2012年 · 第41卷第08期

目的 根据2011年国际肺癌研究学会、美国胸科学会和欧洲呼吸学会公布的肺腺癌国际多学科分类方案(简称新分类)评估不同组织学类型与表皮生长因子受体( EGFR)、KRAS、EML4-ALK突变的相关性.方法 检测212例手术切除肺腺癌标本中EGFR第18 ～21号外显子( E18 ～21)、KRAS第12和13位密码子和EML4-ALK突变,并结合新分类与2004年WHO分类进行比较分析.结果 按照新分类标准,EGFR突变常见于贴壁为主型、乳头为主型和微乳头为主型腺癌,不同组织学类型之间差异有统计学意义(P =0.008)；KRAS突变最常见于浸润性黏液腺癌(1/2),其次为胶样腺癌(3/7),在不同组织学类型之间差异有统计学意义(P =0.003)；EML4-ALK融合突变最常见于实体为主型腺癌伴黏液产生(6/39,15.4％),其次为胶样腺癌(1/7),在不同组织学类型之间差异无统计学意义(P=0.181).EGFR突变的腺癌伴有甲状腺转录因子(TTF)-1高表达(P=0.008),KRAS突变的腺癌伴有TTF-1低表达(P =0.000),而EML4-ALK融合与TTF-1表达无相关性(P=0.274).按照2004年WHO分类,KRAS和EML4-ALK突变在不同组织学类型之间差异有统计学意义(P=0.002,P=0.000),而EGFR突变差异无统计学意义(P =0.502).结论 新分类结合TTF-1免疫标记有助于判断肺腺癌的分子学改变,TTF-1阳性的贴壁为主型、乳头为主型和微乳头为主型腺癌提示可能存在EGFR突变；而TTF-1阴性的浸润性黏液腺癌和胶样腺癌则可能存在KRAS突变,但对于判断EML4-ALK融合突变无明显优势。

目的 应用体内外实验研究非小细胞肺癌( NSCLC)中白细胞介素7及其受体(IL-7/IL-7R)对调控细胞增殖和促进淋巴管形成的作用机制.方法 应用免疫组织化学SP法观察95例NSCLC组织中IL-7、IL-7R、cyclin D1和血管内皮生长因子(VEGF)-D的表达,分析IL-7/IL-7R与各因素的关系.然后应用四甲基偶氮唑盐法、流式细胞术、逆转录-聚合酶链反应( RT-PCR)、Western blot法、染色质免疫沉淀法、免疫共沉淀法及裸鼠体内移植实验研究肺癌中IL-7/IL-7R调控细胞增殖和促进淋巴管形成的作用机制.结果 IL-7( 63.2％,60/95)、IL-7R( 61.1％,58/95)、cyclin D1 (52.6％,50/95)和VEGF-D( 58.9％,56/95)在NSCLC中高表达.IL-7/IL-7R的表达与cyclin D1(P＜0.01,P＜0.01)、VEGF-D(P ＜0.01,P＜0.01)、淋巴管密度(P=0.005,p=0.013)和肿瘤临床分期(P=0.008,P=0.005)、转移(P＜0.01,P＜0.01)相关.IL-7/IL-7R能促进A549细胞生长；同时能增加cyclin D1和VEGF-D的表达；同时能促进c-Fos/c-Jun的表达和磷酸化及c-Fos/c-Jun形成异二聚体并促使c-Fos/c-Jun与cyclin D1和VEGF-D的启动子结合调控其转录；还能促进肺癌移植瘤生长及移植瘤淋巴管形成.结论 在NSCLC中,IL-7/IL-7R通过调控c-Fos/c-Jun的表达及活性进一步调控cyclin D1促进肿瘤细胞生长,调控VEGF-D促进淋巴管形成。

