2005年 · 第28卷第11期

俗话说,长江后浪推前浪,一代更比一代强.当代中青年专家学者具有完善的知识结构,扎实的基础知识和专业知识,而且科学思维活跃,勇于创新,是学术发展的未来,学科建设的栋梁,我国检验医学(实验室诊断学)的发展寄希望于广大中青年专家学者!

目的 探讨中国汉族无关血友病B家系先证者的凝血因子Ⅸ基因的突变和发病的分子机制.方法对19例中国汉族无关血友病B家系先证者,静脉采集各家系先证者外周血,表型诊断确诊后,用PCR对FⅨ 8个外显子及其侧翼序列进行扩增,用末端标记双脱氧法检测核酸序列.结果 19例血友病B家系先证者均检测到相应的基因序列的改变.结论 19例中国汉族无亲缘关系的血友病B家系先证者FIX基因在编码外显子的核苷酸部位均发现有基因突变,其中发现五种新的突变,即6444T→A(Cys23Stop);10497G→C(Cys82Ser);31101G→T(Arg327Ile);31102 InsertT;30984T→G(Ile288Ser)为国际上首次报道。

目的 克隆人核包膜蛋白自身抗原gp210、p62和LBR基因,构建重组表达质粒,获得具免疫学活性的纯化重组蛋白,建立酶联免疫吸附法(ELISA),初探抗核包膜蛋白gp210、p62和LBR自身抗体在原发性胆汁性肝硬化(PBC)诊断中的意义.方法构建重组表达载体,在大肠杆菌BL21、M15中表达;融合蛋白经Ni-NAT树脂柱进行亲和层析纯化,并通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及免疫印迹法(WB)进行免疫活性鉴定;应用表达蛋白建立间接ELISA,检测60名健康体检者、68例原发性胆汁性肝硬化(PBC)、60例病毒性肝炎、60例结缔组织病患者血清中抗gp210、p62和LBR抗体.结果经重组质粒测序和酶切结果证实,gp210、p62和LBR目的基因已正确插入原核表达载体中,基因序列正确,符合表达框架;SDS-PAGE检测表达产物分别在69 000、62 000 和27 000处有一明显的蛋白表达条带,WB分析表明重组蛋白具有人gp210、p62和LBR抗原反应性.ELISA检测标本血清结果显示,PBC中,抗gp210抗体、抗p62抗体和抗LBR抗体阳性率分别为36.8%、30.9%和5.9%;而病毒性肝炎组、结缔组织病组和健康体检组中,除抗gp210抗体在结缔组织病患者中阳性率为1.7%外,3种自身抗体检测结果均为阴性.PBC组3种自身抗体阳性率与疾病对照组及正常对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05和P<0.01).结论本研究成功克隆人核包膜蛋白自身抗原gp210、p62和LBR基因,并将其在大肠杆菌中成功表达.应用纯化融合蛋白建立的ELISA检测抗gp210抗体、抗p62抗体和抗LBR抗体,对PBC具有较好特异性,为PBC的特异性临床诊断提供了有效的工具。

目的 探讨遗传性凝血因子Ⅹ(FⅩ)缺陷症的分子发病机制.方法对在一个遗传性凝血因子Ⅹ(FⅩ)缺陷症家系中发现的两种FⅩ基因新突变剪接位点突变IVS1+1G>A和错义突变Arg347His,分别进行异位转录和体外表达的研究,通过逆转录反应结合巢式PCR扩增的方法,检测患者外周血中的FⅩ异位转录产物.针对Arg347His突变,将野生型FⅩ cDNA克隆至真核细胞表达载体,定点突变构建Arg347His突变质粒.然后将野生型质粒和突变体质粒分别转染HEK293细胞,采用一期法检测细胞培养液中的FⅩ活性;采用ELISA检测分别细胞裂解液和细胞培养液中的FⅩ抗原含量.结果对于IVS1+1G>A突变,逆转录结合巢式PCR的产物经克隆后测序只检测到了正常的转录本,而没有发现异常转录本,原因可能是由于IVS1+1G>A导致了终止密码的提前出现,从而致使异常转录的mRNA在体内很快被降解.对于Arg347His错义突变,真核细胞表达结果发现,Arg347His突变并没有影响FⅩ蛋白的合成分泌,但突变质粒转染的细胞所分泌的FⅩ蛋白促凝活性明显下降.结论异位转录和体外表达的实验进一步证实了IVS1+1G>A和Arg347His是导致本家系先证者表现为FⅩ缺陷症的原因.IVS1+1G>A突变导致了异常转录的mRNA在体内被很快降解;Arg347His突变显著降低了FⅩ的促凝活性。

