2011年 · 第34卷第12期

目的 建立一种同时测定血浆中Trp和Kyn浓度的HPLC-UV检测法.方法 以3-硝基酪氨酸(3-N-Tyr)为内标,采用Agilent Hypersil ODS色谱柱进行分离.流动相中醋酸缓冲液( 15 mmol/L,pH 5.5):乙腈为94∶ 6(v/v)；流速为0.8 ml/min；柱温:25℃；紫外程序化检测波长:0～4 min,360 nm；4～5 min,302 nm.选取2010年9-12月重庆市九龙坡区第一人民医院15例慢性乙型肝炎患者、8例慢性肾炎患者、10例血小板减少性紫癜患者以及15名健康体检者,用该方法检测其血浆Trp、Kyn水平并计算Kyn/Tp比值；各指标在上述4组间的比较采用单因素方差分析,两两比较采用SNK法.结果 Kyn与Trp的保留时间分别为2.9 min和4.4 min,线性范围分别为0.44～18.30μmol/L和3.67～470.00 μmol/L,检测限分别为0.014 μmol/L和0.122 μmol/L.Kyn与Trp的日内变异均小于3％,日间变异均小于4％.平均回收率均在92.29％～104.40％之间.用该方法测定临床标本,健康对照组、慢性肾炎组、血小板减少性紫癜组以及慢性乙型肝炎组血浆中Kyn浓度分别为(1.59±0.28)、(2.73±0.56)、(2.69±0.44)和(1.54±0.48) μmol/L,Trp浓度分别为(59.8±10.0)、(46.1±11.7)、(58.5±8.0)和(41.4±13.1)μmol/L,Kyn/Trp比值分别为(0.027 4±0.007 5)、(0.061 6±0.0165)、(0.0467±0.0091)和(0.038 3±0.007 5),差异均有统计学意义(F值分别为23.734,8.463和20.921,P均＜0.01).结论 所建立HPLC-UV检测法可同时测定血浆中Kyn和Trp浓度,适合于临床检测。

目的 探讨应用苦味酸法和酶法检测肌酐对GFR评估方程适用性的影响.方法 选取2007-2009年华北(北京)、东北(大连)、华东(上海)、华中(长沙)4个区域三级甲等综合医院CKD患者176例.以双血浆法99m Tc-二乙三胺五乙酸(99mTc-DTPA)血浆清除率作为176例CKD患者的rGFR.使用4个不同厂家的酶法或苦味酸法肌酐试剂配套不同厂家自动生化分析仪分别测定患者血肌酐,同时应用体表面积( BSA)标化的Cockcroft-Gault方程(CG/BSA方程)、简化MDRD方程、校正至同位素稀释质谱法的简化MDRD方程(MDRD-IDMS方程)、CKD流行病学合作研究方程(CKD-EPI方程)及2个国内简化MDRD改良方程(课题组方程1、2)分别计算eGFR,比较不同估算结果与rGFR的相关性、偏差、精密度以及30％准确性.结果 176例CKD患者的rGFR为[40.70(19.41～84.35)] ml·min-1·(1.73 m2)-1.应用苦味酸法测定肌酐时,各方程评估的eGFR与rGFR的ICC在0.879～0.923之间；应用酶法测定肌酐时,各方程评估的eGFR与rGFR的ICC在0.925 ～0.946之间,相关性优于应用苦味酸法测定肌酐.Bland-Altman图显示,各方程评估的eGFR在高值区偏差较大,但用酶法时偏离程度均小于应用苦味酸法.在rGFR≥60 ml·min-1·(1.73 m2)-1时,各方程应用酶法测定肌酐时的30％准确性在68.3％～90.0％之间,应用苦味酸法30％准确性在41％～75％之间,除课题组方程1外,其他方程应用酶法测定肌酐时的准确性均显著高于苦味酸法.而rGFR＜60ml· min-1·(1.73 m2)-1时,应用酶法、苦味酸法测定肌酐的30％准确性分别在39.7％～49.1％、40.5％～52.6％之间.对于同一方程,应用酶法测定肌酐的两套不同检测系统间,其30％准确性差异无统计学意义,而应用苦味酸法的两套不同检测系统间,其30％准确性差异有统计学意义.结论 同一评估方程使用苦味酸法和酶法两种不同的肌酐检测方法时,结果存在显著性差异.采用酶法测定肌酐时,方程评估的eGFR结果在相关性、偏离程度、准确性方面均优于苦味酸法。

