2009年 · 第32卷第11期

以往认为细菌不易对万古霉素产生耐药,但近年来国际上许多国家和地区报道了万古霉索的耐药性现象,其中异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌(hVISA)受到了关注,因其发生率上升而又不易被检测,影响了细菌感染的治疗.本期刊登了王辉教授课题组以可靠的检测方法 时分离自我国14个城市的甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌进行了hVISA检测,首次发现hVISA在我国的发生率高,应引起临床医师的重视。

[编者按]替加环素(tigecyclin)是一种甘氨酰环素(glycylcycline)类抗生素,是半合成四环素米诺环素的衍生物.替加环素在细菌核糖体水平上抑制蛋白质合成,是针对MRSA及泛耐药鲍曼不动杆菌等耐药细菌有效的广谱抗菌药物.替加环素于2005年在美国上市,目前全球共有50多个国家和地区批准和上市了替加环素,预定2009年底将在中国上市.

金黄色葡萄球菌可以引起严重的社区和医院感染.近几年,甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)所致的感染在全球范围内呈上升趋势.万古霉素是治疗MRSA的最常用药物,但是,随着万古霉素中介的金黄色葡萄球菌(vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus,VISA)和异质性万古霉素中介的金黄色葡萄球菌(heterogenous VISA,hVISA)的出现,由此而引起的万古霉素治疗失败的病例也逐渐增加.因此,各个医院检测、治疗、预防万古霉素敏感性下降的金黄色葡萄球菌意义重大。

冠心病是严重危害人类健康,并受多种遗传、环境因素及其之间相互作用影响的复杂性疾病.因此,深入进行遗传和环境因素研究,将为预防和控制冠心病提供依据.全基因组扫描新策略对于筛查多基因疾病的致病和易感基因无疑具有里程碑式的意义,其对疾病相关基因的定位,不再依赖已知候选基因,并可在整个基因组范围内对未知基因进行筛查[1].在过去的2年里,已从40种常见疾病中鉴定出100多个新致病基因位点[2],使人类深入认识了基因与基因、基因与疾病之间的遗传学关系.现对全基因组扫描策略在冠心病相关基因定位中的应用与研究进展综述如下。

目的 探讨肌钙蛋白I(cTnI)和C反应蛋白(CRP)水平在急性冠状动脉综合征(ACS)患者经皮冠状动脉介入干预(PCI)术后危险分层与预后中的价值.方法 留取335例ACS患者胸痛症状发作6～10 h的PCI术前血标本.化学发光法测定cTnI,免疫法测定CRP,入选患者按cTnI(＜0.1、0.1～0.5、＞0.5 μg/L)和CRP(≤3、＞3 mg/L)浓度进行分组.观察ACS患者PCI术后30 d心源性死亡和主要心脏不良事件(MACE,包括心源性死亡、非致命性再次心肌梗死、继发心力衰竭及再入院的复合终点)发生率,并随访患者2年内发生的心源性死亡率.结果 PCI患者检测数据经多变量logistic回归分析显示,cTnI独立于年龄、性别、高血压、高胆固醇、糖尿病、吸烟等冠心病危险凶素,预测ACS患者PCI术后30 d心源性死亡率的OR为3.5,95%C/2.2～5.3(P＜0.01),再次心肌梗死发生率的OR为1.5,95%CI 1.1～2.6(P＜0.05).CRP独立于各因素,预测近期心源性死亡率的OR为1.6,95%CI 1.1～2.3(P＜0.05),而对再次心肌梗死发生率不具备预测价值.CRP≤3mg/L的PCI患者,不同cTnI浓度组(＜0.1、0.1～0.5、＞0.5μg/L)术后30 d的MACE发牛率分别为4.3%、11.7%、18.8%(X2=4.829,P=0.028);CRP＞3 mg/L的PCI患者,不同cTnI浓度组术后30 d的MACE发生率分别为5.5%、13.2%、21.1%(X2=5.862,P=0.015).所有PCI术后患者经2年随访,Kaplan-Meier曲线分析结果显示,不同cTnI浓度组心血管性疾病存活率分别为92.2%、89.1%、80.0%,3组间差异有统计学意义(X2=7.571,P＜0.05).结论 ACS患者胸痛症状发作6～10 h时的cTnI和CRP浓度能够较好地对行PCI治疗患者进行危险分层,且与PCI术后30 d的MACE发生率密切相关,cTnI浓度对远期心源性死亡率具有预测价值.cTnI和CRP联合检测,对及时发现高风险患者,优化干预策略具有重要意义。

