2008年 · 第37卷第10期

当前病理学工作者们正不断将现代科学研究的新进展和新技术应用于病理学领域,以探寻疾病发生的分子机制,建立诊断方法和技术,为防治疾病提供科学的理论基础与实用工具.解剖学、组织学以及免疫学等并行学科的发展也促进了病理学的发展.在现代细胞和分子生物学高速发展的今天,以基因为研究对象,以规模化生物技术为支撑的生命科学新学科——基因组学也必将丰富病理学的研究内容和手段,为病理学带来革命性的改变.基因组学对病理学发展的贡献主要体现在两个基本方向:首先是人类基因组学,它研究人类自身的基因与基因多样性;其次是病原生物(包括病原生物和它们的载体生物)的基因组学和病原生物的群体遗传学。

胶质瘤足中枢神经系统最常见、也是最难根治的原发性肿瘤.国内外资料表明,原发性胶质瘤发生率为(7.8～12.5)/10万人,脑胶质瘤约占颅内肿瘤的35.3%～61.0%.由于胶质瘤具有侵袭性生长、不能全切、术后易复发、复发后恶性程度增高等生物学特性,严重地威胁着患者的生命健康。

目的 检测非小细胞肺癌(NSCLC)组织中表皮生长因子受体(EGFR)基因突变和拷贝数,明确中国NSCLC人群中EGFR基因状态.方法 应用显微切割技术和蝎形探针扩增阻滞突变系统(Scorpions ARMS)联合检测290例石蜡包埋、甲醛固定的NSCLC组织中其EGFR基因突变状态,并应用荧光原位杂交(FISH)技术检测其中209例EGFR基因拷贝数的情况,分析EGFR基因突变和EGFR摹因拷贝数二者之间的关系,探讨EGFR基因状态与肺癌临床病理特点的相关性.结果 NSCLC组织EGFR突变率为41.7%(121/290),其中腺癌为48.4%,大细胞癌为16.7%,鳞癌为0.EGFR基因突变以第19、21外显子突变为主(92/121),其中6例存在两种类型的突变.EGFR基因FISH阳性率为51.2%(107/209),包括29例扩增,78例高多体性.其中腺癌FISH阳性率为52.1%,大细胞癌为75.0%,鳞癌为11.1%.检测结果显示NSCLC组织EGFR基因突变与EGFR基因高拷贝数主要存在于腺癌,EGFR基因突变与EGFR基因拷贝数之间有显著的相关性.结论 中国人NSCLC组织具有较高的EGFR基因突变率和FISH阳性率;联合检测EGFR基因拷贝数和基因突变可能更有利于靶向药物的筛选。

目的 建立SYT-SSX融合基因的荧光原位杂交(FISH)检测和评估方法,并探讨其对于滑膜肉瘤的诊断价值.方法 将62例确诊滑膜肉瘤、60例非滑膜肉瘤与133例可疑滑膜肉瘤做成组织芯片,应用FISH技术检测这些病例中的SYT-SSX融合基因,并将FISH结果与以前研究中的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)结果比较.结果 96.9%(247/255)的病例能够进行FISH分析.FISH对确诊滑膜肉瘤诊断的灵敏度为96.7%(58/60),排除非滑膜肉瘤诊断的特异度为100%(59/59).另外,78.1%(100/128)的可疑滑膜肉瘤经FISH检测为SYT-SSX阳性.在可疑滑膜肉瘤中,FISH与RT-PCR结果的一致率为83.6%(102/122),79.7%(106/133)经RT-PCR或FISH证实为SYT-SSX阳性.结论 应用FISH技术检测SYT-SSX融合基因具有高度的灵敏度和特异度.FISH与RT-PCR结果可以互相证实、互相补充,有助于滑膜肉瘤疑难病例的诊断。

