2011年 · 第34卷第09期

目的 建立同时测定血清AAA含量的HPLC-FLD法，探讨CRI患者血清AAA含量变化及其临床应用价值。方法血清标本来自于100名健康体检者和80例CRI患者。将CRI患者按2002年美国肾脏基金会(NKF)诊断分期标准进行分期：CKD 2期4例、CKD 3期12例、CKD 4期12例和CKD 5期52例；按CRI不同病因分组：慢性肾炎型32例、糖尿病型36例和高血压型12例。血清经高氯酸去蛋白后，离心取上清液测定，外标法定量。采用Megres C18色谱柱，流动相为乙腈：水（体积比为1∶9），流速为1.0 ml/min,荧光检测器在不同时间段设定特定波长对血清AAA进行测定。对健康对照组和CRI患者组血清中AAA总量、Tyr、Phe和Trp含量及不同分期和不同病因CRI患者血清Tyr、Phe和Trp含量进行比较，同时评价血清AAA总量诊断CRI的敏感度与特异度。结果Tyr、Phe和Trp线性范围分别为0.550～275.000、3.050 ～1 220.000和0.049～49.000 μmol/L，最低检测限分别为0.014、0.500和0.005 μmol/L,平均回收率分别为100.9％、101.3％和98.5％，日内精密度为2.32％～3.92％（平均为3.13％），日间精密度为3.18％ ～4.20％（平均为3.58％）。CRI患者组血清AAA总量、Tyr、Trp含量及Tyr/Phe比值分别为(135.74±12.23)、(52.27±8.25)、(21.49±4.25) μmoL/L和[0.87（0.68 ～1.05）]，低于健康对照组的(174.47±11.57)、（63.53±4.68）、(44.22±3.67) μmol/L和[0.97（0.94～1.00）]，差异均有统计学意义（t=- 14.709、4.452、22.100,U=266.000,P均＜0.05）。不同分期CRI患者Tyr、Phe和Trp含量差异无统计学意义；Tyr含量在慢性肾炎组、高血压组和糖尿病组间差异无统计学意义，Phe在慢性肾炎组与高血压组、慢性肾炎组与糖尿病组间差异有统计学意义（U= 114.00、395.00，P均＜0.05），Trp在慢性肾炎组与糖尿病组间差异有统计学意义(U=349.00,P＜0.05)。血清AAA总量诊断CRI的敏感度、特异度分别为90％ (72/80)和100％ (100/100)。结论HPLC-FLD法测定血清AAA简便、快速，敏感度高及特异度好，同时测定血清AAA含量对CRI患者的诊断和评价有一定价值。

目的 探讨尿液BNP水平对慢性心力衰竭的诊断价值。方法采用微粒酶免疫测定法检测83例慢性心力衰竭患者（NYHAⅠ ～Ⅳ级）和30名健康对照者的尿液和血浆BNP浓度，同时采用NYHA标准对心功能进行分级，并用超声心动图检查评定患者心功能。结果慢性心力衰竭组尿液BNP水平为[90.0(38.3～209.5)]ng/L，血浆BNP水平为[680.0(289.7 ～ 1543.5)]ng/L，明显高于健康对照组的[17.0（13.0 ～33.0）]ng/L和[84.5(56.0～158.0)]ng/L，差异均有统计学意义（U值分别为207.5、71.0，P均＜0.01）。随心功能NYHA分级的增高，尿液BNP水平逐渐升高。尿液BNP水平与血浆BNP水平呈正相关(r=0.842,P＜0.01)，与NYHA分级呈正相关(r =0.742，P＜0.01)，与LVEF呈负相关（r=-0.801，P＜0.01）。LVEF＜ 40％患者的尿液BNP水平为[143.0(85.0 ～258.0)]ng/L，LVEF≥40％患者的尿液BNP水平为[31.5(17.3～38.8)]ng/L，差异有统计学意义(U=80.0,P＜0.01)。以36.5 ng/L为临界值时，尿液BNP诊断慢性心力衰竭的敏感度为84％，特异度为80％。结论 尿液BNP对慢性心力衰竭的诊断有重要意义，与血浆BNP具有相似的诊断价值。