目的 探讨睾丸核蛋白(NUT)抗体表达及基因重排在上呼吸道NUT中线癌(NMC)中的应用,以及NMC的发病情况、临床病理学特点、诊断及其鉴别诊断.方法 收集北京同仁医院病理科1990年至2010年诊断的上呼吸道小圆细胞型恶性肿瘤163例,包括低分化鳞状细胞癌(31例)及未分化癌(1例)、非角化型未分化鼻咽癌(60例)、小细胞神经内分泌癌(6例)及其他非上皮性小圆细胞型恶性肿瘤(65例).分析其临床特征及病理学特点,行EB病毒编码的小RNA探针(EBER)原位杂交检测及NUT单克隆抗体的免疫组织化学EnVision法染色.NUT抗体阳性表达的病例以荧光原位杂交(FISH)法检测NUT基因重排、以免疫组织化学染色方法标记角蛋白(AEI/AE3、CK7、CK8)、p63及神经内分泌标志物(神经元特异性烯醇化酶、突触素、嗜铬粒素A、S-100蛋白、CD56).结果 (1)3例低分化鳞状细胞癌及1例未分化癌中发现NUT抗体呈强阳性核表达,约占该组病例的12.5％ (4/32),占本组上皮性恶性肿瘤的4.1％ (4/98),全部病例的2.5％ (4/163)；其年龄范围为42～59岁；其他各组病例NUT抗体均为阴性；(2)4例NUT抗体阳性表达的病例其瘤细胞均表达角蛋白及p63,而神经内分泌标志物及EBER检测均阴性；(3)4例NUT阳性表达的病例中2例FISH检测证实有NUT基因重排,此2例患者死亡,另2例未检测到NUT基因重排,患者存活(分别为40及12个月).结论 (1)NMC是发生于上呼吸道的少见小圆细胞型恶性肿瘤,既往被归于低分化鳞状细胞癌及未分化癌中,其NUT抗体阳性表达及NUT基因重排阳性；(2)NMC好发于中线器官,特别是鼻腔鼻窦,与EB病毒感染无关,临床病程及预后有所不同；(3)NUT免疫组织化学染色及FISH检测在其诊断及鉴别诊断中发挥主要作用。

目的 分析肺支气管扩张症伴发肺神经内分泌细胞增生及微小瘤形成病例的临床病理特征.方法 收集22例此类病例,通过光镜下观察及免疫组织化学EnVision法检测分析其临床病理特征及免疫组织化学特点.结果 22例肺支气管扩张症伴发神经内分泌细胞增生及微小瘤形成患者平均年龄53岁,男女比例9∶13,大体检查为典型的支气管扩张症表现,仅1例切面可见灰白色质软结节,直径＜5 mm;镜下观察22例均有支气管扩张症表现,在此基础上均可见细小气道上皮细胞下神经内分泌细胞增生并形成微小瘤(直径均＜5 mm),10例伴单发微小瘤形成,12例伴多发微小瘤形成,平均直径1.6 mm,淋巴结均未发现特殊改变.术后16例分别随访17～117个月,平均随访58个月,均无类癌发生,1例合并肺癌患者术后猝死,5例失访.免疫组织化学嗜铬粒素A( CgA,18/18)、突触素(16/16)、AE1/AE3(16/16)、TTF-1(14/15)、CD56( 14/14)均阳性,12例Ki-67阳性指数均＜2％.结论 免疫组织化学CgA、突触素、CD56、TTF-1、AE1/AE3有助于诊断.早期发现、手术切除和密切随访有助于阻止疾病进展。

