2014年 · 第43卷第08期

“双重打击”淋巴瘤(double-hit lymphoma,DHL)是侵袭性B细胞淋巴瘤的一个基因亚型.侵袭性B细胞淋巴瘤主要包括伯基特淋巴瘤(BL)、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)以及具有介于DLBCL和BL特点的无法分类的B细胞淋巴瘤(B-UNC/DLBCL/ BL).WHO(2008)造血与淋巴组织肿瘤分类将DHL放在B-UNC/DLBCL/BL的遗传学章节进行了介绍,因为DHL的发生率随年龄增长而增长,约见于30％的老年B-UNC/DLBCL/BL[1].近年来DHL的研究逐渐增多,也有一些新的进展,有必要对其进行再认识。

化学试剂是病理科日常工作中不可缺少的物品,随着病理新技术的应用和工作量的日趋增长,化学试剂的品种会越来越多,且数量也越来越大.所以如何安全有效地使用和管理已成为病理科不可忽视的大问题,我们主要根据国家的法律法规结合病理科的规章制度和工作流程[1-5],对这一内容进行详细探讨。

目的 统计中山大学肿瘤防治中心4年间诊断的所有成熟T和自然杀伤(NK)细胞淋巴瘤病例,分析其不同类型的构成比,研究各类型成熟T和NK细胞淋巴瘤CD30表达情况,为抗CD30抗体药物在成熟T和NK细胞淋巴瘤的应用提供参考数据.方法 选取2009年9月1日至2013年8月31日4年间中山大学肿瘤防治中心诊断的所有成熟T和NK细胞淋巴瘤,统计分析各类型淋巴瘤的发病情况.抽调其中存档的164例成熟T和NK细胞淋巴瘤患者的病理蜡块进行免疫组织化学EnVision法检测其CD30的表达.结果 4年间共诊断成熟T和NK细胞淋巴瘤625例.最常见为结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤(ENKTL),共319例(51.0％),其余常见病例分别为血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(AITL) 119例(19.0％)、非特指型外周T细胞淋巴瘤(PTCL-NOS)81例(13.0％)、间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)[包括系统性ALCL 48例(7.7％)及原发皮肤ALCL 11例(1.8％)].除ALCL外,在本院存档的164例病例中,CD30阳性率最高的是NK/T细胞淋巴瘤,阳性率为62.1％(41/66).16例PTCL-NOS仅1例阳性,其余28例AITL及其他少见类型的淋巴瘤无1例阳性.结论 中山大学肿瘤防治中心收集的成熟T和NK细胞淋巴瘤不同类型的发病情况各异.CD30在多种成熟T和NK细胞淋巴瘤中均有不同程度表达,除间变性大细胞淋巴瘤,NK/T细胞淋巴瘤的阳性表达率最高,有望成为抗CD30抗体药物治疗的候选病种。

目的 探讨骨原发间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)的临床病理学特征、诊断、鉴别诊断及预后.方法 回顾性分析12例确诊为骨原发性ALCL患者的临床病理资料,并进行免疫组织化学EnVision法染色和EB病毒原位杂交,对其临床病理学特征及预后情况进行分析.结果 12例患者男性7例,女性5例.发病年龄9～64岁,中位年龄17.5岁.就诊时患者均表现为骨痛,影像学检查为溶骨性骨破坏,包括8例单发和4例多发性骨破坏.发病部位依次为:脊柱7例、髂骨5例、骶骨2例,肱骨和锁骨各1例.组织学以普通型最为常见(8例),另有淋巴组织细胞型和小细胞型各2例.蛋白水平检测显示全部病例肿瘤细胞一致性强表达CD30,其中7例间变性淋巴瘤激酶(ALK)阳性,5例ALK阴性.10例获得随访,随访时间2～47个月,7例临床缓解,3例死亡.7例ALK阳性患者中5例获得随访,生存状况均良好;5例ALK阴性患者中3例死亡.结论 骨原发ALCL以儿童和青年男性多见,中轴骨为好发部位.ALK蛋白表达可能是提示骨原发ALCL预后良好的指标。