目的 了解儿童急性白血病细胞和血液肿瘤细胞株中转录因子PAX5/BSAP的表达特性.方法采用实时定量RT-PCR方法,检测了6个血液肿瘤细胞株以及6例正常儿童、58例初发和4例复发急性白血病儿童骨髓细胞中PAX5和CD19 mRNA的表达水平.采用Western Blotting分析了6个血液肿瘤细胞株和4个临床样本中BSAP表达水平.采用RNAi(RNA干扰)技术特异性阻断NAMALWA细胞株(B细胞系)中PAX5的表达.结果在NAMALWA细胞株中,PAX5和CD19 mRNA相对表达量分别为2.35%和2.52%;而在T-和髓系细胞株中几乎不表达.同时运用Western Blotting在B系细胞中检测到一52KD的BSAP条带,但在T-和髓系细胞中为阴性.在临床样本中B-ALL(急性B淋巴细胞白血病)组比T-ALL(急性T淋巴细胞白血病)组和AML(急性髓细胞性白血病)组的PAX5 mRNA表达高(P=0.029和P=0.013).在B-ALL患儿中,PAX5 mRNA表达的个体差异很大.RNAi技术抑制NAMALWA细胞株中PAX5基因表达达35%,但不影响细胞增殖效率(P<0.05).结论部分B-ALL中PAX5 mRNA表达明显升高,可作为进一步研究B-ALL发病机理的另一个切入点.RNAi技术可进一步用于B系血液恶性肿瘤细胞的观察研究。

目的 研究我所发现的丙型肝炎病毒(HCV)1b基因型5′非编码区 (5′NCR) -222位C-T变异的病毒株,是否为1型中的其他亚型.方法对64例HCV 1b型的样本进行5′NCR扩增后作BamH I酶切,并从有此BamHⅠ位点的样品中随机选取了6例样品扩增5′NCR和NS5B区,测序后对5′NCR进行序列分析,NS5B区序列分别与GenBank中1型的各亚型序列以及38株来自世界不同地区的1b型参考序列构建遗传进化树.结果 6例样本与GenBank中1型的各亚型NS5B区遗传进化树分析结果显示这6株都属于1b型,而非1型的其他亚型,6株变异株与38株来自世界不同地区的1b型参考序列NS5B区的进化树分析结果显示,6例样品并未形成1b型中的独立分支,在遗传进化上与其他38株HCV 1b型病毒株没有明显差异.结论本文的研究证实了我们所发现的HCV 1b型5′非编码区有BamHⅠ位点的病毒株确为1b型的变异株,并非1型的其他亚型.而这种变异与干扰素耐药是否具有相关性,尚有待于进一步研究.

目的 对奥谱托欣耐药的肺炎链球菌和奥谱托欣敏感的其他α-溶血性链球菌进行准确的鉴定.方法采用奥谱托欣敏感试验、胆汁溶解试验、乳胶凝集试验及生化鉴定试验进行鉴定.结果 630株肺炎链球菌中有两株对奥谱托欣具有抗药性,占0.3%.31株对奥谱托欣具有敏感性的α溶血性链球菌包括13株缓症链球菌、6株口腔链球菌、6株孪生球菌、3株少酸链球菌、2株中间型链球菌、1株星座链球菌.对奥谱托欣敏感的α溶血性链球菌,其抑菌环直径绝大部分在14～17 mm范围内,而肺炎链球菌对奥谱托欣的抑菌环直径绝大部分都在20 mm以上.对奥谱托欣敏感的α溶血性链球菌对苯唑西林大都呈高度耐药(93.5%),而肺炎链球菌大都敏感(94.0%).结论胆汁溶解试验和乳胶凝集试验鉴定肺炎链球菌的特异性高,试验结果可靠.API-Strept鉴定试条和VITEK*TWO-GPC鉴定卡可用于耐奥谱托欣肺炎链球菌的鉴定。