目的 探讨骨化性肌炎的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断的意义.方法 通过收集骨化性肌炎15例的临床及影像学资料,光镜观察及免疫组织化学EnVision法(波形蛋白、S-100蛋白、结蛋白、平滑肌肌动蛋白、骨连接素、Ki-67染色),分析其临床、影像学、病理学特征及免疫表型.结果 15例骨化性肌炎中发病年龄12～46岁,平均年龄31岁,男11例,女4例.发生在长骨皮质外,骨膜下及深部软组织占13例,1例位于髂部,1例位于手掌;15例中8例有明确外伤史,2例有手术史,I例不清楚,4例否认有外伤史.组织学上相应的10例穿刺及8例大体标本分带倾向不明显,均为较活跃的肿瘤样成骨表现,另5例穿刺标本及7例手术大体标本都可观察到较明确的骨化性肌炎分带状结构.术后随诊1年,2例复发.免疫组织化学染色波形蛋白、结蛋白、肌动蛋白及骨连接素均呈不同程度阳性;S-100蛋白2例阳件;Ki-67增殖指数5例为10%,其余为1%.结论 骨化性肌炎同骨表面骨肉瘤鉴别诊断在于临床、影像及病理三者结合。

目的 总结并分析胰腺导管内乳头状黏液肿瘤(IPMN)临床病理特征.方法 收集19例IPMN的临床及影像学资料,通过光镜观察及免疫组织化学EnVision法[抗体包括p53、c-erbB-2、Ki-67、p16、Fascin]分析其临床、病理学特征及免疫表型.结果 19例IPMN患者平均年龄59岁,中位年龄61岁,男女比例12:7,6例有长期吸烟史,1例合并结肠腺癌,临床表现为上腹部不适、腹痛、食欲减退、体重下降、脂肪泻等.腹部CT及B超检查多数病例表现为囊性占位性病变,囊内有分隔,囊壁有乳头状回声,个别病例表现为单发或多发实性占位,其中3例行十二指肠镜逆行胰管造影(ERCP)检查见十二指肠乳头处有胶冻样黏液分泌物.18例行肿物及部分胰腺切除术,1例行胰管内肿瘤摘除术,11例主要位于胰头,病理诊断1例为胰腺导管内乳头状黏液腺瘤,3例为交界性IPMN,15例为胰腺导管内乳头状黏液腺癌,其中12例伴有浸润,浸润癌中10例为乳头型和(或)管型,2例为黏液型合并管型,2例为原位癌.大体检杳17例为单发,2例为多发病灶,6例为实性占位,13例表现为囊性或囊实性占位,囊性区部分内肇光滑剑有乳头附着,部分囊腔内充满乳头状组织;镜下检查8例为肠型,7例为胰胆管上皮型,3例为胃型,1例为嗜酸细胞型;导管周围纤维组织均明显增生,16例周围胰腺组织伴有慢性胰腺炎,2例肠壁浸润,淋巴结均未发现转移;术后13例分别随访4～48个月,平均随访20个月,1例术后24个月死于其他原因,1例可疑肝转移,1例姑息手术后胰头占位,10例无复发.免疫组织化学6例p53阳性,5例p16阳性,8例Fascin阳性,c-erbB-2均阴性,Ki-67指数1%～80%,平均38%.结论 IPMN为一组少见的胰腺肿瘤,肿瘤主要位于胰管内,伴有胰管扩张,肿瘤细胞为黏液性,有乳头形成,乳头状黏液腺癌多见,约2/3病例伴有浸润.Ki-67指数超过15%应考虑恶性.肿瘤预后较胰腺导管癌明显要好,治疗主要是局部切除及相应化疗,应长期随访.影像学、ERCP及胰液细胞学检查有助于疾病的早期发现和诊断。

目的 探讨指状树突细胞肉瘤/肿瘤(IDCS)的病理特征、诊断及鉴别诊断.方法 分析3例IDCS的临床表现,对标本进行病理形态和免疫组织化学(EnVision法)染色观察.结果 大体检查肿瘤呈灰白、灰黄色,质实.1例发生于左肺,1例原发于脾脏伴全身淋巴结累及,1例发生于淋巴结.光镜下肿瘤组织呈边界不甚清楚的巢片状,部分呈束状、旋涡状排列,周边较多淋巴细胞、浆细胞浸润.肿瘤细胞呈卵圆形或梭形,胞质透亮或轻度嗜酸性,核卵圆形,呈空泡状,可见不明显的小核仁,部分见有核沟.免疫组织化学肿瘤细胞表达S-100蛋白.结论 IDCS是一种罕见的组织细胞和树突细胞恶性肿瘤,有一定的病理学特征.应与滤泡树突细胞肉瘤、炎性假瘤、朗格汉斯细胞组织细胞增生症、恶性黑色素瘤、未分化癌及间变性大细胞淋巴瘤等鉴别.免疫组织化学S-100蛋白等标记对鉴别诊断有帮助。