目的 评价降钙素原在成人下呼吸道感染中的诊断价值.方法 收集2008年7-12月北京大学人民医院的疑似下呼吸道感染的成人患者97例,分为下呼吸道感染合并脓毒症组、医院获得性肺炎组、社区获得性肺炎组、慢性阻塞性肺病急性加重组、其他下呼吸道感染组以及非感染性疾病组.记录各组患者的外周血血常规、红细胞沉降率、C反应蛋白、降钙素原、痰细菌培养、血培养等资料,所有病例均进行APACHEⅡ评分.降钙素原的检测采用荧光免疫夹心法.结果 下呼吸道感染合并脓毒症组、医院获得性肺炎组、社区获得性肺炎组、慢性阻塞性肺病急性加重组、其他下呼吸道感染组、非感染性疾病组降钙素原水平分别为10.1(0.7 ～37.0)、0.3(0.1 ～0.8)、0.2(0.1 ～0.9)、0.2(0.1～0.4)、0.3(0.1 ～0.5)、0.1(0.1 ～0.2)mg/L,差异有统计学意义(H=19.898,P＜0.01)；两两比较显示,下呼吸道感染合并脓毒症组、医院获得性肺炎组、社区获得性肺炎组、其他下呼吸道感染组降钙素原水平均高于非感染性疾病组(U值分别为0、18.000、81.000、20.000,P值均＜0.01)；且下呼吸道感染合并脓毒症组降钙素原水平显著高于其余感染组(U值分别为11.000、45.000、3.000、4.500,P均＜0.01).对细菌培养阳性患者的降钙素原和APACHEⅡ评分进行Pearson相关分析,r为0.499.取0.5 mg/L为临界值,降钙素原诊断下呼吸道感染的敏感度为32.6％,特异度为100％；而临界值为0.235 mg/L时,敏感度为53.9％,特异度为100％,诊断正确率为53.9％.结论 降钙素原在成人下呼吸道感染的诊断中具有一定价值,尤其是合并脓毒症时.适当下调降钙素原临界值可以进一步提高其诊断敏感度。

目的 建立北京地区汉族人群的ALT、AST、GGT和LDH的参考区间.方法 按照CLSI文件C28-P3《医学实验室参考区间的定义、建立和确认》中的要求,借鉴IFCC多中心酶学参考区间研究模式及参考人群筛选标准,于2009年筛选卫生部北京医院20～60岁健康体检者315名,其中男132名,女183名,用于上述各种酶参考区间的研究.使用酶学参考物质保证本次研究结果的准确性.上述4种酶的检测方法均能溯源到IFCC的参考测量程序,其中检测ALT和AST的试剂中加入磷酸吡哆醛.结果ALT、AST和GGT需要按性别划分参考区间,ALT参考区间:8.2～ 50.8 U/L(女),12.7 ～71.8 U/L(男)；AST参考区间:15.0～36.7 U/L(女),16.6 ～51.1 U/L(男)；GGT参考区间:9.0 ～ 37.3 U/L(女),12.0 ～ 50.9 U/L(男).LDH无需按性别分组,参考区间为127 ～ 224 U/L.结论 本研究建立了北京地区汉族人群4种酶的参考区间,其中ALT的参考上限高于同类研究。

血清CK测量是临床实验室测量频率极高的项目之一,是骨骼肌、心肌等疾病诊断、治疗监测的重要指标[1].既往研究表明,血清CK常规方法测量结果各实验室间缺乏可比性[2-3],已影响临床诊断和治疗.根据ISO 15189[4]要求,各实验室测量结果应准确并可溯源.按ISO 18153文件要求,血清CK测量结果应溯源至国际临床化学学会(IFCC)参考方法[5].在我国,临床实验室多采用基于自动生化分析仪的常规方法测量血清CK活性,这类方法测量结果的正确性与校准直接相关[6-8].本研究采用厂家校准品校准、人血清基质国家二级标准物质校准[9-10]和选配校准品校准3种模式在日立7170生化分析仪上同时测量40份不同浓度的冷冻血清,测量结果与IFCC参考方法比较,判定不同校准模式下各方法测量结果的正确性.对存在系统偏倚的方法用国家二级标准物质进行厂家认定值修正,并采用31份新鲜单人份血清验证修正后该方法测量结果的正确性。

近年来,我国2型糖尿病的发病率不断上升,由此引发的各种慢性微血管并发症也在增多,糖尿病肾病是糖尿病最常见的微血管并发症,也是终末期肾功能衰竭的主要原因.糖尿病肾病的确切发病机制不明,蛋白尿是最常见的临床表现,最近有研究认为肾小管功能紊乱在糖尿病肾病蛋白尿的形成中发挥着重要作用[1-2],NGAL作为肾小管损伤的重要指标,被认为是最有应用前景的肾损伤标志物之一[3-4].本研究旨在检测2型糖尿病患者血和尿NGAL含量,以探讨其在糖尿病肾病中的临床价值。

目的 探讨用rDNA基因ITS及TUB的差异对15株致病性波氏假阿利什霉/尖端赛多孢重新分类鉴定,以了解致病菌株种类及指导临床治疗的意义.方法 对15株北京大学真菌与真菌病研究中心保存的临床相关波氏假阿利什霉/尖端赛多孢采用形态学方法观察菌落形态及显微镜下特征,糖同化试验方法观察菌株对D-核糖的利用,以及对菌株ITS及TUB进行Clustal X序列比对和MEGA 4方法种系发生研究.结果 15株波氏假阿利什霉/尖端赛多孢菌落形态学和显微镜特征无明显差异,仅1株出现有性期表现.糖同化试验显示所有菌株均可利用D-核糖.15株菌经与荷兰CBS网站(http://www.cbs.knaw.nl)数据库中模式株比对以及绘制种系发生图,显示分属于波氏假阿利什霉复合种第4支Scedosporium apiospermum和第5支Pseudallescheria boydii,且分别为4和11株.结论 对于波氏假阿利什霉复合种仅依赖形态学和生理生化特征难以准确鉴定,且耗时长,而通过多位点基因片段序列分析能可靠鉴定波氏假阿利什霉/尖端赛多孢.对临床相关的波氏假阿利什霉/尖端赛多孢建议在形态学基础上结合分子方法进行种水平鉴定。