目的 探讨血清GFAP、NDKA和PARK7与IS的相关性，及其对IS诊断、预后评估的临床价值。方法用ELISA法检测37例IS患者、28例ICH患者和30名健康人血清GFAP、NDKA和PARK7含量水平，所有患者在发病12 h内、第3、14天除进行上述3项指标检测外，还在相应时间点用MESSS进行神经功能缺损评分，在14 d出院时用Barthel指数(BI)评价其日常生活能力。同时分析3项指标单项检测和联合检测对IS的诊断效能。结果IS组发病12 h内、第3、14天血清GFAP含量分别为(5.49±2.25)、(5.17±2.29)、(5.96±2.39) μg/L，血清NDKA含量分别为9.15(6.28～12.79)、9.13（6.31～12.23）、9.31(6.40～11.83) μg/L，血清PARK7含量分别为(32.71±6.34)、(31.23±6.04)、（32.79±6.94）μg/L；健康对照组血清GFAP、NDKA、PARK7含量分别为(4.62±1.56)、4.24(3.30～5.61)、(14.25±2.65) μg/L。IS组与健康对照组比较，除第3天的GFAP差异无统计学意义(t =1.129,P＞0.05),IS组其余各时间点的3项指标水平分别高于健康对照组（GFAP的t值分别为2.642、1.870，P均＜0.05；NDKA的Z值分别为6.173、6.100、6.278，P均＜0.01；PARK7的t值分别为14.964、15.367、16.060,P均＜0.01）。检测GFAP对IS诊断的特异度和敏感度分别为46.7％ (14/30)和81.1％ (30/37)，NDKA对IS诊断的特异度和敏感度分别为90.0％ (27/30)和78.4％ (29/37)，PARK7对IS诊断的特异度和敏感度分别为96.7％ (29/30)和97.3％ (36/37)；3项标志物联合检测对IS诊断的特异度和敏感度分别为96.7％ (29/30)和100％( 37/37)。此外，IS组GFAP升高的发病风险是健康对照组的1.3倍（OR=1.300，P=0.044）,NDKA升高是1.7倍（0R=1.668,P=0.036）,PARK7则是1.8倍（OR=1.809,P=0.005）。IS患者发病＜12h时GFAP血清含量在IS组和ICH组的差异有统计学意义（t=4.097,P=0.000）；发病不同时间的GFAP、NDKA和PARK7血清含量与MESSS存在不同程度正相关，即IS发病＜12 h时,3者r值分别为0.534、0.482、0.357，P均＜0.05；3d时，3者r值分别为0.433、0.487、0.299，P值分别为0.007、0.002、0.073；14 d时,3者r值分别为0.394、0.200、0.084,P值分别为0.016、0.236、0.620。14 d出院时GFAP、NDKA和PARK7血清含量与BI呈负相关（r值分别为-0.430、-0.321、-0.076，P值分别为0.044、0.050、0.657）。结论血清GFAP、NDKA和PARK7含量与IS密切相关，血清3项指标志升高是IS发病的危险因子，检测3项指标有助于IS的早期诊断，且对患者及时治疗和预后评估有重要意义。

目的 建立浙江地区儿童透射比浊法血清CysC参考区间并分析其与年龄、性别的相关性。方法从LIS系统导出2008 －2010年包含CysC的13 567名儿童生化筛查组合检测数据，通过排除条件（严重的全身性疾病、心血管疾病、肾脏疾病、肌酐或尿素或丙氨酸氨基转移酶结果高于参考上限1.5倍以上、年龄≥16岁、同一患者非第一次CysC结果、血清标本为溶血、黄疸或脂浊和家庭住址非浙江籍者）筛选出8 127名儿童为参考人群，其中男4 264名，女3 863名。CysC的测定采用液相透射比浊法在Roche DPP全自动生化分析仪上进行。运用SPSS 17.0软件和Excel 2003对结果进行统计处理。结果8 127名本地区儿童血清CysC浓度对数呈正态分布，按文献方法和结合临床实际分为1 ～29 d、1～3个月、4～11个月、1～2岁、2～ 16岁5个年龄组进行研究。Lg( CysC)浓度在5个年龄组男性均值依次为0.224、0.170、0.112、0.061、-0.011 (mg/L,lg)，女性依此为0.222、0.164、0.089、0.057、-0.010( mg/L,Ig)，其男女间差异无统计学意义，t值依次为0.174、0.362、1.957、0.445、-0.093，其相应的P值均＞0.05。Ig( CysC)在上述年龄组间的均值依次为：0.222、0.166、0.100、0.059、-0.010( mg/L，lg),经单因素方差分析发现，总体上组间差异有统计学意义(F= 309.785,P=0)，各组间两两比较差异均有统计学显著性（P均为0）。儿童CysC水平随年龄变化趋势显示,2岁前血清CysC水平变化较大，其中1个月内CysC水平最高，以后随着年龄的增长而逐渐降低，但在2岁之后至16岁，总体趋于稳定。儿童血清CysC参考区间：1～29 d组为0.95 ～2.92mg/L，1～3个月组为0.81 ～2.67 mg/L，4～11个月组为0.65 ～2.45 mg/L,1岁组为0.56 ～2.35mg/L,2 ～ 16岁组为0.45 ～2.13 mg/L。结论儿童血清CysC参考区间与性别无密切相关，但不同年龄段之间变化较大，临床应用CysC评价儿童肾功能时应考虑年龄因素。