目的 应用2种不同方法检测晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者肿瘤组织和恶性胸腔积液中表皮生长因子受体( EGFR)的突变率,探讨其与临床病理学特征的关系,并比较2种检测方法的一致率.方法 收集晚期NSCLC患者经甲醛固定的石蜡包埋肿瘤组织241例和其中14例的配对恶性胸腔积液,用蝎型探针扩增阻遏突变系统(蝎型探针ARMS)检测EGFR基因第18、19、20、21外显子上的29种突变,并分析EGFR基因突变与患者临床病理学特征的相关性,以及用直接测序法检测其中37例肿瘤组织EGFR基因突变状态,比较2种检测方法的一致性.结果 114例晚期NSCLC患者标本中检测到EGFR基因突变,突变率为48.7％( 114/234)；其中19外显子缺失突变65例,21外显子点突变L858R 39例,二者占所有突变类型的91.2％ (104/114).14例肿瘤组织和恶性胸腔积液配对的标本检测结果完全一致.应用ARMS和直接测序两种方法检测37例肿瘤组织标本的一致率为94.6％.另外,女性患者突变率(55.9％)高于男性患者(42.2％),差异有统计学意义(P＜0.05)；而不同吸烟史、组织分级以及病理类型的晚期NSCLC患者EGFR基因突变状态差异无统计学意义.结论 晚期NSCLC患者EGFR基因突变率高；用ARMS法检测EGFR基因突变状态具有较高的敏感度,适用于靶向治疗患者的筛选。

目的 探讨胚胎发育不良性神经上皮肿瘤(DNT)的临床病理学、影像学特征、治疗及其预后情况.方法 回顾性分析10例经病理确诊的DNT患者资料,归纳其临床病理和影像学特征.结果 临床均以顽固性癫痫为主要症状,肿瘤位于颞叶5例、额叶3例、顶叶2例.CT扫描病灶呈低密度影,MRI呈T1WI低信号,增强后无强化,T2WI高信号,液体衰减反转恢复序列(FLAIR)检查瘤内可见等信号分隔,边缘环状高信号；无占位效应和瘤周水肿.肿瘤由特异性胶质神经元成分构成,包括少突胶质样细胞,“漂浮”神经元和星形胶质细胞.免疫组织化学:OLC阳性表达Olig2和S-100蛋白,神经元和部分OLC表达NeuN、突触素；Ki-67阳性指数均＜1％.治疗:9例行肿瘤全切术,1例为次全切,术后未行放疗和化疗.预后:均获随访,9例无复发,1例复发.结论 DNT确诊需结合临床病理、免疫组织化学及影像学检查.手术效果良好,术中脑电图描记可有效切除癫痫灶,术后无须放疗和化疗。

目的 总结肾小细胞性神经内分泌癌(简称小细胞癌)的临床病理学特征,分析其诊断及鉴别诊断依据.方法 收集1999年至2010年间解放军总医院病理科诊断的肾小细胞癌12例患者的临床资料,采用HE及免疫组织化学EnVision法进行病理学观察,并结合临床特征进行分析.结果 12例中6例为肾原发性小细胞癌,其中2例发生于肾实质,4例发生于肾盂；胸部影像学检查双肺均未发现占位性病变,肾均为单发肿瘤；5例行根治性肾切除术；大体检查见4例肿瘤位于肾盂,1例位于肾实质.其余6例为肺小细胞癌肾转移,其中4例为肺小细胞癌治疗过程中检查发现,2例以腰痛为首发症状就诊,同时发现肺部与肾的肿瘤；6例均行穿刺活检.显微镜下12例均呈典型的小细胞癌形态,坏死广泛.4例原发于肾盂的病例中可见部分尿路上皮癌成分.免疫组织化学染色显示12例肿瘤细胞均呈CK、突触素、CD56阳性,6例转移性病例和4例原发性病例甲状腺转录因子1阳性.6例肾原发性小细胞癌患者中2例分别于术后4及9个月死亡,2例失访,2例存活(分别随访25及138个月)；6例转移性患者5例死亡(随访3～8个月),1例随访1个月仍存活.结论 肾小细胞癌有原发和转移两种情况,虽然罕见,但肾可以原发小细胞癌,肾盂和肾实质均可发生,诊断主要依靠病理学检查,甲状腺转录因子1在鉴别原发与转移性肿瘤时参考意义不大,鉴别诊断需要结合临床病史、胸部影像学检查和形态学有无合并尿路上皮癌成分等来综合判定。