目的 了解结核分枝杆菌利福平/利福布丁交叉耐药株与利福平耐药/利福布丁敏感株rpoB全基因突变特征的差异.方法 测定rpoB全基因序列,比较278株利福平/利福布丁交叉耐药(rifampicin/rifabutin cross-resistant,RIF/Rfb-R)株和40株利福平耐药/利福布丁敏感(rifampicinresistant/rifabutin-susceptible,RIF-R/Rfb-S)株,30株利福平/利福布丁敏感(rifampicin-susceptible/rifabutin-susceptible,RIF-S/Rfb-S)株及标准株H37 Rv之间的rpoB全基因序列突变差异.结果 利福平/利福布丁敏感株和H37Rv rpoB全基因未发现突变；利福平/利福布丁交叉耐药株的常见突变位点是531(70.5％)和526( 20.9％).223( 80.2％)株单点突变株分别含有S531L、S531W、H526D、H526Y、H526R、Q513K、Q513P、Q510H、V176F、P287R、Y395C及H404Y单点突变,55( 19.8％)株多重突变株分别以S531L、H526R、H526Y、H526D、D516G和Q513K位点与其他位点联合突变为主.利福平耐药/利福布丁敏感株的常见突变位点分别是516(65.0％)、526( 17.5％)和533( 10.0％).21(52.5％)株单点突变株分别含有L533P、H526L、H526S、S522L、D516V、D516Y和D516F单点突变,19(47.5％)株多重突变株分别以D516V和L533P位点与其他位点联合突变为主.结论 本批标本中,利福霉素耐药株rpoB基因突变率为100％,利福平/利福布丁交叉耐药株与利福平耐药/利福布丁敏感株rpoB全基因单点突变株的突变位置或氨基酸替换类型、多重突变株的突变位置或组合类型以及常见突变位点或其氨基酸替换类型完全不同,rpoB全基因DNA序列分析对临床科学应用利福平和利福布丁有指导意义。

目的 研究细胞壁锚定蛋白编码基因sasX在金黄色葡萄球菌中的分布及对细菌耐药性的影响.方法 随机收集上海华山医院2004、2007和2010年从金黄色葡萄球菌感染的住院患者标本中分离鉴定的金黄色葡萄球菌共300株,收集同时期社区健康人群的鼻咽拭子分离鼻腔内定植的金黄色葡萄球菌170株.按照国际通用的MLST以及葡萄球菌A蛋白序列分析（spa typing）方法进行克隆株的鉴定分析.通过苯唑西林MIC值测定方法对MRSA进行检测.采用PCR结合测序方法对金黄色葡萄球菌携带sasX基因情况进行分析,采用纸片琼脂扩散法药敏试验分析临床sasX阳性和sasX阴性金黄色葡萄球菌对抗菌药物的耐药性.结果 300株从金黄色葡萄球菌感染的住院患者标本中分离到的致病性金黄色葡萄球菌克隆分型以ST239（110株,36.7％）和ST5（122株,40.7％）为主.2004至2010年,sasX基因在致病性的金黄色葡萄球菌中的阳性率从17％上升至39％,sasX基因在健康人鼻腔内分离的金黄色葡萄球菌中阳性率平均为0.59％.ST239中sasX的阳性率从47.2％上升至83.8％.携带sasX基因的MRSA百分率从26.4％上升至50.8％,携带sasX基因的MSSA的比率只约占10％.sasX基因阳性组对部分目前临床常用的抗菌药物的耐药性高于sasX基因阴性组.结论 sasX基因主要存在于医院环境内致病性的金黄色葡萄球菌中,SasX可能是金黄色葡萄球菌在医院环境内持续感染毒力因子之一,sasX基因的存在与细菌的耐药有关。

MP是儿童和青少年呼吸道感染常见的病原体,其导致的肺炎及肺外并发症对儿童健康危害严重[1-3].MP缺乏细胞壁,故对作用于细胞壁的抗生素如青霉素类、头孢菌素类不敏感,而对影响细菌蛋白质合成的抗生素如大环内酯类、喹诺酮类等敏感[4].随着红霉素广泛应用于治疗MP感染,MP的耐药现象日益严重.现已证实MP对红霉素耐药主要与23S rRNA基因的点突变有关.为此,本研究通过对西安地区分离培养的MP菌株的23S rRNA基因进行序列分析,探讨本地区MP耐药菌株23S rRNA基因突变和耐药的关系。