目的 探讨B细胞淋巴瘤中LITAF基因启动子区CpG岛异常甲基化情况,研究去甲基化药物对人B细胞淋巴瘤细胞系Raji、Pfeiffer和Daudi细胞中LITAF基因的转录调控作用,寻找肿瘤治疗新靶点.方法 收集存档石蜡包埋组织标本105例[弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL) 54例,小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)15例,黏膜相关淋巴组织结外边缘区淋巴瘤(MALT)8例,滤泡性淋巴瘤(FL)6例,其他22例],5例良性反应性增生淋巴组织作为正常对照.甲基化特异性PCR(MSP)检测LITAF基因启动子区甲基化状态.运用MSP、Western blot、免疫组织化学方法检测5-氮杂脱氧胞苷处理前后Raji、Pfeiffer和Daudi细胞系的甲基化状态及蛋白表达情况.四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测经去甲基化药物处理后细胞生长抑制情况.结果 B细胞淋巴瘤中89.5％(94/105)的病例存在LITAF基因启动子区高甲基化,其中3.8％ (4/105)的病例发生完全高甲基化,22.9％(24/105)的病例以部分非甲基化为主,对照组5例良性淋巴结增生标本中LITAF基因启动子区均未检测到高甲基化改变.经去甲基化处理后,Raji、Daudi、Pfeiffer细胞LITAF基因甲基化程度明显受抑制,基因表达得以恢复和增加.结论 在B细胞淋巴瘤患者中普遍存在LITAF基因启动子区CpG岛高甲基化,由其所致的LITAF基因表达沉默或减少可能是B细胞淋巴瘤发生的一个重要因素,LITAF基因的高甲基化可望作为一个良好的候选分子诊断标记及可能的治疗靶点。

目的 分析T淋巴母细胞淋巴瘤合并朗格汉斯细胞组织细胞增生症(T-LBL合并LCH)的病理组织学、免疫表型和分子遗传学特征,探讨其诊断、鉴别诊断及预后相关因素.方法 收集3例T-LBL合并LCH的临床病理资料,采用HE、免疫组织化学(EnVision法)进行染色并分析,聚合酶链反应(PCR)技术检测肿瘤T细胞受体(TCR)基因重排情况.结果 3例患者均为男性,平均年龄61.7岁.镜下淋巴滤泡套区周围及副皮质区常见中等大小形态相对单一的T-LBL的肿瘤细胞,细胞胞质少,染色质细,偶见核仁,可见较多核分裂象及凋亡小体;部分区围绕套区呈单行列兵样排列.淋巴结被膜下及副皮质区常见成巢胞质丰富淡染、有明显核沟的朗格汉斯细胞增生;肿瘤或以两种肿瘤细胞相互穿插、或以两种肿瘤成分完全分离的方式分布,但3例均可见两种肿瘤细胞混合存在的区域;免疫组织化学示组织细胞表达:CD1a、S-100蛋白、CD68;淋巴母细胞表达CD3、CD7、末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)和CD34.PCR技术检测到1例有TCR-γ基因重排.2例骨髓未累及,1例骨髓呈双表型急性白血病改变.3例患者均带瘤存活.结论 T-LBL合并LCH具有典型形态学、免疫表型和分子遗传学改变,应注意与皮病性淋巴结炎引起的郎格汉斯细胞组织细胞增生相鉴别,同时当临床出现LCH仅累及淋巴结时,需广泛取材,辅以免疫组织化学染色,排除有无合并淋巴瘤可能,尤其是误将高侵袭性淋巴瘤漏诊而延误患者治疗.T-LBL合并LCH两种肿瘤具有一定克隆相关性。