目的 利用还原型辅酶I(NADH)在340 nm波长处特异性吸收峰,建立用毛细管区带电泳在线检测人血清中乳酸脱氢酶 (LDH) 同工酶的方法.方法实验中采用未涂层毛细管,长60 cm,内径75 μm,pH 9.4(23 ℃) 二氨基二甲基1,3丙二醇(AM2P)缓冲液含20 mmol/L氧化型辅酶I(NAD+ )、51.6 mmol/L乳酸锂.结果在25 min内完成电泳分离,乳酸脱氢酶同工酶1(LDH1)、乳酸脱氢酶同工酶5(LDH5)纯品各自均可得到较好峰形,而且LDH1、 LDH5纯品的混合物亦可得到完全分离,在分析正常人血清与肝癌患者血清时,其结果与美国Helena公司REP全自动琼脂糖电泳结果一致,取得满意效果.结论该法快速、低耗,具有较好的推广应用价值。

目的 构建人组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)基因的原核表达载体并在大肠杆菌中有效表达;探索重组TFPI-2抑制纤溶酶活性及其对人卵巢癌细胞(A2780)迁徙浸润能力的影响.方法 1.以TFPI-2 cDNA为模板,PCR扩增得到645 bp DNA片段,克隆入表达载体pET28a,并转化大肠杆菌BL21株表达.2.限制性内切酶和菌落PCR法鉴定TFPI-2基因DNA片段,Western blot法鉴定TFPI-2融合蛋白.3.建立TFPI-2抑制纤溶酶的动力学方法并测定重组TFPI-2对纤溶酶的抑制作用.4.在体外用Boyden小室,以不同浓度TFPI-2作用A2780细胞进行迁徙和浸润实验.结果 1.成功构建重组TFPI-2的原核表达载体pET28a并在BL21株中表达、纯化,获得大量TFPI-2蛋白.2.Western blot证实表达的融合蛋白为TFPI-2.3.重组TFPI-2对液相和固相中的纤溶酶具有显著抑制作用,且呈剂量-效应关系.4.在迁徙实验中,将A2780-TFPI-2不同浓度组与A2780对照组细胞穿过人工膜的细胞数进行比较,经t检验,无统计学意义(P>0.05);在浸润实验中,将A2780- TFPI-2不同浓度组与A2780对照组细胞穿过人工膜的细胞数进行比较及TFPI-2不同浓度组间的细胞数进行比较,经t检验,具有显著差异(P<0.01).结论 1.人TFPI-2基因的表达,为TFPI-2病理生理的作用和临床研究提供了丰富材料.2.重组TFPI-2抑制纤溶酶活性的研究,为探讨TFPI-2对人卵巢癌细胞浸润转移能力的影响等提供了实验依据.3.重组TFPI-2对人卵巢癌细胞体外自身运动能力无影响,但可显著抑制人卵巢癌细胞的体外浸润能力,为将来卵巢癌用蛋白酶抑制剂治疗提供一可能的靶向依据。

目的 从血清学的检测结果探讨新疆地区获得性免疫缺陷综合征的流行特征和趋势.方法 2001至2004年本院对外科手术之前常规检测和临床各科疑诊送检血清36 021份,应用ELISA和金标法筛检后送区疾控中心艾滋病监测中心WB法确认,RT-PCR方法测HIVRNA的载量,流式细胞仪检测CD细胞.结果抗HIV阳性259例,占0.714%.女性占38%(97/259)有增高倾向并出现宫内感染3例.16～35岁占80%,维族占85.6%,静脉吸毒和无业人群各占94%和67.7%.北疆占83.3%,南疆占8.69%.病毒核酸检出率达50%,其中104～105cop/ml占76%(19/25),CD4、CD8 CD4/CD8均有异常,其中CD4/CD8比值降低达96%,CD4降低56%,CD8升高60%,住院病人逐渐增多.因此感染死亡者占80%,自发骨折占外科16.7%.结论血清学抗HIV、HIVRNA,CD细胞检测证实新疆发病晚,进展快,女性感染率上升存在宫内感染,已进入发病和死亡的增长期,抗病毒治疗势在必行。