目的 研究分析p53遗传背景不同的非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株中p53凋亡刺激蛋白(ASPP)家族的表达和调节,以及在NSCLC诊断和化疗监测中的临床意义.方法 用实时荧光定量逆转录(FQ-RT)-PCR检测NSCLC细胞株A549(野生型)和NCI-H157(突变型)及37例肺癌患者组织与外周血单个核细胞中ASPP1、ASPP2 mRNA表达,免疫印迹技术检测NSCLC细胞株ASPP1、ASPP2蛋白含量.同时,检测2株细胞对顺铂(CDDP)的敏感性以及化疗药物处理后ASPP1、ASPP2mRNA表达变化.此外,还比较NSCLC患者与37名健康对照者ASPP1、ASPP2 mRNA表达情况,并监测NSCLC患者化疗前后ASPP1、ASPP2 mRNA表达变化.结果 FQ-RT-PCR检测ASPP标准品曲线斜率均值分别为-3.249、-3.358,r＞0.98,标准曲线的扩增效率分别为1.156、1.028;CDDP处理后NCI-H157细胞株的IC50值是3.70μg/ml,A549的IC50是10.48μg/ml.NCI-H157细胞株中ASPP1,ASPP2 mRNA平均表达量比A549分别高2.66倍和6.98倍.肺癌患者组织和外周血单个核细胞中ASPP1 mRNA表达分别为(4.27 ±0.57)×103和(2.49±0.32)×103,ASPP2 mRNA表达分别为(2.34±0.75)×103和(7.00±1.17)×103,而健康对照组组织和外周血单个核细胞中ASPP1 mRNA 表达分别为(1.32±0.21)×104和(1.46±0.31)×104,ASPP2 mRNA表达分别为(1.38±0.19)×104和(1.28±0.18)×104.肺癌组中ASPP1和ASPP2 mRNA明显低于健康对照组(t值分别为2.58、3.94、3.62、3.76,P均＜0.05).NSCLC组中18例患者术后化疗前ASPP1和ASPP2 mRNA分别为(2.34±0.56)×103和(6.64±0.72)×103,进行2个周期化疗后分别为(3.66±0.64)×103和(9.42±0.44)×103,基因表达量均明显升高(t值分别为3.02、4.50,P均＜0.05).结论 NSCLC突变型细胞株ASPP1和ASPP2 mRNA的表达均高于野生型细胞株,ASPP1和ASPP2表达升高有可能增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性.NSCLC患者化疗过程中,ASPP1和ASPP2 mRNA表达的变化可能与化疗药物作用有关,提高ASPP1、ASPP2的表达将有助于肿瘤的治疗。