幽门螺杆菌(Hp)是慢性活动性胃炎和消化道溃疡的重要致病菌,且与胃癌和胃黏膜相关淋巴样组织(MALT)淋巴瘤等多种消化系统疾病密切相关,目前已被世界卫生组织癌症研究委员会列为一类致癌原[1].Hp的清除与根治,直接关系到上述疾病的转归.随着抗菌药的大量使用,Hp耐药率日渐增高,左氧氟沙星是一类新型治疗Hp的喹诺酮类抗生素,但也出现了不同程度的耐药现象[2-4].Hp对左氧氟沙星耐药与gyrA基因C261A/G、G271A/T和A272G点突变相关.本研究用针对上述点突变的基因芯片检测Hp对左氧氟沙星耐药的gyrA基因突变,并评价其在检测临床标本中Hp左氧氟沙星耐药的应用价值。

金黄色葡萄球菌是临床常见致病菌,可引起皮肤感染、慢性骨感染、败血症及心内膜炎等各类感染.尤其是甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的出现,更是给全世界的医院带来了难题.糖肽类抗生素万古霉素于1958年首次投入使用,随后即被广泛用于治疗MRSA引起的严重感染.金黄色葡萄球菌可由万古霉素耐药的肠球菌获得vanA基因而产生对万古霉素的耐药,至今全世界已报道11例万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌[1].而自1997年日本报道万古霉素敏感性下降的金黄色葡萄球菌后,金黄色葡萄球菌对万古霉素的敏感性问题就一直引起医疗界的广泛关注[ 2].另外,即使按照现行美国临床实验室标准化协会( CLSI)万古霉素药物敏感实验折点(最低抑菌浓度MIC值≤2 mg/L)判断为敏感的金黄色葡萄球菌,其临床使用万古霉素治疗失败的病例也屡有报道,这种治疗欠佳的原因可能为其万古霉素MIC值的上升[3].本研究收集浙江省8家医院临床分离MRSA菌株,应用Etest方法及微量肉汤稀释法检测其万古霉素的MIC值,了解MRSA对万古霉素敏感性,并对Etest方法与微量肉汤稀释法测量万古霉素对MRSA的MIC值进行比较分析。

铜绿假单胞菌是人体的一种条件致病菌,目前在我国医院获得性感染中占有非常重要的地位,并且随着抗菌药物的广泛应用,其对亚胺培南的耐药率逐年上升,这给临床抗感染治疗带来了很大的困难.目前认为铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药机制主要有如下几个方面:β-内酰胺酶的水解作用、细菌外膜孔蛋白的通透性降低、作用靶位(如青霉素结合蛋白)的改变、主动外排系统高表达、生物膜的产生等[¨].本实验室前期对广州市收集的亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的情况进行了研究,在此基础上,本研究对这些菌株进行了OprD和青霉素结合蛋白(penicillinbinding proteins,PBPs)这两方面的检测,以全面了解广州地区铜绿假单胞菌分离株对亚胺培南的耐药机制。

食物过敏威胁着人类健康,90％的食物过敏是由牛奶、鸡蛋、大豆、花生等8种物质引起的,其中花生及其制品可引起较为严重的过敏反应,甚至威胁生命[1].花生的加工方式有多种,而这些方法可能会导致花生过敏原性的增强、减弱或不变.研究加工对花生过敏原性的影响,对指导临床患者规避过敏原具有重要价值.常用的检测花生过敏原的方法有2种,通常体内试验的影响因素较多;而体外检测法多为国外进口产品,且操作步骤繁杂、耗时费力、价格昂贵、所需血清标本量大.为降低成本,简化实验步骤,评估加工方式对花生过敏原性的影响,我们对生、熟花生过敏原致敏蛋白进行提取纯化后,制备花生过敏原检测试纸条,用其检测患者血清中花生过敏原sIgE,以期为临床花生过敏疾病诊疗提供依据。

目前,已有多种分子生物学技术被用于HLA-B * 27检测,如PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)和PCR-SSP等.但是这些方法都需要在PCR后进行凝胶电泳或杂交分析,不仅耗时,且易造成遗留污染与假阳性,还可能因使用强诱变剂溴乙锭为示踪剂,使其应用受到一定限制[1].TaqMan实时荧光PCR是20世纪90年代的新型核酸检测方法,其能实时监测PCR的荧光强度,同时进行扩增与检测,因而无需在PCR完成后进行凝胶电泳或杂交分析,不仅能有效避免遗留污染与假阳性,而且不用溴乙锭等强诱变剂[2-3].因此,其一出现即备受青睐,并被认为是基因分型、基因表达及基因突变检测的强有力工具.然而,目前尚鲜见TaqMan实时荧光PCR检测HLA-B*27的研究报道,本研究用其检测人HLA-B*27,以探讨其应用价值。

目的 建立临床常见的病原真菌的基因芯片检测体系.方法 选取8种临床常见真菌,包括白色假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌、热带假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌、土曲霉、黄曲霉、米根霉和烟曲霉.根据真菌ITS区设计引物和探针,进行扩增和芯片制备.通过将待检真菌的PCR产物变性后与点布探针的芯片杂交,观察并分析荧光信号强度,进行对真菌的快速检测.并选取临床真菌阳性标本和细菌阳性标本共25份进行验证.结果 25份临床阳性标本的芯片检测结果显示,10份细菌阳性的标本,经真菌基因芯片检测,全部为阴性,无荧光信号.其余15份真菌标本中,12份临床真菌阳性标本均鉴定出芯片中的某一种真菌的结果.另外采用克柔假丝酵母菌人为制备的3份待检样本,经检测,芯片中8种真菌位点无荧光信号,为阴性,仅有真菌通用探针得到荧光信号,表明该标本中有真菌存在,但无法确认是哪一种.结论 本研究建立的基因芯片可对常见病原真菌进行快速准确的鉴定,为基因芯片应用于临床奠定了基础。