胱氨酸蛋白酶抑制剂C（CystatinC）是一种内源性胱氨酸蛋白酶抑制剂，相对分子质量为13000，较低，它由有核细胞以相对比较稳定的速度合成并释放到血浆中去。作为肾功能的标志物，CystatinC与Scr相比有很多的优势，它的分泌不受年龄、性别、身高、体重、肌肉量等因素的影响。

目的 评估基因芯片法检测耐多药结核临床分离株的临床意义。方法采取分层抽样的方法分别从北京胸科医院、同济大学附属上海市肺科医院和广州市胸科医院保存的临床菌株库的耐药组和敏感组中，随机抽取利福平耐药株800株，异烟肼耐药株797株，耐多药株791株，利福平/异烟肼双敏感380株。用基因芯片法检测包括rpoB基因的511(T→C)、513(A→C，C→A)、516( G→T,A→T,A→G)、526( C→T,C→G,A→T,A→G)、531( C→T,C→G)、533( T→C)位点、katG的315(G→C，G→A)位点和inhA的-15(C→T)位点的耐药突变。以绝对浓度法药敏结果为金标准，计算基因芯片法的符合率、敏感度和特异度。同时对基因芯片法的核酸扩增产物进行测序，以验证基因芯片对核酸序列检测的准确性。结果以绝对浓度法药敏结果作为标准，基因芯片法检测利福平、异烟肼耐药和耐多药的符合率分别是93.7％(1 108/1 183)、83.8％ (994/1 186)、82.4％ (975/1 183)。检测利福平耐药的敏感度为92.0％ (733/797)，特异度为97.2％( 375/386)；检测异烟肼的敏感度为77.4％ (617/797)，特异度为96.9％ (377/389)；检测耐多药的敏感度为74.6％( 588/788)，特异度为98.0％(387/395)。在利福平基因芯片检测为突变的菌株中，突变频率最高的位点是531( TCG)，突变率为64.5％(480/744)；在katG/ inhA突变菌株中，基因芯片检测为katG 315( AGC)单突变的为77.4％(487/629)；且与测序结果基本一致，仅有5例菌株中不完全相符。其中1株异烟肼耐药菌基因芯片法检测为katG 315(G→C)突变，而测序结果为野生型，其余4株为基因芯片法未包含的突变类型。结论基因芯片法可快速可靠地检测结核临床分离株利福平和异烟肼的耐药性，有望在临床诊断中广泛应用。

目的 检测MTB耐多药菌株和敏感菌株的TCS反应调节子的表达水平，以筛选出与MTB耐药相关的TCS。方法将7H9肉汤培养至对数生长期的MTB进行总RNA的提取和纯度鉴定；然后进行反转录，利用SYBR Green I实时荧光定量PCR方法检测MTB的TCS反应调节子表达水平，以筛查出在耐多药菌株和敏感株中差异表达的TCS反应调节子。检测1NH、SM和LFA压力下这些差异表达的TCS反应调节子的表达水平。结果 与敏感菌株相比，在耐多药菌株中Rv0491、Rv3133c、Rv3143和Rv3246c分别上调表达1.03、7.11、3.48和1.37倍，差异有统计学意义（t或t'=5.623、-4.196、-3.559、-3.016,P＜0.01）。而其余反应调节子的表达在耐多药菌株和敏感菌株之间差异均无统计学意义。在抗生素压力下，Rv1027c、Rv3246c和Rv3143的表达明显升高，Rv0491和Rv3133c则变化不明显。结论Rv3246c和Rv3143的差异表达可能是MTB耐药的重要机制之一，可为新型抗结核药物的研制提供理论依据。

