18.3%和23.7%.用GSTrap FF亲和层析柱和Ni2+-NTA纯化柱进行蛋白纯化,并研究这两种蛋白对藤黄微球菌、BCG和结核分枝杆菌H37Rv的促生长作用.结论 成功克隆了结核分枝杆菌Rv1884c和Rv0867c基因并得到了其大肠杆菌表达产物,为进一步研究Rv1884c和Rv0867c基因蛋白的活性及其功能,以及研究结核分枝杆菌快速促生长作用奠定了基础。

抗体导向酶一前体药物疗法(antibody-directed enzyme prodrug therapy,ADEPT)自1987年由Bagshawe等提出以来,其研究受到广泛关注[1-2]。

铜绿假单胞菌是长期住院患者和肺囊性纤维化患者感染的常见致病菌,铜绿假单胞菌形成生物被膜的能力使其可以长期定植在人类组织和生物医学材料表面,临床上容易导致慢性、持续性感染[1].探讨生物被膜的形成机制及影响生物被膜形成的因素,对临床指导用药具有重要意义。

随着电子、传感器、计算机和生物技术的发展,越来越多的自动化检验仪器应用于临床检验,不仅提高了测试速度,还提供了丰富的结果数据。

患者男,55岁,因"反复心慌、气喘9个月,加重3 d"入院. 　　患者9个月前(1997年12月)上楼时无诱因出现心慌、气短,休息后可缓解,超声心动图检查:左心房内径(LAd)33 mm,左心室内径(LVd)58 mm,射血分数(EF)40%,服用卡托普利等药治疗.1998年3月上述症状发作,仍未予重视。

肌酸激酶(creatine kinase,CK)是人体能量代谢中的重要酶类,可以调节组织细胞的功能,保证细胞生理活动的需要.从首次在进行性肌营养不良症患者的血清中发现CK的存在开始,CK及其同工酶的结构、在疾病的诊治和预后评估中的应用、测定标准化等方面的研究从未间断。

遗传性血管性水肿(HAE)是一种常染色体显性遗传病,其免疫化学的主要特征是补体第一成分抑制因子[简称C1抑制物(C1 inhibitor,C1INH)],其量的缺乏或功能缺陷对该病的诊断和及时治疗有重要意义.HAE发病率约为1/10万[1],可分为普通型和变异型.现将最近发现的1例HAE变异型病例报告如下。

解尿素寡杆菌(Oligella ureolytica)1987年由Bossau 等[1-2]命名,是形态极其微小的革兰阴性小杆菌,生长缓慢,致病性不详.国外有多例该菌分离自人血液的报道,但未能确定是否为败血症的病原菌.2005年,我们自1例肝炎合并糖尿病、反复发热患者血液中多次分离出该菌.现报告如下。

血细胞分析仪的应用越来越普遍,但实验室在使用血细胞分析仪时存在很多问题及难题,影响到血细胞分析仪检测结果的准确性,使医疗机构间以及医疗机构内不同检测系统的检测结果可比性差,不能实现检测结果的相互通用.贵州省临床检验中心通过血细胞分析二级标准检测系统对新鲜全血定值,探讨用定值新鲜血对医疗机构实验室的血细胞分析仪进行校准的可行性。

一、病毒分子免疫学数据库 1．HIV分子免疫学数据库：HIV分子免疫学数据库（http：／／www．hiv．lanl．gov／content／index）始建于1987年，收录人类获得性免疫性免疫缺陷病毒（HIV）辅助性T细胞表位、细胞毒性T细胞表位和抗体结合位点，是一个有注释、可检索的数据库。该数据库除提供已知HIV表位的全面列表外，还提供较多的免疫信息学工具，包括基序检索（Motif Scan）、序列定位（Sequence Locator）、表位比对（Epilign）、