目的 探讨肾小管状囊性癌的临床病理学特点和鉴别诊断.方法 分析1996年至2011年北京友谊医院病理科诊断的3例肾小管状囊性癌的临床特点、组织形态学及免疫表型特点,并复习相关文献.结果 3例患者均为男性,平均年龄59岁(44 ～71岁),均为体检发现肿物,肿物最大径1.5 ～5.0 cm.肿瘤大体境界清楚,无包膜,切面呈海绵状改变.镜下观察可见不同程度扩张之囊腔和小管,由纤细的纤维间质分隔.内衬细胞呈扁平、立方、柱状,有的为鞋钉样细胞,胞质嗜酸性,核仁明显.2例局灶胞质透明,其中1例合并乳头状肾细胞癌.免疫组织化学染色显示,3例肿瘤广谱CK、波形蛋白,CK19,CD10,P504S均呈阳性表达,3例肿瘤高分子质量细胞角蛋白 34BE12局灶阳性表达.2例肿瘤CK7局灶阳性表达.结论 肾小管状囊性癌好发于男性,是一种罕见的肾肿瘤,具有显著的大体(海绵状表现)和镜下(囊腔和小管常内衬鞋钉样细胞,由薄的纤维间质分隔)特征,主要应与以多房囊性生长方式为主的肾脏病变相鉴别。

目的 探讨microRNA383( miR-383)对人髓母细胞瘤Daoy细胞系中PRDX3基因的表达及细胞增殖活性与凋亡等的影响.方法 应用即时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测人髓母细胞瘤组织(15例)、Daoy细胞系、对照脑组织(5例)中miR-383及PRDX3mRNA表达水平；采用Western blot法检测人髓母细胞瘤组织、Daoy细胞系、对照脑组织中PRDX3基因蛋白表达水平；人工合成miR-383模拟体(mimics)转染人髓母细胞瘤Daoy细胞系,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法、流式细胞术等实验方法检测转染后各组Daoy细胞增殖与凋亡、细胞内活性氧水平、线粒体膜电位水平的变化.结果 15例人髓母细胞瘤组织中13例(13/15) miR-383表达水平较对照脑组织明显下调,14例( 14/15) PRDX3 mRNA表达水平较对照脑组织显著增高.miR-383、PRDX3mRNA在人髓母细胞瘤Daoy细胞系中表达水平分别为对照脑组织的0.353、1.315倍.PRDX3蛋白表达水平在人髓母细胞瘤组织、Daoy细胞系中较对照脑组织增高.miR-383mimics转染后24、48 h,实验组miR-383平均显著高于空白对照组,且48 h更加显著；而PRDX3mRNA、蛋白表达水平48 h较空白对照组显著降低.CCK-8法检测提示实验组中细胞增殖率较对照组明显降低(P＜0.05).Annexin VFITC法检测转染后48 h细胞凋亡结果显示miR-383 mimics实验组细胞早期凋亡率(11.60±0.30)％明显高于空白对照组(2.30±0.20)％(P=0.000).细胞内活性氧水平检测结果显示转染后24、48 h实验组较空白对照组细胞内活性氧水平明显升高,且48 h更加显著.线粒体膜电位水平检测结果显示转染后24h实验组线粒体膜电位水平较空白对照组明显降低.结论 与对照脑组织相比,miR-383在人髓母细胞瘤组织、Daoy细胞系中表达降低,PRDX3基因表达升高.上调miR-383可降低Daoy细胞系中PRDX3基因表达,并有效抑制Daoy细胞增殖活性,促进Daoy细胞凋亡,出现Daoy细胞内活性氧水平升高,线粒体膜电位水平降低的细胞功能学变化。