目的 评价流式细胞术(FCM)定量检测血小板膜糖蛋白(GP)IIb/IIIa位点的性能,探讨正常人与白血病患者GPIIb/IIIa位点数及CD41/CD61阳性表达率的关系.方法用FCM检测GPIIb/IIIa位点,以国际标准评价其检测性能;并检测13例正常人和16例急性白血病患者血小板GPIIb/IIIa的位点数及CD41/CD61表达率.结果 FCM检测 GPIIb/IIIa位点的批内CV<1%、批间CV<3%及总重复性的CV<2%;检测线性良好,标本量(血小板数1 000～7 000)对GP IIb/IIIa位点检测无影响,CV<2%;GPIIb/IIIa位点检测标准曲线的平均荧光强度(MFI)与位点数间相关性很好(r=0.999 8).同时,正常人GPIIb/IIIa的游离位点数平均为76 944,总位点数平均为74 432,CD41/CD61平均表达率为98.0% ,急性淋巴细胞白血病患者GPIIb/IIIa游离位点数平均为64 180,总位点数平均为61 079,CD41/CD61平均表达率为68.5%,急性非淋巴细胞白血病患者GPIIb/IIIa游离位点数平均为63 634,总位点数平均为58 667,CD41/CD61平均表达率为61.6%.经t检验,急性白血病患者的GPIIb/IIIa位点数及CD41/CD61表达率明显低于正常者(P均< 0.02).结论流式细胞术可直接、快速、特异地检测血小板GPIIb/IIIa位点数,可为急性白血病患者的出血机制研究及治疗提供依据。

目的 从构建了人氨基末端脑利钠肽(amino-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP)基因的表达菌中抽取目的蛋白,并对其进行纯化、鉴定及稳定性的初步研究. 方法取表达菌株BL21-pGEX-4T-3-NT-proBNP,IPTG诱导表达,GSH-agarose 亲和纯化目的蛋白,提纯产物进行SDS-PAGE电泳和Western blot 鉴定,并采用自动免疫分析仪检测其免疫反应性和稳定性.结果 GST- NT-proBNP融合蛋白表达水平高,可溶性好.SDS-PAGE、免疫测定分析显示其相对分子量为34 600,具有较高的特异免疫反应性和稳定性.结论 NT-proBNP能通过基因工程手段以GST融合蛋白的形式大量获取,在非变性条件下得到的GST- NT-proBNP有较好的免疫反应活性和稳定性。

目的 探讨硝酸甘油(GTN)作为一氧化氮供体对人宫颈癌Hela细胞增殖及全细胞蛋白质组学表达的调控意义.方法分别用细胞形态学和噻唑蓝比色法(MTT)观察经GTN作用的Hela细胞生长和增殖状况;双向凝胶电泳技术分离Hela细胞蛋白质,观察GTN对细胞蛋白表达谱的影响.结果培养液中GTN浓度为40 μg/ml时Hela细胞分离、皱缩,出现小球状或异型性,细胞外杂质增多,密度明显下降(0.0825,P<0.05); MTT检测细胞增殖抑制率为73.3%;双向电泳分析显示GTN组与对照组Hela细胞蛋白质点匹配率为86%,GTN组较对照组312个(47%)蛋白点表达明显改变, 101个(15.2%)上调,211个(31.8%)下调,且有17个蛋白点只在GTN组细胞中表达,21个蛋白点只在对照组细胞中表达.结论一定浓度的GTN能够抑制肿瘤细胞的生长和调控细胞内蛋白质表达。