目的 探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患者免疫表型与细胞遗传学改变和临床特征的关系.方法 应用流式细胞术及相关单克隆抗体,Cell Quest软件获取并分析50 000个细胞,通过CD45/侧向角散射光强度(SSC)设门识别幼稚细胞,对113例ALL患者骨髓进行免疫表型分析;采用骨髓细胞72 h培养法常规制备染色体,R显带技术对其中的74例进行核型分析.结果 113例ALL患者中,14.2%(16/113)为T淋巴细胞急性淋巴细胞白血病(T-ALL),85.8%(97/113)为B淋巴细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL).113例ALL患者中有106例进行髓系抗原检测,34.9%(37/106)ALL患者表达髓系抗原(MyAg),CD13是ALL中最常见的MyAg(23.6%,25/106).T-ALL髓系相关抗原表达总的阳性率为46.2%(6/13),B-ALL为33.3%(31/93),差异无统计学意义(X2=0.825,P＞0.05).成人ALL各髓系相关抗原表达总的阳性率为47.6%(20/42),高于儿童的26.6%(17/64),差异有统计学意义(X2=4.948,P＜0.05).可供核型分析的74例ALL中,核型异常者39例(52.7%).MyAg+ALL与MyAg-ALL患者临床和生物学特征分析表明,MyAg+组高白细胞(＞50×109/L)患者比例为48.6%(18/37),高于MyAg-ALL组的20.3%(14/69),差异有统计学意义(X2=9.191,P＜0.01);MyAg+ALL组CD34阳性患者比例为83.8%(31/37),高于MyAg-ALL组的53.6%(37169),差异有统计学意义(X2=9.527,P＜0.05);而且MyAg+ALL组成人患者比例(54.1%,20/37)高于MyAg-ALL组(31.9%,22/69),差异有统计学意义(X2=4.948,P＜0.05).结论 ALL免疫表型与细胞遗传学改变和临床特征具有一定相关性,将免疫表型与细胞遗传学检测相结合,有助于ALL诊断。

目的 探讨遗传性抗凝血酶(AT)缺陷症先证者及其家系成员的AT活性(AT:A)、AT抗原含量(AT:Ag)及基因型在引起遗传性AT缺陷症发病的分子机制.方法 收集3例AT缺陷症先证者及其家系成员血浆标本,采用发色底物法和免疫比浊法分别检测先证者及其家系成员血浆AT:A和AT:Ag,提取外周血基因组DNA.用PCR法扩增AT基冈的全部7个外显子及侧翼序列,通过直接测序分析异常的突变基因.利用蛋白免疫印迹法分析血浆中AT含量的变化,用凝血酶生成试验检测患者体内的凝血状态.结果 3例先证者AT:A和AT:Ag均降低到正常值的50%左右,分别在AT基因外显子4区的第7386位核苷酸发生杂合性G＞C突变,导致W(Trp)225 C(Cys)错义突变;2号外显子区第2591位核苷酸发生C＞G突变,导致S(Ser)36 X(stop)无义突变;5号外显子区第9819佗核苷酸发生C＞T杂合突变,导致R(Arg)359 X(stop)无义突变.部分家系成员表型和基因型榆测结果与先证者一致.蛋白免疫印迹结果显示先证者及其家系成员血浆中的AT含量较正常混合血浆明显减少,凝血酶生成实验显示先证者体内呈现明显的高凝状态.结论 I型遗传性AT缺陷症中,W225C、S36X、R359X引起血浆中AT含量下降,是导致遗传性AT缺陷症的分子致病机制。

目的 研制早期快速检测抗肠道病毒71型(EV71)抗体的ELISA血清学诊断性试剂盒,评价其临床应用价值.方法 将表达纯化的EV71重组蛋白VP1作为包被抗原,建立EV71型手足口病间接ELISA的血清学检测方法 .通过与逆转录(RT)PCR方法 、EV71病毒分离试验和微量血清中和试验比较,评价抗.EV71 IgM和抗-EV71 IgG血清学诊断方法 在EV71型手足口病的诊断价值.结果 与RT-PCR比较,抗-EV71 IgM敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为83%、85%、81%和87%;抗.EV71 IgG敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为72%、74%、68%和77%.与EV71病毒分离方法 比较,抗-EV71 IgM敏感度、特异度分别为85%和97%;抗-EV71 IgG敏感度、特异度分别为75%和77%.通过直线相关分析发现,抗-EV71 IgG抗体滴度和中和抗体滴度呈显著正相关(r=0.72,P＜0.05).EV71型手足口病患儿恢复期血清抗IgG滴度较急性期升高(P＜0.01),但抗IgM滴度差异无统计学意义(P＞0.05).结论 利用VP1重组蛋白作为包被抗原,成功开发ELISA检测人血清抗-EV71 IgM和抗-EV71 IgG抗体的诊断试剂盒。