目的 筛选AIDS患者血浆中与HAART疗效相关的特异性生物标志物,为临床疗效评估提供新型检测分子,指导AIDS治疗的预后判断.方法 收集2008年6月至2009年2月由上海市公共卫生临床中心感染一科收集的艾滋病患者血浆,包括病毒学治疗有效组10例(病毒载量＜ 50拷贝/ml)和病毒学治疗失败组11例(病毒载量＞50拷贝/ml),入组患者年龄22 ～ 63岁.血浆样品用Bio-rad公司血浆高丰度蛋白质去除试剂盒处理,去除血浆中的白蛋白和免疫球蛋白IgG.处理后的血浆蛋白质样品通过二维凝胶电泳(2DE)进行分离,采用ImageMaster软件分析获得的电泳图谱,找到与疗效相关的差异蛋白质.差异蛋白质点经过胰酶酶切后,通过在线纳升级反向液相色谱串联电喷雾离子阱质谱分析鉴定.结果 血浆经过高丰度蛋白去除试剂盒处理后,低丰度的蛋白质得到了有效的富集.共发现了6个在治疗有效组和治疗无效组血浆样品中表达差异的蛋白质点.这些差异蛋白质经液相色谱串联质谱分析得到准确鉴定,包括血清转铁蛋白、血清β纤维蛋白原等.结论 通过蛋白质组学研究发现,血清转铁蛋白等蛋白质在艾滋病患者血浆中表达水平与治疗过程中病毒载量相关,它们可能是评价抗病毒治疗疗效的潜在生物标志物。

诺如病毒( Noroviruses,NVs)是急性病毒性胃肠炎暴发的主要病原之一,是引起儿童和成年人非细菌性胃肠炎的主要病原[1].NVs呈全球性感染,频繁暴发流行,被世界卫生组织(WHO)定为B类病原,近年来我国的相关疫情报告也在增多[2-4].NVs胃肠炎主要通过污染的食物或水引起,海产品是食源性NVs胃肠炎的重要病因,接触或感染者呕吐物的气溶胶是暴发传播的主要途径。

HCV对人类健康的危害越来越受到重视,其检测方法也在不断改进.CIA法近年来因其具有较高的灵敏度、特异性而应用于临床抗-HCV检测,但美国疾病预防控制中心(CDC)早在1998年就提出建议,抗-HCV筛查呈反应性结果需进一步采用补充试验确证后方可报告[1].目前采用的补充试验有免疫印迹法和病毒核酸检测,这两种试验十分昂贵、操作要求较高,广泛用于临床检测是不现实的.如何更为有效地利用现有抗-HCV筛检结果预测确证结果尤为重要,本研究就83份抗-HCV阳性反应性标本的RIBA确证结果做了简单的分析。

目的 评价电化学发光免疫法检测NT-proBNP的分析性能.方法 参考CLSI发布的方法学评价系列文件,对Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP的精密度、正确度、空白限(LoB)和检出限(LoD)、功能灵敏度(FS)、分析测量范围(AMR)、最大稀释度、临床可报告范围(CRR)以及胆红素、血红蛋白和乳靡对分析的干扰进行评价,并与厂商声明的性能和有关的质量标准进行比较.根据CLSI C28-A2文件,选择18～74岁的健康体检者80名,按年龄分为4组,每组20名,以验证厂商声明的生物参考区间的适用性.结果 电化学发光免疫法检测NT-proBNP的批内CV和总CV分别为1.1％ ～2.2％和1.5％ ～2.9％,与卫生部临床检验中心室间质量评价调查品同方法组的均值和配套校准品标示值的偏差分别为2.7％ ～5.9％和2.7％～7.5％,LoB、LoD和FS分别为2.5、7.8和8.8 pg/ml,AMR为8～35 126 pg/ml,最大允许稀释度为1∶2,CRR为9～70 252 pg/ml,胆红素(428 μmol/L)、血红蛋白(2 g/L)和乳靡(2 200 FIU)对NT-proBNP测定无干扰.不同年龄组各20名健康参考个体NT-proBNP浓度除1个检测值(167 pg/ml)超出厂商提供的参考区间外,其余均在厂商提供的参考区间内.结论Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP的主要分析性能达到了厂商声明的性能和有关的质量要求,建立的LoD、FS、最大稀释度和CRR可为临床提供更好的质量保证,厂商声明的生物参考区间可满足临床需要。