目的 研究表皮葡萄球菌agr对其生物膜形成的调节作用,并探讨其调节机制,以期发现新的生物膜形成调节途径,完善agr调节网络.方法用同源重组方法构建表皮葡萄球菌agr阴性突变株,从体外、体内不同角度观察agr阴性突变株与其agr阳性野生株生物膜形成能力和致病力的差异.结果表皮葡萄球菌agr阴性突变株与其agr阳性野生株相比,黏附能力、致病力均明显增强;在agr阴性突变株中许多蛋白表达是增加的,如ClpP(ATP-dependentClp protease)、DadL(D-alanine-D-alanine ligase)等;在agr阴性突变株中基因clpP、atlE和 dadL mRNA的表达分别是agr阳性野生株的6.4、7.6和3.9倍.而fbe、ica mRNA的表达在agr阴性突变株和agr阳性野生株中差异无统计学意义.结论agr基因可以下调表皮葡萄球菌生物膜的形成,是生物膜形成的抑制因子.agr基因对生物膜的下调作用可能不但通过下调atlE的表达,还可能同时下调clpP的表达;agr对生物膜的下调作用并不通过调节fbe和ica途径;首次发现agr可以通过调节dadL来调节细菌细胞壁的合成。

目的 研究MTLC(c-myc target from laryngeal cancer cells)基因在喉癌组织中的表达规律及其在喉癌发生中的作用.方法用反转录-聚合酶链反应法检测MTLC mRNA在喉癌组织及配对对照组织中的表达水平;用基因转染分析MTLC基因过表达对Hep2细胞生长的影响.结果 36份喉癌组织中有28份(77.8%)MTLC mRNA表达下调;与转染空质粒的对照细胞相比,表达MTLC的细胞生长明显受到抑制,凋亡细胞比例明显增高(喉癌组织为118/300,对照细胞为25/300).结论 MTLC基因在喉癌组织中表达下调,其过表达可抑制喉癌Hep2细胞生长并促进凋亡,提示MTLC可能在喉癌发生、发展过程中起重要作用。

目的 建立一种快速毛细管电泳检测Y染色体AZF区域微缺失诊断男性不育症的方法. 方法利用聚乙烯吡咯烷酮(PVP)作为筛分介质及其兼有的"动态"涂渍作用,采用毛细管非涂渍无胶筛分电泳与多重聚合酶链反应(PCR)相结合技术,配以高灵敏度的激光诱导荧光检测器,对Y染色体AZF(azoospermia factor)区域微缺失病人15个序列标签位点进行直接基因诊断.结果检测38例严重少精或无精症患者,发现10例存在缺失,缺失率为26.3%.对15例已婚有子女的正常人进行了对照检测,其中缺失率为0%,经χ2检验P<0.01,提示严重少精和无精与正常对照组的AZF区域微缺失率差异有统计学意义,明显高于正常对照组.同时,对AZF四个亚区STS微缺失率进行比较,分别将10例AZF微缺失群体中确定AZFc区的缺失率与另三个区域的缺失率进行分别统计分析,发现AZFc占63.4 %,AZFa占4.0 %,AZFb占15.2 %,AZFd 占17.4 %,χ2检验P<0.05,提示AZFc区的缺失率与另三个区域差异有统计学意义,AZFc区缺失率明显高于AZFa、AZFb及AZFd区.结论毛细管非涂渍无胶筛分电泳与传统的凝胶琼脂糖电泳相比,本方法在分离速度、分辨率及实验成本方面均有较大改善,其与多重PCR相结合使对严重少精和无精症的诊断更加准确、可靠。

目的 探讨氧化、天然脂蛋白(a)[Lp(a)]循环免疫复合物(IC)致动脉粥样硬化作用.方法采用人源的氧化、天然Lp(a)与异源的抗载脂蛋白B(apoB)结合制备IC,观察不同浓度的Lp(a)-IC对小鼠腹腔巨噬细胞胆固醇酯的蓄积和泡沫细胞形成作用.结果氧化、天然Lp(a)-IC均引起巨噬细胞内胆固醇酯大量堆积,其效果强于Ox-Lp(a) (P<0.001),且随着剂量的增加而升高,并转化为泡沫细胞;而天然Lp(a)、抗apoB处理的巨噬细胞内未见胆固醇酯的堆积.结论 Lp(a)-IC导致巨噬细胞转化为泡沫细胞,参与动脉粥样硬化形成。