目的 探讨乳腺基质分泌型化生性癌(MPC)的临床病理特征、免疫表型和预后.方法 回顾性分析2002至2012年间16例乳腺MPC的临床病理特点和免疫表型.随访获取MPC患者的预后信息,并与同期非特殊型浸润性乳腺癌进行配对,比较两组肿瘤的无复发生存和总体生存.结果 患者均为女性,年龄29 ～ 69岁(平均48岁).肿瘤大小平均为4 cm.多数肿瘤界限清楚,呈结节状、膨胀性生长.镜下浸润性癌直接向软骨/软骨黏液样基质过渡,呈现外周型和弥漫型两种分布模式.基质分泌癌成分占整个肿瘤比例的10％ ～ 80％.MPC具有三阴型免疫表型(雌激素受体、孕激素受体和HER2均阴性)并较高水平表达S-100蛋白和基底型细胞角蛋白.软骨/软骨黏液样基质呈阿辛蓝染色阳性.MPC的无局部复发生存(P=0.010)、无远处转移生存(P =0.011)和总体生存(P=0.017)均低于配对的非特殊型浸润性癌.结论 乳腺MPC具有独特的形态学特征和免疫表型,属于侵袭性强的化生性癌亚型。

目的 研究结节性筋膜炎的USP6基因重排发生率,评价其临床应用价值.方法 应用间期荧光原位杂交(FISH)方法检测中性甲醛固定、石蜡包埋的29例结节性筋膜炎的USP6基因重排情况,并应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测其中15例的MYH9-USP6转录情况.结果 FISH结果显示29例结节性筋膜炎中的24例(83％)携带USP6基因重排,应用RT-PCR检测其中的15例,发现8例(8/15)携带MYH9-USP6融合基因,这15例中有11例FISH证实USP6基因重排阳性、3例阴性和1例信号缺失,7例USP6基因重排阳性和1例FISH显示信号缺失的病例RT-PCR证实携带MYH9-USP6融合基因.结论 USP6基因重排是结节性筋膜炎的一种常见遗传学改变,对于临床病理上辅助诊断结节性筋膜炎是一种有价值的工具。

目的 报告4例罕见的骨原发神经鞘瘤,探讨其诊断标准以及与软组织神经鞘瘤在形态学上的差异.方法 复查2002至2013年本院诊断的所有骨相关性神经源性肿瘤,从中筛选出4例由长骨和扁骨髓内发生的骨原发神经鞘瘤,收集其临床及影像学资料,通过光镜观察及免疫组织化学EnVision法分析其临床、影像学、病理学特征、免疫表型及病理鉴别诊断.结果 4例均具有神经鞘瘤的典型形态学改变和免疫表型,与软组织神经鞘瘤相比,骨原发神经鞘瘤在形态学上有以下特征:影像学呈良性表现,低倍镜下肿瘤缺乏包膜,局部浸润骨组织或破坏骨皮质,偶可累及骨旁软组织,肿瘤大多为实性,较少囊性变,常以Antoni A区结构为主,部分区域富于细胞.结论 骨原发神经鞘瘤非常罕见,发生于长骨和扁骨髓内,由于其病理形态和生长方式与其他部位神经鞘瘤有一定的差异,应注意避免将其误诊为骨原发低度恶性梭形细胞肉瘤而导致不必要的过度治疗。