目的 探讨通过条件培养液(CM)和高浓度血清即20%的胎牛血清(FBS)联合作用下,myocardin在骨髓来源的间充质干细胞向平滑肌细胞(SMC)定向分化过程中的表达特点.方法 采用伞骨髓贴壁法分离骨髓问充质干细胞,CM联合20%FBS诱导骨髓间充质干细胞,同时设立持续10%FBS、单20%FBS及单CM诱导下的骨髓间充质十细胞对照组和SMC阳性对照组,分别于诱导前及诱导3、7、10和14 d时观察细胞形态的变化,并在相应的时间点用免疫荧光法、逆转录聚合酶链反应法、Western blot半定量分析法榆测myocardin以及SMC表面各种标志基因的表达变化,用透射电镜检测诱导后细胞内肌丝存在以此来证实诱导分化成功.结果 光镜观察显示诱导前至诱导3、7、10和14 d时,骨髓问允质十细胞南纺锤形、多角形、扁平形和小圆形等多种形态逐渐转变为单一的长梭形,在诱导21 d后显示出明显的峰-谷特征.免疫荧光结果显示表达myocardin的阳性细胞数量逐渐增多,表达部位由胞质逐渐移向胞核,而表达平滑肌标志基因Ot一平滑肌肌动蛋白(Ot.SMA)、平滑肌肌动蛋白重链(SM-MHC)的细胞也随之增加,同时联合诱导后3、7、lO和14 d表达myocardin和平滑肌标志基因(α-SMA或SM-MHC)的双阳性细胞数最逐渐增加.RT-PCR结果显示myocardin的mRNA表达逐渐上调,在诱导7 d达到高峰后表达基本稳定(P<0.05);平滑肌标志基因α-SMA及SM22α的表达随着myocardin表达上调而增加(r=O.81,P<0.05),诱导10 d后表达基本稳定.Western blot结果显示myocardin蛋白和平滑肌标志基因α-SMA蛋白表达量在诱导后明显增加(r=0.84,P<0.05).透射电镜结果显示诱导21 d后的分化细胞中有肌丝的存在.在不同时间点各组之间的差异有统计学意义(P<0.05).结论 CM联合高浓度的血清可有效诱导骨髓间充质干细胞向SMC分化,myocardin在此分化过程中起了重要作用.骨髓来源的间充质干细胞可以在诱导下定向分化成为SMC。

目的 探讨血管紧张素Ⅱl型受体(ATlR)在心肌纤维化中的表达及其意义.方法 注射盐酸异丙肾上腺素(Is0)15 mg/kg复制大鼠缺血性心肌纤维化模型.MD-100自动生化分析仪检测大鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)的含量,通过Masson染色评价心脏的形态及结构变化;同时采用免疫纽织化学染色分析心肌ATIR蛋白表达及I型和Ⅲ型胶原的表达,逆转录聚合酶链反应分析ATlR mRNA表达.结果 与正常对照组比较,注射Iso后血清LDH、CK及CK-MB在4h达高峰(X2=16.90,P<0.05),AST在6 h达高峰(x2=16.90,P<0.05).ATlR mRNA结果显示,注射Iso后2～12 h,ATlR mRNA表达即有所增加,但无统计学意义(P>0.05);注射Iso后24 h,ATIR mRNA表达较正常对照组明显增加;自48 h后mRNA表达逐渐下降,至3周后降至正常.ATlR蛋白表达随纤维化病变程度的加重而增加.结论 ATIR mRNA及ATlR的蛋白表达水平在缺血缺氧性坏死心肌明显增加,ATlR的表达与纤维化程度密切相关,提示ATlR可能参与了心肌纤维化的过程。