目的 建立快速凝固酶阴性葡萄球( CNS)菌种的基因鉴定方法.方法对培养获得的、经Auto Scan-4微生物分析仪和API Staph鉴定系统鉴定为CNS的100株临床分离菌株和质控菌株应用tRNA基因间长度多态性PCR分析(tDNA-PCR)和肠杆菌基因间相同序列(ERIC)两种分子生物学方法进行常见的CNS菌种鉴定,同时改良实验条件,并将tDNA-PCR及ERIC-PCR两种分子生物学方法的鉴定结果与传统的Auto Scan-4微生物分析仪和API Staph鉴定系统进行比较.结果 tDNA-PCR及ERIC-PCR两种分子生物学方法对质控菌株及经Auto Scan-4微生物分析仪和API Staph系统鉴定的12种临床分离CNS菌株均可以得到各自不同的电泳图谱,它们可以快速、准确地对常见12种CNS,包括表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、人葡萄球菌、华纳葡萄球菌、模仿葡萄球菌、孔氏葡萄球菌、心耳葡萄球菌、松鼠葡萄球菌、头状葡萄球菌、施氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌和里昂葡萄球菌进行菌种鉴定.从图谱的肉眼观察看,12种CNS均可以很好地鉴别开.tDNA-PCR及ERIC-PCR与Auto Scan-4和API Staph鉴定系统的一致率为95%.经Taq酶聚合后进行电泳,tDNA-PCR在100～600bp产生6～10条DNA片段;ERIC-PCR在100～1200 bp仅产生1～8条DNA 片段.结论 tDNA-PCR及ERIC-PCR是快速、敏感的CNS菌种鉴定的方法,具有高度的特异性。

目的 在构建好的肽核酸压电基因传感器检测系统上引入"RecA蛋白-互补单链DNA探针"复合体作为新型生物信号放大系统,提高传感器的检测灵敏度.方法压电基因传感器阵列表面先固定上乙肝病毒(HBV)的bis-PNA探针,加入HBV基因组DNA与之反应完全后,加入"RecA蛋白-互补单链DNA探针"与bis-PNA/dsDNA复合物反应.首先分别优化RecA蛋白及ATPγS的浓度,再观察最佳条件下传感器检测系统的频率下降值和反应时间.结果当RecA 蛋白浓度为3 mg/ml,ATPγS浓度为12.5 μmol/L时,所引起的频率下降值最明显.最佳条件下所引起的频率改变为(112.2±12.7)Hz.结论在检测系统中加入"RecA蛋白-互补单链DNA探针"复合体,可有效地提高压电基因传感器的检测灵敏度。

目的 研究建立改良双缩脲双试剂二点终点法测定血清总蛋白的方法,以消除标本溶血、黄疸、脂浊、含葡聚糖的干扰.方法采用改良试剂,测定方法的精密度、回收率、检测限、线性范围、干扰试验,以确定所建立方法的基本性能;与Doumas法比较以确定方法的可靠性与消除干扰的效果.结果样品与试剂比例为5∶ 220 μl,线性范围达140 g/L.回归方程:Y=484.0+48.06X,r=0.999 3.批内CV(20次)0.24%,日间CV (20 d)1.07%.回收率95.6%～103%, 平均99.5%.检测限2.36 g/L.血红蛋白(Hb)2.1 g/L以下, 胆红素(Bil)148 μmol/L以下,三酰甘油(TG)28.2 mmol/L以下,葡聚糖30 g/L以下干扰不显著.改良法与Doumas法测定外观正常标本结果高度相关,回归方程:Y=-2.435 4+1.037 4X,r=0.988 2.结果间差异无统计学意义,t=0.156,P=0.877.测定溶血、高脂、黄疸、含葡聚糖标本二种方法间差异有统计学意义.结论采用改良双缩脲双试剂二点终点法测定血清总蛋白,能有效消除溶血、黄疸、高脂和葡聚糖的干扰,提高结果准确性。