目的 探讨儿童神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)ALK蛋白表达与ALK基因遗传学及表观遗传学改变的相关性,并分析NB的ALK蛋白表达异常及ALK基因异常的临床病理学意义.方法 培养三个NB细胞株,其中两株为ALK阳性表达(SH-SY5Y和SK-N-SH),一株为ALK阴性表达(SK-N-AS),并收集43例NB石蜡包埋组织标本及相应临床资料;运用免疫组织化学EnVision法检测NB细胞株及石蜡包埋组织标本的ALK蛋白表达;运用荧光原位杂交(FISH)检测ALK基因的拷贝数;运用PCR技术、Sanger测序技术检测ALK基因点突变;运用重亚硫酸盐测序技术(BSP)检测ALK基因启动子区CpG岛的甲基化状态.结果 SH-SY5Y和SK-N-SH细胞株的ALK蛋白表达于胞质,而SK-N-AS无ALK蛋白表达;43例神经母细胞瘤组织中,ALK蛋白阳性者26例(60.5％,26/43),阴性者17例(39.5％,17/43),ALK蛋白表达与患者的生存期相关,ALK蛋白阳性表达者,生存期较短(P =0.020),但ALK蛋白表达与NB的分化状态(P=0.503)、发病部位(P=1.000)及年龄(P =0.063)无相关性.43例NB中,ALK基因扩增者2例(4.6％,2/43),ALK基因获得者30例(69.7％,30/43),余者ALK基因正常(25.6％,11/43),ALK基因多拷贝(包括扩增和获得)与ALK蛋白阳性表达有明显相关性(P =0.020),ALK基因多拷贝倾向ALK蛋白的阳性表达;ALK基因多拷贝与NB的分化状态(P=1.000)、发病部位(P =0.775)及年龄(P =0.328)无相关性.三个NB细胞株中均未发现ALK基因的点突变,43例NB组织中,仅发现1例(2.3％,1/43)存在ALK基因的点突变[第23号外显子同义突变A1200A(G4552C)],其ALK蛋白呈阴性表达,在诊断后2个月死亡;BSP检测显示,三株细胞ALK基因启动子区CpG岛均未甲基化,6例NB患者(其中3例ALK阳性,3例ALK阴性)ALK基因启动子区CpG岛也均未甲基化.结论 大部分NB组织中ALK蛋白表达阳性,ALK蛋白阳性表达者提示不良预后.ALK蛋白阳性表达与ALK基因多拷贝相关,但与ALK基因启动子区甲基化无明显相关性.ALK基因多拷贝是NB中比较常见的遗传学改变.ALK基因点突变率很低,有可能提示不良预后。

目的 探讨Wnt通路中Sox17及β连环蛋白在少突胶质细胞起源肿瘤的表达及与临床病理特征的关系.方法 选择新疆医科大学第一附属医院2003至2013年间,经病理组织学诊断为不同级别的少突胶质细胞起源肿瘤合计100例,良性病变周围组织标本10例为对照、采用免疫组织化学EnVision法对10例对照和100例少突胶质细胞起源肿瘤Sox17及β连环素进行半定量分析,Kaplan-Meien和Cox回归分析Sox17、β连环蛋白与少突胶质细胞起源肿瘤临床病理特征及预后关系.结果 Sox17在正常脑组织中均有表达(10/10),少突胶质细胞瘤(WHOⅡ级)和间变性少突胶质细胞瘤(WHOⅢ级)中阳性率分别为82％ (41/50)、62％(31/50),三者间比较差异有统计学意义(P＜0.05);β连环蛋白阳性率分别为2/10、22％(11/50)、52％ (26/50),差异有统计学意义(P＜0.01);单因素分析Sox17蛋白(P=0.000)、β连环蛋白(P =0.033)、部位(P=0.001)、化疗(P=0.000)与少突胶质细胞瘤患者预后相关.结论 Sox17蛋白表达、β连环蛋白失表达者预后较好.联合检测少突胶质细胞起源肿瘤Sox17及β连环蛋白表达,有助于预后判断。

目的 观察NK4对裸鼠人Raji淋巴瘤移植瘤增殖的抑制作用,探讨其分子机制.方法 构建肝细胞生长因子(HGF)基因转染的裸鼠人Raji淋巴瘤移植瘤模型.成瘤后经尾静脉连续4周注射NK4蛋白(每只50 μg/d),动态监测裸鼠体质量和瘤体生长.8周后取瘤组织,采用即时荧光定量PCR检测移植瘤HGF mRNA、c-Met mRNA的表达,分别采用末端转移酶标记技术(TUNEL法)和免疫组织化学检测移植瘤组织的凋亡系数(AI)和微血管密度(MVD),进行综合分析.结果 成功构建裸鼠移植瘤模型.各组裸鼠体质量均下降,以NK4蛋白组最大,但组间差异无统计学意义(P＞0.05).HGF基因转染组瘤体积大于对照组(P＜0.01),对照组间差异无统计学意义(P＞0.05),注射NK4蛋白后瘤体积均明显减小(P＜0.01).注射NK4蛋白后,HGF基因转染组HGFmRNA、c-Met mRNA表达增强(P＜0.01).HGF基因转染组AI(33.5％±12.3％)显著低于对照组(89.1％±22.3％,81.9％±27.0％,P ＜0.05),但NK4蛋白注射后增加明显(119.1％±18.9％,P＜0.01).HGF基因转染组MVD(28.5 ±2.0)较对照组(12.2±1.4,13.8±1.3,P＜0.01)为高,但NK4蛋白注射后MVD降低(15.5±2.5,P＜0.01).结论 NK4可显著抑制HGF基因转染的裸鼠人Raji淋巴瘤移植瘤的生长,其可能经竞争性阻断HGF/Met信号转导途径而促进肿瘤细胞凋亡并抑制瘤内血管新生而发挥其效应。