自然流产占全部妊娠10％～15％,主要由遗传、免疫、感染、解剖、内分泌、环境等因素引起,细胞遗传学研究表明,其遗传因素中的染色体异常占所有自然流产胚胎50％～60％,是造成自然流产的主要原因[1].Bui等[2]报道,自然流产胚胎中约86％染色体异常为数目异常,结构异常仅6％,包括嵌合型在内的其他异常占8％.细胞遗传学方法是染色体分析的金标准,并已被广泛应用,但细胞培养失败及长期培养时母源细胞选择性生长限制其应用;CGH技术能在整个基因组中筛选染色体不平衡改变,但不能区分染色体整倍性改变、嵌合体和母体细胞污染[3-4].FISH作为分子细胞遗传学技术,已用于癌症及产前诊断,但其检测自然流产胚胎染色体异常的报道较少.本研究用FISH技术和13、16、18、21、22、X和Y染色体特异性探针,检测自然流产胚胎染色体异常,探讨自然流产与染色体数目异常的关系。

8P11骨髓增殖综合征(EMS)也称为干细胞白血病/淋巴瘤综合征,是一种十分少见的髓系肿瘤.在2008年世界卫生组织(WHO)髓系肿瘤的分类方案中,已将EMS归入伴有FGFRI重排的骨髓增殖性肿瘤[1].患者就诊时多表现为慢性骨髓增殖性疾病的血液学和临床特点,本文对1例EMS患者的临床和实验室资料进行分析,以提高对EMS的认识。

患者男,80岁,2010年12月29日因“胸闷、气促、不能平卧”,拟诊“急性心力衰竭合并肺部感染”入住上海市第二人民医院.体检:呼吸急促、高枕卧位,重度贫血貌,双上肢前臂外侧弥散性出血点,双下肢紫癜.两下肺有干湿啰音,心率110次/分,律齐,肝颈反流征阳性,下肢浮肿.CT检查示胸腔积液、心影增大。

vWF主要由血管内皮细胞合成,巨核细胞和血小板亦有极少量合成.静息状态下vWF是以二硫键相连的多聚体形式储存在Weibel-Palade小体内,当内皮细胞损伤、异常活化或受到凝血酶等物质刺激时,vWF可以在30 min内被释放入血液循环[1].vWF在血小板黏附到内皮下结构的过程中发挥关键作用,同时还可与纤维连接蛋白共同与GPⅡb-Ⅲa结合,诱导血小板聚集[2].此外,作为载体蛋白,vWF可稳定凝血因子Ⅷ,并支持凝血因子的活化.对vWF抗原水平和活性的测定长期以来被应用于血管性血友病的诊断和分型,由于此类患者数量较少,vWF在临床上的应用范围非常有限.vWF:Ag的检测方法主要包括ELISA和LIA[3-4],与ELISA比较,LIA有相近的线性范围和更低的批间变异,尽管该方法有可能受到风湿因子的潜在干扰,但由于其具有自动化程度高、精密度高的优点,目前已经成为应用最多的分析方法[5-6]。

肿瘤标志物( tumor marker,TM)是指在恶性肿瘤发生和增殖过程中,由肿瘤细胞产生或机体反应而异常产生和(或)升高的,反映肿瘤细胞特性的一类物质,如癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)、前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA)等[1-3].目前,TM在临床上主要用于对经过组织学确诊的恶性肿瘤患者进行病情的动态监测,TM浓度的逐渐升高常意味着疾病处于不断进展期或现行治疗措施的效果不佳,浓度降低则意味着对治疗有反应或疗效较好,而稳定的抗原水平则常常暗示疾病处于稳定期.动态监测的另一目的是判断残留病灶、预测复发,TM浓度持续低水平升高意味着可能有残留病灶的存在,而短期内迅速升高则往往是疾病复发的前兆[2-5]。

早在1935年,Stein和Leventhal[1]就发表了文章,对7例妇女同时存在闭经、多毛、肥胖以及卵巢上的多囊泡进行了描述,这是早期对多囊卵巢综合征( polycystic ovary syndrome,PCOS)的报道.多囊卵巢综合征的患病率在西方国家为4％～8％,但是由于诊断标准的不同,患病率也有很大的差别.据报道[2],在采用鹿特丹标准进行的某项社区研究显示,患病率可以高达18％,尤其需要引起关注的是,其中70％的患者之前未能得到诊断.在中国,有关多囊卵巢综合征的流行病学资料比较缺乏,近年来有增多趋势,发病率在各种报道中为3％～10％.多囊卵巢综合征以闭经、多毛、雄激素水平升高、不孕、肥胖及卵巢的多囊为主要表现,影响妇女的生殖系统、代谢系统和心血管系统的健康,在疾病的诊断、发病机制以及治疗上均比较复杂.本文对多囊卵巢综合征的发病机制、诊断要点以及治疗进行综述,希望可以提高对该病的认识。