目的 对1例胎儿脐血DNA用跨越断裂点PCR技术(gap-PCR)检测DNA时罕见同时出现α2、右缺失(-α3.7)和东南亚缺失(southeast asian deletion,-SEA)的胎儿及其家系进行分析,探讨其基因变异的来源.方法 1例24周龄的胎儿脐血 DNA采用gap-PCR检测,采用巢式及单重PCR对胎儿及其父母、祖父母、外祖父母进行α地巾海贫血基因型分析,并进行红细胞参数分析、血红蛋白检测,反向斑点杂交技术诊断α地中海贫血点突变及β地中海贫血点突变,同时比较分析胎儿基因变异与家系关系.结果 血液学表型分析显示,胎儿血红蛋白γ链的四聚体(Hb Bait's)含量为7.6%、母亲、外祖父均为典型的α地中海贫血.胎儿的父亲、祖父母、外祖母4人红细胞指数和血红蛋白无异常改变.胎儿为HKαα和东南亚缺失型杂合子,其父亲、祖父均为HKαα;其母亲、外祖父为东南亚杂合子;祖母、外祖母均未发现α地中海贫血基因缺失.通过遗传咨询孕妇选择了保留胎儿.结论 发现1例罕见的HKαα和-SEA的混合杂合子(HKαα/-SEA),成功保住胎儿。

截止至2009年8月11日,全球共15个国家确诊人禽流感病例438例,死亡262例,死亡率59.8%;中国确诊人禽流感病例38例,死亡25例,死亡率65.8%;其中仪2009年1月份,中国连续报告8例人禽流感病例,引起各方面高度关注.总结以上病例,病例的早发现、早确诊对人禽流感疫情的防治,尤其是降低死亡率有着重要意义.人禽流感病例的确诊主要依赖于实验室诊断.本研究通过2009年1月5日北京市首例人禽流感病例的实验室检测和诊断,探讨人禽流感病例实验窒检测流程以及新技术在病例早期诊断中的意义。

禽流感病毒(avian influenza vires,AIV)是一种RNA病毒,属于正黏病毒科(orthomyxoviridae)A型流感病毒属.A型流感病毒根据其表面血凝索(hemagglutinin,HA)与神经胺酸酶(neuraminidase,NA)抗原性的不同可分为若干亚型,目前已发现的A型流感病毒的血凝素有16个亚型(H1～16),神经氨酸酶有9个亚型(N1～9)[1].1997年中国香港暴发H5N1亚型高致病性禽流感,导致18人感染,6人死亡,这引起了人们的疑虑:H9N2亚型禽流感病毒能否跨越种间障碍从而导致人群的感染?1998-1999年,广东省以及香港地区暴发了H9N2亚型禽流感,直接导致多人感染[2-3].2003年11月,香港地区又发生了H9N2亚型禽流感病毒感染人的事件[4]。

胸腹腔积液是恶性肿瘤的常见体征之一.目前临床确诊恶件胸腹腔积液主要靠细胞学检测,但是细胞学诊断仅能确诊约50%～70%的恶性胸腹腔积液的性质和来源,联合活检能够提高其7%～13%的诊断水平[1-3].胸腹腔积液游离肿瘤标志虽然能够在一定程度上提高良恶性胸腹腔积液诊断准确率及敏感性[4-5],但是仍有待新的简便有效,且非侵入性的检测方法的建立.20世纪70年代,Leon等[6]发现肿瘤患者血清游离DNA浓度高于健康人,提示游离核酸有作为肿瘤诊断的价值.本研究中,我们采用荧光定量(FQ)-PCR建立了一种简单的胸腹腔积液游离核酸[包括DNA、mRNA及microRNA]检测方法,以寻找新的诊断与鉴别诊断良恶性胸腹腔积液的肿瘤指标。