目的 研究胃癌细胞中KIAA0101蛋白的表达,并探讨其表达下调对胃癌MKN-45细胞增殖、细胞周期和侵袭力的影响.方法 利用Western blot检测3株胃癌细胞系(MKN-28、SGC-7901和MKN-45)中KIAA0101蛋白的表达.将KIAA0101小干扰RNA(siRNA)和对照siRNA分别转染胃癌MKN-45细胞,利用Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒)检测细胞增殖的变化,利用流式细胞术检测细胞周期分布的改变,最后采用Boyden小室检测细胞侵袭力的变化.结果 胃癌MKN-45细胞中KIAA0101蛋白的相对表达水平显著高于MKN-28和SGC-7901细胞,3组之间差异有统计学意义(P＜0.05).CCK-8结果显示,与未处理组和对照siRNA组相比,KIAA0101 siRNA组中胃癌MKN-45细胞的增殖受到明显抑制(P＜0.05).细胞周期分析结果显示,KIAA0101 siRNA组[ (61.47±0.89)％]在G0/G1期的细胞数比率显著高于未处理组[(47.43±0.85)％]和对照siRNA组[ (48.43±0.73)％；F=271.653,P=0.000].进一步Boyden小室体外侵袭实验结果显示,KIAA0101 siRNA组(61.51 ±4.76)中MKN-45细胞穿过Matrigel的细胞数显著低于未处理组(138.74±10.16)和对照siRNA组(132.93±11.25；F=65.949,P=0.000).结论 KIAA0101表达下调能明显抑制胃癌细胞的增殖、诱导细胞周期静止和降低细胞的侵袭能力,因而有望成为胃癌治疗的新靶点。

肾上皮样血管平滑肌脂肪瘤(EAML)是一类比较罕见的肾肿瘤,具有独特的病理形态学特征和生物学行为.对预测EAML的恶性潜能,目前尚缺乏特异性的形态学指标,尤其是分子生物学改变与EAML恶性潜能的相关性.我们收集6例EAML进行了回顾性分析,探讨其临床病理特征、免疫表型和p53基因改变及与恶性潜能的关系。

甲状腺玻璃样变小梁状肿瘤(hyalinizing trabecular tumour,HTT)是一种较为少见的甲状腺肿瘤,容易与甲状腺乳头状癌(PTC)的实体亚型相混淆,在冷冻切片和针吸细胞学诊断中尤为突出.我们收集了3例甲状腺HTT,对其临床病理特征进行总结并结合文献复习。

在病理学形态上有多种疾病在光镜下都表现为上皮样肉芽肿性病变,如结核病、结节病、麻风病等慢性感染性疾病,在不同部位、不同患者及不同病变时期,其上皮样肉芽肿病理表现的典型性也不同,在病理诊断中常难以鉴别这类疾病,容易引起误诊.在病理形态上主要表现为上皮样肉芽肿性病变的疾病在临床上最常见的是结核病,故在病理诊断中应特别注意结核病的诊断与排除诊断.目前结核病病理诊断的主要辅助检测是抗酸染色,但其灵敏度较低[1];文献报道针对结核分枝杆菌特定DNA序列进行荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测痰液、胸腹水标本中结核分枝杆菌的敏感性高、特异性强,且省时、易操作,用于诊断肺结核病取得较好效果[2]。

病历摘要患者男,90岁.入院前半个月平卧位呛咳,伴白黏痰.2d前发热,体温37.8℃,查血常规示白细胞17 × 109/L,中性粒细胞占0.77,胸片未见明确感染,2006年8月10日以肺部感染收入院.既往史:高血压、冠心病史多年,脑出血,左侧轻瘫,脑血栓形成史,前列腺癌,陈旧性肺结核.体检生命体征平稳,一般情况差,肺部未闻及干湿啰音,未发现阳性体征.入院诊断:肺部感染,其余同前。

死者女,38岁.于2009年3月18日突发“四肢远端麻木,以手掌、足底明显,伴头晕”而入院.体检:意识清楚,语言清晰流利,情感无异常,运动神经、颅神经功能均无障碍,未引出病理性反射,仅有双侧膝关节以下痛觉消退,双足感觉过敏,腱反射活跃,双手呈“手套样”感觉减退.血常规与血生化正常,诊断周围性神经炎原因待查入院.2d后出现双下肢乏力及阵发性剧烈疼痛,排尿无力,疑为重金属中毒。