目的 探讨颈部淋巴结针吸细胞学诊断的准确率及误诊原因.方法 分析580例颈部淋巴结针吸细胞学检查结果.其中161例在原部位取活检,分析针吸细胞学与组织学诊断符合率及误诊原因.结果 580例中淋巴结反应性增生226例,特异性炎202例,恶性淋巴瘤45例,转移癌107例.161例针吸细胞学与组织学诊断符合率为94.4%.107例转移癌中96例经临床及病理检查确定了原发灶.细胞学与组织学对照结果显示,细胞学检查有9例误诊,针吸细胞学误诊主要原因是吸取组织量少,对病变了解不全面;误诊病例结合病史及临床表现均有考虑到其他疾病的可能性.结论 颈部淋巴结针吸细胞学诊断准确率较高,但对可疑病变及原发肿瘤的分型,针吸细胞学仅可给予提示件初步诊断,需经组织学活检,必要时免疫组织化学诊断分型。

环氧合酶2(COX2)和β连接素与多种肿瘤发生有关,但是否与肾母细胞瘤有关则报道甚少.我们通过免疫组织化学的方法观察两者在肾母细胞瘤中的表达情况,探讨其在该肿瘤中的意义。

肿瘤的发生、发展不仅涉及肿瘤细胞本身,而且还与肿瘤细胞周围的微环境有密切关系.虽然肿瘤间质对肿瘤发生发展的影响已得到公认,但研究的重点始终聚焦在肿瘤细胞本身,对肿瘤微环境尚少实质性关注。

黏着斑激酶(FAK)最初是在1992年被发现的,因其定位于整合素簇集的部位即黏着斑,故命名为之[1].FAK属非受体酪氨酸激酶家族中的FAK/PTK2亚家族,该亚家族仅有两个成员:FAK(PTK2)和PYK2(PTK2B).FAK在哺乳动物以及低等真核生物如果蝇、斑马鱼等的大多数组织及细胞类型中都有表达,且其序列在进化上具有保守性性[2],而PYK2表达具有一定的组织特异性。

近年提出的"肾上皮和间质肿瘤(renal epithelial andstromal tumor,REST)"包括了囊性肾瘤(cystic nephroma)以及肾混合性上皮和间质肿瘤(mixed epithelial and stromatlllnor,MEST).囊性肾瘤和MEST之间在性别优势、年龄分布、上皮与间质成分的形态学和免疫组织化学表现方面均相似,但又在上述两种肿瘤的各自范畴内有所变异。

神经纤维髓鞘和轴索的染色方法很多,但一般均为单一染色,在实验动物神经组织的某些毒性病理诊断及人体大脑组织变性性疾病的诊断和研究中常常需要同时显示神经纤维髓鞘和轴索,但常规的HE染色不能很好地显示神经纤维髓鞘和轴索的组织形态,这就迫切要求建立一种新的能够同时显示神经纤维髓鞘和轴索的染色方法。

患者女,66岁.因反复咯血、咳嗽40余年,再发10 d于2005年11月7日入院.胸部MRI示左肺下叶大部分肺段见大小不一囊状影,囊壁厚,囊内未见明显液平面(图1);右肺下叶、中叶部分肺段见多个囊状影,壁薄,未见液平.考虑原发性囊状支气管扩张,不除外肺囊肿.术中见左肺下叶稍粘连,肺裂发育不好,泛红,含气不全。

患者男,54岁.主因右下肢水肿,活动受限于2006年7月8日入院.曾在当地某医院诊断有下肢血栓,治疗后未见好转而来本院.体检:右下肢指凹性水肿,浅静脉曲张,皮肤暗紫色,疼痛,活动时加重。

患者男,51岁,发现颈部肿块1年,近期明显增大于2007年11月28日入院.体检:右颈部可触及2cm×2cm肿块,随吞咽上下活动.临床诊断:结节性甲状腺肿.行甲状腺次全切除术,术中冷冻切片检查发现双侧甲状腺多发性结节,其中2个结节较硬,灰白色,界限均清楚.冷冻切片诊镲断:双侧结节性甲状腺肿伴乳头状癌.进而行淋巴结清扫术,术后伤口愈合良好,现进一步随访中。

患者女,76岁.因发现左腹股沟肿物2个月,于2007年9月来本院就诊.门诊B超检查:左腹股沟多个肿大淋巴结,不融合,考虑为淋巴瘤.门诊手术取左腹股沟淋巴结1枚。

患者女,69岁.3个月前无明显诱因出现下腹部腹胀、腹痛,无恶心、呕吐,无黑便,服用消炎药可缓解.近1个月症状逐渐加重,于2006年2月23日入本院诊治。