胃癌是常见恶性肿瘤之一,由于起病隐匿,早期诊断极为困难,目前尚未发现特异性肿瘤标志.人组织激肽释放酶基因家族(Kallikreins,KLKs)是近年发现的肿瘤标志家族,KLK6基因是该家族成员之一,其编码的蛋白--人组织激肽释放酶6(human kallikrein 6,hK6)是由223个氨基酸组成的丝氨酸蛋白酶,具有胰蛋白酶样活性[1].国外研究发现,hK6参与了人类多种恶性肿瘤的形成过程,且与肿瘤的侵袭、浸润和转移等生物学行为密切相关[2-3],但hK6与胃癌的关系在国内尚鲜见报道.我们采用免疫组织化学链霉菌抗生素蛋白一过氧化物酶连接法(SP)检测hK6在胃癌、胃溃疡和正常胃黏膜组织中的表达情况,并探讨hK6表达与胃癌患者临床病理参数间的关系。

目的 观察多柔比星(doxorubicin,DOX)诱导K562细胞mdr1基因表达过程中丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activatedprotein kinase,MAPK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的作用,探讨mdr1基因的转录调控机制.方法多柔比星初始浓度为0.01 μg/ml,诱导K562细胞24 h后撤药继续培养至细胞状态恢复,加入多柔比星继续诱导24h,浓度增加为0.02μg/ml.依上述方法 多柔比星浓度逐渐增加,直至0.05μg/ml.收集DOX浓度为0.01、0.03和0.05μg/ml时的细胞.RT-PCR检测mdr1基因表达,流式细胞仪检测mdr1基因编码的P糖蛋白(P-gP)的表达,Westernblot 检测ERK活化情况.MAPK的抑制剂PD98059预处理K562细胞1 h后与多柔比星共同作用,逆转录(RT)-PCR和流式细胞仪分别检测mdr1基因和P-gP的表达情况.结果经多柔比星作用后K562细胞中ERK磷酸化增强,同时mdr1基因转录上调,及其蛋白产物P-gP的表达也增加,当多柔比星浓度为0.05μg/ml时两者的表达均增加了5倍之多.而用PD98059预处理细胞后能明显抑制多柔比星诱导mdr1基因转录和蛋白表达,多柔比星浓度为0.03μg/ml时PD98059对mdr1基因表达的抑制率为(74.1±0.11)%,多柔比星浓度为0.05μg/ml时抑制率为(70.2±0.14)%.结论 多柔比星能够诱导K562细胞mdr1基因表达,同时激活MAPK/ERK信号通路,阻断ERK的活化能抑制mdr1基因的诱导性表达。

通过SCID小鼠与NOD/Lt品系(T淋巴细胞、B淋巴细胞、自然杀伤细胞缺陷,循环补体缺乏,抗原呈递细胞分化及功能不良)回交得到的NOD/Ltsz-SCID/SCID小鼠(简称NOD/SCID小鼠).目前,NOD/SCID小鼠白血病模型的建立多采用经尾静脉接种较大数量的白血病细胞[1-3],虽然可以保证成功植入,但对研究小鼠的机体免疫反应实验十分不利,主要原因在于植入的肿瘤细胞不再分裂繁殖且小鼠本身为免疫缺陷鼠.另外,NOD/SCID小鼠的成本较高,饲养条件苛刻,模型建立所需细胞数量较大,普通实验室大都无法开展白血病动物模型的研究.本研究以尾静脉注射K562细胞的BABL/c裸鼠为阳性对照组,另采用本室构建的鼠源性BP210bcr/abi细胞,注射未经γ射线照射的BABL/c小白鼠,建立慢性粒细胞白血病(CML)小鼠模型。

官颈癌是世界第二大妇女常见肿瘤[1].大量流行病学和分子生物学研究证实高危型人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV),尤其是HPV16型在宫颈癌发生、发展进程中起关键作用[2-3].HPV16型E7基因编码蛋白与细胞转化和病毒复制的调控有关,在维持转化组织恶性表型的过程中发挥重要作用.本研究选择与官颈卜皮细胞相似的非肿瘤性人永生化表皮细胞(HaCaT)作为研究对象,通过真核表达载体pCMV将HPVl6 E7基因导人HaCaT细胞,使HPV16 E7在HaCaT细胞中表达,探讨其对HaCaT细胞的增殖、周期及HLA-Ⅰ类分子表达的影响。