患者女,20岁.因右下腹疼痛1d、腹胀半天于2011年12月8日入院.入院体检:腹平坦,未见肠型及蠕动波,右下腹压痛,无反跳痛及肌紧张,Murphy征阴性.全腹叩诊呈鼓音,移动性浊音阴性,肠鸣音4次/min.既往无系统性疾病及便秘病史.家族史:经追问自述其父及祖母曾患相似症状,但具体诊断不详.血清学检查未见明显异常.腹部CT示:升结肠内容物多并结肠壁及周围改变.术中见横结肠、升结肠高度扩张,横结肠积气,盲肠至结肠肝曲浆肌层广泛多处撕裂,肠壁明显变薄,术中诊断“结肠梗阻”并行右半结肠切除术及末端回肠造瘘术。

病理学是在人类探索和认识自身疾病的过程中产生的,它的发展与自然科学、基础科学的发展和技术进步有着密切联系.近年来,随着细胞生物学、分子生物学、现代免疫学等新兴学科的发展,病理学已经从细胞核亚细胞器水平,深入到分子水平、基因水平去认识疾病,借助分子病理学,病理学家可以获得复杂的肿瘤分子资料,为临床工作者提供患者个体化用药/预测生物标志物以及评估疾病进展的有用信息[1].通过检测基因表达水平(蛋白、mRNA)、基因突变、基因拷贝数与扩增和甲基化等,可以指导精确的个体化治疗,并且用以判定患者的预后。

20世纪60年代,人们开始了对自噬的研究.自噬是一些相关基因调控的真核细胞降解细胞器和蛋白质的高度进化保守的过程.自噬普遍存在于酵母、线虫、果蝇、人体等有机体中,但人们对自噬的认识并不深入.1997年自噬基因的发现促进了人们对自噬本质及其功能的认识[1].由于自噬的过程和调控网络十分复杂,且自噬和凋亡密切相关,其在肿瘤中起着十分重要的作用,本文就自噬、凋亡与肿瘤的关系作一综述。

随着计算机技术的蓬勃发展，数字化病理这一领域呈现出欣欣向荣的发展态势。为了让广大病理工作者及时了解数字化病理领域的新进展、存在的问题，以及未来的发展方向，由中华医学会《中华病理学杂志》编辑委员会、中华医学会病理学分会共同主办的“全国数字化病理应用与发展学术研讨会”拟于2012年9月21至24日在云南省昆明市召开。会议将邀请国内外著名病理学家作专题演讲，主要介绍数字化病理的新进展、数字化病理切片在远程会诊中的应用、数字化病理切片系统在病理学科教学中的应用等。

由中国医学科学院血液学研究所血液病医院主办的第一届血液病理诊断高峰论坛定于2012年11月16至18日在天津举办。

卫生部病理质量控制中心细胞病理学组于2011年9月在山东聊城成立。细胞病理学组由来自全国的11位细胞病理专家组成，北京医院刘冬戈教授任组长，北京协和医院孟芝兰教授任副组长兼秘书，并于2012年6月17日在宁波召开的细胞病理研讨会期间召开了卫生部病理质量控制中心细胞病理学组第一次工作会议，会上向细胞病理学组成员颁发了聘书。

由中华医学会病理学分会乳腺病理学组（筹备中）、中国抗癌协会肿瘤病理专业委员会乳腺病理学组共同主办，四川大学华西医院和大理学院协办的国家级继续医学教育项目第四次乳腺疾病病理诊断研修班于2012年5月4至7日在云南大理成功召开。这是乳腺疾病病理诊断研修班开办以来首次在成都以外的地区举办，吸引了来自全国的病理工作者180余人参与。

《细胞病理学诊断图谱及实验技术》一书第2版即将出版，曹跃华、杨敏、陈隆文、杨斌等14位来自加拿大、美国、澳大利亚、中国的主编和编者们商定用本书所得稿费购书100册，用以赠送国内100家基层医院病理科。赠书活动由华夏病理学网（http：／／www．ipathology．cn）在线进行，且该网站拟开辟相应的细胞学专栏，邀请海内外专家学者共同为广大网友们答疑解惑，以实际行动促进我国基层病理科的建设，推进细胞病理学事业的发展。