目的 描述新型突变喹诺酮耐药基因Smqnr及其在嗜麦芽窄食单胞菌的分布，初步探讨Smqnr基因与喹诺酮抗生素耐药之间的关系。方法 嗜麦芽窄食单胞菌的鉴定采用VITEK全自动细菌鉴定和药敏系统，采用标准琼脂稀释法测定替加环素、氯霉素、头孢他啶、复方磺胺甲(恶)唑、替卡西林/克拉维酸、左氧氟沙星、莫西沙星7种抗生素对442株嗜麦芽窄食单胞菌的最低抑菌浓度(MIC)。聚合酶链反应(PCR)扩增全长Smqnr基因，测序后采用DNAMAN软件比对序列之间的差异，并构建系谱树分析不同Smqnr基因之间亲缘性关系。结果 嗜麦芽窄食单胞菌对7种抗菌药物有不同程度的耐药，且在5％ ～50％之间变动，左氧氟沙星的抗菌活性较好，耐药率仅为6.11％ (27/442)，抗菌活性最好的药物为莫西沙星，耐药率为5.88％( 25/442)，442株嗜麦芽窄食单胞菌中114株检测到Smqnr基因，检出率为25.79％ (114/442)，包括11种已发现的Smqnr和20种新型突变的Smqnr基因（Smqnr 28 ～ 47），新型突变的Smqnr基因是由于部分碱基发生突变导致相应的219位翻译氨基酸位点发生改变。耐药株Smqnr基因检出率为42.30％ (11/26)，中介株Smqnr基因检出率为34.37％( 11/32),敏感株检出率23.95％ (92/384)，敏感株中MIC为0.125 μg/ml的嗜麦芽窄食单胞菌Smqnr基因检出率最高，为37.78％。结论Smqnr基因编码区高度多态，新型突变的Smqnr基因是由于部分碱基发生突变导致相应的219位翻译氨基酸位点发生改变所致。Smqnr基因在嗜麦芽窄食假单胞菌中的检出率较高，分布也存在较大差异。

目的 评价REP-PCR基因分型技术在临床光滑假丝酵母菌株分型中的应用价值。方法收集2009-2010年上海瑞金医院、上海仁济医院、上海华山医院、安徽医科大学附属医院、深圳人民医院38株光滑假丝酵母菌。采用MLST法扩增光滑假丝酵母菌的6个管家基因内片段，扩增片段测序后与数据库数据比对得出等位基因谱，从而得到相应的序列型（sequence type，ST）。采用REP-PCR法设计Ca21、Ca22、Com21引物扩增38株光滑假丝酵母菌重复序列，通过电泳比较分析，获得REP-PCR型。比较两种分型方法的结果和效率。结果 以Ca22-Com21为引物的REP-PCR分型效果最好。REP-PCR和MLST分型结果相同，38株光滑假丝酵母菌共产生5种REP-PCR型，分别为A、B、C、D、E型，对应于MLST的ST7、ST3、ST19、ST45和新型。REP-PCR比MLST耗时短。结论REP-PCR方法简单快速，且分辨率与MLST技术相同，可作为实验室大量菌株分型的首选方法。

目的 对卫生部临床检验中心2010年微生物室间质评1012菌进行鉴定，研究1012菌的分类学位置及放线菌属的系统分类现状。方法采用传统的细菌学形态检查、商品化的API、以及16S rRNA基因测序等多种手段对1012菌进行系统的鉴定。结合远程计算机系统提供的原核生物信息，构建放线菌属及相关细菌的16S rRNA基因的系统发生树，研究放线菌属的系统进化及1012菌与相关菌种之间的亲缘关系。结果1012菌为兼性厌氧、不形成芽胞的革兰氏阳性棒状菌，60多项生化实验，除L-阿拉伯糖发酵实验阴性，其余与图列茨放线菌一致。16S rRNA基因序列分析结果显示：1012菌与图列茨放线菌的同源性高达99.8％，但与放线菌属的模式菌种——牛放线菌的同源性仅为90.6％。进一步的系统发生树亦表明，放线菌科的五个菌属清晰地聚类成9个“基因属”，小弯杆菌、动弯杆菌、放线杆菌、隐秘杆菌4个菌属分别包含单一的基因群，而放线菌属则包含了5个独立的基因群。结论1012菌可鉴定为图列放线菌，但从基因的角度上分析，当前的放线菌属的组成结构过于松散，可能会重新分类。