HLA-Ⅰ类分子在单个核细胞(PBMC)表面表达丰富,HLA-Ⅰ类分子除了参与全身免疫应答外,还有调节免疫和参与免疫细胞分化的作用.研究表明,PBMC的HLA-Ⅰ类分子在细胞免疫中发挥着极为重要的作用,其表达降低可能会减弱机体对肿瘤细胞的杀伤力,从而导致肿瘤细胞逃避机体免疫监视[1]。

血小板参数检测一般包括PLT、平均血小板体积(MPV)、血小板比积(17CT)、血小板体积分布宽度(PDW)及大血小板比率(P-IJCR)等,目前多以血细胞分析仪检测.临床工作中常发现有些参数不报结果,影响医师及时了解患者情况,尤其是有的出血性疾病患者血小板参数回报不全,临床要求重测,重测后仍不显示参数,在更换其他血细胞分析仪后则可显示结果.为此我们对95例不能完全显示血小板参数的血标本以3种五分类血细胞分析仪同时检测,发现3种血细胞分析仪血小板参数显示结果不同,并对血细胞分析仪的血小板参数变化特点及原因进行了初步分析,现报道如下。

患者男,45岁,因在工地不慎被钢丝拉伤右大腿48 h,损伤部位血肉模糊、不能活动,在当地医院行外固定架术后因病情严重、治疗条件有限于2008年11月28日转入我院.入院诊断:(1)右下肢开放性骨折;(2)右下肢气性坏疽待定;(3)右下肢严重感染;(4)右下肢大片皮肤肌肉碾挫伤伴血管神经损伤.体格检查:体温37.6℃,脉搏124次/min,呼吸22次/min,血压104/75 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa).神志清楚,自主体位.右大腿上1/3至右膝关节上缘右股直肌股中段中间肌阔筋膜张肌,缝匠肌长收肌及大收肌断裂伴缺损,大片皮肤肌肉条索状损伤,皮肤及肌肉翻转,伤口内见前外侧肌群毁损伤,肌肉呈暗红色,弹性差,有明显臭鸡蛋味,触之有捻发音及捻发感并有气泡产生.由于患者右下肢损伤不断加重,皮肤肌肉坏死不断向上发展,急请检验科会诊.微生物室培养结果最终确诊为由双酶梭菌引起的气性坏疽。

患者女,20岁,藏族.腰痛1年,伴头痛、恶心、呕吐,近2 d出现尿频、尿急、尿痛,于2006年4月20日至贵德县人民医院门诊就诊.查体:体温37℃,脉搏80次/min,呼吸22次/min,血压100/80 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),双肾叩击痛(++),颈软无抵抗,心、肺、腹、四肢及神经系统检查均正常.实验室检查:WBC 15.2×109/L,中性粒细胞0.75,淋巴细胞0.18,嗜酸粒细胞0.05,嗜碱粒细胞0.01,单核细胞0.01,Hb 148 s/L,PLT 420×109/L.心电图正常.尿常规检查(10×10)视野中布满椭圆形约1/2～1/3红细胞大小,中间有约45°～90°扭曲并沿自身长轴呈螺旋状旋转,且活动极为活跃的不明微生物。

病历摘要患者女,74岁,1个月前因帕金森病加重服用卡马西平治疗,服药半月后,全身皮肤出现红斑,伴瘙痒、口腔糜烂,临床考虑多形红斑给予激素等对症治疗,皮疹消退,半个月前再次服用卡马西平2 d后全身红斑加重,逐渐发展为皮肤潮红、肿胀、脱屑,以双下肢非凹陷性浮肿为主.来我院门诊进行血常规检查示WBC 14.4×109/L,嗜酸粒细胞0.18,RBC4.29×1012/L,Hb 130 g/L,PLT 198×109/L;尿常规示镜下WBC 3～5个/HP,尿蛋白、胆红素、尿胆原均阳性,CRP增高(45.90 mg/L),拟红皮病收住我院皮肤科,予以甲泼尼龙以及抗过敏药物治疗,病情无明显改善,复查血常规白细胞进行性升高,可见异常细胞,遂转入我院血液科。