目的 探究NGAL对肾小管上皮HK-2细胞缺氧与复氧损伤的作用及其机制.方法 以HK-2细胞为模型,体外模拟缺氧与复氧环境(缺氧时氧浓度＜0.1％).先用WB和实时定量RT-PCR检测正常对照组、缺氧与复氧组细胞内NGAL蛋白和基因水平.用噻唑蓝(MTT)法和磷脂结合蛋白V-异硫氰酸荧光素( Annexin V-FITC)/碘化丙啶双染法检测并比较缺氧与复氧同时加入不同浓度NGAL( 20、100、200、400、1 000 ng/ml)处理组、正常对照组、缺氧与复氧组细胞增殖和凋亡情况,确定加入重组NGAL的适宜浓度.用流式细胞术和实时定量RT-PCR检测并比较正常对照组、缺氧与复氧组、缺氧与复氧同时加适宜浓度NGAL组细胞周期及凋亡相关基因bax、bcl-2、caspase-3.平行实验重复3次,比较各组检测结果.结果 WB法检测细胞内NGAL蛋白/肌动蛋白缺氧与复氧组为5.88±0.08,与正常对照组(1.51±0.03)比较差异有统计学意义(t=96.89,P＜0.05).RT-PCR法检测NGAL/肌动蛋白基因水平缺氧与复氧组为12.32±1.27,正常对照组为1.00±0.00,两组差异有统计学意义(t=15.40,P＜0.05).MTT结果正常对照组吸光度(A)值为0.97±0.03,缺氧与复氧组为0.56±0.04,两组差异有统计学意义(=18.68,P＜0.05).缺氧与复氧同时加入不同浓度的NGAL(50、100、200、400、1 000 ng/ml)组A值分别为0.56 ±0.04、0.53±0.03、0.56±0.04、0.53±0.03、0.54±0.02,缺氧与复氧组和不同浓度NGAL处理组间A值水平相近,差异无统计学意义(F =0.978,P＞0.05),但其与正常对照组比较A值差异均有统计学意义(F=105.20,P＜0.05).Annexin VFITC/碘化丙啶双染检测细胞早期凋亡率(Annexin V阳性,碘化丙啶阴性的细胞群),正常对照组为(1.0±0.2)％、缺氧与复氧组为(27.6±1.4)％,两组细胞早期凋亡率差异有统计学意义(t=33.590,P＜0.05)；加入重组NGAL50、100 ng/ml后分别为(27.8±1.1)％、(26.4±1.3)％,和缺氧与复氧组比较,其差异无统计学意义(t分别为0.250、1.520,p均＞0.05)；加入NGAL 200 ng/ml组为(19.4±0.6)％,明显低于缺氧与复氧组,且早期凋亡率差异有统计学意义(t=10.350,P＜0.05);而NGAL400、1 000 ng/ml组为(19.3±1.1)％、(18.9±0.5)％,与NGAL 200 ng/ml组间早期凋亡率差异均无统计学意义(t分别为0.130、0.630,P均＞0.05)；因此选取NGAL浓度为200 ng/ml.流式细胞术检测PI正常对照组为(30.2±0.4)％,而缺氧与复氧组下降至(22.1±2.7)％,两组PI差异有统计学意义(t=3.750,P＜0.05),而缺氧与复氧同时加入NGAL 200 ng/ml组PI为(23.2±3.7)％,和缺氧与复氧组比较,差异无统计学意义(t=0.510,P＞0.05).实时定量RT-PCR法检测各组细胞内bax/bcl-2、caspase-3基因水平,正常对照组分别为1.00±0.00、1.00±0.00,缺氧与复氧组为5.83±0.33、8.13±0.20,加入NGAL 200 ng/ml后为2.52 ±0.07、1.89±0.02,三组bax/bcl-2(f=485.30,P＜0.05)和caspase-3基因水平(F=3 456.78,P＜0.05)差异有统计学意义.结论 NGAL在缺氧与复氧损伤的肾小管上皮HK-2细胞中通过调节凋亡相关基因表达发挥抗凋亡作用,且为缺血再灌注致急性肾损伤治疗提供了新思路和实验室依据。

目的 研究血清HDL亚类(HDL2-C、HDL3-C)、LDL亚类(LDLa-C、LDLb-C)、FERHDL和MERHDL的个体内和个体间的生物学变异(CVI、CVG).方法 选取2010年9-10月卫生部北京医院20名健康成年志愿者,男女各10名.每隔2周采集空腹静脉血1次,共采集4次,用超速离心-高效液相色谱(HPLC)法测定各脂蛋白亚类水平及FERHDL和MERHDL,计算其CVI和CVG,并给出各项指标的分析质量要求.结果 不同血脂指标的生物学变异不同,HDL3-C和HDL2-C的平均CVI分别为5.5％和7.2％,但两者的CVG差别较大,分别为8.7％和45.5％；LDLa-C和LDLb-C平均CVI分别为11.2％和18.7％；FERHDL和MERHDL的CVI分别为11.9％和12.3％,其中FERHDL的CVG (49.5％)大于MERHDL的CVG(30.6％).CVI存在较大个体差异.结论 本研究考察了血清脂蛋白亚类和HDL胆固醇酯化速率的生物学变异,可为这些血脂类危险因素的分析质量控制及心血管病危险分析奠定基础。

目的 描述常规化学检验项目参考区间上下限回报结果以及来源,比较北京地区的参加单位常规化学与干化学各项目参考区间的差异.方法 把卫生部临床检验中心2010年全国常规化学和干化学第3次室间质量评价回报结果中各项目的参考区间信息纳入研究.剔除所有妇幼保健院、儿童医院和公司的结果,以及所有异常值和错误数据(如下限高于上限、上下限相同等),并对全国参评单位常规化学和干化学参考区间的基本情况以及来源(如果存在性别间差异则报告成年男性水平)进行描述.使用SPSS 13.0分析北京市参评单位常规化学与干化学各项目参考区间的差异.结果 参考区间来源中所占比例最高的3项包括临床检验操作规程483家(47.6％)、试剂厂家说明书295家(29.1％)以及实验室自己确定124家(12.2％).在北京地区参加单位常规化学和干化学参考区间的比较中,有6项下限及上限差异均有统计学意义,有4项出现单侧界限差异有统计学意义.结论 目前各医疗机构常规化学项目参考区间差异明显,来源不统一,各医疗单位常规化学与干化学项目参考区间只有少数项目存在统计学显著性差异,但是否具有临床实际意义有待进一步研究.为了实现医疗机构检验结果互认,必须在标准化基础上,在一定区域内共享相同的参考区间。