目的 分析肺炎支原体感染血清流行病学资料及随访评价部分阳性者抗菌药物疗效。方法用Serodia-Mycoll颗粒凝集试剂盒检测3 134份临床疑似肺炎支原体感染者的血清抗体，判断肺炎支原体感染者并分析其流行病学资料，包括抗体总阳性率、男女阳性率差异、季节阳性率差异、年龄组阳性率差异及不同标本来源阳性率的差异等。随访评价部分阳性者抗菌药物疗效，统计使用抗菌药物的天数、不同抗菌药物使用情况，以及治愈、好转及疗效较差的比例等。结果 收集3 134份临床疑似肺炎支原体感染者的血清标本，其中350份(11.2％)肺炎支原体抗体阳性。女性患者阳性率为12.3％( 198/1 604)，高于9.9％( 152/1 530)男性患者阳性率，差异有统计学意义(X2=4.58，P＜0.05)。肺炎支原体抗体阳性率最高季节在第4季度（10～12月），为13.2％ (95/719)；肺炎支原体抗体阳性率最高年龄组位于5～9岁，为32.8％ (45/137)。儿科门诊及儿科病房为肺炎支原体抗体阳性率最高的标本来源，分别为27.9％ (56/201)和26.5％(60/226)。社区获得性肺炎患者肺炎支原体抗体阳性率为28％ (7/25)，高于其他疾病患者组。随访91例阳性患者中，自出现临床症状至就诊/抗体检测的时间为5～120 d,平均24.2d。71例(78.0％)患者使用大环内酯类抗菌药物治疗，4例(4.4％)使用喹诺酮类抗菌药物，4例(4.4％)使用头孢类抗菌药物治疗，其余12例(13.2％)使用其他抗菌药物或对症处理。上述抗菌药物治疗时间3～21 d，平均8.2d。疗效随访结果是治愈35例(38.5％),好转50例(54.9％)，6例(6.6％)疗效较差。结论肺炎支原体抗体阳性率女性高于男性，第四季度和学龄期儿童分别是肺炎支原体感染的高峰季节和高峰年龄组。儿科门诊及病房为肺炎支原体抗体阳性率最高的标本来源。临床医生能够根据肺炎支原体实验室检测结果选择一线抗菌药物并获得良好的疗效。

抗生素的发现使许多曾被认为是致命性的感染性疾病得到了治愈，但相伴而来的是日益严重的细菌耐药性，使人类在抗细菌感染中面临更大的挑战。喹诺酮类与氨基糖苷类药物是临床抗大肠埃希菌的一线首选药物，但由于其毒性较大，在儿科的临床使用中受到限制，这是否可以降低儿科患者标本中分离的大肠埃希菌对喹诺酮类与氨基糖苷类药物的耐药率呢？本研究对儿科患者标本中分离的529株大肠埃希菌进行了回顾性调查。

鳞状细胞癌抗原（SCC—Ag）是Kato和Torigoe于1977年从子宫颈鳞状上皮中分离出来的鳞状上皮相关抗原TA4的亚单位，与鳞状细胞癌、子宫颈癌、食道癌等恶性肿瘤的发生发展关系密切，但临床鲜见血清SCC—Ag在多种皮肤病中升高的报道。我们通过回顾性分析血清SCC—Ag水平，分析探讨SCC—Ag在各种皮肤病中表达的临床意义。

SS是一种以口、眼干燥为主要临床表现的慢性系统性自身免疫性疾病，可分为pSS和SSS两类。目前发病机制尚不清楚，临床表现纷繁复杂，该病的诊断缺乏快速特异的检查项目。国内外研究发现，M3抗体与SS密切相关，其可能是SS的一种新特异性诊断指标。然而，用常规ELISA很难检出SS患者血清M3抗体。本研究建立一种改良ELISA检测M3抗体的方法，并探讨其在诊断pSS中的价值。