染色体异常被认为是引起新生儿智力低下,学习困难及各种先天畸形或生长发育异常的主要原因.在产前诊断中,快速可靠检测染色体的异常,提高检测方法的可操作性、准确性、特异性,对完善遗传咨询有现实意义.近年来,随着分子细胞遗传学技术的发展,比较基因组杂交技术为染色体病的产前诊断提供了一种新途径。

细菌形态学检查包含标本形态学和细菌培养后形态学.结合我的研究及工作经验,对细菌形态学方法及其意义阐述如下。

目的 研究我国异质性万古霉素中介的金黄色葡萄球菌(hVISA)的分子特征,比较hVISA和万古霉素敏感的金黄色葡萄球菌(VSSA)在分子特征方面的差别.方法 收集2007年来自全国14个城市分离的非重复甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)315株,采用PAP-AUC(菌群谱型分析-曲线下面积法)确定hVISA.通过多重PCR对315株MRSA进行SCCmec分型及agr (accessory gene regulator)分型,对PCR产物进行测序确定spa分型,同时检测pvl基因.结果 在315株MRSA中共检测出30株hVISA,发生率为9.5%.315株MRSA以SCCmec Ⅲ为主,占74.3%,其次为SCCmec Ⅱ,占17.8%.在hVISA中SCCmec Ⅱ的比例明显高于VSSA组(46.7%比14.7%,X2=18.93,P＜0.001).所有MRSA的agr分型以agr 1为主,占73.6%,其次为agr 2,占18.7%,agr3和agr 4型MRSA在临床分离株中少见.agr分型在hVISA和VSSA之间有明显的不同,hVISA中agr 2的比例显著高于VSSA(53.4%比15.1%,X2=26.08,P＜0.001).30株hVISA中有4种spa克隆型,包括t002(13株)、t037(9株)、t030(6株)和1548(2株).315株MRSA中pvl基因的携带率非常低,占1.6%.结论 hVISA的发生率较高.与VSSA相比,hVISA主要以agr 2型为主,与VSSA明显不同.通过spa分型发现hVISA呈多克隆型。

目的 调查中国16个城市28家医院铜绿假单胞菌碳青霉烯类抗牛素耐药情况、产金属酶情况及同源性.方法 收集中国16个城市28家医院2006年7月到2007年7月临床分离的我国医院内病原菌耐药监测(NPRS)所保留的铜绿假单胞菌菌株654株.采用琼脂稀释法测定亚胺培南、美罗培南的MIC,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析碳青霉烯类耐药菌株同源性;Etest法进行金属酶表型筛选;PCR扩增及克隆测序分析金属酶基因型,实时荧光定量逆转录PCR(real time RT-PCR)检测金属酶的转录水平.结果 共筛选出275株碳青霉烯类抗生素不敏感株,其中259株为耐药株,亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为37.5%(245/654)和28.0%(183/654).275株碳青霉烯类抗生素不敏感菌株中金属酶表型阳性率6.55%(18/275),金属酶基因型阳性率8.73%(24/275).6株金属酶基因型阳性而表型阴性菌株的金属酶相对表达量显著低于18株金属酶表型阳性菌株(Z=-2.335,P＜0.05).259株碳青霉烯类抗生素耐药菌株PFGE分属89个型,24株金属酶基因型阳性菌株来自6个城市,分为9个PFGE克隆型.结论 我国铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药率高;未发现铜绿假单胞菌大范围单克隆株流行.产金属酶不是铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要机制。

碳青霉烯类抗生素对革兰阴性杆菌具有强大的抗菌活性,是治疗由多重耐药革兰阴性杆菌导致的医院感染的有效药物,尤其适用于产超广谱β内酰胺酶(ESBL4)和AmpC酶的肠杆菌科细菌引起的严重感染.随着碳青霉烯类抗生素在临床上使用增加,革兰阴性杆菌临床株对该类药物的耐药性不断增加,特别是非发酵菌的耐药率升高明显,但在肠杆菌科细菌中少见。