目的 研究建立用克隆、表达和鉴定人自身抗原组氨酰转移核糖核酸合成酶(HARS,亦称Jo-1抗原)检测多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)自身免疫抗体的方法.方法用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)从HL-60细胞株中克隆人自身抗原Jo-1全长基因,将PCR产物直接进行TA克隆、鉴定及测序,再定向克隆至pGEX-5T载体中,并转入大肠杆菌BL-21;阳性克隆鉴定后在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下表达,然后对其产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(IBT)检测.结果 PCR产物约1 500 bp,与预期1 526 bp接近,测序结果与基因库核酸完全一致.pGEX-5T- Jo-1重组阳性克隆酶切鉴定正确,SDS-PAGE和IBT结果显示,融合蛋白分子量75 000,具有天然人自身抗原Jo-1的免疫原性.结论成功克隆表达人自身抗原Jo-1,为建立PM/DM自身免疫抗体检测方法奠定了基础。

财务管理也是检验科管理者日常工作中很重要的一部分,包括仪器管理、试剂管理、工作量和收入的统计等.手工做这些工作繁琐且不便汇总,如用Excel来完成就容易多了.本人在日常科务管理工作中应用Excel,做仪器、试剂档案,进行工作量和检验收入的统计及分析等工作,取得了非常好的效果.体会如下,供同道们参考。

近10年来嗜麦芽窄食单胞菌所致的感染不断上升,已成为医院感染的重要致病菌,其多重耐药可能与外排泵有关.SmeDEF泵外排包括氟喹诺酮类等多种抗生素.大肠埃希菌多药外排泵AcrAB表达,与耐药表型的诱导有关,是否嗜麦芽窄食单胞菌也有同样机制,待研究.

男性患者,55岁,因反复发热20余天入院,病程中无咳嗽、头痛、咽痛、呕吐、腹泻等,但诉头昏,体温 37.5～38℃ , 10年前患"高血压"病,间断服药治疗,2个月前因"高血压肾病、慢性肾功能衰竭(尿毒症期)"入院治疗.入院查体:T37.4℃、R20次/min、P70次/min、BP145/85 mm Hg,神清,呼吸平稳,心肺腹阴性,神经系统阴性.门诊辅查:外周血象示WBC14.6×109/L、N0.88、L0.12,尿常规蛋白+++,WBC+/HP、RBC+/HP、肾功能:BUN22.2 mmol/L、Cr351μmol/L,胸片无异常。

由中华医学会中华检验医学杂志编辑委员会和中华医学会检验医学分会主办的"中国检验医学中青年论坛"于2005年6月1～4日在广州市召开。

由中华医学会<中华检验医学杂志>编辑部组织召开的"肌钙蛋白临床评价专家座谈会"2005年6月25日在上海召开了。

由中华医学会<中华检验医学杂志>编辑委员会主办,广州医学院第一临床医学院、广州医学院第一附属医院承办的"全国首届医院临床实验室自动化学术峰会"2005年8月26～27日在广州召开,同时还在广州医学院第一附属医院举行了"全国第一条医院临床实验室全自动化流水线"开通仪式.来自广东省和其他省市的专家学者150多人出席了会议.中华医学会会长、中国工程院院士钟南山教授出席会议并致辞。

问：“干细胞”是否是想象中的“祖细胞”？是否是想象中的“受精卵细胞”可发展成为人体吗？

由国际临床化学联合会(International Federation of Clinical Chemistry, IFCC)和美国临床化学协会(American Association for Clinical Chemistry, AACC)联合主办第19届国际临床化学大会(International Congress of Clinical Chemistry) 暨2005AACC年会于2005年7月24-28日在美国佛罗里达州的奥兰多市隆重召开。

检验医学是建立在科学实验基础上的临床医学专业学科,是最讲科学、最为严谨的学科.检验医学发展史表明,目前临床上开展的绝大部分检验项目,都是经过前人发现、发明、无数次实验、论证、研究、改进、筛选之后才应用于临床诊断.为了保证检验结果的准确性,在应用中还要建立一套严格的质量管理体系,随时对工作质量加以检查和监控,并且还要接受本实验室外部的质量评价.在涉及临床医疗的各个学科中,检验医学这种客观、科学和严谨性是非常突出的学科特点。