目的 探讨RON mRNA及其变异体在膀胱肿瘤组织中的表达与临床意义。方法选择63例膀胱移行上皮癌(TCCB)、7例膀胱内翻性乳头状瘤(IPB)、9例膀胱低度恶性潜能尿路上皮瘤(PUNLMP)患者和12例外伤性膀胱破裂且经病理证实无肿瘤细胞的正常膀胱黏膜组织患者。其中，病理Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级患者分别为30、15和18例，临床Tis+ T1和T2 +T3 +T4期患者分别为44例和15例；用实时荧光定量RT-PCR检测其RON mRNA相对表达量，以GAPDH mRNA为内标物，用RONmRNA/GAPDH mRNA比值表示RON mRNA相对表达量；用RT-PCR检测RON mRNA选择性剪切形成的变异体；用测序检测PCR产物中可能存在的变异体，并分析变异体在不同组织间及TCCB中不同病理分级及临床分期间阳性表达率的差异。结果RON mRNA在TCCB、IPB、PUNLMP及正常膀胱黏膜组织中均见阳性表达，其RON mRNA/GAPDH mRNA比值分别为4.9×10-3(1.8×10-3 ～1.0× 10-2)、3.8×10-3（2.4×10-3～1.7×10-2）、4.9×10-3（1.7×10-3～1.1 ×10-2）、1.0×10-3(4.5×10-4 ～2.8×10-3)，且不同组织间的表达差异均有统计学意义(x2K-W= 17.278，P＜0.05)；RON mRNA/GAPDH mRNA比值在TCCB病理Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级分别为3.7×10-3(1.3×10-3 ～7.5×10-3)、4.9×10-3（1.9X10-3～1.1 ×10-2）、8.9×10-3(2.7×10-3～8.0×10-2)，且差异有统计学意义(x2K-W=7.341,P＜0.05)；RON mRNA/GAPDH mRNA比值在TCCB临床Tis+ T1、T2 +T3 +T4期分别为3.5×10-3（1.2×10-3 ～7.7×10-3）、9.7× 10-3（2.9×10-3～5.3 ×10-2），差异也有统计学意义（Z= -2.306,P＜0.05）。但正常膀胱黏膜组未发现RON mRNA变异体，而在膀胱肿瘤组织中外显子11剪切缺失(E11△)的阳性表达率为70％( 55/79)。在TCCB、IPB、PUNLMP中E11△阳性表达率分别为71％ (45/63)、57％ (4/7)、67％ (6/9)，而不同病理组织中的E11△阳性表达率差异无统计学意义(x2=0.620,P＞0.05)；在不同TCCB病理分级和临床分期中其阳性率差异亦无统计学意义（Z值分别为0.221、0.538，P均＞0.05）。发现1种正常黏膜组织中没有的新变异体，即RON基因外显子的3 476～3 539 bp剪切缺失形成的变异体(E3 476 ～3 539△)。膀胱肿瘤组织中E3 476～3 539△的阳性表达率为56％ (44/79)，在TCCB、IPB、PUNLMP中E 3 476 ～3 539△的阳性表达率分别为57％( 36/63)、43％ (3/7)、56％ (5/9)，但各病理组织间的阳性率差异无统计学意义(x2=0.517，P＞0.05)；在TCCB不同病理分级和临床分期中其阳性率分别为40％ (12/30)、67％ (10/15)、78％ (14/18)、48％(21/44)、80％ (12/15)，差异有统计学意义（Z值分别为7.285、5.041,P均＜0.05）。结论 RONmRNA的表达与TCCB病理分级及临床分期相关，RON可能在TCCB发生发展的过程中发挥重要作用；在正常膀胱黏膜中未见RON mRNA剪切形成的变异体，而在膀胱肿瘤组织中都有不同程度的表达；E 3 476～3 539△的表达与TCCB病理分级及临床分期相关，RON mRNA变异体可能参与了膀胱肿瘤的发生。