目的 利用稳健Z比分数评价肌酐能力验证的数据.方法 肌酐数据来自2009年卫生部临床检验中心3次能力验证常规化学检测项目,分别有1 179、1169和1 168家实验室参加.按照检测方法的不同将肌酐能力验证的数据分为苦味酸组和酶组.利用Mann-Whitney检验作苦味酸法和酶法检测结果的可比性分析.利用四分位值建立的TUKEY区间剔除离群值.利用单样本Kolmogorov-Smirnov检验作原始数据和剔除离群值后数据的正态性分析.利用稳健Z比分数评价检测结果.Z比分数绝对值≤2的检测结果评价为满意值,2＜Z比分数绝对值＜3之间的检测结果评价为可疑值,Z比分数绝对值≥3的检测结果评价为不满意值.结果 苦味酸法和酶法的检测数据大部分(86.7％)不可比.所有研究组的原始数据是非正态分布,剔除离群值后,73.3％的数据是正态分布.2009年3次能力验证苦味酸组的满意率分别是89.8％ (495/551)、87.2％( 468/537)和89.5％ (476/532)；不满意率分别是3.3％( 18/551)、6.5％ (35/537)和4.5％ (24/532).酶组的满意率分别是88.8％( 558/628)、89.3％( 564/632)和88.1％(560/636)；不满意率分别是5.6％( 35/628)、5.2％ (33/632)和6.6％ (42/636).结论 选择稳健Z比分数作为能力验证的评价指标是合理的,避免了离群值对评价结果的影响。

近年来,临床检验的分析前质量控制逐渐受到重视.而分析前因素是临床检验TTP的重要质量环节之一.国内对TTP的研究多关注导致错误结果的影响因素[1-4 ]或试图采用六西格玛质量管理工具去减少分析前误差[5],对于使用QIs和QSs去监控和评价TTP未见相关报道.目前,国际上研究TTP多集中于QIs和QSs这一领域[6-8].最近,IFCC的“实验室误差与患者安全工作组”项目(WGLEPS),发展并提出了最初的25个QIs和QSs的建议专门用于临床检验的TTP监控和评价[6-7],以提高临床检验结果的质量。

为繁荣我国检验医学事业，促进检验医学领域的学术交流，依据中华医学会杂志社关于实施杂志会员制度的相关规定，中华检验医学杂志2012年继续实行VIP读者会员制。

近年来许多报道国内优秀科研成果的论文首先投向国外，特别是被美国科学引文索引（SCI）收录的高水平国际期刊上，以有助于促进国际间的学术交流，让世界更好地了解中国。为了将这些高质量、有影响的论文介绍给国内的广大读者，中华检验医学杂志开设了“国外发表的SCI论文介绍”栏目，目的是使国内更多的读者共享我国的科研成果和相关学科的进展。

由中华医学会检验分会主办的第七次全国中青年检验医学学术会议，拟定于2012年4月18至20日在江苏省南京市召开。全国中青年检验医学学术会议是我国检验医学专业的一项大型学术活动，近年来，随着检验医学的迅猛发展，我国中青年检验工作者开拓进取，成绩斐然。

由中华医学会中华检验医学杂志编辑委员会、中华医学会检验分会、中国医院管理协会临床检验管理专业委员会共同主办的第四届中国POCT高峰论坛，定于2012年8月在广州举行。本次论坛的目的是交流POCT技术在临床诊疗过程中的价值与意义，共同探讨在未来医疗模式下POCT发展的机遇与挑战。

由中华医学会中华检验医学杂志编辑委员会和国家食品药品监督管理局细菌耐药性监测中心主办，中华医学会检验分会微生物学组和北京大学第一医院临床药理研究所共同协办的“第五届全国细菌耐药监测与临床·耐药菌感染治疗专题学术会议”，拟定于2012年5月中旬在安徽合肥市（暂定）召开。

由中华医学会检验分会、中华检验医学杂志编辑委员会、卫生部艾滋病临床专家工作组、中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心参比实验室共同举办的“第五届中国病毒性肝炎和艾滋病实验室诊断与临床高峰论坛”定于2012年4月11～13日召开。

说明：（1）本索引主要根据美国国立医学图书馆编辑的最新版《Index Medicus》中的医学主题词表（MeSH）选择主题词。（2）一般每篇文章（除“消息”外）设立2～3个主题词。（3）本索引按汉字的汉语拼音字母顺序排列，冠有阿拉伯数字或西文字母的主题词和文题，也分别按其后汉字的拼音排序。（4）文题、作者后括号内的数字为期号。