质粒介导的AmpC β内酰胺酶对第三代头孢菌素、头霉素类、单环类等β内酰胺类抗牛素不同程度的耐药,它与超广谱β内酰胺酶(ESBLs)最主要的表型区别是耐药谱的扩大,且不能被克拉维酸抑制.这类酶的出现使得临床对革兰阴性致病菌所能使用的备选抗生索范围进一步缩小。

上海市疾病预防控制中心(SCDC)于2006年始加入WHO全球非伤寒沙门菌的监测网络(GSS),通过临床腹泻病例的监测发现:2006年7-9月间,山夫登儇沙门菌血清型呈现过暴发的流行病学特征[1],其中一类罕见的H2S阴性山夫登堡沙门菌流行菌株占较大比例,为掌握山夫登堡沙门菌在本市的流行规律,本研究对2006-2007年GSS山夫登堡沙门菌腹泻菌株的耐药型谱、RP核糖体分型和脉冲凝胶电泳(PFGE)分子分型进行分析,了解不产硫化氢山夫登堡沙门菌的遗传学特征,为本市的非伤寒沙门菌监测和防治提供依据。

在医学论文的描述中，凡涉及到实验动物者，在描述中应符合以下要求：（1）品种、品系捕述清楚；（2）强调来源；（3）遗传背景；（4）微生物学质量；（5）明确体重；（6）明确等级；（7）明确饲养环境和实验环境；（8）明确性别；（9）有无质量合格证；

在医学论文中正确、合理使用专业名词缩略语可以达到精简文字、节省篇幅，使文章读起来更精练易懂的目的。现将检验医学专业领域为大家所熟知的专业名词及专业机构缩略语公布如下（按英文首字母顺序排列），本刊在论文中将不再注释其中文。

为顺应当今期刊网络化、数字化的发展趋势，更好地为广大作者、读者提供高质量的服务，本刊从2009年5月15日起将开通中华检验医学杂志网站及稿件远程管理系统。网站的开通，将为广大读者、作者、编者提供一个学术交流和沟通的平台。通过本刊网站，读者、作者、编者将能及时了解本领域的国内外学术动态及各专业学术会议的召开事宜。目前本刊有VIP会员1200余人，

1．统计研究设计：应交代统计研究设计的名称和主要做法。如调查设计（分为前瞻性、回顾性或横断面调查研究）；实验设计（应交代具体的设计类型，如自身配对设计、成组设计、交叉设计、析因设计、正交设计等）；临床试验设计（应交代属于第几期临床试验，采用了何种盲法措施等）。主要做法应围绕4个基本原则（随机、对照、重复、均衡）概要说明，尤其要交代如何控制重要非试验因素的干扰和影响。

我国著作权法公布以来，已得到社会各界的广泛重视，作为医学科技期刊必须不折不扣地执行著作权法。为此将本刊对作者署名和志谢的有关要求重申如下。

为繁荣我国检验医学事业，促进检验医学领域的学术交流，依据中华医学会杂志社关于实施杂志会员制度的相关规定，中华检验医学杂志2010年继续实行VIP读者会员制。

近年来许多报道国内优秀科研成果的论文首先投向国外，特别是被美国科学引文索引（SCI）收录的高水平国际期刊上，有助于促进国际间的学术交流，让世界更好地了解中国。为了将这些高质量、有影响的论文介绍给国内的广大读者，《中华检验医学杂志》将开设“在国外发表的SCI论文介绍”栏目，目的是使国内更多的读者共享我国的科研成果和相关学科的进展。

由中华医学会检验分会、中华医学会《中华检验医学杂志》编辑部联合主办的第六次全国中青年检验医学学术会议暨第三届中国检验医学中青年论坛阳普优秀论文奖评选活动，定于2010年3月31日—14月4日在广州市召开。

由中华医学会（CMA）中华检验医学杂志与美国临床化学学会（AACC）Clinical Chemistry杂志共同举办的“如何使论文获得发表”首期培训班将于2010年3月29至4月1日在广州举办。