目的 研究用HRM分析技术检测经典型PKU患者PAH基因突变的临床应用价值。方法采用HRM分析技术对17例经典型PKU患者PAH基因的13个外显子及外显子-内含子交界区域进行检测，并采用DNA测序验证HRM检测结果。同时评价HRM诊断PKU的敏感度和特异度。另外，对其中2个家系的风险胎儿进行产前诊断。结果采用HRM分析技术从17例经典型PKU患者中检出有2个致病突变的患者16例，检出有3个致病突变患者l例。同时检出194V(c.280A＞G)、IVS4nt-1G＞A(c.442-1G＞A)、R158Q(c.473G＞ A)、Q160X(c.478C＞ T)、W187X(c.561G＞ A)、E6nt-96A＞ G(c.611A＞ G)、G239D(c.716G＞ A)、R241C(c.721C＞ T)、R243Q(c.728G＞ A)、G247R (c.739C-＞ C)、G247V(c.740G＞ T)、R261X(c.781C ＞T)、R261Q(c.782G＞ A)、H264R(c.791A ＞G)、F302 fsX39(c.904delT)、E305K(c.913G＞ A)、G312V(c.935G＞ T)、Y356X(c.1068C＞A)、V399V (c.1197A ＞T)、R408Q(c.1223G＞ A)、T418P(c.1252A ＞C)、A434D(c.1301C＞ A) 22种致病突变；Q232Q(c.696G＞A)、V245V(c.735G＞ A)、L385L(c.1155C＞G)3种沉默突变；1种单核苷酸多态点rs2280615(c.402A＞ C)。其中194V(c.280A＞ G)、Q160X(c.478C＞ T)、H264R(c.791A ＞G)、G312V (c.935G＞T)和E305K(c.913G＞ A)为PAH基因新发现的突变。2例风险胎儿经产前诊断，1例未发现致病突变，1例诊断为携带者。HRM突变筛查经典型PKU的敏感度和特异度均为100％，其检测结果与DNA测序结果完全一致。结论HRM分析技术是一种简单、准确、快速、高通量、低成本的遗传学分析方法，可用于经典型PKU的PAH基因突变筛查，并可用于已知父母突变的经典型PKU家系快速产前诊断。

目的 探讨深圳地区汉族人中NAT2基因分布特征，为开展NAT2基因与肿瘤相关性研究和药物代谢性疾病诊治提供依据。方法将DNA浓度为40 ng/μl的标本进行1×100、1×101、1×102、1 ×103、1 ×104倍比梯度稀释，以验证实时荧光定量PCR检测NAT2基因的灵敏度。采用实时荧光定量PCR结合TaqMan探针技术检测554名深圳汉族健康人NAT2基因282、341、481、590和857突变位点，并进行基因分型。同时用直接测序法对47名健康人标本进行平行检测，以验证和评价荧光定量PCR检测NAT2基因的敏感度、特异度和准确性。结果 经倍比梯度稀释试验验证实时荧光定量PCR检测NAT2基因的灵敏度可精确至10-4ng/μl。采用实时荧光定量PCR从554名深圳汉族人中检出NAT2*4、*5、*6、*7、*11等位基因频率分别为64.6％( 358/554)、6.3％( 35/554)、25.3％ (140/554)、30.0％( 166/554)、0.6％( 3/554)。主要基因型NAT2* 4/*6、*6/*7、*13/*13或*12/*12或*4/*4、*4/*7、*7/*13、*12、*6/*13(*12)频率依次为12.3％(68/554)、8.3％ (46/554)、7.6％(42/554)、40.5％(224/554)、8.1％ (45/554)、7.2％ (40/554)、5.6％(31/554),7种基因型约占总基因型的89.6％ (496/554)。深圳地区汉族人中NAT2基因主要等位基因为*4、*6、*7、*13,表型以快乙酰化型和中间型为主，分别占40.5％( 224/554)、46.7％(259/554),慢乙酰化型仅占12.8％(71/554)。用荧光定量PCR和直接测序法平行检测47名健康人NAT2基因，与直接测序法比较，检测282、341、481、590、857位点的敏感度分别为88.2％ (30/34)、87.5％( 7/8)、80.0％ (4/5)、100.0％ (22/22)、93.8％ (15/16)，特异度分别为100.0％ (13/13)、94.9％ (37/39)、100.0％ (42/42)、96.0％( 24/25)、96.8％( 30/31)，准确性分别为91.5％(43/47)、93.6％( 44/47)、97.6％( 46/47)、97.9％ (46/47)、95.7％ (45/47)。结论实时荧光定量PCR检测NAT2基因的灵敏度、敏感度、特异度高，适用于临床及科学研究，深圳地区汉族人主要NAT2等位基因是*4、*6、*7，最常见慢乙酰化表型为*6/*7,这为与NAT2基因相关的代谢性疾病及肿瘤研究提供了数据。