microRNA (miRNA)是一类内源性非编码小RNA,在肿瘤的发生发展过程中起着癌基因或抑癌基因的作用[1],miRNA表达失调与食管癌的发生、发展密切相关.人类基因组编码了超过1 000个miRNA[2],我们应用即时荧光定量RT-PCR法对食管鳞癌组织中的microRNA-939(miR-939)进行检测,分析其与食管鳞癌病理特征及预后的关系。

发生于肝脏的血管周上皮细胞肿瘤(PEComa)罕见,仅占PEComa发病率的8％[1].PEComa是由成熟脂肪、血管及特异性表达HMB45的平滑肌样细胞构成的间叶性肿瘤,构成比例的不同可引起影像学及病理表现形式的多样化,从而造成诊断的困难.一、材料与方法1.病例资料:收集新疆医科大学第一附属医院2008年1月至2014年4月间经病理确诊的原发肝脏PEComa 10例并进行电话随访。

除了组织标本的取材因素,取材标本的外形构建常常是影响实验结果或病理诊断的重要因素[1-2].良好的组织标本塑形,不但能确保组织学染色效果和标本信息的准确获取,而且能节省研究人员的体力和时间,提高效率,减少标本损耗.但是,许多组织标本,如富含致密结缔组织及水分的组织器官,在早期的化学固定和机器脱水处理之后,质地常常变得硬、脆,甚至卷曲、皱缩,此时进行塑形处理则标本容易受损,甚至碎裂[3-4];即使在随后的石蜡包埋过程中采用热石蜡浸泡,塑形效果仍不理想,且器械的钝性塑形过程常不同程度地破坏标本的组织学结构.因此,在实践中探索一种简单易行的组织标本塑形方法显得尤为重要。

患者男,74岁.近3个月无明显诱因出现咽部疼痛不适,近1个月加重,无发热,于2013年11月来新疆医科大学附属肿瘤医院就诊.外院喉镜示:鼻咽部肿物,取活检,外院病理诊断为NK/T细胞淋巴瘤.体检:双侧腋窝及腹股沟多发淋巴结肿大.血常规:淋巴细胞0.29,乳酸脱氢酶221.7 U/L既往5年前曾患前列腺癌并化疗一次。

例1女,17岁,因右下腹痛就诊.体检:右下腹按压痛和反跳痛,临床诊断为急性化脓性阑尾炎,行单纯阑尾切除术.术中见阑尾粗大,表面有脓液.术后患者恢复良好,随访3年2个月,无复发.例2男,27岁,因转移性右下腹痛急诊手术,临床拟诊为急性阑尾炎.术中见阑尾表面暗红,行单纯阑尾切除术,随访1个月,无复发。

“种子(肿瘤细胞)与土壤(微环境)”学说形象地诠释了肿瘤的生长、侵袭和转移的发生机制,以及肿瘤细胞对微环境的依存性和微环境对肿瘤细胞的作用,同时也揭示了二者之间关系的复杂性.与上皮细胞来源的癌相比,血液肿瘤细胞在特殊的组织微环境中发生和分化,如骨髓和次级淋巴器官,由于淋巴细胞分化和所处环境错综复杂,淋巴瘤的发生和演进机制可能更为深奥。

EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)又称人类疱疹病毒4,是一种线性双链DNA病毒,在人群中广泛感染,与淋巴瘤、鼻咽癌、胃癌等多种恶性肿瘤的发生发展密切相关.微小RNA(microRNA,miRNA)是一类存在于多种真核生物和DNA病毒中的非编码RNA,长度为19 ～ 25 nt,以碱基互补的方式和靶标mRNA的3'端非翻译区(3'UTR)结合,导致靶标mRNA的翻译抑制或降解[1-2].EBV是首个被发现可以编码miRNA的病毒.2013年6月 miRbase数据库(www.mirbase.org)公布的数据显示,至今已经发现EBV编码的25个前体miRNA和44个成熟miRNA。

有关照片图的要求：（1）提供的照片必须是原始图像，要清晰，对比度好，彩色图像的色彩正常。数码图片需用高分辨率的数码冲印照片（至少为4×3英寸或以上），不要用打印照片（用热升华打印的照片除外）。（2）数码照片的图像分辨率为300dpi或以上，总像素要在300万像素或以上，图像文件最好用tif格式。（3）图像的形态描述要规范，简明扼要，但不能简单到只写“显微镜形态改变”之类。（4）大体标本照片图上应有缩放比例尺，显微镜照片应注明染色方法和图像的放大倍数（数码照片的放大率最好用比例尺来标注），图中需标注必要的提示或特指符号（包括箭头）。（5）每张图背面用铅笔写明文题、作者、图号和图片的上下方向。（6）若刊用人像，应征得本人的书面同意，或遮盖其能被辨认出系何人的部分。图中如有引自他刊者，应注明出处，附版权所有者同意使用该图的书面签名信（可用传真件）。

一、如何注册并申请成为本刊作者1．在浏览器中输入http：／／www．cma．org．cn，点击“业务中心”。2．网站注册（用户名和密码为您在中华医学会统一的登录信息，请牢记!忘记密码时可通过注册时填写的邮箱索取密码）。

上海交通大学医学院附属新华医院崇明分院（三级乙等）位于上海市崇明县城桥镇。医院创建于1915年，现占地面积112亩，核定床位1000张，是崇明岛上规模最大、科室设置齐全、设施先进的综合性医院。目前是上海交通大学医学院和安徽医科大学教学医院、上海市全科医师规范化培训基地。在职职工1217人，其中卫技人员1014名，高级职称113名，中级职称503名。医院拥有3个市级重点专科，13个县级重点学科，37个临床科室，6个教研室，1个市级实验室。为实现医院新一轮发展，现面向社会公开招聘各级各类专业技术人才。

第五届生物标志物与临床研究国际会议于2014年4月15至17日在英国著名学府牛津大学举行。来自20多个国家的100余名研究人员出席了本次会议。上海交通大学医学院系统有4名专家受邀出席本次大会，其中附属瑞金医院消化外科研究所副所长于颖彦教授在大会上报告了“胃癌新型血清标志物的发现与研究进展”。

原定于2014年10月10至13日在浙江省宁波市召开的由中华医学会《中华病理学杂志》编辑委员会、中华医学会病理学分会共同主办的第二届全国数字化病理应用与发展学术研讨会因客观原因延期至2015年举办，会期另行通知。由此给广大病理工作者及相关人员带来的不便深表歉意！

2014年6月28日，由美国克利夫兰医学中心、四川大学华西医院、金域检验集团和四川省医学会联合举办的中国西部国际病理学术会议在成都举行，来自中美两国杰出的病理学家们共聚一堂，分享各自的成就与经验，共同探讨行业前景和发展方向。

由中华医学会《中华病理学杂志》编辑委员会、中华医学会病理学分会主办的第十六届全国诊断病理暨妇产科病理学术研讨会定于2015年上半年在北京召开，会议将邀请国内外著名病理学家进行专题报告。本次会议期间将举办中华病理学杂志创刊60周年庆典活动。