随着人类基因组计划的顺利完成,功能基因组(functional genomic)、蛋白质组学(proteomic)、代谢组学(metabonomics)、激酶组学(kinomic)、免疫基因组学(immunogenomics)、肿瘤免疫组学(cancer immunomics)、免疫组学(immunomics)、抗原组学(antigenome)、抗原表位组学(epitomics)等等组学(omics)研究相继开展,大量有关人类组织细胞结构、功能、代谢及分子间相互作用的信息被发现.所有这些omics研究的目标均是通过一组数据反映人体特定组织器官的功能、代谢等。

中国生物化学与分子生物学会临床应用生物化学与分子生物学分会成立大会暨第一届临床应用生物化学与分子生物学学术会议于2005年9月10～12日在北京中国人民解放军总医院科学文化活动中心隆重举行,田亚平教授受中国生物化学与分子生物学学会委托主持召开并致辞,中国生物化学与分子生物学会副理事长、中国工程院院士王志新教授、中国人民解放军总医院副院长陈晓红少将、日本临床化学会主席滨崎直孝教授、国家标准化委员会主任委员、中华医学会检验分会名誉主任委员杨振华教授、国家卫生部临床检验中心副主任郭健教授到会祝贺并讲话,中国工程院院士王琳芳教授、中国生物化学与分子生物学学会常务理事、解放军生物化学分会主任委员孙志贤教授、中国生物化学与分子生物学会副秘书长兼办公室主任王同喜高级工程师出席会议并祝贺。

中国肝炎防治基金会第二届理事会第三次会议暨大连汉信捐赠乙肝疫苗仪式2005年9月13日在北京举行.中国肝炎防治基金会理事长、全国人大副委员长何鲁丽出席会议并讲话;理事会成员60多人出席会议并听取了工作报告及工作计划.会上,大连汉信生物制药有限公司向中国肝炎防治基金会捐赠了600 000支"汉逊瑞安"新一代重组乙型肝炎疫苗。

由中国实验室国家认可委员会主持召开的"全国ISO15189认可研讨会暨解放军总医院临床检验科通过国家认可颁证挂牌仪式"2005年8月30日在解放军总医院举行.解放军总医院临床检验科是国内首家通过ISO15189认可并颁证挂牌的临床实验室.国家认证认可监督委员会程方副主任、刘安平司长,中国实验室国家认可委员会魏昊秘书长到会讲话.来自全国20多个省市的150多名检验科主任出席了研讨会。

依据卫生部<关于开展医院管理年活动方案>的部署,开展"以病人为中心,以提高医疗服务质量为主题的医院管理年活动,是坚持以人为本,构建和谐社会,用科学发展观指导卫生工作的具体体现,也是全面提高医院管理水平,更好地为人民群众健康服务的重大举措。

瑞典卡罗林斯卡医学院10月3日宣布,将2005年诺贝尔生理学或医学奖授予澳大利亚科学家巴里*马歇尔和罗宾*沃伦,以表彰他们发现了导致胃炎和胃溃疡的幽门螺杆菌。

2005年9月14日解放军总医院亚健康医学研究所正式挂牌成立，并举行了首届亚健康医学论坛，来自瑞典的著名应激损伤研究专家Rolf Ekman教授和神经生物学专家Jonas Bergquist教授及中国工程院院士刘耕陶教授应邀参加了论坛并进行精彩演讲，解放军总医院副院长李书章少将和医务部主任刘振立少将到会祝贺。各位专家就环境、心理应激对机体的影响及基因组学、蛋白组学理论和技术在亚健康医学领域的应用等学术问题进行了广泛研讨。刘耕陶院士指出，近年来亚健康问题已受到公众的广泛关注，但其研究工作多停留在社会学和心理学调查层面，尚缺乏利用现代生命科学技术和医学知识指导的系统研究，我国第一个从医学角度对亚健康问题进行研究的亚健康医学研究所在解放军总医院正式成立，标志着亚健康医学研究进入了一个新阶段。