目的 评价in-house HIV-1基因型耐药检测方法的敏感性与准确性。方法 收集2004年4月至2008年10月全军艾滋病检测中心检测的来自河南、广西130份血浆标本。以美国FDA批准的HIV-1基因型耐药性检测系统(ViroSeqTM v2.0)为参考方法，并与建立起的基因型耐药性检测方法(in-house)平行检测待检样本，比较二者在扩增效率、耐药突变位点检测以及耐药报告等方面的一致性。结果已知的14 850个耐药突变位点中,2种方法可同时对99.3％(14 752/14 850)的耐药突变位点准确检出；在对不同突变位点的检测中,2种方法对蛋白酶抑制剂耐药突变位点、逆转录酶抑制剂耐药突变位点及两类抑制剂耐药突变位点检测一致率分别为99.7％、99.0％和99.3％（Kappa值分别为0.909 9、0.952 1和0.948 8，P值均＜0.01）；2种方法出具的两类药物的耐药结果报告一致率94.6％（Kappa=0.637 4,P＜0.01）。本研究共检测到34个ViroSeqTM数据库(ViroSeqTM software v2.7)未收录位点，其中2个突变位点对耐药的影响较大。结论in-house基因型耐药性检测方法与ViroSeqTM基因型耐药性检测系统在耐药突变位点检测以及评价上具有高度一致性，是一种快速准确、性价比高的HIV-1基因型耐药检测方法，同时在耐药数据库方面具有一定优势。

先天性代谢异常（inborn errors of metabolism，IEMs）又称遗传代谢病（inherited metabolic disorders）。IEMs种类繁多，大多数在婴儿期起病，涉及机体各系统的组织器官。虽然每种疾患均属少见病，但因病种繁多，总体发病率可达活产婴儿的1／500，危害严重。患儿临床表现个体差异很大，可以自胎儿期到成年各个时期发病，如不能及时诊断、合理治疗，死亡率很高，存活者常遗留严重的神经系统、肝、肾、内分泌系统的损害。但由于缺乏特异性症状与体征，

生物传感器是能够检测生物学反应的一种分析仪器，通常能通过转换机制和生物学机制两方面研究进行拓展。SAW传感器是用压电效应转换机制来检测传感器表面生物学反应的。SAW最早被用在电子通讯中的滤波器和谐振器上，早期用于气体检测。20世纪80年代早期，液相检测并不很成功，原因在液相中受到声波能量衰减的困扰。为减低水环境的阻尼作用，科学家们设计出更适于液相检测的SH—SAW传感器、LSAW传感器和LW传感器等。

肺栓塞（pulmonary emboli，PE）是各种内源性或外源性栓子阻塞肺动脉引起急性肺循环障碍的临床和病理生理综合征。其中，因血栓引起的PE称为肺血栓栓塞征（pulmonary thromboembolism，PTE），是PE的主要类型。PE因发病率高、病死率高及误诊率高，已日益引起临床的重视。PE的栓子90％以上源自患者腿部的深静脉，其他少见的栓子来自深部骨盆静脉、肾静脉、下腔静脉和腋静脉，上肢深静脉也可以导致肺栓塞。

我国著名的心血管病及老年医学专家，北京医院名誉院长，中国共产党的优秀党员，中华医学会系列杂志杰出的总编辑钱贻简教授，因病于2011年7月6日在北京逝世，享年86岁。7月12日清晨，全国各界的代表和中华医学会系列杂志的编辑们前往北京医院送别钱老，在告别室中摆放着中华医学会、

为进一步活跃学术氛围，更好地实现检验与临床的沟通，加强和提高我国形态学临床检验技术水平，本刊从2008年起设置了“临床病例（理）研究”栏目，重点介绍检验与临床工作中遇到的疑难及典型病例，以便普及形态学检验诊断的知识和技术。文章分病历摘要、病例讨论、诊断及鉴别诊断、病理诊断及病例来源5个部分。

近年来许多报道国内优秀科研成果的论文首先投向国外，特别是被美国科学引文索引（SCI）收录的高水平国际期刊上，以有助于促进国际间的学术交流，让世界更好地了解中国。为了将这些高质量、有影响的论文介绍给国内的广大读者，中华检验医学杂志开设了“国外发表的SCI论文介绍”栏目，目的是使国内更多的读者共享我国的科研成果和相关学科的进展。

我国著作权法公布以来，已得到社会各界的广泛重视，作为医学科技期刊必须不折不扣地执行著作权法。为此将本刊对作者署名和志谢的有关要求重申如下。